動物細胞工程復習課件公開課一等獎課件省課獲獎課件

動物細胞工程專項第1頁動物細胞培養(yǎng)第2頁10代細胞細胞懸浮液動物胚胎或幼齡動物組織、器官胰蛋白酶剪碎細胞貼壁部分細胞“癌變”，遺傳物質變化，無限傳代50代細胞傳代培養(yǎng)剝離、分瓶細胞株細胞細胞系1、過程：胰蛋白酶、分瓶原代培養(yǎng)第3頁幾個有關概念：原代培養(yǎng)：從機體取出后立即培養(yǎng)細胞為原代細胞。傳代培養(yǎng)：將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。第4頁細胞株：原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數細胞存活到40~50代，這種傳代細胞為細胞株。細胞系：細胞株傳代至50代后又出現細胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質變化，使其在培養(yǎng)條件下能夠無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。細胞株和細胞系區(qū)分：細胞系遺傳物質變化，具有癌細胞特點，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。第5頁1）無菌、無毒：

2）所有營養(yǎng)物質：

3）合適溫度和PH值：

4）必要氣體條件：（添加一定量抗生素，定期更換培養(yǎng)液）（葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等。）確保細胞順利生長增殖36.5+（-）0.5度,7.2-7.4O2和CO2（95%空氣和5%CO2）2、條件：維持培養(yǎng)液PH第6頁

3、應用：大規(guī)模培養(yǎng)生產生物制品（病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體）作為基因工程中受體細胞培養(yǎng)動物細胞能夠用于檢測有毒物質，判斷某種物質毒性用于生理、病理、藥理等方面研究，為治療和預防疾病提供理論根據第7頁核移植技術和克隆動物第8頁

1.概念：將動物一種細胞細胞核，移入一種已經去掉細胞核卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一種新胚胎，這個新胚胎最后發(fā)育成動物個體。用核移植辦法得到動物稱為克隆動物原理：動物體細胞核全能性。第9頁取供體細胞取卵母細胞

供體細胞培養(yǎng)培養(yǎng)到MⅡ中期

卵母細胞去核

供體細胞注入去核卵母細胞

供體核進入受體卵母細胞

重組胚胎

代孕母牛

生出與供體遺傳物質基本相同個體2.過程：第10頁3.克隆動物研究意義：1）克隆動物作為生物反應器，生產醫(yī)用蛋白2）改良動物品種3）治療人類疾病，作為供體4）保護瀕危動物4．體細胞核移植技術存在問題：1）許多克隆動物體現出遺傳和生理缺陷。2）成功率非常低及克隆動物食品安全性問題。第11頁動物細胞融合第12頁1.過程：動物細胞A動物細胞B誘導，融合2個完整雜交細胞AB有絲分裂（膜融合、質融合）（核融合）注意：

動物細胞融合也需要把多種兩種細胞放在一起，讓它們隨機融合后，再從中篩選雜交細胞第13頁2.意義：

突破了有性雜交辦法局限，使遠緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）成為也許。3.應用：成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等主要伎倆，尤其是利用雜交瘤技術制造單克隆抗體。第14頁植物體細胞雜交和動物細胞融合比較比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合原理融合前處理誘導措施細胞膜流動性、植物細胞全能性細胞膜流動性、細胞增殖用纖維素酶、果膠酶去壁用胰蛋白酶使細胞分散物理法:離心、振動、電激化學法：聚乙二醇物理法:離心、振動、電激化學法：聚乙二醇生物法：滅活病毒第15頁細胞工程植物體細胞雜交動物細胞融合誘導過程原生質體制備（酶解法）原生質體融合（物、化）雜種細胞篩選和培養(yǎng)雜種植株誘導與判定正常小鼠免疫處理動物細胞融合（物、化、生）雜交瘤細胞篩選與培養(yǎng)專一抗體檢查陽性細胞培養(yǎng)單克隆抗體提純成果獲取雜種植株取得雜交細胞，以生產細胞產品用途和意義克服遠緣雜交不親和障礙，大大擴展雜交親本組合范圍應用：白菜-甘藍雜種植株（1）制備單克隆抗體（2）診斷、治療、預防疾病，例如“生物導彈”治療癌癥第16頁單克隆抗體第17頁1.單克隆抗體制備過程誘導其融合辦法有哪些？融合后培養(yǎng)液中有幾個細胞如何篩選出雜交瘤細胞，雜交瘤細胞有何長處注射抗原目標是什么為何要進行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，數次篩選大量增殖雜交瘤細胞取得單克隆抗體辦法第18頁2.單克隆抗體應用：１）作為診斷試劑：精確識別多種抗原物質，并與抗原特異性結合2）用于運載藥品：制成“生物導彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療長處：精確、高效、簡易、迅速單克隆抗體長處：特異性強、敏捷度高、可大量制備。長處:療效高、毒副作用小第19頁1.下列哪—項屬于克?。ǎ〢．將雞某個DNA片段整合到小鼠DNA分子中B．將抗藥菌某基因引入草履蟲細胞內C．將鼠骨髓瘤細胞與經免疫脾細胞融合成雜交瘤細胞D．將某腫瘤細胞在體外培養(yǎng)繁殖成一種細胞系DC

課堂練習2、動物細胞融合和植物體細胞雜交比較中，正確是（）①誘導融合辦法完全相同②所用技術伎倆不相同③所采取原理完全相同④都能形成雜種細胞A.①② B.①③C.②④ D.③④3、下列圖是單克隆抗體制備過程圖，1過程注射物質和A細胞名稱為()A、抗體、T淋巴細胞 B、抗原、T淋巴細胞C、抗體、B淋巴細胞 D、抗原、漿細胞D第20頁

類型比較基因工程育種細胞工程育種植物組織培養(yǎng)育種植物體細胞雜交育種動物細胞核移植育種長處目標性強，能夠按照人們意愿定向改造生物；育種周期短。迅速繁殖、培育無病毒植株等克服遠緣雜交不親和障礙，培育出作物新品種。迅速繁殖優(yōu)良品種，保存瀕危物種，有選擇地繁殖某性別動物。缺陷技術復雜，存在安全性問題。