GB/T 23814-2009蓮蓉制品中蕓豆成分定性PCR檢測(cè)方法

犐犆犛６７．０５０

犡０４

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜２３８１４—２００９

蓮蓉制品中蕓豆成分定性犘犆犚檢測(cè)方法

犘狉狅狋狅犮狅犾狅犳狋犺犲狆狅犾狔犿犲狉犪狊犲犮犺犪犻狀狉犲犪犮狋犻狅狀犳狅狉

犱犲狋犲犮狋犻狀犵犽犻犱狀犲狔犫犲犪狀狊犮狅犿狆狅狀犲狀狋狊犻狀犾狅狋狌狊犳狅狅犱狊

２００９０５２７發(fā)布２００９０９０１實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書(shū)

犌犅／犜２３８１４—２００９

前言

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄Ａ為資料性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：國(guó)家加工食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心（廣州）、廣州市質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)研究院、中華

人民共和國(guó)深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：蔡依軍、覃芳芳、羅海英、鄧?guó)欌?、郭新東、吳玉鑾、藍(lán)芳。

Ⅰ

書(shū)

犌犅／犜２３８１４—２００９

蓮蓉制品中蕓豆成分定性犘犆犚檢測(cè)方法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了蓮蓉制品中蕓豆成分的定性ＰＣＲ檢測(cè)方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于由蓮蓉制品半成品和成品中蕓豆成分的定性檢測(cè)。

本標(biāo)準(zhǔn)的檢出限為０．５ｎｇ蕓豆ＤＮＡ。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法（ＧＢ／Ｔ６６８２—２００８，ＩＳＯ３６９６：１９８７，ＭＯＤ）

ＧＢ／Ｔ１９４９５．１轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)通用要求和定義

ＧＢ／Ｔ１９４９５．２轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求

ＧＢ／Ｔ１９４９５．７轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)抽樣和制樣方法

３術(shù)語(yǔ)和定義

ＧＢ／Ｔ１９４９５．１確立的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

４防污染措施

檢測(cè)過(guò)程中防止交叉污染的措施按照ＧＢ／Ｔ１９４９５．２中的規(guī)定執(zhí)行。

５抽樣和制樣

按照ＧＢ／Ｔ１９４９５．７規(guī)定的方法執(zhí)行。

６測(cè)定方法

６．１原理

樣品經(jīng)ＤＮＡ提取后，針對(duì)蕓豆特異基因序列設(shè)計(jì)引物，通過(guò)ＰＣＲ技術(shù)，特異性擴(kuò)增蕓豆基因的

ＤＮＡ片段，根據(jù)ＰＣＲ擴(kuò)增結(jié)果，判斷該樣品中是否含有蕓豆成分。

６．２試劑和材料

除另有規(guī)定外，所用試劑為分析純或生化試劑，水為按照ＧＢ／Ｔ６６８２規(guī)定的一級(jí)水。

６．２．１引物：檢測(cè)蓮蓉制品內(nèi)源基因和蕓豆特異基因的引物及其信息見(jiàn)表１。

表１蓮蓉制品內(nèi)、外源基因所需的引物信息

ＰＣＲ產(chǎn)物大?。?/p>

檢測(cè)基因引物序列基因性質(zhì)適用范圍

ｂｐ

正：５’ＧＴＡＧＡＡＴＣＧＧＣＡＣＴＧＧＡＧＧＴＡＧ３’

ＮＮＥＡ０７３２１４２蓮子特異基因蓮蓉制品

反：５’ＣＡＴＧＧＧＣＴＡＡＣＣＡＡＣＴＡＧＡＣＡＧＣ３’

正：５’ＣＡＧＡＣＡＴＴＴＣＡＴＡＴＣＣＡＧＧＧＡＧＧ３’

ＡＢ