骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)教學(xué)課件

骨髓檢查的臨床應(yīng)用造血系統(tǒng)疾病骨髓細(xì)胞學(xué)檢查是診斷造血系統(tǒng)疾病的最有價(jià)值的檢查方法造血系統(tǒng)疾病診斷造血系統(tǒng)疾病療效分析和預(yù)后估計(jì)骨髓檢查的臨床應(yīng)用造血系統(tǒng)疾病1肯定性診斷：骨髓中具有特異性病理細(xì)胞－－如白血病細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞、異形組織細(xì)胞、癌細(xì)胞等符合性診斷：骨髓象表現(xiàn)異常變化，結(jié)合臨床病史可符合診斷－－如缺鐵性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血、粒細(xì)胞缺乏、免疫性血小板減少性紫癜、脾功能亢進(jìn)、類(lèi)白血病反應(yīng)等提示性診斷：骨髓象可提供進(jìn)一步診斷線索－－如溶血性貧血需結(jié)合病史作溶血檢查才能明確診斷除外性診斷：骨髓象的檢查能排除臨床上被懷疑的疾?。缛准?xì)胞減少，疑患急性白血病而骨髓檢查無(wú)相應(yīng)改變時(shí)，可作出排除性診斷肯定性診斷：骨髓中具有特異性病理細(xì)胞－－如白血病細(xì)胞、骨髓瘤2臨床應(yīng)用診斷非造血系統(tǒng)疾病某些原蟲(chóng)感染，如瘧疾和黑熱病某些代謝性疾病如高雪病協(xié)助診斷感染性疾病

如傷寒、敗血癥等某些轉(zhuǎn)移性癌腫等－－在骨髓涂片中能查到相應(yīng)的病原體或特殊細(xì)胞瘧原蟲(chóng)利杜氏小體臨床應(yīng)用診斷非造血系統(tǒng)疾病瘧原蟲(chóng)利杜氏小體3增生程度有核細(xì)胞/成熟紅常見(jiàn)疾病極度活躍1:1（1:0.5－2.0）白血病明顯活躍1:10（1:5－12）白血病、 增生性貧血增生活躍1:20（1:16－32）正常骨髓或某些貧血增生減低1:50（1:35－70）再障、粒缺或 粒細(xì)胞減少癥增生極度減低1:200（1:300）再障骨髓增生程度—5級(jí)增生程度有核細(xì)胞/成熟紅常見(jiàn)疾病極度活躍4骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)教學(xué)課件5主要內(nèi)容血細(xì)胞發(fā)育過(guò)程形態(tài)變化血細(xì)胞正常形態(tài)學(xué)特征血細(xì)胞的細(xì)胞化學(xué)染色常見(jiàn)血液病血液學(xué)特征主要內(nèi)容血細(xì)胞發(fā)育過(guò)程形態(tài)變化6一、血細(xì)胞生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點(diǎn)

－－原始、幼稚、成熟

胞體：大→小（巨核細(xì)胞：小→大,且不規(guī)則）胞核：大?。捍蟆。t細(xì)胞核消失，巨核細(xì)胞：小→大）形狀：圓→凹陷→分葉（粒細(xì)胞）染色質(zhì)：細(xì)致稀疏→粗糙致密，淺→深核仁：多→少→無(wú)，核膜由不明顯轉(zhuǎn)為明顯胞質(zhì)：數(shù)量：少→多,僅淋巴細(xì)胞變化不大染色：嗜堿、深染→嗜堿、淡染→嗜酸、淡染（單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞仍嗜堿）特殊物質(zhì)（血紅蛋白、特殊顆粒等）：無(wú)→少→多一、血細(xì)胞生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點(diǎn)

－－原始7NSE主要存在于單核細(xì)胞中，從原單核細(xì)胞到成熟單核細(xì)胞逐漸增強(qiáng)，粒細(xì)胞一般呈陰性或弱陽(yáng)性，淋巴細(xì)胞一般為陰性。酸性磷酸酶染色（ACP）10%，呈圓形，大小接近成熟紅細(xì)胞，7~12m【結(jié)果】NAP主要存在于成熟粒細(xì)胞胞漿中，其他血細(xì)胞均為陰性反應(yīng)。陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿與再生障礙性貧血的鑒別:前者NAP活性減低，后者增高。結(jié)合組化染色，免疫分型考慮核形狀不一，為橢圓形，亦可成折疊或分葉狀對(duì)有些細(xì)胞既有上一階段特點(diǎn)，又有下一階段特點(diǎn)--宜劃分為下一階段原始淋巴細(xì)胞：正常不見(jiàn)或很少見(jiàn)核變小，約占整個(gè)細(xì)胞的1/2，呈卵圓形或有凹陷，偏于一旁顆粒型巨核：為過(guò)渡型巨核細(xì)胞，占10~27%，漿中無(wú)血小板形成核:占細(xì)胞1/2，可有核仁，核的一側(cè)可有淡染區(qū)，核染色質(zhì)較濃集增生減低1:50（1:35－70）再障、粒缺或 粒細(xì)胞減少癥正常骨髓中約占0-5％【原理】POX可分解底物中H2O2,釋放氧使無(wú)色的聯(lián)苯胺轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，與亞硝基鐵氰化鈉結(jié)合形成藍(lán)黑色顆粒沉著于細(xì)胞質(zhì)中或巨核細(xì)胞脆弱，在涂片過(guò)程中受到損傷，使核排出；有核紅細(xì)胞呈陰性反應(yīng)；某些代謝性疾病如高雪病其他血液病：淋巴瘤、骨髓增殖性疾病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病等NAP活性中度增高，惡組時(shí)活性降低。胞漿量多，有多量特異性顆粒NSE主要存在于單核細(xì)胞中，從原單核細(xì)胞到成熟單核細(xì)胞逐漸增8細(xì)胞發(fā)育規(guī)律細(xì)胞體積與外形大小：通常從原始到成熟，胞體由大逐漸變小。巨核細(xì)胞相反，細(xì)胞越成熟，胞體越大。外形：紅細(xì)胞系始終呈圓形；粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞系則保持圓形或橢圓形；單核細(xì)胞系由圓形或橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形；巨核細(xì)胞系由圓形變?yōu)槊黠@不規(guī)則形。細(xì)胞發(fā)育規(guī)律細(xì)胞體積與外形9細(xì)胞發(fā)育規(guī)律細(xì)胞質(zhì)量：一般由少到多。淋巴細(xì)胞變化不大。染色：紅、粒及巨核細(xì)胞系細(xì)胞漿著色多由深藍(lán)色或淺藍(lán)色而變?yōu)闇\紅色，紅細(xì)胞最終變?yōu)榻奂t色。顆粒：從無(wú)到有，由非特異性顆粒到特異性顆粒。如原始粒一般無(wú)顆粒，早幼粒出現(xiàn)非特異性嗜天青顆粒，中幼粒以后各階段細(xì)胞嗜天青顆?；鞠Ф源罅刻禺愋灶w粒。紅細(xì)胞系胞漿中不含顆粒。細(xì)胞發(fā)育規(guī)律細(xì)胞質(zhì)10細(xì)胞發(fā)育規(guī)律細(xì)胞核大小：由大變小，巨核細(xì)胞則相反。細(xì)胞核核形：幼紅細(xì)胞胞核始終呈圓形，最后脫核而消失。各系白細(xì)胞原始階段胞核均呈圓形或橢圓形，隨著細(xì)胞成熟，核的一側(cè)逐漸凹陷，最后形成分葉狀；單核細(xì)胞則由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形；淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞系核形保持不變。巨核細(xì)胞胞核逐漸增大并分葉，分葉不規(guī)則堆疊成為一巨大的核。細(xì)胞發(fā)育規(guī)律細(xì)胞核11細(xì)胞發(fā)育規(guī)律細(xì)胞核染色質(zhì)：由細(xì)致疏松逐漸變?yōu)榇植诿芗?，最后緊縮成塊，著色由淺變深，隨DNA含量增加而逐漸變?yōu)樯钭仙?。核位置：紅細(xì)胞系胞核位置居中，核四周均有胞漿。粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及漿細(xì)胞的核常偏位。淋巴細(xì)胞胞核常一側(cè)著邊。細(xì)胞發(fā)育規(guī)律細(xì)胞核12細(xì)胞發(fā)育規(guī)律細(xì)胞核核膜：由不明顯到明顯核仁：由清晰到模糊不清最后消失原始階段均有核仁早幼階段核仁模糊不清或消失中幼階段多無(wú)核仁細(xì)胞發(fā)育規(guī)律細(xì)胞核13二、血細(xì)胞正常形態(tài)學(xué)特征二、血細(xì)胞正常形態(tài)學(xué)特征14紅細(xì)胞系統(tǒng)原始紅細(xì)胞：0~1.5%,15~22

m圓形或有偽足突出核漿比例大核仁1~5個(gè)，邊界不清核膜清楚，核周淡染區(qū)漿呈深藍(lán)，不含顆粒早幼紅細(xì)胞：

0~2%，體積變小，11~20

m核染色質(zhì)開(kāi)始聚集→粗顆粒狀核仁模糊或消失胞漿更藍(lán)紅細(xì)胞系統(tǒng)原始紅細(xì)胞：15中幼紅細(xì)胞：

2~10％，體積顯著變小，8~18

m胞核變小，染色質(zhì)排列緊密，濃集成塊，車(chē)輪狀排列，或如砸碎之墨(明顯空隙)核仁已完全消失胞漿明顯增多，胞漿嗜多色--灰藍(lán)色，藍(lán)色或灰紅色(血紅蛋白)

晚幼紅細(xì)胞：

10%，呈圓形，大小接近成熟紅細(xì)胞，7~12

m胞核更小，染色質(zhì)固縮呈炭團(tuán)狀胞漿量更多，淡紅與成熟RBC相近

中幼紅細(xì)胞：16粒細(xì)胞系統(tǒng)原始粒細(xì)胞：0.5~2%，11~18

m，圓形漿淡藍(lán)色，漿內(nèi)無(wú)顆?；蛏倭渴忍烨囝w粒核圓，染色質(zhì)細(xì)致如薄沙核仁3~5個(gè)，清晰可見(jiàn)早幼粒細(xì)胞：0.5~4%胞體較大染色質(zhì)粗糙稍有濃集，核仁仍存在或開(kāi)始消失（少，不清）胞漿較原粒細(xì)胞為多，藍(lán)色稍淺，漿內(nèi)充滿嗜天青顆粒－－紫紅，大小不一，形態(tài)不一，分布不均勻，可蓋在核上或在核周?chē)＜?xì)胞系統(tǒng)原始粒細(xì)胞：0.5~2%，11~18m，圓17中幼粒：圓形核變小，約占整個(gè)細(xì)胞的1/2，呈卵圓形或有凹陷，偏于一旁染色質(zhì)開(kāi)始密集核仁消失胞漿內(nèi)出現(xiàn)特異顆粒（中性2~12%，嗜酸0-1%，嗜堿偶見(jiàn)）晚幼粒細(xì)胞：3~13％，圓形胞核凹陷呈腎形或馬蹄形，但凹陷不超胞核假想橫徑的一半染色質(zhì)明顯密集，呈粗條狀胞漿量多，有多量特異性顆粒中幼粒：圓形18桿狀核核的凹陷超過(guò)假想橫徑的1/2染色質(zhì)密集成塊狀分葉核

細(xì)胞核分成3~5葉，核葉之間分界清楚，有核絲相連桿狀核19單核細(xì)胞系統(tǒng)原始單核細(xì)胞：正常骨髓很少見(jiàn)，有原始細(xì)胞特點(diǎn)核圓，有扭曲折疊核仁1~3個(gè)，不清楚染色質(zhì)疏松，均勻－－網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)胞漿灰藍(lán)幼單核細(xì)胞：正常骨髓中很少見(jiàn)核形狀不一，為橢圓形，亦可成折疊或分葉狀染色質(zhì)疏松較原單為粗，但仍呈網(wǎng)狀核仁可有可無(wú)胞漿增多，灰藍(lán)色，可見(jiàn)多數(shù)細(xì)小的嗜天青顆粒單核細(xì)胞系統(tǒng)原始單核細(xì)胞：正常骨髓很少見(jiàn)，有原始細(xì)胞特點(diǎn)20淋巴細(xì)胞系統(tǒng)原始淋巴細(xì)胞：正常不見(jiàn)或很少見(jiàn)

胞體大，直徑10-18um，（ALL則不一定）胞漿亮藍(lán)(原粒：天藍(lán)單:灰藍(lán))，一般無(wú)顆粒核大、核漿比例大染色質(zhì)如細(xì)沙狀核仁1~2個(gè)、較原粒清楚幼淋巴細(xì)胞：

0.5%，圓形或橢圓形，與原淋大小相仿或稍小胞核圓形，染色質(zhì)較為緊密，核仁模糊或不見(jiàn)胞漿稍增多呈淡藍(lán)色，無(wú)或有少量嗜天青顆粒淋巴細(xì)胞系統(tǒng)原始淋巴細(xì)胞：正常不見(jiàn)或很少見(jiàn)21特殊物質(zhì)（血紅蛋白、特殊顆粒等）：無(wú)→少→多巨核細(xì)胞相反，細(xì)胞越成熟，胞體越大。呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，陽(yáng)性物質(zhì)呈均勻彌漫或細(xì)顆胞漿量多，有多量特異性顆粒陰性反應(yīng)：急性淋巴細(xì)胞性白血病。根據(jù)其周?chē)?xì)胞－－（幼稚細(xì)胞)胞質(zhì)豐富，呈不透明深藍(lán)色或藍(lán)紫色通常從原始到成熟，胞體由大逐漸變小。如原始粒一般無(wú)顆粒，早幼粒出現(xiàn)非特異性嗜天青顆粒，中幼粒以后各階段細(xì)胞嗜天青顆?；鞠Ф源罅刻禺愋灶w粒。原始淋巴細(xì)胞：正常不見(jiàn)或很少見(jiàn)胞體：大→小（巨核細(xì)胞：小→大,且不規(guī)則）巨幼紅細(xì)胞：胞體及胞核均增大，核染色質(zhì)纖細(xì)、疏松，著色淺淡，胞漿量豐富極度活躍1:1（1:0.極度活躍1:1（1:0.紅系明顯增生，以早及中幼紅為主明顯活躍1:10（1:5－12）白血病、 增生性貧血巨核細(xì)胞：為正常骨髓中最大的細(xì)胞，胞核呈不規(guī)則或分葉狀，染色質(zhì)粗糙，排列很緊密，胞漿多呈均勻的淡紫紅或淡紅色，內(nèi)含極細(xì)的紫紅色顆粒中性粒堿性磷酸酶在堿性條件下將基質(zhì)液中成分水解，產(chǎn)生黑色物質(zhì)核仁1~5個(gè)，邊界不清【臨床意義】同POX染色反應(yīng)。細(xì)胞化學(xué)染色：以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，根據(jù)化學(xué)反應(yīng)原理，進(jìn)行血細(xì)胞涂片以及染色，顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)化學(xué)組成以及變化淋巴細(xì)胞系統(tǒng)淋巴細(xì)胞：大淋巴細(xì)胞：直徑13-18um胞核圓形或橢圓染色質(zhì)較為緊密呈塊，排列均勻胞漿稍增多呈天蘭色，可有少量大而稀疏的嗜天青顆粒小淋巴細(xì)胞：直徑6-10um染色質(zhì)粗糙、致密呈大塊胞漿量少，有較多的嗜天青顆粒特殊物質(zhì)（血紅蛋白、特殊顆粒等）：無(wú)→少→多淋巴細(xì)胞系統(tǒng)22巨核細(xì)胞系統(tǒng)原巨核細(xì)胞：正常骨髓中很少見(jiàn)原始細(xì)胞中最大，多為不規(guī)則形，很少呈卵圓形胞核大，圓形或橢圓形或不規(guī)則，核偏位核仁2~3個(gè)，不明顯染色質(zhì)較粗，呈網(wǎng)狀排列－－土豆皮樣

胞漿不整齊,邊緣有空泡及偽足樣突出，漿量少，不透明深藍(lán)色，不含顆粒巨核細(xì)胞系統(tǒng)原巨核細(xì)胞：正常骨髓中很少見(jiàn)23巨核細(xì)胞系統(tǒng)幼巨核細(xì)胞：正常骨髓中約占0-5％胞體比原巨稍大，外形不規(guī)則，有偽足樣突出胞漿增多，可有偽足，呈（灰）蘭色，核旁區(qū)較淡，可出現(xiàn)嗜天青顆粒核為腎形或不規(guī)則形核染色增粗，濃集核仁可有可無(wú)巨核細(xì)胞系統(tǒng)24巨核細(xì)胞系統(tǒng)巨核細(xì)胞：為正常骨髓中最大的細(xì)胞，胞核呈不規(guī)則或分葉狀，染色質(zhì)粗糙，排列很緊密，胞漿多呈均勻的淡紫紅或淡紅色，內(nèi)含極細(xì)的紫紅色顆粒顆粒型巨核：為過(guò)渡型巨核細(xì)胞，占10~27%，漿中無(wú)血小板形成胞體更大胞漿彌漫紫紅色核分葉產(chǎn)板型巨核：成熟型，胞漿中出現(xiàn)血小板，約占44~60％裸核型：巨核細(xì)胞胞漿完全血小板化后，細(xì)胞退化；或巨核細(xì)胞脆弱，在涂片過(guò)程中受到損傷，使核排出；占8~30%巨核細(xì)胞系統(tǒng)巨核細(xì)胞：為正常骨髓中最大的細(xì)胞，胞核呈不規(guī)則或25漿細(xì)胞系統(tǒng)原漿細(xì)胞胞體大，呈圓形核大，占細(xì)胞2/3以上，染色質(zhì)均勻分布呈顆粒狀核仁明顯漿灰藍(lán)幼漿細(xì)胞核:占細(xì)胞1/2，可有核仁，核的一側(cè)可有淡染區(qū)，核染色質(zhì)較濃集

漿:較原漿為多，淡染區(qū)擴(kuò)大漿細(xì)胞胞體:大小不一,形不規(guī)則,圓或橢圓染色質(zhì)結(jié)塊較大,呈車(chē)輪狀胞質(zhì)豐富，呈不透明深藍(lán)色或藍(lán)紫色漿細(xì)胞系統(tǒng)原漿細(xì)胞26分析單個(gè)血細(xì)胞注意點(diǎn)全面的觀點(diǎn)：即識(shí)別每一個(gè)細(xì)胞時(shí)應(yīng)根據(jù)每個(gè)細(xì)胞的大小、核漿比例、胞核、胞漿特點(diǎn)進(jìn)行全面分析，不能單憑一點(diǎn)下結(jié)論細(xì)胞發(fā)育是一個(gè)連續(xù)過(guò)程，人為劃分為不同階段。對(duì)有些細(xì)胞既有上一階段特點(diǎn)，又有下一階段特點(diǎn)--宜劃分為下一階段病理情況下核漿發(fā)育不平衡，核發(fā)育落后于漿－－同時(shí)有上下兩階段特點(diǎn)--辨認(rèn)以核形態(tài)為主分類(lèi)不明細(xì)胞需描述形態(tài)特點(diǎn)，不要隨便棄之各種原始細(xì)胞難以鑒別－－不能完全根據(jù)形態(tài)來(lái)定根據(jù)其周?chē)?xì)胞－－（幼稚細(xì)胞)結(jié)合組化染色，免疫分型考慮鑒別細(xì)胞需在同一片與其他細(xì)胞比較－－染色深淺，酸堿差異分析單個(gè)血細(xì)胞注意點(diǎn)全面的觀點(diǎn)：即識(shí)別每一個(gè)細(xì)胞時(shí)應(yīng)根據(jù)每個(gè)27三、血細(xì)胞的細(xì)胞化學(xué)染色細(xì)胞化學(xué)染色：以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，根據(jù)化學(xué)反應(yīng)原理，進(jìn)行血細(xì)胞涂片以及染色，顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)化學(xué)組成以及變化可鑒別血細(xì)胞形態(tài)有助于臨床疾病的診斷，指導(dǎo)治療三、血細(xì)胞的細(xì)胞化學(xué)染色細(xì)胞化學(xué)染色：以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，根28特殊物質(zhì)（血紅蛋白、特殊顆粒等）：無(wú)→少→多原始淋巴細(xì)胞：正常不見(jiàn)或很少見(jiàn)增生減低1:50（1:35－70）再障、粒缺或 粒細(xì)胞減少癥【結(jié)果】NAP主要存在于成熟粒細(xì)胞胞漿中，其他血細(xì)胞均為陰性反應(yīng)。染色：紅、粒及巨核細(xì)胞系細(xì)胞漿著色多由深藍(lán)色或淺藍(lán)色而變?yōu)闇\紅色，紅細(xì)胞最終變?yōu)榻奂t色。胞核凹陷呈腎形或馬蹄形，但凹陷不超胞核假想橫徑的一半核仁1~5個(gè)，邊界不清成熟粒細(xì)胞有核分葉過(guò)多現(xiàn)象－－巨粒細(xì)胞可較早出現(xiàn)細(xì)胞化學(xué)染色：以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，根據(jù)化學(xué)反應(yīng)原理，進(jìn)行血細(xì)胞涂片以及染色，顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)化學(xué)組成以及變化幼單核細(xì)胞：正常骨髓中很少見(jiàn)核形狀不一，為橢圓形，亦可成折疊或分葉狀骨髓增生明顯活躍，G/E倒置核仁3~5個(gè)，清晰可見(jiàn)幼單核細(xì)胞：正常骨髓中很少見(jiàn)急性粒-單核細(xì)胞性白血病時(shí)，白血病細(xì)胞部分陽(yáng)性，部分陰性巨幼細(xì)胞性貧血骨髓象特點(diǎn)陰性反應(yīng)：急性淋巴細(xì)胞性白血病。SAA:骨髓造血島呈空網(wǎng)狀，僅見(jiàn)成纖維細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和大量網(wǎng)狀纖維－－未見(jiàn)造血細(xì)胞通常從原始到成熟，胞體由大逐漸變小。四、常見(jiàn)血液病骨髓象特點(diǎn)血細(xì)胞的細(xì)胞化學(xué)染色過(guò)氧化物酶（peroxidase，POX)蘇丹黑染色（SudanblackBstain，SB）中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(Neutrophlialkalinephosphatase，NAP)非特異性酯酶染色（NSE）+NaF抑制試驗(yàn)糖原染色(periodicacid–Schiff’sreaction，AS)鐵染色酸性磷酸酶染色（acidphosphatase，ACP）特異性酯酶染色（specificesterase，SE）特殊物質(zhì)（血紅蛋白、特殊顆粒等）：無(wú)→少→多血細(xì)胞的細(xì)胞化學(xué)29POX【原理】POX可分解底物中H2O2,釋放氧使無(wú)色的聯(lián)苯胺轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，與亞硝基鐵氰化鈉結(jié)合形成藍(lán)黑色顆粒沉著于細(xì)胞質(zhì)中【結(jié)果】強(qiáng)陽(yáng)性：胞質(zhì)中藍(lán)黑色顆粒粗大而密集弱陽(yáng)性：胞質(zhì)中藍(lán)黑色顆粒細(xì)小而稀疏陰性:胞質(zhì)中無(wú)藍(lán)黑色顆粒者【正常參考值】

POX主要存在于粒細(xì)胞系統(tǒng)，原粒細(xì)胞為陰性,隨細(xì)胞的成熟--反應(yīng)增強(qiáng)，但嗜堿性粒細(xì)胞為陰性?！九R床意義】

陽(yáng)性反應(yīng)：急性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性，急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞弱陽(yáng)性或陰性。陰性反應(yīng)：急性淋巴細(xì)胞性白血病。POX【原理】POX可分解底物中H2O2,釋放氧使無(wú)色的聯(lián)30骨髓片POX染色骨髓片POX染色31骨髓片POX染色APL：呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)AML-M4：部分呈陽(yáng)性反應(yīng)，部分成弱陽(yáng)性反應(yīng)AML-M5：呈弱陽(yáng)性ALL：呈陰性，<3%骨髓片POX染色APL：呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)AML-M4：部分呈陽(yáng)性32蘇丹黑染色SB【原理】SB作為一種脂溶性染料溶于細(xì)胞內(nèi)含脂質(zhì)物質(zhì)中，使其呈棕黑色或深黑色?！窘Y(jié)果和正常參考值】與POX染色大致相同?！九R床意義】同POX染色反應(yīng)。蘇丹黑染色SB【原理】SB作為一種脂溶性染料溶于細(xì)胞內(nèi)含脂質(zhì)33NAP【原理】：偶氮偶聯(lián)法、鈣-鈷法中性粒堿性磷酸酶在堿性條件下將基質(zhì)液中成分水解，產(chǎn)生黑色物質(zhì)【結(jié)果】

NAP主要存在于成熟粒細(xì)胞胞漿中，其他血細(xì)胞均為陰性反應(yīng)?！菊⒖贾怠?/p>

陽(yáng)性率：平均為10％～40％，以“+”

陽(yáng)性反應(yīng)為主。積分值：陽(yáng)性積分值40～80（分）。NAP【原理】：34明顯活躍1:10（1:5－12）白血病、 增生性貧血（POX）（-）~（+）染色質(zhì)粗糙稍有濃集，核仁仍存在或開(kāi)始消失（少，不清）巨幼變－－各階段幼紅細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨核細(xì)胞骨髓增生明顯活躍或增生活躍結(jié)合組化染色，免疫分型考慮如原始粒一般無(wú)顆粒，早幼粒出現(xiàn)非特異性嗜天青顆粒，中幼粒以后各階段細(xì)胞嗜天青顆?；鞠Ф源罅刻禺愋灶w粒。急性白血病類(lèi)型的鑒別：急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)NAP活性增高，急性粒細(xì)胞白血病時(shí)減低，急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞時(shí)正?；驕p低。巨幼細(xì)胞性貧血骨髓象特點(diǎn)通常從原始到成熟，胞體由大逐漸變小。核仁1~5個(gè)，邊界不清原始細(xì)胞中最大，多為不規(guī)則形，很少呈卵圓形Ｈ－Ｊ小體、嗜堿性點(diǎn)彩染色質(zhì)較粗，呈網(wǎng)狀排列－－土豆皮樣急性淋巴細(xì)胞性白血病為陰性反應(yīng)。堿性磷酸酶增加減少或（-）正?；蛟黾覰EC：非紅系的骨髓有核細(xì)胞細(xì)胞外鐵：按陽(yáng)性強(qiáng)度（藍(lán)色物質(zhì)、藍(lán)色顆粒、藍(lán)色小珠）分為5級(jí)。淋巴細(xì)胞胞核常一側(cè)著邊。原始淋巴細(xì)胞：正常不見(jiàn)或很少見(jiàn)【臨床意義】感染時(shí)的鑒別：急性化膿感染時(shí)活性明顯增高，病毒感染時(shí)活性正?；蚵詼p低。慢性粒細(xì)胞性白血病與類(lèi)白血病反應(yīng)的鑒別：CML時(shí)NAP活性明顯減低，類(lèi)白血病反應(yīng)NAP活性極度增高。陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿與再生障礙性貧血的鑒別:前者NAP活性減低，后者增高。急性白血病類(lèi)型的鑒別：急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)NAP活性增高，急性粒細(xì)胞白血病時(shí)減低，急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞時(shí)正?；驕p低。其他血液?。毫馨土?、骨髓增殖性疾病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病等NAP活性中度增高，惡組時(shí)活性降低。其他情況：腎上腺皮質(zhì)激素功能亢進(jìn)、妊娠及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素、雌激素等，NAP積分可增高。明顯活躍1:10（1:5－12）35骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)教學(xué)課件36中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（NAP）+++++++++++++-嗜酸粒細(xì)胞-中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（NAP）+++++++++++++37NSE+NaF抑制試驗(yàn)【原理】NSE可將基質(zhì)液中a-醋酸萘酚水解，產(chǎn)生a-萘酚，再與重氮染料偶聯(lián)形成不溶性有色沉淀，定位于細(xì)胞質(zhì)中NSE+NaF抑制試驗(yàn)【原理】38NSE+NaF抑制試驗(yàn)【正常參考值】NSE主要存在于單核細(xì)胞中，從原單核細(xì)胞到成熟單核細(xì)胞逐漸增強(qiáng)，粒細(xì)胞一般呈陰性或弱陽(yáng)性，淋巴細(xì)胞一般為陰性。【臨床意義】急性單核細(xì)胞性白血病為強(qiáng)陽(yáng)性，且可被氟化鈉抑制。急性粒細(xì)胞性白血病與均為陰性或弱陽(yáng)性,但陽(yáng)性反應(yīng)不被氟化鈉所抑制。急性淋巴細(xì)胞性白血病為陰性反應(yīng)。NSE+NaF抑制試驗(yàn)【正常參考值】39PAS【原理】過(guò)碘酸-Schiff反應(yīng)；糖原遇過(guò)碘酸氧化生成醛酸，與Schiff液中的品紅結(jié)合，形成紫紅色化合物PAS【原理】40PAS【正常參考值】有核紅細(xì)胞呈陰性反應(yīng)；淋巴細(xì)胞多呈陰性，少數(shù)弱陽(yáng)性；粒系中，原粒細(xì)胞糖原染色（－），早幼粒以下階段為（+），逐漸增強(qiáng)；單核細(xì)胞呈弱陽(yáng)性反應(yīng)巨核細(xì)胞和血小板呈陽(yáng)性反應(yīng)PAS【正常參考值】41【臨床意義】鑒別紅白血病與其他幼紅細(xì)胞增多的疾?。杭t白血病時(shí)幼紅細(xì)胞的PAS染色呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，積分值增高。鑒別良性與惡性淋巴細(xì)胞增生性疾?。簮盒粤馨图?xì)胞增生性疾病，其淋巴細(xì)胞的PSA染色積分值增高；病毒感染等淋巴細(xì)胞良性增生時(shí)，淋巴細(xì)胞積分值正常?！九R床意義】鑒別紅白血病與其他幼紅細(xì)胞增多的疾?。杭t白血病時(shí)42三種急性白血病類(lèi)型的鑒別：急性粒細(xì)胞白血病時(shí)，原始及幼稚粒細(xì)胞PAS染色常呈陰性反應(yīng)；急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)，原始及幼稚淋巴細(xì)胞常呈陽(yáng)性反應(yīng)，陽(yáng)性物質(zhì)呈粗顆?；驂K狀；急性單核細(xì)胞白血病時(shí)，原始及幼稚單核細(xì)胞多呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，陽(yáng)性物質(zhì)呈均勻彌漫或細(xì)顆粒狀。三種急性白血病類(lèi)型的鑒別：43鑒別某些細(xì)胞類(lèi)型：（1）不典型的巨核細(xì)胞與李-斯（Reed-sternberg）細(xì)胞的鑒別：前者呈陽(yáng)性反應(yīng)，后者一般為陰性或弱陽(yáng)性反應(yīng)。（2）高雪細(xì)胞與尼曼匹克細(xì)胞的鑒別：前者呈陽(yáng)性反應(yīng)，后者一般為陰性或弱陽(yáng)性反應(yīng)。（3）腺癌細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，骨髓轉(zhuǎn)移時(shí)有助于與白血病細(xì)胞的鑒別。鑒別某些細(xì)胞類(lèi)型：44NSE+NaF抑制試驗(yàn)形狀：圓→凹陷→分葉（粒細(xì)胞）5%，圓形或橢圓形，與原淋大小相仿或稍小染色質(zhì)疏松較原單為粗，但仍呈網(wǎng)狀慢性粒細(xì)胞性白血病與類(lèi)白血病反應(yīng)的鑒別：CML時(shí)NAP活性明顯減低，類(lèi)白血病反應(yīng)NAP活性極度增高。如原始粒一般無(wú)顆粒，早幼粒出現(xiàn)非特異性嗜天青顆粒，中幼粒以后各階段細(xì)胞嗜天青顆?；鞠Ф源罅刻禺愋灶w粒。幼單核細(xì)胞：正常骨髓中很少見(jiàn)其他血液?。毫馨土?、骨髓增殖性疾病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病等NAP活性中度增高，惡組時(shí)活性降低。大淋巴細(xì)胞：直徑13-18um粒系中，原粒細(xì)胞糖原染色（－），早幼粒以下階段為（+），逐漸增強(qiáng)；【結(jié)果】NAP主要存在于成熟粒細(xì)胞胞漿中，其他血細(xì)胞均為陰性反應(yīng)。過(guò)氧化物酶（-）分化差的原始細(xì)胞（-）~（±）陽(yáng)性率：平均為10％～40％，以“+”陽(yáng)性反應(yīng)為主。有核紅細(xì)胞呈陰性反應(yīng)；病理情況下核漿發(fā)育不平衡，核發(fā)育落后于漿－－同時(shí)有上下兩階段特點(diǎn)--辨認(rèn)以核形態(tài)為主幼紅細(xì)胞胞核始終呈圓形，最后脫核而消失。某些原蟲(chóng)感染，如瘧疾和黑熱病早幼階段核仁模糊不清或消失糖原遇過(guò)碘酸氧化生成醛酸，與Schiff液中的品紅結(jié)合，形成紫紅色化合物網(wǎng)狀細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、組織細(xì)胞和單核細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。NSE+NaF抑制試驗(yàn)45PASMA幼紅細(xì)胞呈陰性反應(yīng)AML-M6幼紅細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)PASMAAML-M646細(xì)胞化學(xué)染色

急淋急粒急單過(guò)氧化物酶（-）分化差的原始細(xì)胞（-）~（±

）（POX）（-）~（+）分化好的幼稚細(xì)胞（+）~（++）糖原染色粗顆?；驂K狀彌漫性淡紅色淡紅色細(xì)顆粒狀（PAS）（+）（-）/（?）（+）非特異酯酶（-）NaF抑制不敏感可被NaF抑制（NSE）（-）~（+）（+）~（++）堿性磷酸酶增加減少或（-）正常或增加（NAP）PAS（糖原染色）用于鑒別紅白血病M6（強(qiáng)陽(yáng)性）和巨幼貧細(xì)胞化學(xué)染色急淋47鐵染色【原理】人體內(nèi)鐵存在形式：鐵蛋白，含鐵血紅素。鐵在酸性環(huán)境下在低鐵氰化鉀中形成藍(lán)色的鐵氰化鐵，又稱(chēng)普魯士藍(lán)反應(yīng)。鐵染色【原理】48鐵染色【結(jié)果】細(xì)胞外鐵：按陽(yáng)性強(qiáng)度（藍(lán)色物質(zhì)、藍(lán)色顆粒、藍(lán)色小珠）分為5級(jí)。細(xì)胞內(nèi)鐵：以鐵粒幼細(xì)胞所占的百分率表示。環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞：10個(gè)以上的粗大鐵粒，環(huán)繞細(xì)胞核排列超過(guò)核周徑的2/3以上。鐵染色【結(jié)果】49【參考值】細(xì)胞外鐵：一般為+或++

細(xì)胞內(nèi)鐵：陽(yáng)性率為20~90%，平均為65%。細(xì)胞漿內(nèi)常見(jiàn)1~5個(gè)鐵染色顆粒?！緟⒖贾怠?0【臨床意義】缺鐵性貧血：細(xì)胞外鐵明顯降低或消失，細(xì)胞內(nèi)鐵陽(yáng)性率減低，常<15%，細(xì)胞漿內(nèi)鐵粒變小、變淡。非缺鐵性貧血：惡性貧血、再生障礙性貧血、溶血性貧血時(shí)，細(xì)胞外鐵多為++到+++，細(xì)胞內(nèi)鐵陽(yáng)性率增加。鐵粒幼細(xì)胞性貧血：細(xì)胞內(nèi)鐵陽(yáng)性率明顯增加，并可見(jiàn)到環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞?！九R床意義】51MDS-RAS鐵染色，圖中所指為環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞MDS-RAS鐵染色，圖中所指為環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞52細(xì)胞外鐵觀察++++血色病+++AA、鐵粒幼貧血++感染+++AA、鐵粒幼貧血+IDA治療后—IDA陽(yáng)性為藍(lán)綠色沉淀細(xì)胞外鐵觀察+++++++++++++—陽(yáng)性為藍(lán)綠色沉淀53ACP毛細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)且不為L(zhǎng)-酒石酸所抑制，有助于毛細(xì)胞白血病的診斷。鑒別T淋巴細(xì)胞（+）與B淋巴細(xì)胞（-）。鑒別高雪病和尼曼-匹克病:前者呈陽(yáng)性反應(yīng)，后者為陰性。網(wǎng)狀細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、組織細(xì)胞和單核細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。ACP毛細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)且不為L(zhǎng)-酒石酸所抑制，有助于毛細(xì)胞白54酸性磷酸酶染色（ACP）FAB：ALL-L2ACP染色呈陽(yáng)性反應(yīng)（桔紅色粗大顆粒）提示為T(mén)淋巴細(xì)胞白血病酸性磷酸酶染色（ACP）FAB：ALL-L2ACP染色呈陽(yáng)性55特異性酯酶染色SE急性粒細(xì)胞性白血病原粒、早幼粒細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)急性單核細(xì)胞白血病和急性淋巴細(xì)胞白血病均呈陰性反應(yīng)急性粒-單核細(xì)胞性白血病時(shí)，白血病細(xì)胞部分陽(yáng)性，部分陰性特異性酯酶染色SE急性粒細(xì)胞性白血病原粒、早幼粒細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性56四、常見(jiàn)血液病骨髓象特點(diǎn)四、常見(jiàn)血液病骨髓象特點(diǎn)57缺鐵性貧血骨髓象特點(diǎn)增生活躍或明顯活躍，粒紅比值減低紅系明顯增生－－以中、晚幼紅細(xì)胞為主幼紅細(xì)胞體積小，胞漿量少，邊緣不規(guī)整，胞核小而致密，晚幼紅核固縮呈小而致密的紫黑色－－“炭核”老核幼漿(核成熟早于漿)成熟紅細(xì)胞體積小，中心淡染區(qū)擴(kuò)大，嚴(yán)重時(shí)可呈環(huán)狀紅細(xì)胞；易見(jiàn)嗜多色性紅細(xì)胞粒系相對(duì)減少，各階段比例及細(xì)胞形態(tài)大致正常巨核細(xì)胞系正常缺鐵性貧血骨髓象特點(diǎn)增生活躍或明顯活躍，粒紅比值減低58巨幼細(xì)胞性貧血骨髓象特點(diǎn)骨髓增生明顯活躍，粒、紅比值明顯減低紅系明顯增生，以早及中幼紅為主老漿幼核分裂相多見(jiàn)Ｈ－Ｊ小體、嗜堿性點(diǎn)彩成熟紅細(xì)胞：明顯大小不均，呈高色素性粒系相對(duì)減少－－可見(jiàn)各階段巨粒細(xì)胞，以晚幼粒、桿狀核細(xì)胞最多見(jiàn)巨核細(xì)胞數(shù)量大致正常或增多巨幼細(xì)胞性貧血骨髓象特點(diǎn)骨髓增生明顯活躍，粒、紅比值明顯減低59巨幼變－－各階段幼紅細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨核細(xì)胞巨幼紅細(xì)胞：胞體及胞核均增大，核染色質(zhì)纖細(xì)、疏松，著色淺淡，胞漿量豐富巨粒細(xì)胞：胞體增大，胞核腫脹，核染色質(zhì)疏松；成熟粒細(xì)胞有核分葉過(guò)多現(xiàn)象－－巨粒細(xì)胞可較早出現(xiàn)巨核細(xì)胞：可有胞體巨大、核分葉過(guò)多巨幼變－－各階段幼紅細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨核細(xì)胞60溶血性貧血骨髓象特點(diǎn)骨髓增生明顯活躍，G/E倒置紅系?？?gt;30%，急性溶血可達(dá)>50%，以中、晚幼紅為主分裂相多見(jiàn)Ｈ－Ｊ小體、嗜堿性點(diǎn)彩粒系相對(duì)減少，各階段比例及形態(tài)大致正常巨核細(xì)胞系大致正常溶血性貧血骨髓象特點(diǎn)骨髓增生明顯活躍，G/E倒置61再生障礙性貧血骨髓象特點(diǎn)骨髓脂肪滴增多，顆粒減少增生減低或極度減低粒系及紅系有核細(xì)胞均減少，早期造血細(xì)胞少見(jiàn)淋巴細(xì)胞相對(duì)增多漿細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞、組織嗜鹼細(xì)胞增多巨核細(xì)胞：減少甚至缺乏（SAA）再生障礙性貧血骨髓象特點(diǎn)骨髓脂肪滴增多，顆粒減少62增生活躍1:20（1:16－32）正常骨髓或某些貧血通常從原始到成熟，胞體由大逐漸變小。呈陽(yáng)性反應(yīng)，陽(yáng)性物質(zhì)呈粗顆?；驂K狀；細(xì)胞化學(xué)染色：以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，根據(jù)化學(xué)反應(yīng)原理，進(jìn)行血細(xì)胞涂片以及染色，顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)化學(xué)組成以及變化核仁1~5個(gè)，邊界不清細(xì)胞發(fā)育是一個(gè)連續(xù)過(guò)程，人為劃分為不同階段。染色質(zhì)：細(xì)致稀疏→粗糙致密，淺→深粒系中，原粒細(xì)胞糖原染色（－），早幼粒以下階段為（+），逐漸增強(qiáng)；幼單核細(xì)胞：正常骨髓中很少見(jiàn)巨核細(xì)胞系由圓形變?yōu)槊黠@不規(guī)則形。急性淋巴細(xì)胞性白血病為陰性反應(yīng)。某些代謝性疾病如高雪病由細(xì)致疏松逐漸變?yōu)榇植诿芗詈缶o縮成塊，著色由淺變深，隨DNA含量增加而逐漸變?yōu)樯钭仙?。胞漿增多，灰藍(lán)色，可見(jiàn)多數(shù)細(xì)小的嗜天青顆粒ACP染色呈陽(yáng)性反應(yīng)（桔紅色粗大顆粒）提示為T(mén)淋巴細(xì)胞白血病中性粒堿性磷酸酶在堿性條件下將基質(zhì)液中成分水解，產(chǎn)生黑色物質(zhì)核形狀不一，為橢圓形，亦可成折疊或分葉狀特殊物質(zhì)（血紅蛋白、特殊顆粒等）：無(wú)→少→多原始單核細(xì)胞：正常骨髓很少見(jiàn)，有原始細(xì)胞特點(diǎn)某一系或兩系的血細(xì)胞過(guò)度異常增生，原始/幼稚細(xì)胞明顯增多，?30%ANC其他系列細(xì)胞受抑巨幼紅細(xì)胞：胞體及胞核均增大，核染色質(zhì)纖細(xì)、疏松，著色淺淡，胞漿量豐富SAA骨髓象：有核細(xì)胞增生極度減低NSAA骨髓象：有核細(xì)胞增生減低增生活躍1:20（1:16－32）63SAA:骨髓造血島呈空網(wǎng)狀，僅見(jiàn)成纖維細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和大量網(wǎng)狀纖維－－未見(jiàn)造血細(xì)胞NSAA:淋巴細(xì)胞較多，可見(jiàn)中性晚幼粒細(xì)胞、桿狀核和分葉核粒細(xì)胞，晚幼紅細(xì)胞核高度致密，濃縮－－“炭核”樣SAA:骨髓造血島呈空網(wǎng)狀，僅見(jiàn)成纖維細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和大量網(wǎng)64白血病急性白血?。╝cuteleukemia,AL）：病程短，<6個(gè)月－－骨髓和血液中以分化差的原始/幼稚細(xì)胞大量增殖為主慢性白血病(chronicleukemia,CL)：骨髓和血液中以成熟或接近成熟的異常細(xì)胞為主白血病急性白血?。╝cuteleukemia,AL）：病程65急性白血病骨髓象特點(diǎn)增生明顯活躍或極度活躍某一系或兩系的血細(xì)胞過(guò)度異常增生，原始/幼稚細(xì)胞明顯增多，?30%ANC其他系列細(xì)胞受抑細(xì)胞特殊形態(tài)或結(jié)構(gòu)：Auer小體，藍(lán)細(xì)胞ANC：（allnucleatedcell）全部骨髓有核細(xì)胞NEC：非紅系的骨髓有核細(xì)胞急性白血病骨髓象特點(diǎn)增生明顯活躍或極度活躍ANC：（all66急性早幼粒細(xì)胞白血病急性早幼粒細(xì)胞白血病67急性淋巴細(xì)胞白血病急性淋巴細(xì)胞白血病68CML骨髓象特點(diǎn)骨髓增生極度活躍粒系顯著增生，G/E明顯增高，主要為中幼粒，晚幼粒及杵狀核比例顯著增高，原、早幼<10%，嗜堿、嗜酸細(xì)胞比例增高<10%紅系增生受抑巨核細(xì)胞早期增多，晚期減少CML骨髓象特點(diǎn)骨髓增生極度活躍69多發(fā)性骨髓瘤（MM）骨髓增生明顯活躍或增生活躍典型的骨髓瘤細(xì)胞粒系、紅系及巨核系細(xì)胞的