糖類藥物的分析

糖類藥物的分析第1頁糖類物質(zhì)：是多羥基（2個或以上）醛類或酮類化合物，在水解后能變成以上二者之一有機(jī)化合物。在化學(xué)上，因為其由碳、氫、氧元素組成，在化學(xué)式表現(xiàn)上類似于“碳”與“水”聚合，故又稱之為碳水化合物。生物學(xué)功效：1.提供能量。植物淀粉和動物糖原都是能量儲存形式。2.細(xì)胞骨架。纖維素、半纖維素、木質(zhì)素是植物細(xì)胞壁主要成份，肽聚糖是原核生物細(xì)胞壁主要成份。3.細(xì)胞間識別和生物分子間識別。細(xì)胞膜表面糖蛋白寡糖鏈參加細(xì)胞間識別。紅細(xì)胞表面ABO血型決定簇就含有巖藻糖。人體吸收：糖包含蔗糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖、淀粉、糊精等。除了葡萄糖、果糖和半乳糖能被人體直接吸收，其余糖都要在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為基本單糖后，才能被吸收利用。糖類藥物的分析第2頁糖分類（依據(jù)結(jié)構(gòu)單元數(shù)目）1.單糖：不能被水解成更小分子糖。常見單糖有葡萄糖、果糖、核糖和脫氧核糖。2.低聚糖，又稱寡糖：由2～10個單糖分子脫水縮合而成。含有營養(yǎng)意義低聚糖是雙糖。常見雙糖有：①蔗糖，一個葡萄糖分子和一個果糖分子縮合而成。②麥芽糖，甜度約為蔗糖二分之一。兩個葡萄糖分子脫水縮合而成。③乳糖，因存在于哺乳動物乳汁中而得名。由一個葡萄糖分子和一個半乳糖分子結(jié)合而成。3.多糖：由幾百個乃至幾萬個單糖分子縮合生成，通式為(C6H10O5)n，最主要是淀粉與纖維素。4.結(jié)合糖(復(fù)合糖，糖綴合物)：糖脂、糖蛋白、糖-核苷酸等。5.糖衍生物：糖醇、糖酸、糖胺、糖苷等。糖類藥物的分析第3頁葡萄糖單糖蔗糖乳糖

賦形劑和矯味劑一、藥品結(jié)構(gòu)與性質(zhì)雙糖淀粉多糖第一節(jié)葡萄糖及其制劑分析

醫(yī)學(xué)上糖類：葡萄糖屬單糖，是人體能量主要起源之一。乳糖、蔗糖，淀粉常被用作藥品制劑賦形劑或矯味劑。

糖類藥物的分析第4頁葡萄糖葡萄糖為醛糖，含有還原性；有多個不對稱碳原子，含有旋光性，為右旋體；在水中易溶，在乙醇中微溶。無色結(jié)晶或白色結(jié)晶性或顆粒性粉末；無嗅，味甜糖類藥物的分析第5頁

OH

H

C

|

H—C—OH

|OH—C—HO

|

H—C—OH

|

H—C

|

CH2OH

H

OH

C

|

H—C—OH

|OH—C—HO

|

H—C—OH

|

H—C

|

CH2OH

CHO

|

H—C—OH

|OH—C—H

|

H—C—OH

|

H—C—OH

|

CH2OH

a-葡萄糖開鏈葡萄糖?-葡萄糖葡萄糖投影結(jié)構(gòu)式示意圖糖類藥物的分析第6頁二、判別試驗（一）比旋度測定旋光度：直線偏振光經(jīng)過光學(xué)活性化合物液體或溶液時，能引發(fā)旋光現(xiàn)象，使偏振光平面向左或右旋轉(zhuǎn)，旋轉(zhuǎn)度數(shù)稱旋光度。有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)中含有手性碳原子，含有旋光現(xiàn)象。利用測定藥品旋光度進(jìn)行定性、雜質(zhì)檢驗和定量分析方法，稱為旋光度測定法。手性碳原子，是指和四個不一樣原子或基團(tuán)連接碳原子。在一定條件下測得旋光度稱為比旋度，以[α]表示。比旋度能夠反應(yīng)其純度，故藥典對葡萄糖原料不作專題含量測定，只要求比旋度范圍糖類藥物的分析第7頁影響旋光度測定原因：

１.物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)

物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)不一樣，旋光性也不一樣：

相同條件下，有旋轉(zhuǎn)角度大，有旋轉(zhuǎn)角度小；

有呈左旋（“-”表示），有呈右旋（“+”表示）；

有些物質(zhì)無手性碳原子，無旋光性。

２.溶液濃度

溶液濃度越大，其旋光度也越大。

在一定濃度范圍內(nèi)，藥品溶液濃度和旋光度呈線性關(guān)系。

測比旋度時，要求在一定濃度溶液中進(jìn)行。

３.溶劑

溶劑對旋光度影響比較復(fù)雜，隨溶劑與藥品而有所不一樣。

測定藥品旋光度和比旋度時，應(yīng)注明溶劑名稱。糖類藥物的分析第8頁４.光線經(jīng)過液層厚度光線經(jīng)過液層厚度越厚，旋光度越大除另有要求外，中國藥典（年版）采取1dm長測定管５.光波長波長越短，旋光度越大。中國藥典（年版）采取鈉光譜D線（589.3nm）測定旋光度。６.溫度普通情況下，溫度影響不是很大，對于大多數(shù)物質(zhì)，在黃色鈉光情況下，溫度每升高1℃，比旋度約降低千分之一。糖類藥物的分析第9頁Ch.P.（）計算：g/mlg/100ml糖類藥物的分析第10頁(二)與斐林（Fehling）試液反應(yīng)葡萄糖醛基還原性水、△Cu2O↓

Fehling試液(三)IR中國藥典要求本品紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照圖譜一致。

糖類藥物的分析第11頁三、雜質(zhì)檢驗

（一）葡萄糖檢驗葡萄糖制備工藝1、酸度：目標(biāo)：控制本品酸性雜質(zhì)。原因：內(nèi)在：因為葡萄糖中有醛基，易被氧化成葡萄糖酸；

外在：水解過程中加入酸。方法：取本品2.0g,加新沸過冷蒸餾水20ml溶解后，加酚酞指示液3滴與氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L）0.20ml，應(yīng)顯粉紅色。糖類藥物的分析第12頁2、溶液澄清度與顏色目標(biāo)：檢驗水中不溶性雜質(zhì)或有色雜質(zhì)。3、乙醇溶液澄清度目標(biāo)：檢驗乙醇中不溶性雜質(zhì)，如糊精。原理：糊精在熱乙醇中溶解度小，使澄清度變差。方法：取本品1.0g，加90%乙醇30ml，置水浴上加熱回流約10min，溶液應(yīng)澄清。糖類藥物的分析第13頁4、亞硫酸鹽與可溶性淀粉原理及現(xiàn)象：因為部分硫酸在水解過程中被還原，可能產(chǎn)生亞硫酸鹽，而可溶性淀粉則是未反應(yīng)原料。供試品試驗結(jié)果顯黃色，為合格。供試品中如有亞硫酸鹽存在，因為亞硫酸有還原性，會使碘褪色，如有可溶性淀粉存在，則遇碘顯藍(lán)色。糖類藥物的分析第14頁

5、蛋白質(zhì)原理：制備葡萄糖原料多為淀粉，它來自于植物根莖或種子，因而在提取過程中常有蛋白質(zhì)被同時提出，利用蛋白質(zhì)類雜質(zhì)遇酸產(chǎn)生沉淀性質(zhì)可對其進(jìn)行檢驗（不得發(fā)生沉淀）6、氯化物、硫酸鹽、鈣鹽、鋇鹽等糖類藥物的分析第15頁（二）葡萄糖注射液檢驗1.特殊雜質(zhì)：5-羥甲基糠醛(5-HMF)檢驗葡萄糖易分解產(chǎn)生5-羥甲基糠醛，其本身是無色，它可再分解為乙酰丙酸與甲酸或聚合，其聚合物為一個有色物質(zhì)。葡萄糖遇強(qiáng)熱使溶液變黃，最少有一部分顏色是因為葡萄糖分解產(chǎn)物5-羥甲基糠醛聚合物作用所致；而且葡萄糖注射液色澤深淺與5-羥甲基糠醛產(chǎn)生量成正比。所以，能夠用5-羥甲基糠醛形成速度來檢驗葡萄糖分解速度。糖類藥物的分析第16頁5-羥甲基糠醛(5-HMF)：對人體橫紋肌及內(nèi)臟有損害引入路徑：高溫消毒時分解產(chǎn)生檢驗原理：利用雜質(zhì)有共軛雙烯結(jié)構(gòu)，采取UV-Vis進(jìn)行檢驗要求：A284nm≤0.32

2.pH值：pH值3.2-6.53.重金屬：≤5ppm4.細(xì)菌內(nèi)毒素、無菌等糖類藥物的分析第17頁四、含量測定（一）原料：比旋度（二）葡萄糖注射液*≤10%葡萄糖注射液直接測定*＞10%葡萄糖注射液可加氨試液后測定

加氨試液可加速

、

兩種異構(gòu)體抵達(dá)旋光平衡加熱、加酸亦可加速平衡抵達(dá)糖類藥物的分析第18頁計算WZZ-3自動旋光儀糖類藥物的分析第19頁結(jié)構(gòu)原理光源起偏鏡偏振光盛液管旋轉(zhuǎn)后偏振光檢偏鏡經(jīng)過檢偏鏡偏振光糖類藥物的分析第20頁（三）葡萄糖氯化鈉注射液含量測定1.葡萄糖

取本品，照葡萄糖注射液項下方法測定，即得。

2.氯化鈉（銀量法）

精密量取本品20ml，加水30ml，加2％糊精溶液5ml、2.5％硼砂溶液2ml與熒光黃指示液5～8滴，用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于5.844mgNaCl。

糖類藥物的分析第21頁吸附指示劑變色原理：

化學(xué)計量點后，沉淀表面荷電狀態(tài)發(fā)生改變，指示劑在沉淀表面靜電吸附造成其結(jié)構(gòu)改變，進(jìn)而造成顏色改變，指示滴定終點。AgCl︱Cl-+FI-AgCl︱Ag+FI-Ag

+滴定前滴定中滴定終點熒光黃變色過程:

糖類藥物的分析第22頁滴定開始前：Cl-FI-FI-Cl-Cl-Cl-Cl-FI-Cl-SP前：AgClCl-Cl-Cl-Cl-FI-FI-FI-SP及SP后：AgClAg+Ag+Ag+Ag+FI-FI-FI-糖類藥物的分析第23頁第二節(jié)右旋糖酐20、40及其制劑分析

起源：系蔗糖經(jīng)腸膜狀明串珠菌發(fā)酵后生成一個高分子葡萄糖聚合物，經(jīng)處理精制而得。因為聚合葡萄糖分子數(shù)目不一樣，而產(chǎn)生不一樣分子量產(chǎn)品。有高分子(平均分子量10-20萬）、中分子（6-8萬）、低分子（2-4萬）、小分子（1-2）。性狀：為白色或類白色無定形粉末，無臭，無味。易溶于熱水，不溶于乙醇。其水溶液為無色或微帶乳光澄明液體。用途：是當(dāng)前最正確血漿代用具之一。臨床上慣用有中分子右旋糖酐，用于出血性、創(chuàng)傷性及燒傷性休克等。低、小分子右旋糖酐，能改進(jìn)微循環(huán)，亦有擴(kuò)充血容量作用。注:右旋糖酐70（中分子）；右旋糖酐40（低分子）；右旋糖酐10（小分子）糖類藥物的分析第24頁糖類藥物的分析第25頁糖類藥物的分析第26頁水、△Cu2O↓

一、比旋度測定右旋糖苷為旋光性物質(zhì)，含有旋光性。比旋度應(yīng)符合要求。二、化學(xué)判別反應(yīng)右旋糖苷20含有還原性，能與堿性酒石酸銅試液反應(yīng)。三、檢驗項目：氯化物、氮、干燥失重、熾灼殘渣、重金屬、分子量和分子量分布等。糖類藥物的分析第27頁四、含量測定右旋糖苷20氯化鈉注射液含量測定1、右旋糖苷測定本品為復(fù)方制劑，右旋糖苷20有旋光性，而氯化鈉無旋光性，不干擾測定，用旋光度法測定右旋糖苷20含量。2、氯化鈉測定用鉻酸鉀法測定氯化鈉，右旋糖苷20不干擾，可直接測定。滴定反應(yīng)：Ag++C1-→AgCl↓（白色）終點反應(yīng)：2Ag++Cr042-→Ag2Cr04↓（磚紅色）

糖類藥物的分析第28頁1、葡萄糖酸鈣中蔗糖或還原糖類檢驗用試劑是A、堿性焦性沒食子酸試液B、堿性亞硝基鐵氰化鈉試液C、堿性

-萘酚試液D、堿性碘化汞鉀試液E、堿性酒石酸銅試液

糖類藥物的分析第29頁2、葡萄糖中存在特殊雜質(zhì)為：A、糊精

B、氯化物C、砷鹽

D、酒精

E、鹽酸3、葡萄糖注射液含量測定方