醫(yī)學基礎(chǔ)知識

基礎(chǔ)知識培訓醫(yī)院檢驗科組織結(jié)構(gòu)院長辦公室檢驗科（主任）藥劑科（主任）器材處（處長）生化組免疫組臨檢組微生物組血庫標本采集分類送檢標本處理（離心、分離等）標本測定報告結(jié)果臨床檢驗的一般程序檢驗科臨床科室采集：靜脈－－常規(guī)生化 動脈－－血氣分析 末梢－－細胞分析血樣：全血WHOLEBLOOD－抗凝 血漿PLASMA－抗凝 血清SERUM－非抗凝腦脊液CSF尿樣URINE試管：含抗凝劑無抗凝劑血清：無纖維蛋白原血漿：含纖維蛋白原紅細胞、白細胞纖維蛋白、固型物抗凝劑：肝素、EDTA、草酸鹽、檸檬酸鹽有關(guān)標本臨檢內(nèi)容：三大常規(guī)（血、尿、便）方法及所用分析設(shè)備：血常規(guī)——鏡檢、全自動血液分析儀（二分類、三分類、五分類）尿常規(guī)——鏡檢、尿干化學分析儀、尿沉渣分析儀便常規(guī)——鏡檢尿常規(guī)尿液生成

尿是腎臟內(nèi)形成的。當體內(nèi)血液經(jīng)腎小球毛細血管時，其中的細胞、大分子蛋白質(zhì)和脂類等膠體被截留，其余成分則經(jīng)半透膜濾過，進入腎小球囊，此稱為原尿。原尿通過腎小管時，絕大部分水分、電解質(zhì)和葡萄糖等物質(zhì)又重新被吸收回血；同時，腎小管也分泌一些物質(zhì)加入尿中；最后生成終尿，經(jīng)由輸尿管、膀胱和尿道排出體外。尿的主要成分

含水分約96-98%，固體物3-4%，正常人每天由尿中排出總固體約60g，其中無機鹽約25g，有機物約35g。無機鹽中約一半是鈉和氯離子；有機物中主要是尿素（每天可排出約30g），其次是少量糖類、蛋白質(zhì)（包括酶、蛋白質(zhì)性激素和抗體）以及種類繁多的代謝物。尿干化學檢測項目尿PH尿比重(SG)尿蛋白（PRO）尿糖（GLU）尿酮體（KET）尿膽紅素（BIL）尿膽原（UBG）尿亞硝酸鹽（NIT）尿液白細胞（LEU）尿液紅細胞（ERY）血常規(guī)血液的成分血細胞（有形成分）和液體（血漿）有形成分：紅細胞、血小板、白細胞血漿：水分、無機鹽、蛋白質(zhì)及其代謝產(chǎn)物、葡萄糖類及分解物、維生素、脂肪類物質(zhì)、氣體和微量元素血細胞占血液的40--50%白細胞和血小板占血液的1%顏色由RBC中的紅色的血紅蛋白HGB產(chǎn)生HGB具有攜氧功能功能,含氧多則鮮紅色血液的成分血液的白細胞成分有顆粒白細胞無顆粒白細胞嗜中性白細胞嗜酸性白細胞嗜堿性白細胞淋巴細胞單核細胞血細胞的起源生成血細胞的生成經(jīng)歷較長的增殖、分化、成熟、釋放的過程骨髓中的細胞生成在增殖池，成熟后在貯存池，感染、疾病或應激狀況下加速或提前釋放進入血液正常成人每天1011紅細胞衰老死亡正常成人每天大約1011粒細胞衰老死亡血細胞的分化過程全能性干細胞骨髓類干細胞紅細胞類干細胞顆粒細胞、單核細胞、巨噬細胞類干細胞淋巴細胞類干細胞原始巨核細胞類干細胞肥大細胞干細胞嗜酸性粒細胞類干細胞嗜堿性粒細胞類干細胞早幼紅細胞原始肥大細胞原始單核細胞原始單核細胞原始單核細胞原始紅細胞原始巨核細胞原始單核細胞幼稚巨核細胞幼稚單核細胞中性早幼粒細胞嗜酸性早幼粒細胞嗜堿性早幼粒細胞中幼紅細胞晚幼紅細胞有核紅細胞紅細胞單核細胞巨噬細胞中性中幼粒細胞中性中晚粒細胞嗜酸性中幼粒細胞嗜堿性中幼粒細胞嗜酸性中晚粒細胞嗜堿性中晚粒細胞肥大細胞肥大細胞巨核細胞血小板中性桿狀核粒細胞嗜酸性桿狀核粒細胞嗜堿性桿狀核粒細胞中性分葉核粒細胞嗜堿性分葉核粒細胞嗜酸性分葉核粒細胞中性分葉核粒細胞嗜酸性分葉核粒細胞嗜堿性分葉核粒細胞T-淋巴細胞類干細胞B-淋巴細胞類干細胞原始T-淋巴細胞原始B-淋巴細胞T-淋巴細胞原始T-淋巴細胞B-淋巴細胞血液的功能搬運氧氣至全身（RBC）進行人體免疫功能（WBC）阻止血液外流（PLT）調(diào)節(jié)溫度、PH值紅細胞扁平狀，中央凹陷內(nèi)含血紅蛋白（HGB），富含鐵，易氧化正常值為350-550萬/ul

網(wǎng)織紅細胞：成人：0.5-1.5％白細胞淋巴細胞單核細胞嗜中性粒細胞嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞白細胞

白細胞

WBC4.0-10.0X10^9/L淋巴細胞LYMPH20-40％中性粒細胞NEUT50-70％單核細胞MONO3.0-8.0％堿性粒細胞BASO0.0-1.0％酸性粒細胞EO0.5-5.0％白細胞分類二分類淋巴細胞其他白細胞三分類淋巴細胞嗜中性粒細胞其他白細胞五分類淋巴細胞單核細胞嗜中性粒細胞嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞白細胞功能白細胞功能：產(chǎn)生人體免疫功能，直接攻擊外來細 菌或產(chǎn)生抗原抗體反應。單核細胞細菌T型淋巴細胞B型淋巴細胞抗體偵察情報通信直接攻擊產(chǎn)生包圍異常舉例正常情況下，外周血中幼稚細胞量極少或幾乎難以見到；艾滋?。夯颊唧w內(nèi)淋巴細胞極度減少；血液病：如患者體內(nèi)的紅細胞出現(xiàn)大小不等，中心蒼白區(qū)擴大和或靶形紅細胞，此類形態(tài)的變化可考慮缺鐵性貧血或地中海貧血；如患者體內(nèi)出現(xiàn)多量異形淋巴細胞，又伴有發(fā)熱，可考慮傳單或甲肝；全血細胞的減少，可考慮再障、急單或巨幼貧；幼稚細胞的出現(xiàn)，可考慮白血病的可能；全血測量

CBC（completebloodcount）WBC白細胞RBC紅細胞HCT紅細胞壓積HGB紅蛋白MCV平均紅細胞體積MCH平均紅細胞血紅蛋白含量MCHC平均紅細胞血紅蛋白濃度PLT血小板計算參數(shù)MCV(fl)

＝HCT(%)

/RBC(X10^6/ul)X10MCH(pg)

＝HGB(g/dl)

/RBC(X10^6/ul)X10MCHC(g/dl)

＝HGB(g/dl)

/HCT(%)X1000測試原理40年代后期,庫爾特發(fā)明并申請了粒子計數(shù)技術(shù)的設(shè)計專利，50年代初應用于血細胞計數(shù)，其原理是：細胞通過小孔時，會產(chǎn)生脈沖，脈沖的個數(shù)就是細胞的個數(shù)，脈沖的高度就是細胞的體積，并以此對WBC進行兩分類和三分類。測試原理電壓時間脈沖的個數(shù)表示被測顆粒的個數(shù)，脈沖的高度表示顆粒的體積。測試原理應用電阻抗法，根據(jù)白細胞通過檢測孔產(chǎn)生脈沖信號的大小，借助界標技術(shù)將白細胞分為“二分類”、“三分類”。但由于細胞體積間有交叉，所以此種分類只是參考和初篩。其結(jié)果不能取代鏡檢?。CT的測定原理手工方法：毛細管法內(nèi)徑：1mm長度：10cm離心計算板100%60%HCT的測定原理用血球計數(shù)儀方法：HCT=（紅細胞總體積/血液總體積）x100%=Ax∑hKh1h2h3標本經(jīng)過5萬倍稀釋后，通過檢測孔時，產(chǎn)生信號波，將信號波的大小累加，乘以一常數(shù)，即得HCT的值。HGB（血紅蛋白）的測量燈泡聚光鏡濾光片標本光電轉(zhuǎn)換器HGB（血紅蛋白）的測量血液經(jīng)稀釋并加入溶血素后，RBC被破壞，HGB釋放出來與月桂酰鈉結(jié)合，形成血紅蛋白衍生物，通過比色原理，對其吸光度進行檢測并換算得到HGB濃度。實際結(jié)果＝標本結(jié)果－空白結(jié)果直方圖生成根據(jù)細胞通過小孔產(chǎn)生的脈沖高度，加界標后形成白細胞三分類直方圖。浮動界標白細胞紅細胞和血小板紅細胞分布寬度取X軸60.65%可信區(qū)域紅細胞分布寬度取20%的區(qū)域P-LCR體積大于12fl的血小板與血小板總數(shù)的比值儀器取代不了鏡檢生化臨床生物化學的領(lǐng)域和性質(zhì)

臨床生物化學是化學、生物化學與臨床醫(yī)學的結(jié)合，目前已經(jīng)發(fā)展成為一門成熟的獨立學科。臨床生物化學有其獨特的研究領(lǐng)域、性質(zhì)和作用，是一門理論和實踐性較強的、邊緣性的應用學科，以化學和醫(yī)學知識為主要基礎(chǔ)。廣義上講，臨床生物化學是研究器官、組織人體體液的化學組成和進行著的生物化學過程，以及疾病、藥物對這些過程的影響，為疾病診斷、病情監(jiān)測、藥物療效、預后判斷和疾病預防等各個方面提供信息和理論依據(jù)。臨床生物化學除了要求應用化學與醫(yī)學方面的理論知識和技術(shù)外，還應與生物學、物理學、教學、電子學等各方面的知識密切聯(lián)系，廣泛地應用這些學科領(lǐng)域的新成就。

臨床生物化學的主要作用

第一，闡述有關(guān)疾病的生物化學基礎(chǔ)和疾病發(fā)生發(fā)展過程中的生物化學變化。這些生物化學改變可以是原發(fā)性的，也可能是某種原因引起器官病損或并發(fā)癥導致體液生化組成發(fā)生的一系列繼發(fā)性的改變。這部分內(nèi)容又稱之為化學病理學(chemicalpathology)。第二，開發(fā)應用臨床生物化學檢驗方法和技術(shù)，對檢驗結(jié)果的數(shù)據(jù)及其臨床意義作出評價，用以幫助臨床診斷以及采取適宜的治療。這部分內(nèi)容有兩方面的側(cè)重點：在闡明疾病生化診斷的原理方面，側(cè)重于論述疾病的生化機制，比較接近化學病理學的范疇；而在技術(shù)方法的開發(fā)應用方面，偏重于臨床生物化學實驗室的應用，有人稱之為臨床化學(clinicalchemistry)，其中一部分內(nèi)容又稱之為診斷生物化學(diagnosticclinicalchemistry)。●肝功能 ●代謝功能 ●貧血●腎功能 ●血脂分析 ●藥物監(jiān)測●心功能 ●電解質(zhì)平衡 ●毒物分析●胰腺功能 ●血氣分析常規(guī)生化檢測項目肝功能●TP-總蛋白 ●ALB-白蛋白●GLOB-球蛋白●A/G-白球比●AMON-血氨●TBIL-總膽紅素 ●Bu-非結(jié)合膽紅素 ●Bc-結(jié)合膽紅素 ●DELB-Delta膽紅素●DBIL-直接膽紅素●NBIL-新生兒膽紅素●ALT-谷丙轉(zhuǎn)氨酶●AST-谷草轉(zhuǎn)氨酶●LDH-乳酸脫氫酶●ALP-堿性磷酸酶●GGT-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶●CHE-膽堿酯酶腎功能●BUN－尿素氮●CREA－肌酐●BUN/CREA－尿素氮肌酐比值●URIC－尿酸電解質(zhì)●K－鉀 ●NA－鈉 ●CL－氯 ●CA－鈣 ●ECO2－二氧化碳血脂●CHOL－膽固醇 ●TRIG－甘油三酯 ●HDLC－高密度酯蛋白膽固醇●LDL－低密度脂蛋白●C/H－膽固醇高密度比心肌酶譜●AST－谷氨酸轉(zhuǎn)移酶●LDH－乳酸脫氫酶●CK－肌酸激酶●CKMB－肌酸激酶同工酶●CKMB％－CKMB/CK胰腺、前列腺疾病胰腺：●AMYL－淀粉酶●LIPA－脂肪酶前列腺：●ACP－酸性磷酸酶代謝●GLU－葡萄糖●LAC－乳酸●CA－鈣●P－磷●URIC－尿酸藥物濃度監(jiān)測、毒物分析●DGXN－地高辛 ●SALI－水楊酸●CRBM－卡馬西平 ●THEO－茶堿●PHBR－苯巴比妥 ●Li－鋰●PHYT－苯妥因 ●ALC－乙醇●ACET－醋氨酚其他●FE－鐵●TIBC－總鐵結(jié)合力●CRP－C反應蛋白●Mg－鎂●UPRO－尿蛋白●PROT－腦脊液蛋白臨床生物化學分析儀

臨床生化自動分析儀，就是把生化分析中的取樣、加試劑、去干擾、混合、保溫反應、檢測、結(jié)果計算、顯示和打印，以及清洗等步驟自動化的儀器。它完全模仿并代替了手工操作。不僅提高了工作效率，而且減少了主觀誤差，穩(wěn)定了檢驗質(zhì)量。由于這類儀器一般都具有靈敏、準確、快速、節(jié)省和標準化等優(yōu)點，使得生化自動分析儀在臨床生化分析中得到了廣泛應用。

比色計、半自動、全自動單通道、多通道、分立式、離心式濕化學類、干化學類生化儀器的分類終點分析法：一點終點法、兩點終點法

連續(xù)檢測法：兩點速率法、多點速率法電極法：直接電極法、間接電極法免疫法、電泳法、比濁法等主要的檢測方法試劑劑型

單試劑：操作簡便適用于各類生化分析儀，配方復雜（穩(wěn)定劑、掩蔽劑），穩(wěn)定性差，不能完全避免內(nèi)外源物質(zhì)干擾。雙試劑：可較徹底排除樣品空白和內(nèi)外源干擾物，更加符合酶偶聯(lián)反應的特性和過程，試劑配方簡單，試劑穩(wěn)定，便于儲存，運輸和使用，可用抑制法直接測定某些同工酶。液體試劑：不需手工調(diào)制，省工省時，試劑批間差小，重復性好，杜絕干粉試劑重溶時因水質(zhì)差引起試劑變質(zhì)，有利于急診標本，按需取量，避免浪費檢測原理比色分析：比色分析理論――Beer-Lambert定律

A=lg（I0/I）＝KCL或I＝I0×10-KCL

I0：入射光強度

I：透過光強度

K：常數(shù)

C：溶液濃度

L：溶液的厚度影響因素1、化學因素的影響：溶液中溶質(zhì)可因濃度的改變而發(fā)生離解、締合，與溶劑間的作用等原因而出現(xiàn)偏離比爾定律的現(xiàn)象。由化學因素引起的偏離，有時可控制溶液條件設(shè)法減免。此外，能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)也可導致偏離比爾定律。2、非單色光的影響：比爾定律的一個重要條件是單色光，但在比色分析中常有不同波長的光同時存在。這就使吸光度發(fā)生改變，從而偏離比爾定律。3、光學因素的影響：散射是向空間各個方向，而使透射光減弱。反射可使光能損失，當光線通過兩種不同介質(zhì)時，則發(fā)生反射。當樣本溶液與空白溶液的折射率有較大差異時，導致吸收值的偏差。4、非平行光通過吸收池時，由于光線的傾斜使厚度L增大而影響測量值。波長的選擇可見綠色帶黃深黃桔紅深紅深紫青紫紫藍藍色帶綠綠色帶藍深綠Ultra-violet紫外200~400深紫深紅桔紅深黃綠色帶黃暗綠綠色帶藍藍色帶綠紫藍青紫被測溶液顏色顏色750~800610~750595~610560~580580~595500~560490~500480~490435~480400~435波長(nm)基本光路部件1、光源：熱光源（鎢燈、鹵鎢燈）、氣體放電光源（氫燈、氘燈）2、單色器：是一種用來把光源發(fā)出的復合光分解成單色光，并能任意改變所需波長的裝置。包括：棱鏡、干涉濾光片、光柵3、比色杯：比色杯可由玻璃和石英等材料制成，玻璃適用于350nm以上光區(qū)，而石英杯則適用于紫外和可見光區(qū)。4、檢測器：是把光信號轉(zhuǎn)變成電信號輸出的裝置，包括：光電池、光電管、光電倍增管酶法分析酶法分析包括兩方面的內(nèi)容：①借助酶來測定某一化合物的濃度，如測定體液中的葡萄糖、甘油三酯、膽固醇、尿素、尿酸、肌酐等。②借助酶來測定另一種酶的活性，實際上是用酶來測定待測酶的產(chǎn)物，如轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶、淀粉酶等。酶法分析酶催化特點：高度的特異性、高催化效率、作用條件溫和酶的活性部位：底物結(jié)合部位、催化部位酶的輔助因子：金屬離子、輔基和輔酶、NAD、NADP酶的分類：氧化還原酶、轉(zhuǎn)移酶、水解酶、裂合酶、異構(gòu)酶、合成酶酶的活性單位：一國際單位為在一分鐘內(nèi)催化轉(zhuǎn)變1個微摩爾的反應物的酶量.（IU→U、U/L）酶活性測定的最適條件合適的底物、輔因子、活化劑、變構(gòu)劑的種類和濃度指示酶和輔助酶的種類和濃度反應混合液的最適pH，緩沖液種類和濃度去除各種抑制劑酶活性測定的基本知識酶活性是通過測定酶促反應過程中單位時間內(nèi)底物的減少量或產(chǎn)物的生成量，即測定酶促反應的速率來獲得的。測定酶反應開始后某一時間內(nèi)（t1到t2）產(chǎn)物或底物濃度的總變化量來求取酶反應初速度的方法稱為定時法。連續(xù)測定（每15s～1min監(jiān)測一次）酶反應過程中某一反應產(chǎn)物或底物的濃度隨時間的變化來求出酶反應初速度的方法稱為連續(xù)監(jiān)測法，又稱動力學法或速率法。通過測定酶反應開始至反應達到平衡時產(chǎn)物或底物濃度總變化量來求出酶活性的方法稱為平衡法。常用監(jiān)測物質(zhì)1．NADH或NADPH：NADH或NADPH在340nm有特征性光吸收，而它們的氧化型NAD+或NADP+則沒有這個吸收峰，340nm波長處的吸光度與NAD（P）H的濃度成正比。另外NAD（P）H有強烈的熒光，其激發(fā)波長為340nm，發(fā)射波長為460nm。2．H2O2指示反應：使單一的色素原顯色、使成對的色素原顯色、發(fā)光反應3．硝基苯衍生物：硝基苯酚或硝基苯胺作為底物的結(jié)合型化合物均無色，而一旦水解或游離型產(chǎn)物在pH大于8的堿性條件下能生成黃色的醌類離子型化合物，在400nm～410nm有光吸收峰，其吸光度與濃度成正比。自動生化分析儀主要參數(shù)測定方法學類型的選擇:終點法,速率法,固定時間法溫度波長樣品與試劑量延遲時間測定時間濃度校正因子

HITACHI:7020,7060,7080,7150,7170,7180,7600…OLYMPUS:AU400,AU640,AU1000,AU2700,AU5400…BECKMAN:CX3,CX4,CX5,CX7,CX9,LX20…ROCHE:Integra400/800,ReflotronPlus/Sprint…DADE:DimensionAR/ARx/RxL/Xpand…VITROS:V250,V750,V950,DT60市場常用生化儀Hitachi32R2360T/h32R2360T/h44*2+16R24000T/h44R2800T/h44R2800T/hHITACHI70807600-1307020717070607180Olympus38R2400T/h48R2800T/h48＊3R24800T/h48R21600T/hOLYMPUSAU400AU640AU2700AU5431Bechman9R675T/h80R1440T/h33R675＋225T/h33R675＋225T/hBECKMANCX5CX3CX7CX9LX2029R425＋225T/hRoche72R855T/hROCHE36R400T/hIntegra800Integra400PlusDadeBehring47R520T/h48R968T/hDADEBEHRINGDimensionXpandDimensionRxL免疫免疫的概念免疫學（immunology）是研究機體自我識別和對抗原性異物排斥反應的一門科學。免疫：免疫是生物機體的一種保護性生理反應，其作用是“識別”和排除抗原性異物(如病原微生物，衰老的自身細胞，突變產(chǎn)生的異常體細胞等)，以維持機體內(nèi)環(huán)境的平衡和穩(wěn)定。機體免疫系統(tǒng)的基本功能1．免疫防御（immunologicaldefence）指機體排斥外源性抗原異物的能力。這是動物藉以自凈、不受外來物質(zhì)干擾和保持物種純潔的生理機制。這種功能一是抗感染，即傳統(tǒng)的免疫概念；二是排斥異種或同種異體的細胞和器官，這是器官移植需要克服的主要障礙。這種能力低下時機體易出現(xiàn)免疫缺陷病，而過高時易出現(xiàn)超敏反應性組織損傷。2．免疫自穩(wěn)（immunololgicalhomeostasis）指機體識別和清除自身衰老殘損的組織、細胞的能力，這是機體藉以維持正常內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的重要機制。這種自身穩(wěn)定功能失調(diào)時易導致某些生理平衡的紊亂或者自身免疫病。3．免疫監(jiān)視(immunologicalsurveillance)指機體殺傷和清除異常突變細胞的能力，機體藉以監(jiān)視和抑制惡性促瘤在體內(nèi)生長。一旦功能低下，宿主易患惡性腫瘤。人體免疫的一般過程進入機體成為抗原機體識別抗原抗原抗體復合物的清除信號傳遞抗體產(chǎn)生人體外源性物質(zhì)抗原抗體反應免疫學反應免疫學檢驗臨床免疫學檢驗免疫功能檢測應用免疫技術(shù)檢測非特異性免疫功能檢測免疫球蛋白及補體含量測定具體項目很多：如感染免疫測定、腫瘤標志物、自身免疫病等免疫學檢驗技術(shù)發(fā)展1960sRIA－放射免疫 1970sEIA－酶免疫（ELISA）1980sFIA/CL－熒光/化學發(fā)光1988TR-FIA－時間分辨熒光1994ECL－電發(fā)光法1997ECI

－增強化學發(fā)光放射免疫分析優(yōu)勢明顯：用放射性核素標記抗原或者抗體，可測定大、小分子量物質(zhì)，應用廣泛；放射性核素的檢測靈敏度很高，可以達到ng甚至pg水平；儀器設(shè)備價格便宜，試劑盒開發(fā)成本低。

缺點很多：半衰期短，試劑貨架期不長；反應時間長，操作步驟很難自動化；使用放射性核素，需要一定防護。標記物不斷變化，試劑批間、批內(nèi)變化大，標準曲線不能保存，不能解決急診。酶免疫分析優(yōu)點：用酶標記抗原或抗體，可用于幾乎所有可溶性抗原抗體系統(tǒng)；與放免相比標記試劑穩(wěn)定，無放射性危害；酶免疫技術(shù)的新方法、新技術(shù)不斷發(fā)展，商品化試劑盒與檢測儀器種類很多，檢測儀器價格便宜。

缺點：試劑制備困難（固相載體、酶結(jié)合物底物、洗滌液、顯色液等等），必須應用符合要求的試劑和標準化操作，才能獲得良好結(jié)果。酶免疫測定步驟復雜，需時較長；由于酶受環(huán)境影響，標準曲線依舊不能保存，仍不能解決急診問題。時間分辨熒光免疫分析優(yōu)點：應用了鑭系元素螯和物，延長了熒光的衰變時間；大大減少了血清成分、試管、儀器組件等的本底熒光干擾；檢測靈敏度較高，可以達到ng水平。

缺點：反應體系中必須經(jīng)過PH值的強烈變化，對檢測物質(zhì)的免疫活性影響較大；反應時間長，不能解決急診問題；還沒有成熟的全自動儀器，半自動儀器不能解決手工誤差、污染的問題。

發(fā)光免疫分析一種物質(zhì)由電子激發(fā)態(tài)恢復到基態(tài)時，釋放出的能量表現(xiàn)為光的發(fā)射，統(tǒng)稱為發(fā)光；發(fā)光免疫分析就是指用這種可發(fā)光物質(zhì)作為標記物。根據(jù)使物質(zhì)獲能的不同方式，可以把發(fā)光免疫檢測分為化學發(fā)光和電發(fā)光兩類；即一種是用化學反應所釋放能量使物質(zhì)從基態(tài)上升至激發(fā)態(tài)，另一種是用電能使物質(zhì)從基態(tài)上升至激發(fā)態(tài)。發(fā)光檢測的優(yōu)勢很多：敏感度高，大部分發(fā)光檢測的靈敏度達到或者超過了放免水平；精密度和準確性高，遠遠超過酶免和熒光免疫水平；試劑穩(wěn)定、無毒害，與放射性核素及酶相比，優(yōu)勢明顯；測定時間短，真正使免疫檢測可以做到“急診”水平；發(fā)展了完善的全自動測定系統(tǒng)，避免手工誤差和污染等。 常用免疫檢測項目傳染?。庖吖δ軝z查）心肌標志物（應用免疫技術(shù)）生殖/內(nèi)分泌甲狀腺功能腫瘤標志物代謝貧血傳染病Anti-HAV-甲肝抗體HBsAg-乙肝表面抗原HBsAg-con-乙肝表面抗原確認Anti-HBs-乙肝表面抗體Anti-HBe-乙肝E抗體HBeAg-乙肝E抗原Anti-HBc-乙肝核心抗體Anti-HBcIgM-乙肝核心抗體IgMAnti-HCV-丙肝抗體Anti-HIV-艾滋病抗體甲狀腺功能

TT3-三碘甲狀腺原氨酸TT4-甲狀腺素FT3-游離三碘甲狀腺原氨酸FT4-游離甲狀腺素TSH-超敏促甲狀腺素T3U-T3甲狀腺攝取生殖內(nèi)分泌TotalB-HCG-總B人絨毛膜促性腺激素FreeB-HCG-游離B人絨毛膜促性腺激素LH-黃體生成素FSH-卵泡刺激素E2-雌二醇PROG-孕酮Testo-睪酮PROL-催乳素腫瘤標志物AFP-甲胎蛋白CEA-癌胚抗原CA125-癌抗原125CA153-癌抗原153CA199-癌抗原PSA-總前列腺特異性抗原心肌標志物CKMBmass-肌酸激酶同工酶CTnI-心肌鈣蛋白-IMyo-心肌紅蛋白代謝/貧血代謝NTx-N端肽Cort-可的松貧血Fer-鐵蛋白B12-維生素B12Fol-葉酸RBCFol-紅細胞葉酸市場常見免疫系統(tǒng)

ABBOTT:AxSYM,AxSYMPLUS,I2000(ArchitectSystem)…ROCHE:ECL1010,ECL2010,E170(ModularSystem)…BECKMAN:ACCESS,DxI800(LXi725)…BAYER:ACS180,ADVIACENTAUR…DPC:IMMULITE,IMMULITE1000,IMMULATE2000…bioMérieux:VIDAS…

PerkinElmer：AutoDELFIA…J&JOCD:ECi…ABBOTTAxSYMIMxROCHE101020102010E170X2BAYERACS180ADVIACENTAURBECKMAN-COULTERACCESSDxI800DPCIMMULITEIMMULITE1000IMMULITE2000PerkinElmerAUTODELFIABioMérieux免疫系統(tǒng)的組成免疫系統(tǒng)（immunesystem）是由具有免疫功能的器官、組織、細胞和分子組成，是機體免疫機制發(fā)生的物質(zhì)基礎(chǔ)。免疫系統(tǒng)內(nèi)的各種淋巴樣器官和細胞在機體的整體免疫功能中分別擔負著不同的角色，根據(jù)其功能不同可將整個系統(tǒng)分成3個組織層次：①中樞免疫器官；②外周免疫器官；③免疫細胞。各層次不同類型的組織與細胞又有著不同的作用，通過淋巴細胞再循環(huán)和各種免疫分子將各部分的功能協(xié)調(diào)統(tǒng)一起來。與機體的其它系統(tǒng)一樣，免疫系統(tǒng)雖有著一系列的內(nèi)部調(diào)節(jié)機制，但不是完全獨立運行，而是與其它系統(tǒng)互相協(xié)調(diào)，尤其是受神經(jīng)體液調(diào)節(jié)，又可進行反饋影響，共同維持機體的生理平衡。免疫系統(tǒng)是伴隨著生物種系發(fā)生和發(fā)展過程中逐步進化而建立起來的。無脊椎動物僅有吞噬作用和炎癥反應，到了脊椎動物才開始有腔上囊，出現(xiàn)特異性抗體，至哺乳動物才逐漸產(chǎn)生較多種類的免疫球蛋白。進化程序不同的動物中免疫球蛋白類型出現(xiàn)的多少不一。免疫系統(tǒng)各成分的系統(tǒng)發(fā)生順序為吞噬細胞、細胞介導免疫、體液免疫；在體液免疫中抗體產(chǎn)生的順序是IgM、IgG、IgA、IgD和IgE。免疫器官免疫器官（immuneorgan）是指實現(xiàn)免疫功能的器官或組織。根據(jù)發(fā)生的時間順序和功能差異，可分為中樞神經(jīng)免疫器官（centralimmuneorgan）和外周免疫器官（peripheralimmuneorgan）兩部分。中樞免疫器官：中樞免疫器官又稱一級免疫器官，包括骨髓、胸腺、鳥類法氏囊或其同功器官。中樞器官主導免疫活性細胞的產(chǎn)生、增殖和分化成熟，對外周淋巴器官發(fā)育和全身免疫功能起調(diào)節(jié)作用。外周免疫器官包括淋巴結(jié)、脾和粘膜相關(guān)淋巴組織（mucosaassociatedlymphoidtissue，MALT）等，是免疫細胞聚集和免疫應答發(fā)生的場所。淋巴細胞淋巴細胞（lymphocyte）是受免疫系統(tǒng)的主要細胞，按其形成大小可分為大（11～18μm）、中（7～11μm）、?。?～7μm）三類；按其性質(zhì)和功能可分為T細胞、B細胞和NK細胞。不同類型的淋巴細胞很難從形態(tài)學上分辨，只能通過其不同的表面標志和不同的反應性進行區(qū)分。T細胞是在胸腺中成熟的淋巴細胞，故稱胸腺依賴性淋巴細胞（thymus-dependentlymphocyte），簡稱T淋巴細胞或T細胞，是血液和再循環(huán)中的主要淋巴細胞。

B細胞是在鳥類法氏囊或其同功器官（骨髓）內(nèi)發(fā)育成熟的細胞，因此稱為法氏囊或骨髓依賴的淋巴細胞（bursaorbonemarrowdependentlymphocyte），簡稱B淋巴細胞或B細胞。B細胞受抗原刺激后可產(chǎn)生抗體的漿細胞。輔佐細胞在免疫應答過程中，淋巴細胞，尤其是T細胞的活化需要非淋巴細胞的參與；能夠通過一系列作用幫助淋巴細胞活化的細胞稱為輔佐細胞（accessorycell，AC）。免疫相關(guān)名詞抗原：抗原(antigen，Ag)是指能刺激機體免疫系統(tǒng)誘導免疫應答并能與應答產(chǎn)生如抗體或致敏淋巴細胞發(fā)生特異反應的物質(zhì)。一個完整的抗原應包括兩方面的免疫性能：①免疫原性(immunogenicity)指誘導宿主產(chǎn)生免疫應答的能力，具有這種能力的物質(zhì)稱為免疫原(immunogen)；②免疫反應性(immunoreactivity)指抗原與抗體或致敏淋巴細胞發(fā)生特異性結(jié)合的能力，亦稱為反應原性。有些物質(zhì)在獨立存在時只具有反應原性而無免疫原性，稱為半抗原(hapten)；而免疫原通常同時具有免疫反應能力?？贵w（Antibody,Ab）：與抗原反應發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。抗原抗體反應（antigen-antibodyreaction）是指抗原與相應抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應。可發(fā)生于體內(nèi)（invivo），也可發(fā)生于體外(invitro)。體內(nèi)反應可介導吞噬、溶菌、殺菌、中和毒素等作用；體外反應則根據(jù)抗原的物理性狀、抗體的類型及參與反應的介質(zhì)（例如電解質(zhì)、補體、固相載體等）不同，可出現(xiàn)凝集反應、沉淀反應、補體參與的反應及中和反應等各種不同的反應類型。因抗體主要存在于血清中，在抗原或抗體的檢測中多采用血清作試驗，所以體外抗原抗體反應亦稱為血清反應（serologicreaction）。免疫相關(guān)名詞免疫應答（immuneresponse）是機體免疫系統(tǒng)對抗原刺激所產(chǎn)生的以排除抗原為目的的生理過程。這個過程是免疫系統(tǒng)各部分生理功能的綜合體現(xiàn)，包括了抗原遞呈、淋巴細胞活化、免疫分子形成及免疫效應發(fā)生等一系列的生理反應。通過有效的免疫應答，機體得以維護內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。免疫應答的基本過程:1、抗原識別階段2、淋巴細胞活化階段3、抗原清除階段。具有抗感染、抗腫瘤等對機體有利的效果，稱為免疫保護（immunoprotection）；但在另一些條件下，過度或不適宜的免疫應答也可導致病理損傷，稱為超敏反應（hypersensitivity），包括對自身抗原應答產(chǎn)生的自身免疫病。與此相反，特定條件下的免疫應答可不表現(xiàn)出任何明顯效應，稱為免疫耐受（immunotolerance）。免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)通常是指一組具有抗體活性和（或）抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白。Ig由漿細胞產(chǎn)生，存在于血液和其他體液（包括組織液和外分泌液）中，約占血漿蛋白總量的20％；還可分布在B細胞表面。Ig的結(jié)構(gòu)具有不均一性，可分為不同的類型；多數(shù)Ig具有抗體活性，可以特異性識別和結(jié)合抗原，并引發(fā)一系列生物學效應。免疫相關(guān)名詞Ig分子由4條肽鏈組成，2條長鏈稱為重鏈(heavychain，H)，由大約440個氨基酸殘基組成，分子量約50～70kD；2條短鏈稱為輕鏈(lightchain，L)，由大約220個氨基酸組成，分子量約22.5kD。4條肽鏈通過鏈間二硫鍵(-S·S-)連在一起。補體（complement，C）是存在于人和脊椎動物血清及組織液中的一組具有酶樣活性的球蛋白，加上其調(diào)節(jié)因子和相關(guān)膜蛋白共同組成一個反應系統(tǒng)棗補體系統(tǒng)。補體系統(tǒng)參與機體的抗感染及免疫調(diào)節(jié)，也可介導病理性反應，是體內(nèi)重要的免疫效應系統(tǒng)和放大系統(tǒng)。補體受體（complementreceptor，CR）是細胞膜上能與補體成分或補體片段特異性結(jié)合的一種表面糖蛋白。許多類型的細胞膜上都具有補體受體，而且在同一細胞膜上可含有不同的受體免疫項目的簡單介紹傳染病Anti-HAV-甲肝抗體這種抗體是感染甲肝病毒（HAV）后病人血中最早出現(xiàn)的一種抗體。臨床意義:（1）感染后的甲型肝炎病人血中很快就可出現(xiàn)此種抗體，并在血中能夠維持3－6個月的時間。

（2）有少部分病人測不出這一抗體，這種結(jié)果臨床上稱作HAVAb-IgM應答“缺失”。這類患者可借助于檢測HAAg或甲型肝炎總抗體來明確診斷。HBsAg-乙肝表面抗原

HbsAg陽性見于①乙型肝炎潛伏期和急性期；②慢性遷延性肝炎，慢性活動性肝炎，肝硬化，肝癌；③慢性HBsAg攜帶者。HBsAg也可從許多乙肝患者體液和分泌物中測出，如唾液、精液、乳汁等。Anti-HBs-乙肝表面抗體

HBsAb是病人感染了乙型肝炎病毒（HBV）以后，對乙型肝炎表面抗原蛋白質(zhì)所產(chǎn)生的一種免疫反應性抗體（保護性抗體），它對HBsAg有一定的中和作用。臨床意義:（1）HBsAb陽性證明以往有過乙型肝炎病毒感染的歷史，機體產(chǎn)生了一定的免疫力。

（2）注射乙型肝炎疫苗或打過HBsAb免疫球蛋白，HBsAb可呈陽性反應。

（3）HBsAb是保護性抗體，血中抗體滴度在1：64或P/N〉10以上時才對機體有保護作用。Anti-HBe-乙肝E抗體臨床意義:（1）慢性乙型肝炎HBeAb陽性占48．3%，肝硬化為68．3%，肝癌為80%。

（2）HBeAb陽性率增高，表明多數(shù)患者乙型肝炎病毒感染的時間可長達7－27年。

（3）HBeAb陽性仍會有一定的傳染性。在HBeAb陽性的孕婦分娩嬰兒中可有20%感染乙型肝炎病毒。

傳染病HBeAg-乙肝E抗原（1）HBeAg增高說明患有乙型肝炎具有較強的傳染性，它的出現(xiàn)往往是乙型肝炎的早期或者是活動期。

（2）如HBeAg陽性持續(xù)時間大于10周以上或更長時間，病人可能進展為慢性持續(xù)性感染，肝組織常有較嚴重的損害，急性乙型肝炎容易演變成慢性肝炎或肝硬化。

（3）HBeAg陽性孕婦有垂直傳染性，9%以上的新生兒將受乙型肝炎病素感染，HBeAg也為陽性。

Anti-HBc-乙肝核心抗體

HBAb是由乙型肝炎核心抗原刺激肝細胞產(chǎn)生的一種免疫球蛋白，其中有IgG、IgM、IgA和IgE型。臨床上常規(guī)檢測的有IgM和IgG型。臨床意義:（1）乙肝核心抗體IgM增高可診斷急性乙型肝炎。

（2）單純核心抗體IgG增高常表示有既往感染。

（3）HBcAb的出現(xiàn)表明肝內(nèi)乙肝病毒復制活躍，肝細胞受損較重，并且傳染性較強。

（4）HBcAb對乙型肝炎無保護作用，其持續(xù)陽性可長達數(shù)十年甚至保持終身。Anti-HBcIgM-乙肝核心抗體IgMHBcAb－IgM陽性是乙肝病毒急性感染和病毒復制活躍的指標，具有高度傳染性。HbcAb-IgM陽性還可見于慢性活動性乙型肝炎。Anti-HCV-丙肝抗體臨床意義:（1）在輸血后患肝炎有80－90%的病人是丙型肝炎，其中大部分為陽性。

（2）在乙型肝炎患者中，特別是經(jīng)常使用血制品（血漿、全血）的病人可以引起丙肝病毒的合并感染，使疾病轉(zhuǎn)為慢性化、肝硬化或者肝癌。所以對乙型肝炎的復發(fā)病人或是慢性肝炎病人要進行HCV－Ab的檢測。

心肌標志物CKMBmass-肌酸激酶同工酶測定CK-MB的質(zhì)量可不受酶活性的影響，直接檢測CK-MB分子的濃度，可更加敏感、特異地為臨床提供幫助。CK-MBmass檢測的敏感性和特異性都大大高于CK-MB活性（activity），故當沒有開展cTnI或cTnT檢測時，可用CK-MBmass協(xié)助臨床診斷，其對于診斷急性冠脈綜合征和評價心肌損傷程度，以及在敏感性和特異性方面都接近肌鈣蛋白。CTnI-心肌鈣蛋白-I

診斷急性心肌梗死的高特異性和高敏感性的確診標志物，血清/血漿中cTn水平在AMI發(fā)生后8～14h達高峰，1～2周后降至正常。由于cTnI/cTnT具用心肌特異性，胸痛發(fā)生4h后的患者，可直接采用cTnI/cTnT檢測。cTnI/cTnT除了用于AMI的早期診斷外，尚可作為臨床溶栓治療后再灌注的監(jiān)測指標。Myo-心肌紅蛋白當心肌細胞發(fā)生損傷時，Mb是最早進入血液的生物的標志物，其擴散入血的速度比CK-MBmass或cTnI/cTnT更快。但因肌紅蛋白在骨骼肌中也有表達，故骨骼肌損傷時也可有大量肌紅蛋白釋放，其不具有心肌特異性。甲狀腺功能檢測T4是判斷垂體－甲狀腺軸功能的重要指標，對甲功低下的診斷價值更大。T3主要由T4在外周脫碘生成，它比T4具有更大的生物活性，在甲亢的早期或復發(fā)初期、T3值常早于T4值升高，故測定T3深度是診斷甲亢最靈敏的指標。因此聯(lián)合檢測血清T3、T4值，能更全面地反映病情及治療后的甲功能狀況。成人正常值范圍：T31.08～3.08nmol/L，T463.2～157.4nmol/L。由甲狀腺分泌入血的T4絕大部分（99.95％）立即與血漿中甲狀腺素結(jié)合蛋白質(zhì)結(jié)合。血清中T3僅小部分來自甲狀腺，大部分是由血中T4脫碘轉(zhuǎn)換而成，絕大部分T3（99.5％）也與血漿中的蛋白質(zhì)結(jié)合。因此，血清FT3、FT4比結(jié)合狀態(tài)的T3、T4低得多，但只有FT3、FT4才能進入細胞發(fā)揮生理效應，且影響其濃度檢測的因素較少，所以檢測血清FT3、FT4濃度能最直接、最靈敏和最正確地反映甲狀腺功能狀態(tài)，聯(lián)合檢測FT3、FT4，對甲狀腺功能的診斷率近于100％。參考正值：FT4為10.9～25.0pmol/L；FT3為4.0～7.5pmol/L。甲狀腺功能TSH-超敏促甲狀腺素

TSH由垂體前葉分泌，受下丘腦的促甲素釋放激素（TRH）的刺激而產(chǎn)生和釋放，同時也受血中甲狀腺激素的負反饋調(diào)控。當血中T3、T4濃度減低（或增高）可刺激（或抑制）TSH的分泌，兩者間呈現(xiàn)負函數(shù)相關(guān)關(guān)系。當T3、T4輕度降低時，TSH呈低水平升高（10～15mlU/L）；T3、T4明顯降低時，TSH呈高水平升高（15～200mlU/L）、故檢測血清TSH值是早期診斷原發(fā)性甲低（尤其對亞臨床型）的靈敏指標。若血清T3、T4值低，TSH值亦低，可考慮為垂體性或下丘腦性甲低。T3U-T3甲狀腺攝取測定T3uptake可用來間接評估甲狀腺結(jié)合球蛋白(例如TBG)的飽合程度。它常和T4搭配，共同評估甲狀腺功能的狀態(tài)，以達成下列二種目的：T3uptake和T4的結(jié)果可用來計算FreeT4index，間接評估游離甲狀腺素的多少。當甲狀腺結(jié)合球蛋白變動而造成TotalT4異常時，計算FreeT4index可協(xié)助區(qū)分此為生理現(xiàn)象或病理現(xiàn)象。T3uptake並不是在測定T3，而是在分析甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)未結(jié)合部位的多少腫瘤標志物AFP-甲胎蛋白甲胎蛋白是胎兒發(fā)育早期由肝臟和卵黃囊合成的一種血清糖蛋白，分子量70000，電泳時位于白蛋白和α1球蛋白之間，胎兒出生后不久即逐漸消失。1963年Abelev首先發(fā)現(xiàn)患肝細胞癌的小鼠存在AFP，1964年Tatarinor報道肝細胞癌患者血清中AFP升高。目前檢測血清中AFp是臨床上診斷肝癌的重要指標。AFP是人體在胚胎時期血液中含有的一種特殊蛋白，系肝細胞內(nèi)粗面內(nèi)網(wǎng)核糖顆粒所合成，胎兒出生后，血清AFP濃度下降，幾個月至1年內(nèi)降至正常，正常成人肝細胞失去合成AFP的能力，因此血清中含量極微（一般＜20μg/L），除肝細胞癌可顯著升高外，妊娠、胚胎癌如睪丸癌、卵巢癌和極少數(shù)胃、胰、膽管、結(jié)腸直腸癌也可升高，但其絕對值不如肝細胞癌高。慢性肝炎、肝硬化可有AFP的分子變異體，亦可有一過性升高。因此血清AFP檢測結(jié)果必須結(jié)合臨床癥狀與超聲檢查才有診斷意義。①血清AFP對肝細胞癌有特異診斷價值，尤其是動態(tài)變化測定，如AFP連續(xù)4周陽性（＞400μg/L），同時ALT正常，并且排除上述其他疾病，可以