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文檔簡(jiǎn)介

專題八生物技術(shù)實(shí)踐水、碳源、氮源、無機(jī)鹽

配制培養(yǎng)基→滅菌→接種→培養(yǎng)

尿素

稀釋涂布平板法

纖維素

剛果紅

無氧

30~35℃

讓豆腐長毛霉

加鹵湯裝瓶

細(xì)胞的全能性

脫分化和再分化

pH、溫度、光照

水蒸氣蒸餾法

壓榨法

萃取法

紙層析法

走進(jìn)高考1.PCR

產(chǎn)物中加入二苯胺試劑,加熱變藍(lán)說明有目的DNA產(chǎn)生(2015江蘇,23D)(

)2.用稀釋涂布平板法培養(yǎng)計(jì)數(shù),應(yīng)選擇有30~300菌落數(shù)的平板(2015四川,3D)(

)3.醋酸菌在無氧條件下利用乙醇產(chǎn)生醋酸(2014廣東,4B)(

)4.用紙層析法提取菠菜綠葉中的色素和鑒定胡蘿卜素提取粗品(2014四川,14C)(

)5.先供氧進(jìn)行果醋發(fā)酵,然后隔絕空氣進(jìn)行果酒發(fā)酵(2013江蘇,14B)(

)6.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌(2013江蘇,18A)(

)7.用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)不必知道基因的全部序列(2013江蘇,22B)(

)8.用洋蔥進(jìn)行DNA

粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí),加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨(2013江蘇,4A)(

)9.尿糖試紙含有固定化的葡萄糖酶和過氧化氫酶,可以反復(fù)使用(2012江蘇,17C)(

)10.腐乳制作所需要的適宜溫度最高(2011江蘇,3A)(

)【自我校對(duì)】1.×

變藍(lán)說明有DNA產(chǎn)生,但不能說明一定是目的DNA。2.√3.×

用醋酸菌釀醋時(shí)需要持續(xù)通氣,即利用醋酸菌的有氧呼吸。4.×

紙層析法可用來分離色素,而不能提取色素。5.×

進(jìn)行果酒、果醋發(fā)酵實(shí)驗(yàn),要先進(jìn)行隔絕空氣果酒發(fā)酵,再供氧進(jìn)行果醋發(fā)酵。6.×

在配制培養(yǎng)基的過程中要先滅菌后倒平板。7.√

PCR法擴(kuò)增目的基因只需要知道基因兩端的序列,設(shè)計(jì)合適的引物即可。8.×

加入洗滌劑后研磨動(dòng)作要輕緩、柔和。9.×

尿糖試紙由于使用后不能將反應(yīng)物和酶分開,而不能再次使用。10.×

酵母菌酒精發(fā)酵適宜溫度是18~25

℃,醋酸菌醋酸發(fā)酵的適宜溫度是30~35

℃,腐乳制作中豆腐長出毛霉的適宜溫度是15~18

℃??键c(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四固體

液體

選擇

鑒別

平板劃線法

稀釋涂布平板法

灼燒

干熱

活菌計(jì)數(shù)法

顯微鏡直接計(jì)數(shù)

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四2.選擇培養(yǎng)基的選擇因素(1)培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí),可以分離

微生物,因?yàn)榉枪痰⑸锊荒茉诖伺囵B(yǎng)基上生存。

(2)當(dāng)培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí),也具有分離效果。如石油是

時(shí),可以抑制不能利用石油的微生物的生長,使能夠利用石油的微生物生存,達(dá)到分離能消除石油污染的微生物的目的。

(3)改變微生物的

,也可以達(dá)到分離微生物的目的。如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。

固氮

唯一碳源

培養(yǎng)條件

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四例1:(2014課標(biāo)全國Ⅱ理綜,39)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?;卮鹣铝袉栴}。(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,這樣做的目的是

;然后,將1mL水樣稀釋100倍,在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為

。

(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí),接種環(huán)通過

滅菌,在第二次及以后的劃線時(shí),總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是

。

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四(3)示意圖A和B中,

表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。

(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中

的含量,同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高

的利用率。

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四解析:為了檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌平板是否合格,應(yīng)對(duì)空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間。每升水樣中的活菌數(shù)為(39+38+37)÷3÷0.1×100×1

000=3.8×107(個(gè))。對(duì)接種環(huán)應(yīng)進(jìn)行灼燒滅菌。為了將聚集的菌體逐步稀釋以獲得單個(gè)菌落,在第二次及以后的劃線時(shí),總是從上一次劃線的末端開始劃線。A表示的是平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果,B表示的是用稀釋涂布平板法接種后得到的結(jié)果。答案:(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3)B(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練11.(2015江蘇南京5月調(diào)研)下圖表示培養(yǎng)和純化X細(xì)菌的部分操作步驟,下列敘述正確的是(

)A.步驟①操作時(shí),倒好平板后應(yīng)立即將其倒置,防止水蒸氣落在培養(yǎng)基上造成污染B.步驟②接種環(huán)和試管口應(yīng)先在火焰上灼燒,接種環(huán)冷卻后再放入試管中蘸取菌液C.步驟③沿多個(gè)方向劃線,使接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)后可根據(jù)出現(xiàn)的單個(gè)菌落計(jì)數(shù)D.步驟④是將培養(yǎng)皿放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),一段時(shí)間后所得到的都是X細(xì)菌的菌落考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四解析:步驟①操作時(shí),倒好平板后應(yīng)待其冷卻凝固后,立即將其倒置,防止水蒸氣落在培養(yǎng)基上造成污染,A項(xiàng)錯(cuò)誤;步驟②接種環(huán)和試管口應(yīng)先在火焰上灼燒,接種環(huán)冷卻后再放入試管中蘸取菌液,B項(xiàng)正確;步驟③沿多個(gè)方向劃線,使接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)后可出現(xiàn)單個(gè)菌落,但平板劃線法不能用于計(jì)數(shù),C項(xiàng)錯(cuò)誤;步驟④是將培養(yǎng)皿放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),一段時(shí)間后所得到的不一定都是X細(xì)菌的菌落,D項(xiàng)錯(cuò)誤。答案:B考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四2.(2015北京東城區(qū)期末)下列有關(guān)微生物實(shí)驗(yàn)的敘述,不正確的是(

)A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B.平板劃線法可用于微生物的計(jì)數(shù)C.分離不同的微生物要采用不同的稀釋度D.觀察菌落的特征可以用來進(jìn)行菌種的鑒定解析:微生物培養(yǎng)過程中要進(jìn)行無菌操作,防止外來雜菌的入侵,以獲得純凈的培養(yǎng)物,A項(xiàng)正確;平板劃線法可用于微生物的分離,B項(xiàng)錯(cuò)誤;土壤中各類微生物的種群數(shù)量是不同的,稀釋的目的是使每個(gè)微生物個(gè)體充分分離,以便在平板培養(yǎng)時(shí)能得到由單個(gè)微生物個(gè)體生長而來的菌落,因此分離不同的微生物要采用不同的稀釋度,C項(xiàng)正確;每一種微生物在一定條件下形成固定的菌落特征,因此觀察菌落的特征可以用來進(jìn)行菌種的鑒定,D項(xiàng)正確。答案:B考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四2C2H5OH+2CO2CH3COOH+H2O小分子肽+氨甘油+脂肪酸

2C3H6O3玫瑰紅色

基酸

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四無氧

有氧

有氧

30~35

常溫

果酒

果醋

加鹽

加鹵湯

發(fā)酵

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四例2:(2015山西四校聯(lián)考)近年來,紀(jì)錄片《舌尖上的中國》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮,其中多次講述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。請(qǐng)分析回答下列問題。(1)在果醋制作時(shí),運(yùn)用醋酸菌在供應(yīng)

和糖源充足時(shí),將糖分解成醋酸;在糖源不充足時(shí),也可以利用酒精生成醋酸,請(qǐng)寫出該過程的化學(xué)反應(yīng)式:

。

(2)腐乳制作的流程是:讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時(shí),應(yīng)注意控制

;配制鹵湯時(shí),要使鹵湯中酒的含量控制在

%左右。

(3)制作泡菜的原理是

。蔬菜在腌制過程中,會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽。在

條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生

反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成

色染料。

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四解析:(1)在果醋制作時(shí),運(yùn)用醋酸菌在供應(yīng)氧氣和糖源充足時(shí),將糖分解成醋酸;在糖源不充足時(shí),也可以利用酒精生成醋酸,反應(yīng)式為C2H5OH+O2CH3COOH+H2O。(2)腐乳制作的流程是:讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時(shí),應(yīng)注意控制鹽的用量,配制鹵湯時(shí),要使鹵湯中酒的含量控制在12%左右。(3)制作泡菜的原理是乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖,將葡萄糖分解成乳酸。蔬菜在腌制過程中,會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽。在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。答案:(1)氧氣C2H5OH+O2CH3COOH+H2O(2)鹽的用量12(3)乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖,將葡萄糖分解成乳酸鹽酸酸化重氮化玫瑰紅考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練21.(2015江蘇徐州、連云港、宿遷三市聯(lián)考)下列關(guān)于制作葡萄酒和葡萄醋的敘述,正確的是(

)A.制果酒最快捷的途徑是先制果醋,再制果酒B.榨汁前,先將新鮮葡萄進(jìn)行沖洗后再去枝梗C.無氧條件下,醋酸菌能將酒精直接變?yōu)榇姿酓.整個(gè)制作過程中,應(yīng)杜絕微生物的生長繁殖解析:果醋是在果酒的基礎(chǔ)上接種醋酸桿菌進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生,A項(xiàng)錯(cuò)誤。榨汁前,先將新鮮葡萄進(jìn)行沖洗后再去枝梗,減少雜菌進(jìn)入葡萄果肉內(nèi),B項(xiàng)正確。醋酸菌是需氧菌,應(yīng)在有氧的條件下發(fā)酵,C項(xiàng)錯(cuò)誤。整個(gè)發(fā)酵過程中必須要有酵母菌或者醋酸菌生長繁殖,D項(xiàng)錯(cuò)誤。答案:B考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四2.(2015遼寧大連二模)某校同學(xué)在實(shí)驗(yàn)室開展生物技術(shù)實(shí)踐活動(dòng)。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題。(1)A組同學(xué)制作泡菜。在泡菜腌制的過程中,要注意控制腌制的時(shí)間、

和食鹽的用量;最后要向壇蓋邊沿的水槽中注滿水,這一操作的目的是

(2)B組同學(xué)制作腐乳。在制作腐乳過程中,在腐乳表面往往會(huì)有一層致密的皮,這層皮實(shí)際上是微生物的

,對(duì)人體無害。

(3)C組同學(xué)制作藍(lán)莓果酒與果醋。某同學(xué)對(duì)自己的發(fā)酵裝置定時(shí)通過充氣口充氣,該同學(xué)是在制藍(lán)莓果

。另一位同學(xué)在藍(lán)莓果汁中直接加入某品牌活性酵母,之后先向發(fā)酵罐中通入一段時(shí)間的無菌空氣,通入無菌空氣的目的是

(4)在藍(lán)莓果酒制作過程中,在變酸的酒的表面觀察到的菌膜是由

大量繁殖而形成的,其可在缺少糖源時(shí)將乙醇變?yōu)?/p>

,然后變?yōu)榇姿帷?/p>

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四解析:(1)在泡菜腌制的過程中,要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量等;最后要向壇蓋邊沿的水槽中注滿水,這樣可以保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。(2)在制作腐乳過程中,在腐乳表面往往會(huì)有一層致密的皮,這層皮實(shí)際上是微生物的匍匐菌絲,對(duì)人體是無害的。(3)果酒發(fā)酵時(shí)需要密封條件下,果醋發(fā)酵需要通氣,根據(jù)題意,第一位同學(xué)通過充氣口充氣,該同學(xué)在制作藍(lán)莓果醋;由于酵母菌在有氧條件下進(jìn)行有氧呼吸,可以大量繁殖,因此另一位同學(xué)加入酵母菌后通入無菌空氣的目的是使酵母菌繁殖。(4)變酸的酒的表面與氧氣接觸,醋酸菌能夠大量繁殖,因此觀察到的菌膜是由醋酸菌繁殖形成的;醋酸菌可以在缺少糖源時(shí),將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)橐胰?進(jìn)而氧化為乙酸。答案:(1)溫度保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境(2)匍匐菌絲(3)醋在有氧條件下,使酵母菌迅速繁殖,數(shù)量增加(4)醋酸菌乙醛考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四水蒸氣蒸餾法

NaCl無水Na2SO4壓榨法

壓榨、過濾、靜置

萃取法

溶解在有機(jī)溶劑

萃取、過濾

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四例3:(2015山東濟(jì)寧二模)下面是與植物芳香油的提取相關(guān)的問題,請(qǐng)回答下列問題。(1)玫瑰精油的提取可使用上面左圖所示裝置,這種方法叫

法;蒸餾時(shí)收集的蒸餾液

(填“是”或“不是”)純的玫瑰精油。

(2)橘皮精油的提取原料是橘皮,但橘皮易焦糊,宜采用

法提取橘皮精油。

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四(3)胡蘿卜素是

色的結(jié)晶。從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的是

法,加熱時(shí)應(yīng)該注意控制

,一般情況下,提取胡蘿卜素時(shí),提取效率與原料顆粒的含水量成

比。

(4)將提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析進(jìn)行鑒定,上面右圖為鑒定結(jié)果示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答。A、B、C、D四點(diǎn)中,屬于標(biāo)準(zhǔn)樣品的樣點(diǎn)是

。

解析:(1)從圖中裝置可以看出,玫瑰精油的提取方法為蒸餾法;蒸餾后得到的蒸餾液不是純的玫瑰精油,而是油水混合物。(2)橘皮易發(fā)生焦糊,因此應(yīng)該采用壓榨法提取橘皮精油。(3)胡蘿卜素是橙黃色的結(jié)晶;從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是萃取法;由于高溫時(shí)胡蘿卜素會(huì)分解,因此加熱時(shí)注意控制好溫度和時(shí)間;提取胡蘿卜素時(shí),原料中的含水量會(huì)影響提取效率,因此提取效率與含水量成反比。(4)分析題圖可知,兩側(cè)的為標(biāo)準(zhǔn)樣品,即A、D點(diǎn)。答案:(1)蒸餾不是(2)壓榨(3)橙黃萃取溫度和時(shí)間反(4)A、D考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練31.下列與芳香油提取相關(guān)的敘述,錯(cuò)誤的是(

)A.玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取,原因是玫瑰精油易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定B.當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時(shí),影響精油提取量的主要因素有蒸餾時(shí)間和溫度C.如果蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻,則精油提取量會(huì)下降D.從薄荷葉中提取薄荷油時(shí)不能采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法解析:玫瑰精油屬于芳香類化合物,具有芳香類化合物的通性,即易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定等性質(zhì),A項(xiàng)正確;蒸餾時(shí)間和溫度可影響精油提取量,B項(xiàng)正確;蒸餾時(shí)玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來,如果不進(jìn)行冷卻,部分精油會(huì)隨水蒸氣蒸發(fā)而流失,C項(xiàng)正確。薄荷油與玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)相似,同樣可以采用水蒸氣蒸餾法提取,D項(xiàng)錯(cuò)誤。答案:D考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四2.許多植物含有天然香料,如薄荷葉中含有薄荷油。現(xiàn)用薄荷葉提取薄荷油?;卮鹣铝袉栴}。(1)薄荷油是揮發(fā)性物質(zhì),提取薄荷油時(shí)應(yīng)選用

(填“鮮”或“干”)薄荷葉作原料,其原因是

(2)用萃取法提取薄荷油時(shí),采用的溶劑是

,原理是

。

(3)用水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時(shí),在油水混合物中加入NaCl的作用是

,常用于分離油層和水層的器皿是

,分離出的油層中加入無水Na2SO4的作用是

,除去固體Na2SO4的常用方法是

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