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1.3基因工程的應(yīng)用專題1基因工程一、植物基因工程碩果累累
哪些轉(zhuǎn)基因作物已進(jìn)入大規(guī)模商業(yè)化應(yīng)用階段?
轉(zhuǎn)基因大豆、玉米、棉花和油菜?植物基因工程技術(shù)主要用于哪些方面?
提高農(nóng)作物的抗逆能力(如抗除草劑、抗蟲、抗病、抗干旱和抗鹽堿等),以及改良農(nóng)作物的品質(zhì)和利用植物生產(chǎn)藥物等方面.?(一)抗蟲轉(zhuǎn)基因植物1.蟲害給農(nóng)作物帶來了哪些影響?
傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)如何防治害蟲?有哪些不足?2.現(xiàn)在已有哪些抗蟲植物問世??3.抗蟲基因Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因、淀粉酶抑制劑基因、植物凝集素基因等請(qǐng)閱讀P18生物資料技術(shù)卡,了解一些抗蟲基因的抗蟲機(jī)理。4.抗蟲棉的目的基因是什么?目的基因從何而來?5.我國(guó)的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉取得了哪些進(jìn)展??1.抗蟲棉的目的基因是什么?目的基因從何而來?2.我國(guó)的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉取得了哪些進(jìn)展??(二)抗病轉(zhuǎn)基因植物1.什么是病原微生物?有哪些種類?引起生物生病的微生物,主要有病毒、真菌和細(xì)菌等2.為什么說常規(guī)育種很難培育出抗病毒的新品種?3.在抗病轉(zhuǎn)基因植物中使用最多的是什么基因?病毒外殼蛋白(coatprotein,CP)基因;病毒的復(fù)制酶基因?許多栽培作物自身缺少抗病毒的基因拓展:在抗病毒轉(zhuǎn)基因植物中,為什么使用病毒外殼蛋白基因可以抗病毒侵染?關(guān)于病毒外殼蛋白基因(CP基因)導(dǎo)入植物后的抗病毒機(jī)理,目前有幾種假說。一種假說認(rèn)為:CP基因在植物細(xì)胞內(nèi)表達(dá)積累后,當(dāng)入侵的病毒裸露核酸進(jìn)入植物細(xì)胞后,會(huì)立即被這些外殼蛋白重新包裹,從而阻止病毒核酸分子的復(fù)制和翻譯。另一種假說認(rèn)為:植物細(xì)胞內(nèi)積累的病毒外殼蛋白會(huì)抑制病毒脫除外殼,使病毒核酸分子不能釋放出來。然而最近的研究表明,如果將病毒的外殼蛋白的AUG起始密碼缺失,使之不能被翻譯,或者將外殼蛋白基因變成反義RNA基因,整合到植物細(xì)胞染色體上,轉(zhuǎn)基因植物則有很好的抗性。因此,有人認(rèn)為抗性機(jī)理不是外殼蛋白在起作用,而是CP基因轉(zhuǎn)錄出RNA后,與入侵病毒RNA之間的相互作用起到了抗性作用。4.在抗真菌轉(zhuǎn)基因植物中使用什么基因?幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因?(三)其他抗逆轉(zhuǎn)基因植物1.哪些環(huán)境條件會(huì)造成農(nóng)作物低產(chǎn)、減產(chǎn)?鹽堿、干旱、低溫和澇害等2.鹽堿和干旱對(duì)農(nóng)作物的危害與什么有關(guān)?與細(xì)胞內(nèi)的滲透壓調(diào)節(jié)有關(guān)3.在抗鹽堿和抗干旱作物中使用了什么基因?調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的基因?4.轉(zhuǎn)基因耐寒的煙草和番茄中哪種目的基因提高了其抗寒能力?目的基因從何而來?魚的抗凍蛋白基因?5.抗除草劑基因有何用途?噴灑除草劑時(shí),殺死田間的雜草而不損傷作物?(四)利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)人體(或其它脊椎動(dòng)物)必不可少,而機(jī)體內(nèi)又不能合成的,必須從食物中補(bǔ)充的氨基酸,稱必需氨基酸。必需氨基酸共有8種:賴氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸(甲硫氨酸)、蘇氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸。如果飲食中經(jīng)常缺少必需氨基酸,可影響健康。另外12種氨基酸是人體細(xì)胞能夠合成的叫做非必需氨基酸。你知道哪些食品中缺少必需氨基酸?如何用轉(zhuǎn)基因的方法加以改良?將必需氨基酸含量多的蛋白質(zhì)編碼基因?qū)胫参锔淖儽匦璋被岷铣赏緩街心撤N關(guān)鍵酶的活性?轉(zhuǎn)基因延熟番茄的目的基因是什么?控制番茄果實(shí)成熟的基因?轉(zhuǎn)基因矮牽牛的目的基因是什么?與植物花青素代謝有關(guān)的基因?異想天開總結(jié):基因工程在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用(1)高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具優(yōu)良品質(zhì)的品種用基因工程的方法可以改善糧食作物的蛋白質(zhì)含量。如“向日葵豆”植株。(2)抗逆性品種將細(xì)菌的抗蟲、抗病毒、抗除草劑、抗鹽堿、抗干旱、抗高溫等抗性基因轉(zhuǎn)移到作物體內(nèi),將從根本上改變作物的特性。如轉(zhuǎn)基因抗蟲棉。二、動(dòng)物基因工程前景廣闊(一)用于提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度——?jiǎng)游锲贩N改良、建立生物反應(yīng)器、器官移植等導(dǎo)入外源生長(zhǎng)激素基因(二)用于改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)舉例說明將腸乳糖酶基因?qū)肽膛;蚪M,轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大減低。(三)用轉(zhuǎn)基因的動(dòng)物生產(chǎn)藥物設(shè)問:就基因藥物而言,最理想的表達(dá)場(chǎng)所是哪里?轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺。
(1)乳腺是一個(gè)外分泌器官,乳汁不進(jìn)入體內(nèi)循環(huán),不會(huì)影響轉(zhuǎn)基因動(dòng)物本身的生理代謝反應(yīng)。(2)從乳汁中獲取目的基因產(chǎn)物,產(chǎn)量高,易提純,表達(dá)的蛋白質(zhì)已經(jīng)過充分的修飾加工,具有穩(wěn)定的生物活性。(3)從乳汁中源源不斷獲得目的基因的產(chǎn)物的同時(shí),轉(zhuǎn)基因動(dòng)物又可無限繁殖。
設(shè)問:為什么乳腺能成為基因藥物最理想的表達(dá)場(chǎng)所呢?將藥物蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,通過顯微注射等方法,導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中,將受精卵送入母體,使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)入泌乳期后,可以通過分泌乳汁生產(chǎn)所需要的藥品,稱為乳腺生物反應(yīng)器或乳房生物反應(yīng)器。乳腺生物反應(yīng)器乳腺生物反應(yīng)器的優(yōu)點(diǎn):①產(chǎn)量高;②質(zhì)量好;③成本低;④易提取。(四)用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體利用基因工程對(duì)豬的器官進(jìn)行改造方法:將器官供體基因組導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子,以抑制抗原決定基因的表達(dá)或設(shè)法除去抗原決定基因,再結(jié)合克隆技術(shù),培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官將目的基因?qū)氲絼?dòng)物的受精卵里,目的基因若與受精卵染色體DNA整合,細(xì)胞分裂時(shí),該基因隨染色體的倍增而倍增,使每個(gè)細(xì)胞中都帶有目的基因,使性狀得以表達(dá),并穩(wěn)定地遺傳給后代,從而獲得基因產(chǎn)品。這樣一種新的個(gè)體,稱為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物??偨Y(jié):什么叫轉(zhuǎn)基因動(dòng)物?基因工程在畜牧養(yǎng)殖業(yè)上的應(yīng)用主要是什么?繁殖具有抗病能力、高產(chǎn)仔率、高產(chǎn)奶率和高質(zhì)量的皮毛等優(yōu)良品質(zhì)的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。該過程的重要步驟是通過感染或顯微注射技術(shù)將重組DNA轉(zhuǎn)移到動(dòng)物受精卵中。①獲取目的基因(例如血清白蛋白基因)②構(gòu)建基因表達(dá)載體(在血清白蛋白基因前加特異表達(dá)的啟動(dòng)子)③顯微注射導(dǎo)入哺乳動(dòng)物受精卵中④形成胚胎⑤將胚胎送入母體動(dòng)物⑥發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物(只有在產(chǎn)下的雌性個(gè)體中,轉(zhuǎn)入的基因才能表達(dá))。用基因工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器的操作過程是怎樣的?復(fù)習(xí)鞏固1.在傳統(tǒng)的藥品生產(chǎn)中,某些藥品如胰島素、干擾素等直接從生物體的哪些結(jié)構(gòu)中提???從生物的組織、細(xì)胞或血液中提取。2.傳統(tǒng)生產(chǎn)方法的缺點(diǎn):由于受原料來源的限制,價(jià)格十分昂貴。三、基因工程藥品異軍突起轉(zhuǎn)基因生物目的基因基因從何來抗蟲棉耐寒的番茄生產(chǎn)胰島素的工程菌生產(chǎn)生長(zhǎng)激素的工程菌生產(chǎn)干擾素的工程菌抗真菌立枯絲核菌的煙草抗鹽堿和干旱作物抗除草劑大豆Bt毒蛋白基因蘇云金芽孢桿菌抗凍蛋白基因魚人胰島素基因人人生長(zhǎng)激素基因人人干擾素基因人血液中白細(xì)胞內(nèi)幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的基因抗除草劑基因3.可利用什么方法來解決上述問題?利用基因工程方法制造轉(zhuǎn)基因的工程菌,可高效率地生產(chǎn)出各種高質(zhì)量、低成本的藥品。工程菌:用基因工程方法,使外源基因得到高效率表達(dá)的菌類細(xì)胞株系?;蚬こ趟幤钒ǎ杭?xì)胞因子(即淋巴因子如白細(xì)胞介素—2、干擾素)、抗體、疫苗、激素等
胰島素是治療糖尿病的特效藥。一般臨床上使用的胰島素主要從豬、牛等家畜的胰腺中提取,每100kg胰腺只能提取4-5g胰島素。用該方法生產(chǎn)的胰島素產(chǎn)量低,價(jià)格昂貴,遠(yuǎn)不能滿足社會(huì)需要。1979年,科學(xué)家將動(dòng)物體內(nèi)的胰島素基因與大腸桿菌DNA分子重組,并在大腸桿菌內(nèi)實(shí)現(xiàn)了表達(dá)。1982年,美國(guó)一家基因公司用基因工程方法生產(chǎn)的胰島素投入市場(chǎng),售價(jià)降低了30%-50%?;蚬こ趟幤贰?/p>
胰島素
治療侏儒癥的唯一方法,是向人體注射生長(zhǎng)激素。而生長(zhǎng)激素的獲得很困難。以前,要獲得生長(zhǎng)激素,需解剖尸體,從大腦的底部摘取垂體,并從中提取生長(zhǎng)激素?,F(xiàn)可利用基因工程方法,將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)氪竽c桿菌中,使其生產(chǎn)生長(zhǎng)激素。人們從450L大腸桿菌培養(yǎng)液中提取的生長(zhǎng)激素,相當(dāng)于6萬具尸體的全部產(chǎn)量?;蚬こ趟幤贰?/p>
生長(zhǎng)激素干擾素是動(dòng)物或人體細(xì)胞受到病毒侵染后產(chǎn)生的一種糖蛋白。干擾素幾乎能抵抗所有病毒引起的感染,是一種抗病毒的特效藥。此外干擾素對(duì)治療癌癥和某些白血病也有一定療效。傳統(tǒng)的干擾素生產(chǎn)方法是從人血液中的白細(xì)胞內(nèi)提取,每300L血液只能提取出1mg干擾素。1980-1982年,科學(xué)家用基因工程方法在大腸桿菌及酵母菌細(xì)胞內(nèi)獲得了干擾素,是傳統(tǒng)的生產(chǎn)量的12萬倍。1987年上述干擾素大量投放市場(chǎng)?;蚬こ趟幤贰?/p>
干擾素利用微生物生產(chǎn)藥物的優(yōu)越性何在?利用微生物生產(chǎn)蛋白質(zhì)類藥物,是指將人們需要的某種蛋白質(zhì)的編碼基因,構(gòu)建成表達(dá)載體后導(dǎo)入微生物,然后利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)蛋白質(zhì)類藥物。有以下優(yōu)越性:(1)利用活細(xì)胞作為表達(dá)系統(tǒng),表達(dá)效率高,無需大型裝置和大面積廠房就可以生產(chǎn)出大量藥品。(2)可以解決傳統(tǒng)制藥中原料來源的不足。利用基因工程菌發(fā)酵生產(chǎn)就不需要從動(dòng)物或人體上獲取原料。(3)降低生產(chǎn)成本,減少生產(chǎn)人員和管理人員。1、基因治療概念:四、基因治療曙光初照
把正常基因?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能,從而達(dá)到治療疾病的目的,是治療遺傳病的最有效的手段。(把特定的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中,從而達(dá)到治療疾病的目的)2、實(shí)例:
將腺苷酸脫氨酶(ADA)基因轉(zhuǎn)入取自患者的淋巴細(xì)胞中,再將這種淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)入患者體內(nèi)。(1)對(duì)嚴(yán)重復(fù)合型免疫缺陷癥的治療3、基因治療的類型體外基因治療:先從病人體內(nèi)獲得某種細(xì)胞,進(jìn)行培養(yǎng),然后在體外完成基因轉(zhuǎn)移,再篩選成功轉(zhuǎn)移的細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng),最后重新輸入患者體內(nèi)。體內(nèi)基因治療:直接向人體組織細(xì)胞中轉(zhuǎn)移的治病方法。(如,將治療囊性纖維病的正?;蜣D(zhuǎn)入患者肺組織)4、基因治療的發(fā)展現(xiàn)狀:處于初期的臨床試驗(yàn)階段5、用于基因治療的基因種類:正?;?、反義基因和自殺基因反義基因:反義基因是指由靶基因負(fù)鏈編碼的可以干擾靶基因mRNA轉(zhuǎn)錄與翻譯的基因。自殺基因自殺基因(suicidegene),是指將某些病毒或細(xì)菌的基因?qū)氚屑?xì)胞中,其表達(dá)的酶可催化無毒的藥物前體轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞毒物質(zhì),從而導(dǎo)致攜帶該基因的受體細(xì)胞被殺死,此類基因稱為自殺基因。應(yīng)用自殺基因常用來治療腫瘤和感染性疾病。藥物成分用途傳統(tǒng)方法基因工程胰島素干擾素乙型肝炎疫苗閱讀課本P21-23:
轉(zhuǎn)基因抗乙肝西紅柿(中國(guó)),雖然不能治愈乙肝,但一年只吃幾個(gè)抗乙肝西紅柿,就完全能代替注射乙肝疫苗??挂腋挝骷t柿屬于轉(zhuǎn)基因食品,就是將乙肝疫苗植入西紅柿內(nèi),經(jīng)過多代繁殖,使轉(zhuǎn)入的基因穩(wěn)定化。用轉(zhuǎn)基因的植物生產(chǎn)藥物基因治療概念:
是向目標(biāo)細(xì)胞中引入正常功能的基因,以糾正或補(bǔ)償基因的缺陷,達(dá)到治療的目的。例、基因工程可以用于治療動(dòng)物及人的單基因遺傳病,從基因治療的概念分析,它治療的遺傳病主要是()
A.伴性遺傳病B.常染色體遺傳病
C.顯性遺傳病D.隱性遺傳病隨練習(xí)堂√DNA
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