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關(guān)于交叉配血試驗(yàn)臨床應(yīng)用第1頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三交叉配血試驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?、?shí)驗(yàn)原理三、實(shí)驗(yàn)步驟四、方法學(xué)局限性五、臨床意義六、臨床新進(jìn)展第2頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆漳郯方徊媾溲囼?yàn)的原理、方法、
結(jié)果判讀熟悉交叉配血試驗(yàn)的臨床意義第3頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)原理
交叉配血試驗(yàn)分兩管:
主側(cè):受血者血清+供血者紅細(xì)胞次側(cè):供血者血清+受血者紅細(xì)胞
第4頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)原理
紅細(xì)胞表面帶有大量的負(fù)電荷,懸浮在電解質(zhì)溶液中,會(huì)吸引大量陽(yáng)離子,紅細(xì)胞則被擴(kuò)散的雙層離子云所圍繞,形成zeta電位。第5頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)原理凝聚胺技術(shù)首先利用低離子溶液(LIM)降低介質(zhì)的離子強(qiáng)度,減少紅細(xì)胞周圍的電子云,如有紅細(xì)胞抗原相應(yīng)的血清抗體存在,則可促進(jìn)紅細(xì)胞抗原與血清抗體的特異結(jié)合。第6頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)原理再加入凝聚胺溶液,溶解后產(chǎn)生很多正電荷,中和紅細(xì)胞表面帶有的負(fù)電荷,紅細(xì)胞zeta電位降低,縮短紅細(xì)胞距離,無(wú)論是否有紅細(xì)胞抗原相應(yīng)的血清抗體存在,主、次側(cè)管均可產(chǎn)生非特異性聚集。第7頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)原理最后加入懸浮液,具有中和凝聚胺陽(yáng)離子的作用,使正常紅細(xì)胞的非特異性凝集散開,紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)血清抗體的特異性凝集仍然存在。第8頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)步驟一、取出供血者血漿及紅細(xì)胞,并將冰凍血漿放入37℃溫箱解凍15分鐘。
第9頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)步驟二、受血者抗凝全血標(biāo)本離心備用
3000r/min,5min第10頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)步驟三、將受血者血漿2滴加入主側(cè)管,紅細(xì)胞1滴加入次側(cè)管
第11頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)步驟四、剪下供血者血袋上的血辮,將供血者紅細(xì)胞1滴加入主側(cè)管,血漿2滴加入次側(cè)管
第12頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)步驟五、在主次側(cè)各加入低離子溶液各0.65毫升,混合均勻。第13頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)步驟六、在主、次側(cè)管分別加入2滴凝聚胺溶液,混勻后3400r/min離心10秒,棄去上清,觀察紅細(xì)胞的非特異凝集現(xiàn)象。棄上清第14頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)步驟七、最后各加入懸浮液2滴,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)試管混勻并觀察結(jié)果。第15頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)步驟八、如果在60秒內(nèi),主、側(cè)管凝集均散開,說(shuō)明是由凝聚胺溶液引起的非特異性凝集,配血相合。第16頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)步驟九、如果凝集不散開,則為紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng),配血結(jié)果不相合,如有疑問(wèn),可進(jìn)一步鏡檢確認(rèn)。第17頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)步驟十、同時(shí)對(duì)受血者ABO和RH血型使用玻片法進(jìn)行復(fù)查。第18頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三實(shí)驗(yàn)步驟十一、對(duì)受血者ABO和RH血型使用玻片法進(jìn)行復(fù)查。第19頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三臨床意義一、保證輸血安全二、發(fā)現(xiàn)亞型和不規(guī)則抗體
第20頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三方法學(xué)局限性對(duì)罕見不規(guī)則抗體抗K敏感性低!第21頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三臨床新進(jìn)展流式細(xì)胞術(shù)基因分型技術(shù)卡式微柱凝膠法第22頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三卡式微柱凝膠法第23頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日,星期三卡式微柱凝膠法第24頁(yè),講稿共26頁(yè),2023年5月2日
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