化妝品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的測(cè)定

化妝品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的測(cè)定（BJH202205）1范圍本方法規(guī)定了化妝品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的測(cè)定方法。本方法適用于膏霜乳類、液體類、凝膠類、貼膜類化妝品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的定性和定量測(cè)定。2原理樣品經(jīng)甲醇超聲提取，采用高效液相色譜儀分離，質(zhì)譜檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)保留時(shí)間和特征離子對(duì)的相對(duì)豐度比定性，定量離子對(duì)峰面積定量，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算含量。3試劑和材料除另有規(guī)定外，本方法中所用試劑均為分析純及以上規(guī)格，水為符合GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。3.1甲醇，色譜純。3.2冰乙酸，色譜純。3.30.1%乙酸溶液：量取1mL冰乙酸（3.2），用水稀釋至1000mL，混勻。3.4標(biāo)準(zhǔn)品：脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標(biāo)準(zhǔn)品，純度≥97%。標(biāo)準(zhǔn)品的中文名稱、英文名稱、CAS號(hào)、分子式、相對(duì)分子質(zhì)量、結(jié)構(gòu)式詳見(jiàn)附錄A中的表A.1。3.5脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標(biāo)準(zhǔn)品20mg（精確到0.00001g），置于50mL容量瓶中，用甲醇（3.1）溶解并定容至刻度，搖勻。該標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的質(zhì)量濃度為400mg/L。3.6脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密量取脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（3.5）0.20mL，置于50mL容量瓶中，用甲醇（3.1）定容至刻度，搖勻。該標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度為1.6mg/L。4儀器和設(shè)備4.1高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀。4.2分析天平：感量0.0001g和0.00001g。4.3超聲波清洗器。4.4渦旋混合儀。4.5高速離心機(jī)，轉(zhuǎn)速不小于10000r/min。5試樣制備與保存樣品應(yīng)按照標(biāo)簽標(biāo)示的貯存條件進(jìn)行保存。取樣前，應(yīng)檢查封口的完整性，觀察樣品的性狀和特征，并使樣品混勻。打開(kāi)包裝后，應(yīng)盡可能快地取出所要測(cè)定部分進(jìn)行分析，取樣后，應(yīng)將樣品進(jìn)行密封保存。6分析步驟6.1篩查用標(biāo)準(zhǔn)溶液量取脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.6）適量，用甲醇（3.1）進(jìn)行稀釋，配制成濃度為2μg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。6.2基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)中間液精密量取脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.6）10mL，置于100mL容量瓶中，用甲醇（3.1）稀釋至刻度，搖勻，制成脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯濃度為160μg/L的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)中間液。6.3基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液稱取空白試樣0.2g（精確到0.0001g），置于25mL具塞比色管中，精密加入基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)中間液（6.2）適量，加入甲醇（3.1）至約20mL，自“渦旋振蕩30s”起與樣品同法處理（6.4），配制得濃度為1、2、5、12.5、25μg/L系列濃度基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。注：基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液采用的空白試樣的劑型應(yīng)與待測(cè)樣品基本一致。6.4樣品處理稱取樣品0.2g（精確到0.0001g），置于25mL具塞比色管中，加入甲醇（3.1）約20mL，渦旋振蕩30s，使試樣與提取溶劑充分混勻，超聲提取20min，靜置至室溫，用甲醇（3.1）定容至刻度，搖勻，經(jīng)0.22μm聚四氟乙烯濾膜過(guò)濾（必要時(shí)可先10000r/min轉(zhuǎn)速離心10min），濾液作為供試品溶液備用。當(dāng)供試品溶液中檢出脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯且濃度較高時(shí)，需適當(dāng)稀釋后測(cè)定；空白試樣（6.3）也應(yīng)同法稀釋。6.5儀器參考條件6.5.1色譜條件色譜柱：C18柱（100mm×2.1mm，1.8μm），或等效色譜柱；流動(dòng)相：A為0.1%乙酸溶液（3.3），B為甲醇（3.1）。梯度洗脫程序見(jiàn)表1；流速：0.2mL/min；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：2μL。表1梯度洗脫程序時(shí)間（min）流動(dòng)相A（%）流動(dòng)相B（%）0.00851510.00109012.00109013.00851516.0085156.5.2質(zhì)譜條件離子源：電噴霧離子源（ESI源）；監(jiān)測(cè)模式：負(fù)離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM），監(jiān)測(cè)離子對(duì)及相關(guān)參數(shù)設(shè)定見(jiàn)表2。表2脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯監(jiān)測(cè)離子對(duì)及相關(guān)參數(shù)設(shè)定組分名稱母離子（m/z）子離子（m/z）CE（eV）脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯531.298.9*431.1-50-19*為推薦的定量離子。注：當(dāng)采用不同質(zhì)譜儀器時(shí)，儀器參數(shù)可能存在差異，測(cè)定前應(yīng)將質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化到最佳。6.6定性判定取供試品溶液（6.4）與篩查用標(biāo)準(zhǔn)溶液（6.1）在相同分析條件下測(cè)定，樣品中如呈現(xiàn)定量離子對(duì)和定性離子對(duì)的色譜峰，被測(cè)成分的特征離子峰保留時(shí)間與篩查用標(biāo)準(zhǔn)溶液（6.1）對(duì)應(yīng)的保留時(shí)間一致，且樣品所選擇的監(jiān)測(cè)離子對(duì)的相對(duì)豐度比與篩查用標(biāo)準(zhǔn)溶液（6.1）的監(jiān)測(cè)離子對(duì)的相對(duì)豐度比的偏差不超過(guò)表3的規(guī)定，則可以判定樣品中存在脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯。表3定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度比的最大允許偏差相對(duì)離子豐度（k）k>50%50%≥k>20%20%≥k>10%k≤10%允許最大偏差±20%±25%±30%±50%6.7定量測(cè)定取基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液（6.3）依次測(cè)定，以系列濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，繪制基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，其線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)大于0.99。取供試品溶液（6.4）測(cè)定，將定量離子對(duì)色譜峰面積代入基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線。按“7”項(xiàng)下公式，計(jì)算樣品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的含量。6.8平行試驗(yàn)按上述步驟，對(duì)同一樣品進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn)測(cè)定。6.9空白試驗(yàn)除不加試樣外，均按上述測(cè)定條件和步驟進(jìn)行。7結(jié)果計(jì)算結(jié)果按式（1）計(jì)算：………………(SEQ標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)公式\*ARABIC1)式中：ω—樣品中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，μg/g；ρ—供試品溶液中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的質(zhì)量濃度，μg/L；V—樣品定容體積，mL；m—樣品取樣量，g；D—稀釋倍數(shù)（如未稀釋則為1）。相同條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%。8精密度和準(zhǔn)確度多家實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證定量下限濃度回收率為80%～110%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%（n=6），中、高濃度回收率為85%～110%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%（n=6）。9檢出限和定量限本方法中脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的檢出限、定量下限及取樣量為0.2g時(shí)檢出濃度和最低定量濃度見(jiàn)表4。表4脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的檢出限、定量下限、檢出濃度和最低定量濃度組分名稱檢出限（ng）定量下限（ng）檢出濃度（μg/g）最低定量濃度（μg/g）脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯0.00070.0020.040.210圖譜圖1脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯標(biāo)準(zhǔn)溶液的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)色譜圖附錄A脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯的相關(guān)信息