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文檔簡介

專題八生物技術(shù)實(shí)踐水、碳源、氮源、無機(jī)鹽

配制培養(yǎng)基→滅菌→接種→培養(yǎng)

尿素

稀釋涂布平板法

纖維素

剛果紅

無氧

30~35℃

讓豆腐長毛霉

加鹵湯裝瓶

細(xì)胞的全能性

脫分化和再分化

pH、溫度、光照

水蒸氣蒸餾法

壓榨法

萃取法

紙層析法

走進(jìn)高考1.PCR

產(chǎn)物中加入二苯胺試劑,加熱變藍(lán)說明有目的DNA產(chǎn)生(2015江蘇,23D)(

)2.用稀釋涂布平板法培養(yǎng)計(jì)數(shù),應(yīng)選擇有30~300菌落數(shù)的平板(2015四川,3D)(

)3.醋酸菌在無氧條件下利用乙醇產(chǎn)生醋酸(2014廣東,4B)(

)4.用紙層析法提取菠菜綠葉中的色素和鑒定胡蘿卜素提取粗品(2014四川,14C)(

)5.先供氧進(jìn)行果醋發(fā)酵,然后隔絕空氣進(jìn)行果酒發(fā)酵(2013江蘇,14B)(

)6.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌(2013江蘇,18A)(

)7.用PCR方法擴(kuò)增目的基因時不必知道基因的全部序列(2013江蘇,22B)(

)8.用洋蔥進(jìn)行DNA

粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)時,加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨(2013江蘇,4A)(

)9.尿糖試紙含有固定化的葡萄糖酶和過氧化氫酶,可以反復(fù)使用(2012江蘇,17C)(

)10.腐乳制作所需要的適宜溫度最高(2011江蘇,3A)(

)【自我校對】1.×

變藍(lán)說明有DNA產(chǎn)生,但不能說明一定是目的DNA。2.√3.×

用醋酸菌釀醋時需要持續(xù)通氣,即利用醋酸菌的有氧呼吸。4.×

紙層析法可用來分離色素,而不能提取色素。5.×

進(jìn)行果酒、果醋發(fā)酵實(shí)驗(yàn),要先進(jìn)行隔絕空氣果酒發(fā)酵,再供氧進(jìn)行果醋發(fā)酵。6.×

在配制培養(yǎng)基的過程中要先滅菌后倒平板。7.√

PCR法擴(kuò)增目的基因只需要知道基因兩端的序列,設(shè)計(jì)合適的引物即可。8.×

加入洗滌劑后研磨動作要輕緩、柔和。9.×

尿糖試紙由于使用后不能將反應(yīng)物和酶分開,而不能再次使用。10.×

酵母菌酒精發(fā)酵適宜溫度是18~25

℃,醋酸菌醋酸發(fā)酵的適宜溫度是30~35

℃,腐乳制作中豆腐長出毛霉的適宜溫度是15~18

℃。考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四固體

液體

選擇

鑒別

平板劃線法

稀釋涂布平板法

灼燒

干熱

活菌計(jì)數(shù)法

顯微鏡直接計(jì)數(shù)

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四2.選擇培養(yǎng)基的選擇因素(1)培養(yǎng)基中缺乏氮源時,可以分離

微生物,因?yàn)榉枪痰⑸锊荒茉诖伺囵B(yǎng)基上生存。

(2)當(dāng)培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時,也具有分離效果。如石油是

時,可以抑制不能利用石油的微生物的生長,使能夠利用石油的微生物生存,達(dá)到分離能消除石油污染的微生物的目的。

(3)改變微生物的

,也可以達(dá)到分離微生物的目的。如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。

固氮

唯一碳源

培養(yǎng)條件

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四例1:(2014課標(biāo)全國Ⅱ理綜,39)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?;卮鹣铝袉栴}。(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是

;然后,將1mL水樣稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為

(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時,接種環(huán)通過

滅菌,在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四(3)示意圖A和B中,

表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。

(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中

的含量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高

的利用率。

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四解析:為了檢測培養(yǎng)基滅菌平板是否合格,應(yīng)對空白平板先行培養(yǎng)一段時間。每升水樣中的活菌數(shù)為(39+38+37)÷3÷0.1×100×1

000=3.8×107(個)。對接種環(huán)應(yīng)進(jìn)行灼燒滅菌。為了將聚集的菌體逐步稀釋以獲得單個菌落,在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線。A表示的是平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果,B表示的是用稀釋涂布平板法接種后得到的結(jié)果。答案:(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)B(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四對點(diǎn)訓(xùn)練11.(2015江蘇南京5月調(diào)研)下圖表示培養(yǎng)和純化X細(xì)菌的部分操作步驟,下列敘述正確的是(

)A.步驟①操作時,倒好平板后應(yīng)立即將其倒置,防止水蒸氣落在培養(yǎng)基上造成污染B.步驟②接種環(huán)和試管口應(yīng)先在火焰上灼燒,接種環(huán)冷卻后再放入試管中蘸取菌液C.步驟③沿多個方向劃線,使接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)后可根據(jù)出現(xiàn)的單個菌落計(jì)數(shù)D.步驟④是將培養(yǎng)皿放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),一段時間后所得到的都是X細(xì)菌的菌落考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四解析:步驟①操作時,倒好平板后應(yīng)待其冷卻凝固后,立即將其倒置,防止水蒸氣落在培養(yǎng)基上造成污染,A項(xiàng)錯誤;步驟②接種環(huán)和試管口應(yīng)先在火焰上灼燒,接種環(huán)冷卻后再放入試管中蘸取菌液,B項(xiàng)正確;步驟③沿多個方向劃線,使接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)后可出現(xiàn)單個菌落,但平板劃線法不能用于計(jì)數(shù),C項(xiàng)錯誤;步驟④是將培養(yǎng)皿放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),一段時間后所得到的不一定都是X細(xì)菌的菌落,D項(xiàng)錯誤。答案:B考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四2.(2015北京東城區(qū)期末)下列有關(guān)微生物實(shí)驗(yàn)的敘述,不正確的是(

)A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B.平板劃線法可用于微生物的計(jì)數(shù)C.分離不同的微生物要采用不同的稀釋度D.觀察菌落的特征可以用來進(jìn)行菌種的鑒定解析:微生物培養(yǎng)過程中要進(jìn)行無菌操作,防止外來雜菌的入侵,以獲得純凈的培養(yǎng)物,A項(xiàng)正確;平板劃線法可用于微生物的分離,B項(xiàng)錯誤;土壤中各類微生物的種群數(shù)量是不同的,稀釋的目的是使每個微生物個體充分分離,以便在平板培養(yǎng)時能得到由單個微生物個體生長而來的菌落,因此分離不同的微生物要采用不同的稀釋度,C項(xiàng)正確;每一種微生物在一定條件下形成固定的菌落特征,因此觀察菌落的特征可以用來進(jìn)行菌種的鑒定,D項(xiàng)正確。答案:B考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四2C2H5OH+2CO2CH3COOH+H2O小分子肽+氨甘油+脂肪酸

2C3H6O3玫瑰紅色

基酸

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四無氧

有氧

有氧

30~35

常溫

果酒

果醋

加鹽

加鹵湯

發(fā)酵

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四例2:(2015山西四校聯(lián)考)近年來,紀(jì)錄片《舌尖上的中國》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮,其中多次講述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。請分析回答下列問題。(1)在果醋制作時,運(yùn)用醋酸菌在供應(yīng)

和糖源充足時,將糖分解成醋酸;在糖源不充足時,也可以利用酒精生成醋酸,請寫出該過程的化學(xué)反應(yīng)式:

(2)腐乳制作的流程是:讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時,應(yīng)注意控制

;配制鹵湯時,要使鹵湯中酒的含量控制在

%左右。

(3)制作泡菜的原理是

。蔬菜在腌制過程中,會產(chǎn)生亞硝酸鹽。在

條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生

反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成

色染料。

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四解析:(1)在果醋制作時,運(yùn)用醋酸菌在供應(yīng)氧氣和糖源充足時,將糖分解成醋酸;在糖源不充足時,也可以利用酒精生成醋酸,反應(yīng)式為C2H5OH+O2CH3COOH+H2O。(2)腐乳制作的流程是:讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時,應(yīng)注意控制鹽的用量,配制鹵湯時,要使鹵湯中酒的含量控制在12%左右。(3)制作泡菜的原理是乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖,將葡萄糖分解成乳酸。蔬菜在腌制過程中,會產(chǎn)生亞硝酸鹽。在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。答案:(1)氧氣C2H5OH+O2CH3COOH+H2O(2)鹽的用量12(3)乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖,將葡萄糖分解成乳酸鹽酸酸化重氮化玫瑰紅考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四對點(diǎn)訓(xùn)練21.(2015江蘇徐州、連云港、宿遷三市聯(lián)考)下列關(guān)于制作葡萄酒和葡萄醋的敘述,正確的是(

)A.制果酒最快捷的途徑是先制果醋,再制果酒B.榨汁前,先將新鮮葡萄進(jìn)行沖洗后再去枝梗C.無氧條件下,醋酸菌能將酒精直接變?yōu)榇姿酓.整個制作過程中,應(yīng)杜絕微生物的生長繁殖解析:果醋是在果酒的基礎(chǔ)上接種醋酸桿菌進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生,A項(xiàng)錯誤。榨汁前,先將新鮮葡萄進(jìn)行沖洗后再去枝梗,減少雜菌進(jìn)入葡萄果肉內(nèi),B項(xiàng)正確。醋酸菌是需氧菌,應(yīng)在有氧的條件下發(fā)酵,C項(xiàng)錯誤。整個發(fā)酵過程中必須要有酵母菌或者醋酸菌生長繁殖,D項(xiàng)錯誤。答案:B考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四2.(2015遼寧大連二模)某校同學(xué)在實(shí)驗(yàn)室開展生物技術(shù)實(shí)踐活動。請回答下列有關(guān)問題。(1)A組同學(xué)制作泡菜。在泡菜腌制的過程中,要注意控制腌制的時間、

和食鹽的用量;最后要向壇蓋邊沿的水槽中注滿水,這一操作的目的是

。

(2)B組同學(xué)制作腐乳。在制作腐乳過程中,在腐乳表面往往會有一層致密的皮,這層皮實(shí)際上是微生物的

,對人體無害。

(3)C組同學(xué)制作藍(lán)莓果酒與果醋。某同學(xué)對自己的發(fā)酵裝置定時通過充氣口充氣,該同學(xué)是在制藍(lán)莓果

。另一位同學(xué)在藍(lán)莓果汁中直接加入某品牌活性酵母,之后先向發(fā)酵罐中通入一段時間的無菌空氣,通入無菌空氣的目的是

。

(4)在藍(lán)莓果酒制作過程中,在變酸的酒的表面觀察到的菌膜是由

大量繁殖而形成的,其可在缺少糖源時將乙醇變?yōu)?/p>

,然后變?yōu)榇姿帷?/p>

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四解析:(1)在泡菜腌制的過程中,要注意控制腌制的時間、溫度和食鹽的用量等;最后要向壇蓋邊沿的水槽中注滿水,這樣可以保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。(2)在制作腐乳過程中,在腐乳表面往往會有一層致密的皮,這層皮實(shí)際上是微生物的匍匐菌絲,對人體是無害的。(3)果酒發(fā)酵時需要密封條件下,果醋發(fā)酵需要通氣,根據(jù)題意,第一位同學(xué)通過充氣口充氣,該同學(xué)在制作藍(lán)莓果醋;由于酵母菌在有氧條件下進(jìn)行有氧呼吸,可以大量繁殖,因此另一位同學(xué)加入酵母菌后通入無菌空氣的目的是使酵母菌繁殖。(4)變酸的酒的表面與氧氣接觸,醋酸菌能夠大量繁殖,因此觀察到的菌膜是由醋酸菌繁殖形成的;醋酸菌可以在缺少糖源時,將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)橐胰?進(jìn)而氧化為乙酸。答案:(1)溫度保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境(2)匍匐菌絲(3)醋在有氧條件下,使酵母菌迅速繁殖,數(shù)量增加(4)醋酸菌乙醛考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四水蒸氣蒸餾法

NaCl無水Na2SO4壓榨法

壓榨、過濾、靜置

萃取法

溶解在有機(jī)溶劑

萃取、過濾

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四例3:(2015山東濟(jì)寧二模)下面是與植物芳香油的提取相關(guān)的問題,請回答下列問題。(1)玫瑰精油的提取可使用上面左圖所示裝置,這種方法叫

法;蒸餾時收集的蒸餾液

(填“是”或“不是”)純的玫瑰精油。

(2)橘皮精油的提取原料是橘皮,但橘皮易焦糊,宜采用

法提取橘皮精油。

考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四(3)胡蘿卜素是

色的結(jié)晶。從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的是

法,加熱時應(yīng)該注意控制

,一般情況下,提取胡蘿卜素時,提取效率與原料顆粒的含水量成

比。

(4)將提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析進(jìn)行鑒定,上面右圖為鑒定結(jié)果示意圖,請據(jù)圖回答。A、B、C、D四點(diǎn)中,屬于標(biāo)準(zhǔn)樣品的樣點(diǎn)是

。

解析:(1)從圖中裝置可以看出,玫瑰精油的提取方法為蒸餾法;蒸餾后得到的蒸餾液不是純的玫瑰精油,而是油水混合物。(2)橘皮易發(fā)生焦糊,因此應(yīng)該采用壓榨法提取橘皮精油。(3)胡蘿卜素是橙黃色的結(jié)晶;從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是萃取法;由于高溫時胡蘿卜素會分解,因此加熱時注意控制好溫度和時間;提取胡蘿卜素時,原料中的含水量會影響提取效率,因此提取效率與含水量成反比。(4)分析題圖可知,兩側(cè)的為標(biāo)準(zhǔn)樣品,即A、D點(diǎn)。答案:(1)蒸餾不是(2)壓榨(3)橙黃萃取溫度和時間反(4)A、D考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四對點(diǎn)訓(xùn)練31.下列與芳香油提取相關(guān)的敘述,錯誤的是(

)A.玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取,原因是玫瑰精油易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定B.當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時,影響精油提取量的主要因素有蒸餾時間和溫度C.如果蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻,則精油提取量會下降D.從薄荷葉中提取薄荷油時不能采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法解析:玫瑰精油屬于芳香類化合物,具有芳香類化合物的通性,即易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定等性質(zhì),A項(xiàng)正確;蒸餾時間和溫度可影響精油提取量,B項(xiàng)正確;蒸餾時玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來,如果不進(jìn)行冷卻,部分精油會隨水蒸氣蒸發(fā)而流失,C項(xiàng)正確。薄荷油與玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)相似,同樣可以采用水蒸氣蒸餾法提取,D項(xiàng)錯誤。答案:D考點(diǎn)一考點(diǎn)二考點(diǎn)三考點(diǎn)四2.許多植物含有天然香料,如薄荷葉中含有薄荷油?,F(xiàn)用薄荷葉提取薄荷油?;卮鹣铝袉栴}。(1)薄荷油是揮發(fā)性物質(zhì),提取薄荷油時應(yīng)選用

(填“鮮”或“干”)薄荷葉作原料,其原因是

。

(2)用萃取法提取薄荷油時,采用的溶劑是

,原理是

(3)用水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時,在油水混合物中加入NaCl的作用是

,常用于分離油層和水層的器皿是

,分離出的油層中加入無水Na2SO4的作用是

,除去固體Na2SO4的常用方法是

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