新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治

新傳染病發(fā)覺與防治

肆虐人類數(shù)千年各類傳染病，伴隨人類社會和科學進步，經(jīng)濟發(fā)展，有許多傳染病在一定程度上得到了有效控制，有甚至被毀滅或即將毀滅，如：天花或脊髓灰質炎、小兒破傷風等。但好景不長。20世紀70年代后，因種種原因影響，全球傳染病發(fā)病率再度回升，流行、暴發(fā)事件不斷，表現(xiàn)為：

①一批得到控制傳染病死灰復燃—結核、霍亂、白喉、瘧疾等。

②又發(fā)覺了數(shù)十種新、甚至危害更大病種。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第1頁

所以在《1996年世界衛(wèi)生匯報》中WHO

驚呼：“我們正處于一場傳染性疾病全球危機邊緣，沒有一個國家能夠躲避這場危機。”至于這場新傳染病所產生嚴重后果，已是有目共睹，不可等閑視之。如：當前流行SARS，就是典型例子。所以作為一名21世紀醫(yī)學生，對新傳染病知識應有所了解。在學習與工作中不停地認識、探索對新發(fā)覺地傳染病更加好地、針對性地防治方法。更加好地推行作為一名醫(yī)生天職。所以，借此機會與大家談談當前對新發(fā)覺傳染病發(fā)覺和防治策略。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第2頁1.新傳染病出現(xiàn)及對策

歷史上，傳染病人類健康與生命大敵。結果：傳染病千百萬人死亡，造成巨大災難。人類與傳染病斗爭20世紀中期取得巨大成績,突出例子毀滅天花脊灰、小兒破傷風即將被毀滅許多傳染病被控制:霍亂、結核許多人和醫(yī)學教授認為：醫(yī)學已永遠處理了傳染病問題。種種原因影響：20世紀70年代全球新、舊傳染雙重威脅。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第3頁1.1.二十世紀70年代以來新出現(xiàn)及發(fā)覺傳染病

據(jù)統(tǒng)計，全球新發(fā)覺傳染病有30各種，在我國存在或潛在有20各種，是我們應重視與警覺。

表1近30年來新發(fā)現(xiàn)主要病原體及所致疾病年份病原體所致疾病

1975細小病毒B19

5號病,慢性溶貧中再障危象1976隱孢子蟲隱孢子蟲病,急性小腸結腸炎1977埃博拉病毒埃博拉出血熱1977嗜肺軍團菌軍團病1977漢灘病毒腎綜合征出血熱1977空腸彎曲桿菌空腸彎曲菌腸炎1977丁型肝炎病毒丁型肝炎1980人嗜T淋巴細胞病毒Ⅰ型T細胞淋巴瘤白血病

1981金黃色葡萄球菌毒素中毒性休克綜合征新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第4頁年份病原體所致疾病1982大腸桿菌O157:H7出血性結腸炎1982伯氏疏螺旋體萊姆病1982人嗜T淋巴細胞病毒Ⅱ型毛細胞白血病1983人免疫缺點病毒(HIV)艾滋病1983幽門螺旋桿菌消化性潰瘍病1986環(huán)孢子球蟲環(huán)形孢子蟲病1988人皰疹病毒6型(HHV-6)突發(fā)性玫瑰疹1989查菲氏歐利希氏體人歐利希氏體病1989丙型肝炎病毒丙型肝炎1990戊型肝炎病毒戊型肝炎1992巴爾道氏體貓抓病,桿菌性血管瘤病1993O139群霍亂弧菌O139霍亂1994漢灘病毒分離株漢灘病毒肺綜合征新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第5頁年份病原體所致疾病1995庚型肝炎病毒庚型肝炎1996瘋牛病病原-朊病毒瘋牛病

變異冠狀病毒SARS

猴痘病毒

猴天花按新傳染病存在歷史可分為三類:第一類疾病本身已為人所知，但未被認為是傳染病，近30年因發(fā)覺病原體才被認為是傳染病，如：T細胞淋巴瘤白血病、消化性潰瘍病、突發(fā)性玫瑰疹等。

第二類疾病在人間早已或可能存在，近30年才被發(fā)覺和認識，如：萊姆病、丙型、戊型肝炎等。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第6頁第三類疾病以往在人間不存在，確實是人類新出現(xiàn)傳染病，如：艾滋病、O139霍亂等。

上述一、二類傳染病，尤其是第二類，在人間早已或可能早已存在但未被及時發(fā)覺主要原因之一是：這些傳染病在過去并沒有像現(xiàn)在這么在人間大量發(fā)生和流行，以致沒有受到人們重視和注意。這些也能夠視為新出現(xiàn)傳染病。1.2.新傳染病發(fā)生機理及影響原因1.2.1.新傳染病發(fā)生機理

新傳染病出現(xiàn)原因有二個：

①新病原體被引入人群；新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第7頁

新病原體起源：

a.人類已知傳染病病原體變異株

O139型霍亂弧菌可能為埃爾托霍亂弧菌O基因突變結果，或是非O1群霍亂弧菌取得了毒力基因。

b.起源于環(huán)境中，尤其是動物中病原體。漢灘病毒、伯氏疏螺旋體、歐利希氏體等新傳染病病原體都是來自野生動物。

②新病原體能在新人類宿主中確立及深入傳輸。大多數(shù)新傳染病發(fā)生過程：病原體人類疾病局限地域和孤立人群新地域與新人群巨大危害。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第8頁1.2.2.影響新傳染病發(fā)生原因

由機理可知，凡有利于使病原體引入人群或使之能在人群中確立并傳輸原因皆能影響新傳染病發(fā)生。主要有六類原因：表2影響新傳染病發(fā)生原因原因特殊原因疾病例證

生態(tài)及農業(yè)發(fā)展，水生態(tài)系統(tǒng)改變，砍伐森萊姆病(美國和歐洲，植樹造林)，漢灘環(huán)境改變林/植樹造林，洪水、干旱氣候改變。病毒肺綜合征(美國，93年氣候異常)。人口特征社會條件，人口增加和移民，戰(zhàn)爭、貧HIV出現(xiàn)和傳輸。與行為困，城市衰退，性行為，靜脈用藥。國際旅行和人及貨物世界性交流，空中旅行。AIDS擴散，鼠源性漢灘病毒與O137商業(yè)活動型霍亂擴散。技術和工業(yè)食物供給全球化，食品包裝和加工改溶血性尿毒綜合征(漢堡包中牛肉被E.變，輸血及組織和器官移植，抗生素coliO137:H7污染)，輸血相關性肝炎廣泛使用。(丙肝、庚肝)。微生物變異因為環(huán)境選擇造成微生物變異。霍亂弧菌O139出現(xiàn)。公共衛(wèi)生措媒介控制，飲水凈化及消毒辦法失效隱孢子蟲病(美國，93年水廠過濾裝置施失效失效)。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第9頁1.3.怎樣面對新出現(xiàn)傳染病1.3.1.充分認識新傳染病危害，提升防治新傳染病自覺性新傳染病危害世人皆知,經(jīng)典例子有:艾滋病-----正在全球流行.

SARS----正在我國流行。

92年發(fā)覺O139新型霍亂-----使南亞數(shù)十萬人發(fā)病,呈世界流行態(tài)勢.埃博拉出血熱-----非洲局部,極高死亡率、世人驚慌.萊姆病-----五大洲數(shù)十個國家發(fā)覺，感染嚴新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第10頁重可致殘?？傊?，新傳染病對人類危害程度差異大，傳輸廣，致死率高，易變?yōu)槁?，預后差，無效防治伎倆。所以，應充分認識提升警覺，采取主動對策，加大防治力度。

1.3.2.加強疾病監(jiān)測工作，提升監(jiān)測傳染病出現(xiàn)能力

疾病監(jiān)測-----即連續(xù)不停監(jiān)視疾病發(fā)生發(fā)展動態(tài)，并將相關信息通知衛(wèi)生行政部門公眾，方便及時采取辦法。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第11頁

實踐證實，任何一個國家和地域防御傳染病一個主要武器就是其疾病監(jiān)測體系。假如疾病監(jiān)測系統(tǒng)能及時發(fā)覺人群中新出現(xiàn)癥狀和疾病將是極有意義成績。所以，為能及時監(jiān)視和調查新出現(xiàn)疾病和病原體，以及影響它們原因，必須建立和健全各級、各類疾病監(jiān)測系統(tǒng)。并從人員設備、技術能力等方面給予保障，以提升監(jiān)測新傳染病出現(xiàn)能力。1.3.3.加強新傳染病應用研究，將流行病學研究和試驗室研究相結合，以完善和優(yōu)化防治辦法。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第12頁包含內容：①改進試驗和流行病學研究技術，以快速判定新病原體和疾?。?/p>

②加緊診療試劑研制、核準和開發(fā)應用；

③擴大流行病學研究，說明新傳染病流行步驟、特征和原因；

④加強疫苗研制，開展疫苗效果和免疫費用-效益評價等等。1.3.4.制訂預防和控制新傳染病戰(zhàn)略，并確保實施。辦法應有：①促進相關公共衛(wèi)生信息交流；新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第13頁

②加強公共衛(wèi)生設施以支持疾病監(jiān)測和防治計劃實施；

③建立保障預防戰(zhàn)略實施所需機制與協(xié)作等。2.發(fā)覺新傳染病策略和方法

面對層出不窮新傳染病，及時發(fā)覺，及時識別是進行深入研究和做好防治工作前提?；仡櫄v史，許多新傳染病發(fā)覺即使細節(jié)不一樣，但識別標準及策略均相同。然而，伴隨科學技術進步其策略方法也在不停提升和發(fā)展。2.1.識別和確認新傳染病基本標準2.1.1.注意傳染病基本特征新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第14頁

確定一個新傳染病，必須符合傳染病基本特征。傳染病定義：傳染病是由病原微生物引發(fā)能在人、動物與動物或動物與人之間相互傳染疾病?；咎卣鳎?/p>

①傳染病致病因子是活病原微生物，任何傳染病都是由特異病原體所引發(fā)。病原體種類：細菌、病毒、立克次氏體、螺旋體、真菌、原蟲等。病原體在長久進化過程中適應了定居于新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第15頁人或其它宿主一定組織或器官。

環(huán)境條件所以，病原體宿主發(fā)病帶菌(毒)理論上，任何傳染病都應能確定其病原體。實際上，應用當代技術與方法，人類已知傳染病也大都明確了其病原體。同時說明傳染病病原體新技術與方法也取得了巨大進展。②傳染病能在宿主之間直接地或經(jīng)過媒介物相互傳輸，即有傳染性。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第16頁實際上，傳染病傳輸就是病原體更換宿主過程，即病原體自感染機體經(jīng)過適當途經(jīng)進入另一易感者體內造成感染過程。其必須條件有三個：傳染源、傳輸路徑、易感者。以上條件需同時存在、相互連接傳染病傳輸。所以傳染病含有許多不一樣于非傳染病流行病學特征，據(jù)此特征人們能夠識別一個疾病是否傳染病。2.1.2.新傳染病確實定新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第17頁新發(fā)覺傳染病定義：以前醫(yī)學文件中從未以像現(xiàn)在形式描述過傳染病。實際上可分為兩類：

一類是，作為疾病本身不論過去是否存在，但未被識別，近30年才被發(fā)覺并被確認為傳染病；另一類，疾病本身過去已被認識，但未被認為是傳染病，近30年來因發(fā)覺其病原體才被認為是傳染病。所以，據(jù)傳染病基本特征、結合人類確認傳染病歷史，確認一個疾病是否新傳染病新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第18頁應遵照以下基本標準：

①對于所觀察到疾病能確認為系一新疾病實體，并能證實其含有傳染性，即可認為是一新傳染病。

在特異病原體被發(fā)覺前，可據(jù)傳染性來確定。即先認識傳染病，再發(fā)覺病原體—天花、鼠疫、霍亂、結核、甲肝、乙肝等。近30年新發(fā)覺傳染病中有：丙肝、戊肝、萊姆病、軍團病、人歐利希氏體病等。另外，腎綜合征出血熱也算，這是因為其病原體是近30年才發(fā)覺確定，但該病實際上新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第19頁已經(jīng)有幾十年歷史。

②因為任何傳染病皆由其特異病原體所引起，所以,對于確認為新傳染病疾病應能并應當確定其特異病原體。此一條雖不是確定傳染病先決條件，但卻是傳染病定性終審一環(huán)。只有發(fā)覺了病原體，才算完成對傳染病定性認識，也才能深入研究傳染病特征和防治。

③對于已知非傳染病，當發(fā)覺其系由某特異病原體(已知或新發(fā)覺)所引發(fā)，并證實其有傳染性時，即可確定該病為新傳染病。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第20頁

近30年發(fā)覺新傳染病中，就有部分原認為是非傳染病。如：消化性潰瘍病，后發(fā)覺其特異病原體——幽門螺旋桿菌，并證實其能傳輸之后才確定為傳染病。該病過去未被認為是傳染病，原因是：其傳染性較不顯著，難以以傳染性來確定。2.1.3.確定傳染病病原體標準

19世紀80年代,郭霍氏提出了確定某一微生物為某種疾病病原體標準:

①經(jīng)過分離和純化培養(yǎng)能夠證實病原體在新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第21頁每個病例上都存在;

②在其它疾病病人體內沒有發(fā)覺該病原體;

③該病原體一旦被分離出后,必須能在動物中復制這種疾病;

④在所產生試驗疾病中必須能重新找到該病原體.。郭霍氏標準對于許多傳染病病原體確實認是適宜，但不完善,尤其是對那些無適宜敏感動物模型即在體外難于分離培養(yǎng)病原體來說,極難或不可能滿足上述標準。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第22頁因為任何疾病都是由某種或一些病因引發(fā)，而流行病學活動主要任務之一就是探索病因。為此在郭霍氏標準基礎上，流行病學家發(fā)展提升了推斷疾病病因或因果關系標準，主要有因果聯(lián)絡特異性、一致性、時間性、合理性、聯(lián)絡強度、劑量反應或生物學梯度以及試驗依據(jù)等。當代分子生物學技術發(fā)展，為探索和鑒定新微生物提供了新有較伎倆，尤其是那些在當前不能或難以經(jīng)過體外分離培養(yǎng)傳染病病原體發(fā)覺，而核酸分離及分析技術是新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第23頁唯一可應用方法。當前應用技術有：免疫cDNA文庫篩選法

RDA技術吞并引物PCR技術隨機肽庫篩選技術技術特點：詳細操作各不一樣，設法分離到病原體基因部分核酸片段是其共同點，分析其序列后，以標準基因游走技術取得病原體全基因序列。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第24頁2.2.發(fā)覺新傳染病策略

從新傳染病發(fā)覺史，可知每種新傳染病發(fā)覺都是由臨床醫(yī)生、微生物學家、免疫學家及流行病學家等學科人員從不一樣角度共同工作結果。其普遍規(guī)律性東西對指導更加快、更加好地發(fā)覺新傳染病疾病原體意義重大。2.2.1.依靠臨床醫(yī)生及疾病監(jiān)測系統(tǒng)發(fā)覺疾病生異常現(xiàn)象及原因不明疾病發(fā)生情況，并針對其建立專門疾病監(jiān)測系統(tǒng)，并開展流行病學調查研究，是發(fā)覺和確認新傳染病最主要新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第25頁路徑

機體患病看醫(yī)生原因不明現(xiàn)象,醫(yī)生應提升警覺，細心追蹤觀察、及時匯報。在此過程中，醫(yī)生應樹立發(fā)覺新傳染病意識；對診療不明疾病有刨根問底精神及良好業(yè)務素質；注意留存病人標本。完善及富有成效疾病監(jiān)測系統(tǒng)對于發(fā)覺新傳染病至關主要：首先，經(jīng)過已經(jīng)有疾病監(jiān)測系統(tǒng)可及時地發(fā)覺和搜集到疾病發(fā)生異常情況。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第26頁二是針對新認識疾病或疾病異常情況，經(jīng)過建立專門監(jiān)測系統(tǒng)，能較系統(tǒng)搜集到疾病發(fā)生情況信息。同時開展流行病學調查研究，以說明疾病流行特點、傳輸步驟、以確定是否為新傳染病。疾病監(jiān)測和流行病學調查在發(fā)覺和確認傳染病方面有獨特優(yōu)勢。許多新傳染病發(fā)覺和確認都利用了這一手段，如：艾滋病、萊姆病、軍團病、歐利希氏體病等。2.2.2.現(xiàn)場流行病學研究與試驗室研究相結合是新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第27頁發(fā)覺、確定新傳染病病原體及說明流行病學規(guī)律關鍵

流行病學是探討病因科學，就傳染病而言，流行病學調查能夠或可能確定傳染病發(fā)生危險原因,但不可能查出最終致病因子——病原體。必須借助學科：微生物學、免疫學、分子生物學等試驗研究伎倆來尋找病原體。反之，經(jīng)過試驗研究從病人或其它起源標本找到病原體，則必須經(jīng)過流行病學研究來確定二者之間因果關系。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第28頁所以，流調與試驗結合能夠相互補充不足，共同提升。

2.2.3.傳統(tǒng)微生物學技術與當代分子生物學方法相結合是發(fā)覺新傳染病病原體有效伎倆傳統(tǒng)發(fā)覺病原體方法：動物、培養(yǎng)基、細胞等從病人標本中分離培養(yǎng)出病原體，然后再應用微生物學、免疫學、生物化學及分子生物學等技術進行判定，并研究該病原體與疾病關系。過去對傳染病病原體發(fā)覺，近30年對新傳染病病原體發(fā)覺,大多是采取這種方法。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第29頁但有一些傳染病，因為病原體特征或其他原因極難或不可能以傳統(tǒng)方法來發(fā)覺病原體。如:20世紀70年代中期,非甲非乙型肝炎已被人們認識，據(jù)流調特點又認識到，有以血液傳輸為主非甲非乙型肝炎和經(jīng)消化道傳輸非甲非乙型肝炎二種。世界各地研究人員應用傳統(tǒng)方法一直在找二種肝炎病原體。因在人體中滴度很低等原因，一直未能分離出血液傳輸為主非甲非乙型肝炎，而消化道傳輸非甲非乙型肝炎又難以體外培養(yǎng)。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第30頁80年代當代分子生物學理論和技術飛躍發(fā)展為確定病原體提供了新策略和方法。即：從病人標本中直接提取病原體基因進行體外克隆和表示，獲取可能病原因子核酸及編碼蛋白，然后進行確定其病原特異性。美國學者Choo等首先采取這種策略研究輸血后非甲非乙型肝炎病原體。步驟：病人血清黑猩猩感染黑猩猩血清提取RNA反轉錄成cDNA克隆到gt11表示質粒構建cDNA表示文庫進行體外表示新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第31頁用輸血后非甲非乙型肝炎病人恢復期血清篩選。結果：最終從100萬個克隆子中篩選出一個陽性克隆，并以此部分為基礎，采取基因游走技術測定了丙型肝炎病毒全基因系列。90年Retes等用一樣方法克隆測定了腸道傳輸非甲非乙型肝炎病原全基因序列，完成了對戊型肝炎病毒發(fā)覺和確定。HCV、HEV發(fā)覺和判定策略、方法，是傳染病病原學研究中一個里程碑，為新傳染病病原體發(fā)覺和判定提供了新策略和路徑。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第32頁2.3發(fā)覺和確定新病原體分子生物學技術2.3.1.免疫cDNA文庫篩選法原理：傳染病人標本提取病原體核酸克隆到質粒或噬菌體載體中構建可表示外源核酸編碼蛋白cDNA文庫然后用病人血清抗體與cDNA文庫表示蛋白反應篩選陽性克隆對陽性克隆子中插入外源核酸作序列分析采用基因游走技術等方法克隆測定其全基因系列。2.3.2.RDA(representationaldifferenanalysis)技術是一個PCR與減數(shù)雜交相結合技術。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第33頁原理：用PCR技術從病人組織標本中提出基因片段（健康人體中不存在）提外擴增及減數(shù)雜交擴增出可能病原因子基因片段試驗判定以此基因再測得全基因序列。此法特點：要求條件高、困難多能從小量標本中高效富集目標基因，對未知病原體研究是一個有效實用方法。2.3.3.吞并引物PCR法(cosensussequencebasedPCR)與RDA技術不一樣，其原理：新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第34頁需先了解所要研究病原與其它相類似生物種類進化關系據(jù)類似生物基因序列以較為保守序列設計PCR引物對標本PCR擴增分析擴增片段序列以此為基礎研究可能病原體基因結構。此方法對于細菌及病毒性病原體較為適用2.3.4.隨機肽庫篩選法是近年發(fā)展起來一個新生物技術——蛋白質/多肽呈遞技術。基本原理及流程：利用隨機肽庫單克隆抗體進行對應蛋白質抗原表位分析應用多克隆抗體或新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第35頁病人血清抗體對隨機肽庫進行篩選研究抗原表位對原因不明傳染病,借助于隨機肽庫技術用已知病人血清抗體有可能篩選出未知病原體蛋白抗原表位從而建立檢測這種未知病原體傳染病診療方法。待確定經(jīng)典病例標本后，結合上述方法進行研究確定病原體。3.

幾個新傳染病在我國發(fā)覺與研究3.1.我國萊姆病發(fā)覺與研究萊姆病(Lymedisease)是1975年在美國康涅狄克州萊姆鎮(zhèn)地域首先被發(fā)覺和認識一個蜱傳新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第36頁螺旋體病。病原：伯氏疏螺旋體染病方式：硬蜱叮咬染病為主。受損器官：皮膚,心臟,神經(jīng)及關節(jié)等器官。臨床特征：皮膚損害(慢性游走性紅斑)、伴流感樣表現(xiàn)—早期。心臟、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀為主—中期。關節(jié)、精神癥狀為主—晚期各種多樣臨床表現(xiàn)。發(fā)病范圍:五大洲數(shù)十個國家已發(fā)覺有本病或自然疫源地存在。且發(fā)病率、感染率高,危害新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第37頁嚴重。3.1.1.萊姆病在我國發(fā)覺

1985年夏，艾承緒等在黑龍江林縣進行森林腦炎流行病學調查時，在林區(qū)居民中觀察到疑似早期萊姆病臨床表現(xiàn)—皮膚慢性游走性紅斑。為證實是否萊姆病，1986年夏，研究小組進行了以下調查：

①對某林場居民逐戶調查,發(fā)覺有慢性游走性紅斑、面神經(jīng)麻痹、腦膜炎等神經(jīng)系統(tǒng)異常，急慢性關節(jié)炎等疑似萊姆病臨床表現(xiàn)病人共計302例,罹患率19.2%,病人全部或大多有受蜱叮新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第38頁咬史，皮膚慢性游走性紅斑發(fā)病時間分布與居民蜱叮咬率時間分布相一致。

②以萊姆病螺旋體國際標準株B31制備抗原片，用間接免疫熒光技術(IFA)檢測21例面神經(jīng)麻痹病人血清或腦脊液，8例抗體陽性。

③以一例面神經(jīng)麻痹病人血清作抗體,采用IFA檢測98只全溝硬蜱中腸涂片,陽性率43%；④以蜱懸液接種小鼠，8天后活殺取小鼠肝、脾、腎等組織涂片,進行IFA檢測,觀察到螺旋體;新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第39頁

⑤以BSK培養(yǎng)基從21份神經(jīng)系統(tǒng)異常病人血清或腦脊液分離培養(yǎng)出3株螺旋體，經(jīng)多克隆及單克隆伯氏螺旋體抗體判定,證實為萊姆病螺旋體。以上工作從臨床、流行病學及病原學等方面發(fā)覺和證實了萊姆病在我國存在，從而大大推進了全國萊姆病調查研究工作。3.1.2.對我國萊姆病深入研究

在國家資助下開展了全國萊姆病進一步調查研究工作：新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第40頁

①我國萊姆病地理分布初步研究，從血清學和病原學證實黑龍江、新疆、吉林、內蒙、西藏、浙江、河南等地林區(qū)有本病疫源地和感染存在。

②對黑龍江及新疆萊姆病自然疫源地深入選點調查，說明了各疫源地媒介種類、構成，宿主種類、組成，人群感染率和發(fā)病率，以及媒介、宿主及人群之間相互作用等。

③對我國萊姆病螺旋體進行了較詳細病原學研究，包含：培養(yǎng)特征及培養(yǎng)基改進，形態(tài)及超微結構觀察,單克隆抗體研制和ELISA新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第41頁方法建立，試驗感染動物模型，結構蛋白及抗原蛋白分析等，明確了我國萊姆病類型及特征。3.2.我國戊型肝炎較早證實發(fā)覺與研究戊型肝炎又稱流行性非甲非乙型肝炎或腸道傳輸非甲非乙型肝炎，1980年始認識該病。本病常因飲用被污染水及食物而爆發(fā)流行，青壯年發(fā)病率及孕婦死亡率較高。

1990年該病病毒基因克隆成功，促使該新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第42頁病研究取快速進展。3.2.1.我國戊型肝炎較早發(fā)覺與證實

80年代中期，國內尚無戊型肝炎發(fā)生匯報，國家就開始資助意在發(fā)覺和證實我國戊型肝炎研究。當初該病無特異診療方法，只好據(jù)流行病學特征結合排除甲、乙型肝炎方法來進行。為此，在全國十幾個地域共同協(xié)作，收集肝炎暴發(fā)流行疫情信息，赴現(xiàn)場進行流行病學調查，采集標本，在試驗室進行排除甲新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第43頁、乙型肝炎感染標識檢測，從而證實了數(shù)起戊型肝炎或疑似戊型肝炎疫情。如：①對新疆托克遜縣南胡村82年發(fā)生一起以成人為主肝炎暴發(fā)疫情回顧性調查。結果提醒肝炎暴發(fā)疫情極可能為戊型肝炎所致。②對85年6月發(fā)生在山東文登縣小寨村一次聚餐而引發(fā)肝炎暴發(fā)疫情進行了調查，病人均為成人血檢測均無甲、乙型肝炎急性感染標識，據(jù)此認為是戊型肝炎。數(shù)年后經(jīng)特異性診療試劑檢測抗-HEV全為陽性.新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第44頁3.2.2.對我國戊型肝炎深入研究

86年以后，在我國新疆等地曾連續(xù)多年發(fā)生戊型肝炎流行，對疫區(qū)進行流行病學，并在試驗室用現(xiàn)場采集標本開展血清學及病原學研究，取得主要成績以下：①基本說明了戊型肝炎流行病學特征，尤其匯報了HEV感染無年紀差異，HE發(fā)病呈顯著年紀差異現(xiàn)象。②以病人潛伏期或急性期早期糞便感染恒河猴及傳代成功，表明恒河猴是HEV較理新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第45頁想試驗感染動物模型。③用人肝Hep-G2細胞從HE病人和試驗感染猴糞便分離培養(yǎng)出數(shù)株RNA病毒，經(jīng)判定為HEV。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第46頁3.3.我國丙型肝炎研究3.3.1.關于HCV感染流行病學3.3.2.關于HCV感染免疫應答規(guī)律新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第47頁4.幾個幾個新傳染病發(fā)覺與防治4.1.埃博拉出血熱發(fā)覺與防治埃博拉出血熱(EBOHF)病例1976年6-7月首次發(fā)覺于非洲扎伊爾西南部和蘇丹南部。當初不了解其起因，發(fā)病突然，病死率很高，受到WHO重視，并派調查組到流行地域進行了流行病學、血清學和病原學調查。結論：暴發(fā)流行、高病死率出血性疾病，傳染性強。將病人急性期血和組織標本，接種于非新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第48頁洲綠腎細胞猴(Vero),3天后細胞顯著病變。電鏡、血清學及免疫熒光檢測證實為一種新病毒(屬絲狀病毒)，是引發(fā)扎伊爾和蘇丹兩地出血性疾病病原體。因該病毒是從埃博拉小河附近村莊一位病人首次分離到，而原始起源不清，故被比利時和英國科學家命名為埃博拉病毒（Ebolavirus）。4.1.1.病原學新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第49頁4.2.漢灘病毒肺綜合征

1993年5月在美國西南部暴發(fā)了一個以呼吸衰竭、休克、病死率高為主要特征發(fā)燒性疾病。檢驗結果未發(fā)覺這種疾病與當初已知全部病原體相關，但病人血清與漢灘病毒存在交叉反應。隨病例增加，研究人員排除了除草劑、新流感等其它可能病因，免疫組化、RT-PCR分析，發(fā)覺該病與一個未認識漢灘病毒有關。新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第50頁因嚙齒動物是漢灘病毒主要宿主，所以，在病人室外捕捉大量嚙齒動物，其中鹿鼠將近二分之一，深入研究發(fā)覺該鼠是一個新漢灘病毒主要宿主。病例對照研究證實：該疾病與鼠類親密相關。1993年11月，終于從病人住處捕捉鼠組織中成功分離到病毒，并證實該病毒為一種新漢灘病毒，故該病被命名為：漢灘病毒肺綜合征（Hantaviruspulmonarysyndrome,HPS).新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治第51頁一、病原學

HPS病原體基因組RNA與其它漢灘病毒相同。RT-PCR分析表明，其核酸序列與已知漢灘病毒最少相差30%，說明HPS病毒是漢灘病毒屬新組員。該病毒變異比較大，同一病毒，不一樣地域毒株基因組差異可高達14%