分析報(bào)告格式

1關(guān)于微生物產(chǎn)品可行性分析報(bào)告論文格式：全文字?jǐn)?shù)不少于3500字(此為畢業(yè)論文開題報(bào)告字?jǐn)?shù)要求，故此數(shù)值)，插入頁(yè)碼。全文〔包括參考文獻(xiàn)局部〕字體統(tǒng)一為5號(hào)宋體，但不同標(biāo)題字號(hào)有所不同，具體看下面模板的批注局部。參考文獻(xiàn)須在文中具體引用處標(biāo)示出，引用方法如，[1]。參考文獻(xiàn)局部格式15技術(shù)路線局部最好以簡(jiǎn)潔的框架形式列出，這樣外人一看可以一目了然。關(guān)于報(bào)告局部上交時(shí)間為17周的上課時(shí)間，可交電子稿至本人郵箱，也可打印稿，但也須交電子稿一份。PPT辯論時(shí)間為16周的周一，每組一名代表即可。6.最終感謝黃豐成同學(xué)的建議，使得大家可以拿到統(tǒng)一格式的報(bào)告模板。包括我本人格外感謝有同學(xué)提出這么好的建議，是我考慮不周的失誤，也歡送其他同學(xué)對(duì)微生物學(xué)及試驗(yàn)課方式、方法等提出建議或意見,可以直言，也可以發(fā)郵“mailto:ljzhang96@163“件至本人郵箱:ljzhang96@163(學(xué)校郵箱容量太小，論文和建議都可發(fā)至此郵箱，感謝)。酸性淀粉酶產(chǎn)生菌株的分別、鑒定1,2,3,4(浙江大學(xué)寧波理工學(xué)院，08產(chǎn)品爭(zhēng)論的背景和意義20世紀(jì)60萄糖生產(chǎn)果葡糖漿的大規(guī)模工業(yè)化，淀粉酶的需要量幾乎占了整個(gè)酶制劑總產(chǎn)量的50%以上業(yè)所承受的淀粉酶和糖化酶作用pH值有差異，生產(chǎn)過程中不但增加了生產(chǎn)本錢，而且影響粉酶，簡(jiǎn)化液化、糖化過程，降低淀粉深加工生產(chǎn)本錢具有現(xiàn)實(shí)意義。要特別的淀粉酶種類來滿足生產(chǎn)淀粉酶和糖化酶的最適pH不同，因此在生產(chǎn)工藝的操作中需要進(jìn)展pH調(diào)整。這不但要消耗大量酸、堿，最終還需要對(duì)產(chǎn)品進(jìn)展脫鹽，這些步驟大大提高了我們的生產(chǎn)本錢淀粉酶的作用pH4.0-6.0pH相近，就可以使淀粉液化和糖化在同一條件下進(jìn)展。這樣既避開pH的調(diào)整帶來的麻煩，同時(shí)也削減了大量試劑的消耗，簡(jiǎn)了淀粉的深加工過程。因此開發(fā)型的酸性淀粉酶制劑的工作顯得愈發(fā)迫切。國(guó)內(nèi)外爭(zhēng)論現(xiàn)狀和爭(zhēng)論趨勢(shì)床化學(xué)分析工業(yè)副產(chǎn)品的加工以及工業(yè)生產(chǎn)廢品的利用和處理等領(lǐng)域不同，主要的淀粉酶可以分為四類：α-淀粉酶、β-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和異淀粉酶。α-淀粉酶是以糖原或淀粉為底物，從分子內(nèi)部切開α-1，4-糖苷鍵而使淀粉水解；β-淀粉酶是從底物淀粉的非復(fù)原性末端順次水解每相隔一個(gè)的α-1，4-糖苷鍵而使淀粉水解成麥芽糖；葡萄糖淀粉酶是從底物淀粉的非復(fù)原性末端順次水解α-1，4-糖苷鍵和分枝的α-1，6-糖α-1，6-糖苷鍵，并切下整個(gè)側(cè)枝[1]1915年法國(guó)的Boiden等開頭由枯草桿菌生產(chǎn)細(xì)菌淀粉酶，并在工業(yè)上用于紡織品退漿；1963年日本YasujiMinoda等人[2]覺察黑曲霉可以產(chǎn)酸性α-淀粉酶；此后，美國(guó)、韓國(guó)、中國(guó)以及歐洲國(guó)家的一些爭(zhēng)論者都對(duì)酸性α-淀粉酶進(jìn)展了爭(zhēng)論，如芬蘭的爭(zhēng)論者制備了用于高麥芽糖漿生產(chǎn)的酸性α-其最適pH為5.0；日本的爭(zhēng)論者[3]用白曲霉生產(chǎn)一種酸性α-pH為3.5，適用于清酒制備中淀粉原料的加工；1987年任天明等[4]完成了嗜熱脂肪芽孢桿菌的高α淀粉酶基因在大腸桿菌種的克隆和表達(dá)1990[5從酒曲中分別得到生產(chǎn)高溫α-淀粉酶的菌種；2023年，張強(qiáng)等從西藏溫泉土壤中篩選到一株地衣芽胞桿菌活菌，酶活力到達(dá)7.4U/ml[6]1979282023500。目前國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上兩類常用的是中溫型淀粉酶的和高溫型淀粉酶，它們的最適pH范圍在7左右，在酸性環(huán)境中酶活明顯降低，不能滿足一些酸性環(huán)境淀粉原料的加工，因此酸性淀粉酶的開發(fā)勢(shì)在必行。產(chǎn)品目標(biāo)和爭(zhēng)論內(nèi)容總體爭(zhēng)論目標(biāo)從富含淀粉的土壤中分別篩選得到一株產(chǎn)生酸性淀粉酶的微生物菌株的鑒定，獲得的該微生物菌株可用于酸性淀粉酶的生產(chǎn)。爭(zhēng)論的根本內(nèi)容目的菌株的分別，具體內(nèi)容有：采集土壤樣品，實(shí)行合理的培育方法進(jìn)展培育通過測(cè)量淀粉水解透亮圈比值，對(duì)目的菌株進(jìn)展初步篩選通過淀粉酶活力測(cè)定的方法，對(duì)目的菌株進(jìn)展復(fù)篩目的菌株的鑒定，具體內(nèi)容有：參考《伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)〔第八版》內(nèi)容，對(duì)菌株進(jìn)展生理生化鑒定提取目的菌株的16SrDNA片段，通過進(jìn)展測(cè)序比對(duì)進(jìn)展鑒定爭(zhēng)論的方法與技術(shù)路線爭(zhēng)論方法土樣的采集選擇多個(gè)富含淀粉的土壤樣品地點(diǎn)，比方面粉廠、芋艿地、番薯地等地的土壤，取離地面5-15cm處的土壤，裝袋，并作記錄。增殖〔富集〕培育同種類微生物的生長(zhǎng)生殖對(duì)環(huán)境和養(yǎng)分的要求不同，主要通過調(diào)整培育基的pH值，使目生長(zhǎng)，滿足試驗(yàn)需要。菌株初篩是否有水解透亮圈。同時(shí)測(cè)量菌落的淀粉水解透亮圈直徑(D)和菌落的直徑(d)，通過兩者的比值大小，初步篩出產(chǎn)酶力氣相對(duì)較高〔即D/d值較大〕的菌種進(jìn)展斜面保藏，用于進(jìn)一步的復(fù)篩。復(fù)篩為確定初篩得到菌種的穩(wěn)定性，利用菌株產(chǎn)生的淀粉酶的活力大小對(duì)菌種進(jìn)展進(jìn)一步的篩選。將保藏的菌種培育在液體培育基中，培育一段時(shí)間后，離心取上清液，得到粗酶液，然粉酶的提取及酶活力的測(cè)定：取初步篩選出的菌種，接種到液體培育基中，進(jìn)展發(fā)酵培育。培育到確定時(shí)期后，取發(fā)酵液離心，取上清液〔即粗酶液，參與固體硫酸銨使得溶液飽和度到達(dá)80%，對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)展低溫鹽析，靜置24h后離心溶液，收集蛋白沉淀。然后用適宜1.0%的可溶性淀粉底物溶液10mL放入試管中，在適宜溫度的水浴鍋中預(yù)熱10min1.0mL，混勻，準(zhǔn)確保10min0.5mL反響液，加到盛有10mL0.1mol/LHCl的試管中終止反響。取終止反響后的溶液0.5mL，加到盛有10mL碘液的試管中搖勻。用分光光度計(jì)〔試驗(yàn)前先開啟預(yù)熱30min左右〕在600nm下測(cè)定吸光值，計(jì)算出酶活力。酶活力〔U/mL〕=(D0－D)/D0×100×稀釋倍數(shù)式中DD100為系數(shù)。10min使1%1%所需酶量為一個(gè)酶活力單位U。菌種的鑒定傳統(tǒng)的方法有菌種的生理生化鑒定，現(xiàn)代的方法有16SrDNA序列鑒定等。生理生化鑒定：參考《伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)〔第八版》對(duì)菌種進(jìn)展生理生化鑒定，內(nèi)容包括菌種形態(tài)的觀看，革蘭氏染色、芽孢染色、接觸酶試驗(yàn)等。16SrDNA序列鑒定：16SrDNA是原核生物染色體上編碼核糖體小亞基RNA的基因，在長(zhǎng)期的進(jìn)化過程中分子功能幾乎保持恒定具有保守性，又具有高變性。保守性能反映誕生物物種的親緣關(guān)系, 為系統(tǒng)發(fā)育重建供給線索；高變性則能提示誕生物物種的特征核酸序列，是屬種鑒定的分子根底。把待測(cè)菌種的16SrDNA序列測(cè)定出來，然后與數(shù)據(jù)庫(kù)中的菌種序列進(jìn)展比較即可確定供試菌種的分類地位提取復(fù)篩得到的產(chǎn)淀粉酶菌株的基因組DNA，對(duì)16SrDNA片段進(jìn)展PCR擴(kuò)增PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)電泳檢測(cè)完整后承受瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒割膠回收16SrDNA片段。依據(jù)T-A克隆載體連接試劑盒的說明書，將16SrDNA片段與質(zhì)粒載體連接；連接后轉(zhuǎn)化已制備好的大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，37℃培育箱中過夜培育。挑取能在含有標(biāo)記基因的LB培育基上生長(zhǎng)的單菌落，接種，37℃過夜培育后提取質(zhì)粒，進(jìn)展PCR和酶切檢測(cè)。質(zhì)粒提取操作按質(zhì)粒提取試劑盒的說明書進(jìn)展電泳檢測(cè)完整后送至測(cè)序公司進(jìn)展基因測(cè)序?qū)y(cè)序結(jié)果輸入美國(guó)國(guó)立生物技術(shù)信息中心數(shù)據(jù)〔NationalCenterforBiotechnologyInformation，NCBI〕進(jìn)展BLASTn比對(duì)，依據(jù)目的菌序列與數(shù)據(jù)庫(kù)中的核苷酸序列的相像度來確定分別所得到的菌株的種類。技術(shù)路線整個(gè)試驗(yàn)流程及技術(shù)路線如以以下圖：〔五〕預(yù)期成果〔包括科研報(bào)告、論文、專利、用于實(shí)踐的可能等,著重市場(chǎng)開發(fā)的可能〕通過本工程的爭(zhēng)論方案，預(yù)期可獲得至少1株產(chǎn)酸性淀粉酶菌株，撰寫科研論文一篇。對(duì)該菌株進(jìn)展微生物育種以及菌株發(fā)酵產(chǎn)生酸性淀粉酶的工藝爭(zhēng)論前全世界只有少數(shù)幾家工廠生產(chǎn)而且價(jià)格較高，每公斤50左右，但還是有不少商家購(gòu)置。國(guó)的爭(zhēng)論尚屬國(guó)內(nèi)空白。一旦獲得高產(chǎn)酸性淀粉酶菌株，將有重要應(yīng)用前景。參教文獻(xiàn)梅樂和,岑沛霖.現(xiàn)代酶工程[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2023:200~201.徐穎.高產(chǎn)α-淀粉酶生產(chǎn)均的篩選鑒定及其酶學(xué)性質(zhì)爭(zhēng)論[D].四川:四川大學(xué),2023.[3]張樹政.酶制劑工業(yè)[M].北京:科學(xué)出版社,1984:18~20.YasujiMinoda.Acid-stableα-AmylaseofBlackAspergilliPartⅡ[J].Agr.Biol.chem,1968,32〔1〕:104~109.黃大肪,林敏.農(nóng)業(yè)微生物基因工程[M].北京:科學(xué)出版社,2023.任天明.嗜熱脂肪芽孢桿菌的淀粉酶基因的克隆和表達(dá)[J].生物工程學(xué)報(bào),1987,3:197.金鳳燮,李瑤,張春枝.α-B.sp-JF1的誘變選育[J].大連輕工業(yè)學(xué)院學(xué)報(bào),1997,04.朱何東.高溫α-淀粉酶產(chǎn)生菌的篩選及酶學(xué)性質(zhì)爭(zhēng)論[D].四川:四川大學(xué),2023.張麗蘋,徐巖.酸性α-淀粉酶的爭(zhēng)論與應(yīng)用[J].釀酒科技,2023,29〔3〕:19.[10]谷軍.α-淀粉酶的生產(chǎn)與應(yīng)用[J].生物技術(shù),1994,4〔3〕:1~5.BartholomewNOkolo,LewisIEzeogu,eta1.ProductionofRawStarchDigestingAmylasebyAspergillusnigerGrownofNativeStarchSources[J].Jsci.FoodAgric,1995〔69〕:109.鈴木浴治,小島巖夫.Newα-AmylaseproducedbyBacillus1ieheniformisisacid-tolerantandthermostable-acid-tolerantandthermostableα-amylaseproduction[J].JpnKokaiTokyoJp,10136979,1996〔7〕:32~35.Kamasaka,H.,Sugimoto,K.,Takata,H.,eta1.BacillusstearothermophilusNeopullulanaseSelectiveHydrolysisofAmylosetoMaltoseinthePresenceofAmylopectin[J].Appliedandenvironmentmicrobiology,2023,68〔4〕.Petrova,S.D.Ilieva,S.Z.,Bakalova,N.G.eta1.Productionandcharacterizationofextracellularα-amylasefromthethermophiliefungusThermomyceslanuginosus〔wildandmutantstrains〕[J].BiotechnologyLetter,2023〔22〕:1619~1624.阮森林.酸性α-淀粉酶產(chǎn)生菌的篩選及其酶學(xué)性質(zhì)爭(zhēng)論[D].河南:河南農(nóng)業(yè)大學(xué),2023.[16]李勃.微生物發(fā)酵生產(chǎn)耐酸性α-淀粉酶的爭(zhēng)論[D].陜西:西北大學(xué),2023.[17]謝慧玲,阮森林,劉亮偉.[J].食品工業(yè)科技,2023,29〔10〕:85~87.[18]R.E.布坎南,N.E.吉本斯.伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)〔第八版〕.北京:科學(xué)出版社,1984.[19]黃秀梨,辛明秀.微生物學(xué)試驗(yàn)指導(dǎo)〔2版〕[M].北京:高等教育出版社,202