實(shí)驗(yàn)六血細(xì)胞計(jì)數(shù)及血涂片制作

實(shí)驗(yàn)六血細(xì)胞計(jì)數(shù)及血涂片制作第1頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四血細(xì)胞計(jì)數(shù)1．熟悉并清洗計(jì)數(shù)板和蓋玻片2．稀釋血液：

血樣采集：兔耳緣靜脈采血血樣抗凝：肝素鈉抗凝血樣稀釋?zhuān)喝缦碌?頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四實(shí)驗(yàn)操作

紅細(xì)胞稀釋液：生理鹽水白細(xì)胞稀釋液：冰醋酸(鹽酸)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)：0.9%NaCl1.99mL+0.01mL血，稀釋200倍白細(xì)胞計(jì)數(shù)：1%HCL0.38mL+0.02mL血，稀釋20倍3．充池：（混勻，從中間取）4．靜置計(jì)數(shù)板2min5．計(jì)數(shù)6．計(jì)數(shù)原則：數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右7.計(jì)算：紅細(xì)胞數(shù)/L=N*50*106*200=N*1010

白細(xì)胞數(shù)/L=N/4*10*20*106=N*5*107第3頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四血細(xì)胞計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)板第4頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第5頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第6頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第7頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第8頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第9頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第10頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四保證計(jì)數(shù)板和蓋玻片清潔；以防影響計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。一次完成充池，如充池過(guò)少、過(guò)多、有氣泡或出現(xiàn)任何碎片，應(yīng)拭凈計(jì)數(shù)板及蓋玻片后重新操作。充池后平放計(jì)數(shù)板，不能移動(dòng)蓋玻片。計(jì)數(shù)板中細(xì)胞如果嚴(yán)重分布不均，應(yīng)重新充池計(jì)數(shù)。凡壓線(xiàn)的細(xì)胞應(yīng)按照數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右的原則，避免漏數(shù)或重復(fù)計(jì)數(shù)。注意事項(xiàng)第11頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四血細(xì)胞的分類(lèi)與計(jì)數(shù)第12頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四血液涂片的制備1、每份樣本制作3張血涂片。要求所用玻片清潔、干燥、無(wú)塵，大小為25mm×75mm，厚度為0.8～1.2mm。并有明確標(biāo)記。如果樣本中白細(xì)胞數(shù)量少時(shí)，需要制備更多血涂片（如6張）。2、使用EDTA－K2抗凝血液樣本時(shí)，應(yīng)在采集后4小時(shí)內(nèi)制備血涂片。在制片前，樣本應(yīng)充分混勻。注意，樣本不能冷藏。3、用楔形技術(shù)制備血涂片。在玻片近一端1/3處，加一滴（約0.05ml）充分混勻的血液，握住另一張較狹窄的、邊緣光滑的推片，以30o～45o角使血滴沿推片迅速散開(kāi)，快速、平穩(wěn)地推動(dòng)推片至玻片的另一端。4、在1小時(shí)內(nèi)，用染液染色；或在1小時(shí)內(nèi)，用無(wú)水甲醇（含水量﹤3%）固定后染色。第13頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四推片技巧

推片傾斜45°±1，推成血膜長(zhǎng)度25～35mm，寬度18～20mm，血膜四周留有空隙區(qū)，血膜終尾離玻片終端至少10mm，血膜均勻，薄如蟬翼，尾端形如弧狀，迅速扇（搖）干，血膜具有頭、體、尾不同厚薄區(qū)域。此外，涂片時(shí)，還要考慮患者的血液狀態(tài)，如貧血程度、血液粘稠度、WBC或有核細(xì)胞多少等因素，調(diào)整推片技巧。第14頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第15頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第16頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第17頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四血膜至玻片邊緣約5mm血膜至玻片一端約為總長(zhǎng)1/3血涂片頭部，涂片厚血涂片體部的檢查區(qū)域血涂片尾部，涂片太薄第18頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第19頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四染色步驟取新鮮血液涂片，晾干；加劉A溶液（覆蓋血涂片為宜），染色30s；加劉B溶液于A液上（約為A的2倍），以洗耳球吹出微風(fēng)，使液面產(chǎn)生漣漪，染色30s-1min；水洗，干燥，鏡檢；第20頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第21頁(yè)，共25頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第22頁(yè)，共25頁(yè)，2