蛋白質(zhì)的合成專家講座

第十四章蛋白質(zhì)合成ProteinSynthesis蛋白質(zhì)的合成專家講座第1頁一、蛋白質(zhì)合成體系二、蛋白質(zhì)生物合成三、蛋白質(zhì)定位蛋白質(zhì)的合成專家講座第2頁一、蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)（一）mRNA（二）遺傳密碼（三）tRNA結(jié)構(gòu)與功效（四）核糖體蛋白質(zhì)的合成專家講座第3頁（一）mRNA原核細(xì)胞每個(gè)mRNA分子常帶有多個(gè)功效相關(guān)蛋白質(zhì)編碼信息，以一個(gè)多順反子形式排列，在翻譯過程中可同時(shí)合成幾個(gè)蛋白質(zhì)；真核細(xì)胞每個(gè)mRNA普通只帶一個(gè)蛋白質(zhì)編碼信息，是單順反子形式。蛋白質(zhì)的合成專家講座第4頁真核生物mRNA結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的合成專家講座第5頁不一樣蛋白質(zhì)有各自不一樣mRNA，mRNA除含有編碼區(qū)外，兩端還有非編碼區(qū)。非編碼區(qū)對(duì)于mRNA模板活性是必需，尤其是5'-端非編碼區(qū)在蛋白質(zhì)合成中可能是與核糖體結(jié)合部位。蛋白質(zhì)的合成專家講座第6頁（二）遺傳密碼遺傳密碼（Geneticcode）：mRNA中蘊(yùn)藏遺傳信息堿基次序。1954年物理學(xué)家Gamov首先對(duì)遺傳密碼進(jìn)行探討。提出不可能是一個(gè)堿基或兩個(gè)堿基決定一個(gè)氨基酸（41＝4，42＝16），假如用三個(gè)堿基決定一個(gè)氨基酸，43＝64，就足以編碼20種氨基酸。密碼子應(yīng)是三聯(lián)體（triplet）。1.遺傳密碼概念蛋白質(zhì)的合成專家講座第7頁1961年Crick證實(shí)三聯(lián)體密碼子學(xué)說是正確；且非重合、連續(xù)編碼無標(biāo)點(diǎn)。mRNA分子上以5'→3'方向，從AUG開始每三個(gè)連續(xù)核苷酸（三聯(lián)體）組成一個(gè)密碼子(codon)。mRNA中4種堿基能夠組成64種密碼子。這些密碼代表了20種氨基酸，同時(shí)決定了翻譯過程起始與終止位置。每種氨基酸最少有一個(gè)密碼子，最多有6種密碼子。經(jīng)過遺傳學(xué)和生物化學(xué)試驗(yàn)，1966年編排出了遺傳密碼字典。蛋白質(zhì)的合成專家講座第8頁（1）均聚核苷酸指導(dǎo)均聚肽合成首先，polyU作為模板，加入體外無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)中。將翻譯產(chǎn)物分析后，發(fā)覺合成肽鏈中氨基酸殘基全部是Phe。確認(rèn)了第一個(gè)Phe密碼子（UUU）。接著，polyA和polyC證實(shí)是polyLys和polyPro。確定了AAA是Lys密碼子，CCC是pro密碼子。2.遺傳密碼破譯蛋白質(zhì)的合成專家講座第9頁以A和C原料合成polyAC。polyAC含有8種不一樣密碼子：CCC、CCA、CAA、AAA、AAC、ACC、ACA和CAC。試驗(yàn)中AC共聚物作模板翻譯出肽鏈由6種氨基酸組成，即Asp、His、Thr、Pro和Lys。依據(jù)共聚物成份不一樣百分比和翻譯產(chǎn)物中氨基酸百分比亦不一樣關(guān)系，不能確定A和C排列方式。

（2）特定共聚核苷酸蛋白質(zhì)的合成專家講座第10頁

在缺乏蛋白質(zhì)合成所需因子條件下，特異aa-tRNA可與核糖體-mRNA復(fù)合物結(jié)合。它并不一定需要長mRNA分子，三核苷酸就能夠與核糖體結(jié)合。（3）核糖體結(jié)合技術(shù)蛋白質(zhì)的合成專家講座第11頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第12頁遺傳密碼字典蛋白質(zhì)的合成專家講座第13頁3.密碼基本性質(zhì)（1）每個(gè)密碼子三聯(lián)體(triplet)決定一個(gè)氨基酸性質(zhì)相近氨基酸密碼子排列較近，這有利于在基因突變時(shí)不會(huì)引發(fā)蛋白質(zhì)功效改變。（2）兩個(gè)密碼子之間無任何核苷酸或其它成份加以分隔，即密碼子間無逗號(hào)所以從起始碼AUG開始，三個(gè)堿基代表一個(gè)氨基酸，從mRNA5'→3'方向組成一個(gè)連續(xù)讀框，直至終止碼。假如在讀框中間插入或缺失一個(gè)堿基就會(huì)造成移碼突變，引發(fā)突變位點(diǎn)下游氨基排列錯(cuò)誤。蛋白質(zhì)的合成專家講座第14頁AUG是起始密碼子，也是Met（或者fMet）密碼子。原核和真核生物肽鏈合成第一個(gè)氨基酸都是Met（或者fMet）；少數(shù)細(xì)菌中也用GUG做為起始碼（起始位點(diǎn)編碼fMet，密碼表中編碼Val）；真核生物偶然也用CUG作起始蛋氨酸密碼。密碼子UAA，UAG，UGA是肽鏈成終止密碼，不代表任何氨基酸，也稱無意義密碼子。（3）起始密碼子和終止密碼子蛋白質(zhì)的合成專家講座第15頁

簡并性：一個(gè)氨基酸有幾個(gè)密碼子現(xiàn)象。在64組密碼子中，除UAA、UAG和UGA三組為終止密碼子外，有61組密碼子分別代表20種氨基酸，出Met和Trp只有1個(gè)密碼子外，其它氨基酸都有好幾組密碼子。編碼同一個(gè)氨基酸密碼子稱為同義密碼子。這種現(xiàn)象稱為密碼子簡并性。同義密碼子存在降低了因?yàn)閴A基取代造成有害突變。另外，不一樣生物對(duì)同義密碼子使用頻率可能有不一樣選擇，在進(jìn)行基因工程操作時(shí)應(yīng)考慮選擇最有效密碼子（也稱偏愛密碼子）。（4）密碼子有簡并性(degeneracy)

蛋白質(zhì)的合成專家講座第16頁通用性：即不論是病毒、原核生物還是真核生物密碼子含義都是相同。但真核線粒體密碼子有例外：線粒體中UGA不是終止密碼子，而編碼Trp。肽鏈內(nèi)Met由AUG和AUA二個(gè)密碼子編碼，起始部位Met由AUG、AUA、AUU和AGG均可編碼；AGA和AGG不是Arg密碼子，而是終止密碼子，即UAA、UAG、AGA和AGG均為終止密碼子。

（5）密碼子通用性蛋白質(zhì)的合成專家講座第17頁（6）密碼與反密碼子相互

識(shí)別——變偶性tRNA上反密碼子（anticodon）與mRNA密碼子配對(duì)時(shí)，密碼子第一位、第二位堿基配對(duì)是嚴(yán)格，第三位能夠有一定變動(dòng)。即：普通是反密碼子5'-端堿基與密碼子3'-端堿基非正規(guī)配對(duì)，但能使正確氨基酸進(jìn)入非正確密碼子現(xiàn)象稱為變偶性。蛋白質(zhì)的合成專家講座第18頁“擺動(dòng)假說”認(rèn)為：堿基間除標(biāo)準(zhǔn)配對(duì)外，還能夠有非標(biāo)準(zhǔn)配對(duì)。蛋白質(zhì)的合成專家講座第19頁（三）tRNA結(jié)構(gòu)與功效在蛋白質(zhì)生物合成過程中，tRNA主要起轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸作用。蛋白質(zhì)生物合成需要一整套tRNA將各種氨基酸按照mRNA上密碼子所決定次序轉(zhuǎn)運(yùn)到核糖體上。在蛋白質(zhì)生物合成過程中，特異識(shí)別mRNA上起始密碼子tRNA被稱為起始tRNA，它們參加多肽鏈合成起始；在多肽鏈延伸中運(yùn)載氨基酸t(yī)RNA，稱為延伸tRNA。蛋白質(zhì)的合成專家講座第20頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第21頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第22頁通常將tRNA所轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸標(biāo)在右上角，如tRNACys表示轉(zhuǎn)運(yùn)CystRNA。原核細(xì)胞內(nèi)約有60種不一樣tRNA，真原核細(xì)胞內(nèi)則多達(dá)100-120種。運(yùn)輸同一個(gè)氨基酸不一樣tRNA稱為同工受體tRNA。蛋氨酸雖只有一組密碼子（AUG）卻最少有兩種tRNA，一個(gè)負(fù)責(zé)將運(yùn)到肽鏈中間，用tRNAmMet表示；另一個(gè)攜帶甲酰蛋氨酰參加蛋白質(zhì)合成起始，用tRNAfMet表示；真核細(xì)胞起始tRNA表示為tRNAiMet，攜帶甲酰蛋氨酰參加起始作用，用于肽鏈延伸則表示為tRNAMet。蛋白質(zhì)的合成專家講座第23頁1.tRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)蛋白質(zhì)的合成專家講座第24頁（1）3'端含CCA-OH序列氨基酸接在腺苷酸殘基(A)上，CCA-OH序列稱為氨基酸接收臂(aminoacidacceptorarm)。3'-端第5~11位核苷酸與5'-端第1~7位核苷酸形成螺旋區(qū)，稱為氨基酸接收莖(aminoacidacceptorstem)。蛋白質(zhì)的合成專家講座第25頁（2）TψC環(huán)；TψC環(huán)由7個(gè)堿基組成，參加tRNA與核糖體表面結(jié)合。（3）額外環(huán)或可變環(huán)(extrovariableloop)。堿基種類和數(shù)量（3~18個(gè)堿基）高度可變，并富含稀有堿基。（4）反密碼子環(huán)(anti-cordonloop)。由7個(gè)堿基組成，處于中間位3個(gè)堿基為反密碼子。反密碼子可與mRNA中密碼子結(jié)合。毗鄰反密碼子3'端堿基往往為烷化修飾嘌呤，其5'端為U，即：U-反密碼子-修飾嘌呤。

蛋白質(zhì)的合成專家講座第26頁（5）二氫尿嘧啶環(huán)(D-loop)由8~12個(gè)堿基組成，含有2±1個(gè)修飾堿基(D)。（6）TψC環(huán)、反密碼子環(huán)和二氫尿嘧啶分別連接在由4~5個(gè)堿基組成螺旋區(qū)上，依次稱為TψC莖，反密碼子莖和二氫尿嘧啶莖。15~16個(gè)固定堿基幾乎全部位于這些環(huán)上。

蛋白質(zhì)的合成專家講座第27頁（三）核糖體核糖體(ribosome，核蛋白體）是由rRNA和蛋白質(zhì)組成亞細(xì)胞顆粒，位于胞漿內(nèi)。一類核糖體附著于粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，參加分泌性蛋白質(zhì)合成。一類游離于胞漿，參加細(xì)胞固有蛋白質(zhì)合成。蛋白質(zhì)的合成專家講座第28頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第29頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第30頁1.rRNA組成核糖體rRNA為單股鏈，可自行折疊形成螺旋區(qū)和環(huán)區(qū)，全部螺旋區(qū)堿基都是保守。全部起源rRNA均能形成4個(gè)結(jié)構(gòu)域(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ)，每個(gè)結(jié)構(gòu)域均含許多莖和環(huán)，它們經(jīng)過堿基正確相互反應(yīng)彼此靠近；絕大多數(shù)rRNA堿基特異功效尚不清楚。蛋白質(zhì)的合成專家講座第31頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第32頁2.蛋白質(zhì)大多數(shù)蛋白呈纖維狀，只有少數(shù)呈球狀。蛋白質(zhì)的合成專家講座第33頁3.核糖體結(jié)構(gòu)模型蛋白質(zhì)的合成專家講座第34頁4.核糖體結(jié)合位點(diǎn)（1）mRNA結(jié)合位點(diǎn)：位于30s小亞基頭部，負(fù)責(zé)與mRNA結(jié)合，尤其是16srRNA3'-端與mRNAAUG之前一段序列互補(bǔ)是這種結(jié)合必不可少。蛋白質(zhì)的合成專家講座第35頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第36頁（2）A位點(diǎn)：（Aminoacyl-tRNAsite）是結(jié)合新進(jìn)入氨基酰-tRNA位置。即氨基酰-tRNA位或受位。它大部分位于大亞基，而小部分位于小亞基，（3）P位點(diǎn)：（peptidyl-tRNAsite）是結(jié)合起始tRNA并向A位給出氨基酸位置。又稱肽?；?tRNA位或給位。它大部分位于小亞基，小部分位于大亞基。蛋白質(zhì)的合成專家講座第37頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第38頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第39頁5.多核糖體（Polysomes）原核生物翻譯和轉(zhuǎn)錄是相偶連蛋白質(zhì)的合成專家講座第40頁由一個(gè)分子與一定數(shù)目標(biāo)單個(gè)核糖體結(jié)合形成多核糖體，每個(gè)多核糖體獨(dú)立完成一條多肽鏈合成，極大提升了翻譯效率。蛋白質(zhì)的合成專家講座第41頁多核糖體正處于工作狀態(tài)，游離單核糖體則是貯備狀態(tài)，核糖體亞基是剛從mRNA上釋放，核糖體在這三種狀態(tài)之間轉(zhuǎn)換稱為核糖體循環(huán)。蛋白質(zhì)的合成專家講座第42頁二、蛋白質(zhì)生物合成蛋白質(zhì)生合成（翻譯，Translation）是把mRNA分子中堿基排列次序轉(zhuǎn)變?yōu)榈鞍踪|(zhì)中氨基酸排列次序過程。參加蛋白質(zhì)生物合成成份最少有200種，主要由mRNA、tRNA、核糖體以及相關(guān)酶和蛋白因子組成。蛋白質(zhì)的合成專家講座第43頁蛋白質(zhì)是由20種氨基酸合成。一些蛋白質(zhì)中含有羥脯氨酸、羥賴氨酸、γ-羧基谷氨酸等，都是在肽鏈合成后加工修飾過程中形成。氨基酸在核糖體上縮合成多肽鏈?zhǔn)墙?jīng)過核糖體循環(huán)而實(shí)現(xiàn)。此循環(huán)可分為肽鏈合成起始(initiation)，肽鏈延伸(elongation)和肽鏈合成終止(termination)三個(gè)過程。蛋白質(zhì)的合成專家講座第44頁1.氨基酸激活與氨酰-tRNA合成在蛋白質(zhì)生物合成中，各種氨基酸在參入肽鏈之前必須先經(jīng)活化，然后再由其特異tRNA攜帶至核糖體上，才能以mRNA為模板縮合成肽鏈。氨基酸活化后與對(duì)應(yīng)tRNA結(jié)合反應(yīng)，是由特異氨酰tRNA合成酶催化。蛋白質(zhì)的合成專家講座第45頁每種氨基酸都只有一個(gè)氨酰tRNA合成酶(aaRS)。所以細(xì)胞內(nèi)有20種氨酰tRNA合成酶。aaRS含有高度特異性，它既能識(shí)別特異氨基酸，又能識(shí)別攜帶該氨基酸特異tRNA。aaRS對(duì)氨基酸有嚴(yán)格特異性，而對(duì)與此氨基酸相適應(yīng)數(shù)種同工tRNA則無嚴(yán)格特異性。蛋白質(zhì)的合成專家講座第46頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第47頁原核生物先合成此物質(zhì)甲酰蛋氨酰-tRNA蛋白質(zhì)的合成專家講座第48頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第49頁2.肽鏈合成起始（1）三元復(fù)合物(trimercomplex)形成在起始因子3(IF3)介導(dǎo)和IF-1促進(jìn)下，核糖體30S小亞基附著于mRNA起始信號(hào)部位，形成IF3-30S亞基-mRNA三元復(fù)合物。蛋白質(zhì)的合成專家講座第50頁mRNA上位于AUG上游8~13個(gè)核苷酸處有一短SD序列（Shine-Dalgarno，核糖體結(jié)合序列），它與30S小亞基16SrRNA3'端部分序列互補(bǔ)，是核糖體結(jié)合位點(diǎn)。SD序列可使核糖體選擇mRNA上AUG正確位置起始肽鏈合成。蛋白質(zhì)的合成專家講座第51頁（2）30S前起始復(fù)合物形成在IF2作用下，fMet-tRNAMet與mRNA分子中起始密碼子(AUG或GUG)相結(jié)合（密碼子與反密碼子反應(yīng)）。同時(shí)IF3從三元復(fù)合物脫落，形成30S前起始復(fù)合物：IF2-30S亞基-mRNA-fMet-tRNAMet復(fù)合物。蛋白質(zhì)的合成專家講座第52頁（3）70S起始復(fù)合物形成50S亞基與30S前起始復(fù)合物結(jié)合，同時(shí)IF2脫落，形成70S起始復(fù)合物：30S亞基-mRNA-50S亞基-fMet-tRNAMet復(fù)合物。蛋白質(zhì)的合成專家講座第53頁起始蛋白質(zhì)的合成專家講座第54頁2.肽鏈延長肽鏈延長包含：進(jìn)位、肽鍵形成、脫落和移位等過程。肽鏈合成延長需兩種延長因子(Elongationfactor，EF）EF-T和EF-G以及GTP供能。蛋白質(zhì)的合成專家講座第55頁（1）進(jìn)位在GTP、EF-T等參加下，新氨酰-tRNA進(jìn)入50S大亞基A位，并與mRNA分子上對(duì)應(yīng)密碼子結(jié)合。（2）肽鍵形成在大亞基上肽酰轉(zhuǎn)移酶催化下，P位點(diǎn)上tRNA攜帶甲酰蛋氨?；?或肽?；?轉(zhuǎn)移給A位上新進(jìn)入氨基酰-tRNA氨基酸，即P位上氨基酸(或肽3'端氨基酸)α-COOH基，與A位上氨基酸α-NH2基形成肽鏈。蛋白質(zhì)的合成專家講座第56頁（3）脫落并移位在EF-G和GTP作用下，核糖體沿mRNA鏈(5'→3')相對(duì)移動(dòng)。每次移動(dòng)相當(dāng)于一個(gè)密碼子距離，使下一個(gè)密碼子能準(zhǔn)確定位于A位點(diǎn)。原來處于A位點(diǎn)上二肽酰tRNA轉(zhuǎn)移到P位點(diǎn)上，空出A位點(diǎn)。蛋白質(zhì)的合成專家講座第57頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第58頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第59頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第60頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第61頁隨即再依次進(jìn)位、肽鍵形成、脫落和移位進(jìn)行下一循環(huán)。延長過程每重復(fù)一次，肽鏈延伸一個(gè)氨基酸殘基，屢次重復(fù)使肽鏈增加到必要長度。肽鏈延伸是從N端開始。蛋白質(zhì)的合成專家講座第62頁3.肽鏈合成終止與釋放（1）當(dāng)mRNA上肽鏈合成終止密碼子出現(xiàn)在核糖體A位點(diǎn)上。終止因子（RF）—可識(shí)別終止密碼子，并在A位點(diǎn)上與終止密碼子相結(jié)合，從而阻止肽鏈繼續(xù)延伸。

（2）終止因子可使核糖體P位點(diǎn)上肽酰轉(zhuǎn)移酶發(fā)生變構(gòu)，酶活性從轉(zhuǎn)肽作用變?yōu)樗庾饔?，使tRNA所攜帶多肽鏈與tRNA之間酯鍵被水解切斷，多肽鏈從核糖體及tRNA釋放出來。蛋白質(zhì)的合成專家講座第63頁核糖體與mRNA分離；在核糖體P位上tRNA和A位上RF脫落。在IF3參加下，與mRNA分離核糖體又分離為大小兩個(gè)亞基，可重新投入另一條肽鏈合成過程。蛋白質(zhì)的合成專家講座第64頁蛋白質(zhì)的合成專家講座第65頁4.真核生物和原核生物蛋白合成異同起始復(fù)合物形成位于mRNA5'端AUG上游帽子結(jié)構(gòu)。①形成43S核糖體復(fù)合物：40S小亞基與elF3和elF4c組成。②形成43S前起始復(fù)合物：在43S核糖體復(fù)合物上，連接elF2-GTP-Met-tRNAMet復(fù)合物。（1）起始異同蛋白質(zhì)的合成專家講座第66頁③形成48S前起始復(fù)合物：由mRNA及帽結(jié)合蛋白1(CBP1)、elF4A、elF4B和elF4F共同組成一個(gè)mRNA復(fù)合物。mRNA復(fù)合物與43S前起始復(fù)合物作用，形成48S前起始復(fù)合物。

④形成80S起始復(fù)合物：在elF5作用下，48S前起始復(fù)合物中全部elF釋放出，并與60S大亞基結(jié)合，最終形成80S起始復(fù)合物：40S亞基-mRNA-Met-tRNAMet-60S亞基。蛋白質(zhì)的合成專家講座第67頁

在真核生物蛋白質(zhì)生物合成起始階段，40S核糖體亞基普通可選擇第一個(gè)起始密碼子AUG，開始對(duì)mRNA翻譯。因?yàn)锳UG是唯一起始密碼子；而且，40S亞基與帶帽mRNA5'末端接觸，沿著mRNA"掃描"一直到抵達(dá)第一個(gè)AUG處再開始翻譯。蛋白質(zhì)的合成專家講座第68頁（2）肽鏈延長和終止真核細(xì)胞蛋白質(zhì)生物合成延長和終止中所包括因子比較簡單。真核細(xì)胞肽鏈延長和終止所包括因子：因子功效EF1α促使aa-tRNA與核糖體結(jié)合EF1βγ使EF1α再循環(huán)EF2轉(zhuǎn)位RF肽鏈釋放蛋白質(zhì)的合成專家講座第69頁延長因子(EF1α）可與GTP和aa-tRNA形成復(fù)合物，并把a(bǔ)a-tRNA供給核糖體。EF1βγ能催化GDP-GTP交換，有利于EF1α再循環(huán)利用；EF2催化GTP水解和使aa-tRNA從A位轉(zhuǎn)移至P位。蛋白質(zhì)的合成專家講座第70頁

肽鏈合成終止僅包括釋放因子(RF)。RF可識(shí)別全部三種終止密碼子UAA，UAG和UGA。終止肽鏈合成。RF活化肽鏈酰轉(zhuǎn)移酶釋放新生肽鏈后，即從核糖體解離。蛋白質(zhì)的合成專家講座第71頁6.肽鏈合成后加工mRNA翻譯多肽大多數(shù)為無功效初級(jí)產(chǎn)物，需經(jīng)折疊、修飾、剪切等加工過程后才含有活性。原核有些蛋白質(zhì)要分泌到細(xì)胞外，真核許多蛋白質(zhì)要易位到細(xì)胞器或胞液中。蛋白質(zhì)的合成專家講座第72頁（1）蛋白質(zhì)修飾蛋白質(zhì)修飾普通伴伴隨肽鏈合成進(jìn)行。修飾利于折疊，也與蛋白質(zhì)易位和分泌相關(guān)。多肽鏈修飾包含：①N-端Met（fMet）殘基，以及有些多肽鏈N-端多個(gè)殘基或C-端殘基都會(huì)被切除；②一些多肽鏈還要經(jīng)過一定剪接；③氨基酸側(cè)鏈修飾：二硫鍵形成、磷酸化、糖基化、脂化、核糖基化和乙酰化等。蛋白質(zhì)的合成專家講座第73頁（2）蛋白質(zhì)折疊蛋白質(zhì)折疊是由多肽鏈中氨基酸次序決定。但環(huán)境條件對(duì)折疊有影響。肽鏈折疊與肽鏈合成同時(shí)進(jìn)行。伴隨肽鏈延伸，空間構(gòu)象不停調(diào)整，最終成為天然態(tài)構(gòu)象。一些酶和分子伴侶可參加肽鏈折疊，稱它們?yōu)橹郫B蛋白(foldlinghelper)。蛋白質(zhì)的合成專家講座第74頁①酶,如蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(proteindisulfide1somerase，PDI)可加速形成蛋白質(zhì)中正確二硫鍵；肽酰脯酰順反異構(gòu)酶(peptidylprolylcis/transisomerase，PPI)可催化肽脯氨酰之間肽鍵旋轉(zhuǎn)反應(yīng)，從而加速蛋白質(zhì)折疊過程。②分子伴侶(chaperonin)是細(xì)胞內(nèi)一類能幫助新生肽鏈正確組裝、成熟和跨膜運(yùn)輸，本身卻不是終產(chǎn)物分子成份蛋白質(zhì)，類似酶但又無酶專一性特征，所以稱為分子伴侶。分子伴侶所識(shí)別靶蛋白部位是它們部分折疊非天然狀態(tài)，促進(jìn)折疊機(jī)理尚不清楚。蛋白質(zhì)的合成專家講座第75頁7.抑制翻譯抗菌素很多抗菌素對(duì)蛋白質(zhì)合成都有抑制作用。①四環(huán)素族(tetracyclinefamily)抑制氨基酰–tRNA與原核細(xì)胞核糖體結(jié)合，而抑制各種細(xì)菌蛋白質(zhì)合成。②氯霉素(chloromycetin)與原核細(xì)胞核糖體50S亞基結(jié)合，阻斷肽鍵形成。高濃度時(shí)，對(duì)哺乳動(dòng)物線粒體內(nèi)核糖體50S亞基也有作用。蛋白質(zhì)的合成專家講座第76頁③鏈霉素(Streptomycin)和卡那霉素(Kanamycin)與原核細(xì)胞核糖體30S亞基結(jié)合而改變其構(gòu)象，引發(fā)讀碼錯(cuò)誤，造成合成錯(cuò)誤蛋白質(zhì)。④嘌呤霉素(Puromycin)結(jié)構(gòu)與氨酰–tRNA末端相同，帶有游離氨基，能夠取代氨基酰–tRNA進(jìn)入核糖體受位，使正在延長中肽鏈轉(zhuǎn)移到嘌呤霉素氨基上，這種異常肽鏈很輕易從核糖體上釋放下來，從而終止肽鏈延長。對(duì)真核及原核細(xì)胞都有作用，不能用于臨床治療。蛋白質(zhì)的合成專家講座第77頁

⑤亞胺環(huán)己酮(Cycloheximide)對(duì)真核細(xì)胞有作用，能抑制核糖體上多肽轉(zhuǎn)移酶。另外，白喉毒素也能抑制蛋白質(zhì)合成，它是由白喉棒狀桿菌產(chǎn)生，卻不抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成。此毒素可對(duì)延長因子–2進(jìn)行酶促反應(yīng)，使其修飾成腺苷二磷酸核糖衍生物，從而使動(dòng)物延長因子–2失活，抑制肽鏈移位作用。因?yàn)樗且粋€(gè)酶蛋白，極小量即能完全抑制蛋白質(zhì)合成，成為一個(gè)劇毒物。蛋白質(zhì)的合成專家講座第78頁三、蛋白質(zhì)定位原核生物和真核生物新合成蛋白質(zhì)只有被運(yùn)輸?shù)礁髯蕴囟▉喖?xì)胞部位或分泌到胞外才含有功效