免疫分析技術(shù)生化分析

免疫分析技術(shù)生化分析第一頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日

脊髓灰質(zhì)炎Polio

狂犬病Rabies

風(fēng)疹Rubella肝炎HepatitisA

肝炎HepatitisB

流感Influenza白喉diphtheria

天花Smallpoxvirus輪狀病毒RotavirusPertussis百日咳第二頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日Comparisonofmaximumandcurrentmorbidityforvaccine-preventablediseases

DiseaseMaximumcasesYear1992Percentagechange白喉Diphtheria麻疹Measles腮腺炎Mumps百日咳pertussis脊髓灰質(zhì)炎

Polio(paralytic)風(fēng)疹RubellaCRS破傷風(fēng)Tetanus乙型流感HeamophilusinfluenzaetypeB乙型肝炎HepatitisB206,939694,134152,209265,26921,26957,68620,0001,56020,00026,6111921194119681934195219691964,6519231984198542,2372,5724,083416011451,41216,12699.9999.7598.3198.4699.9899.7299.9597.1292.9439.40第三頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日疫苗的原理疫苗是將病原微生物及其代謝產(chǎn)物，經(jīng)過(guò)人工減毒、滅活或利用基因工程等方法制成的用于預(yù)防傳染病的自動(dòng)免疫制劑。疫苗保留了病原菌刺激動(dòng)物體免疫系統(tǒng)的特性。當(dāng)動(dòng)物體接觸到這種不具傷害力的病原菌后，免疫系統(tǒng)便會(huì)產(chǎn)生一定的保護(hù)物質(zhì)，如免疫激素、活性生理物質(zhì)、特殊抗體等；當(dāng)動(dòng)物再次接觸到這種病原菌時(shí)，動(dòng)物體的免疫系統(tǒng)便會(huì)依循其原有的記憶，制造更多的保護(hù)物質(zhì)來(lái)阻止病原菌的傷害。

免疫分析法是利用抗原抗體特異性結(jié)合反應(yīng)檢測(cè)各種物質(zhì)（藥物、激素、蛋白質(zhì)、微生物等）的分析方法。第四頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日

第一節(jié)抗原第五頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日抗原(Antigen，Ag)：能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，并且能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物(抗體或免疫效應(yīng)細(xì)胞)特異性結(jié)合的物質(zhì)。第六頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日抗原的兩種基本特性：（1）免疫原性(immunogenecity)：指抗原分子能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答(產(chǎn)生特異性抗體及免疫效應(yīng)細(xì)胞)的性質(zhì)。

（2）抗原性(antigenicity，又稱(chēng)免疫反應(yīng)性)：指抗原分子與免疫應(yīng)答產(chǎn)物(抗體或免疫效應(yīng)細(xì)胞)發(fā)生特異性結(jié)合的性質(zhì)。第七頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日

完全抗原（completeantigen)：具有免疫原性和抗原性的物質(zhì)，如：異種動(dòng)物的血清、細(xì)菌、病毒等。半抗原（hapten，又稱(chēng)不完全抗原incompleteantigen）：無(wú)免疫原性，只有抗原性的物質(zhì)，如：多為某些簡(jiǎn)單的小分子物質(zhì)，如青霉素、磺胺。載體（carrier）：賦予半抗原以免疫原性的蛋白質(zhì)。半抗原+蛋白質(zhì)完全抗原第八頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日半抗原

+載體抗體BT完全抗原BBBT在青霉素進(jìn)入體內(nèi)后，如果其降解產(chǎn)物和組織蛋白結(jié)合，就獲得了免疫原性，并刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗青霉素抗體。當(dāng)青霉素再次注射人體內(nèi)時(shí)，抗青霉素抗體立即與青霉素結(jié)合，產(chǎn)生病理性免疫反應(yīng)，出現(xiàn)皮疹或過(guò)敏性休克，甚至危及生命。

第九頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日第一部分抗原的類(lèi)型一．根據(jù)抗原性質(zhì)：完全抗原、半抗原第十頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日

二．根據(jù)與人體的親緣關(guān)系：

1.異種抗原（xenogenicAg）：來(lái)源于不同物種的抗原，如微生物、動(dòng)物蛋白對(duì)于人是異種抗原；

2.同種異型抗原（allogenicAg）：來(lái)源于同一物種的不同個(gè)體的抗原，如來(lái)自于另一個(gè)個(gè)體的血型抗原，主要組織相容性抗原等；

3.自身抗原（autoantigen）：來(lái)自于自身的抗原，如眼晶狀體蛋白等。第十一頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日

三．根據(jù)抗原的合成方式：天然抗原：異己抗原自身抗原人工抗原：人工結(jié)合抗原人工合成抗原基因工程抗原第十二頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日第二部分醫(yī)學(xué)上重要的抗原一.病原微生物：

1.細(xì)菌性抗原：細(xì)胞壁：蛋白質(zhì)、脂多糖等。鞭毛：蛋白質(zhì)夾膜：多糖

2.病毒性抗原：衣殼：蛋白包膜：糖蛋白

3.其它：螺旋體、真菌等。第十三頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日痢疾桿菌

霍亂弧菌傷寒桿菌鏈球菌大腸桿菌第十四頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日狂犬病病毒腺病毒口蹄疫病毒病毒（viruses）流感病毒第十五頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日真菌白色念珠菌

(1,000Xoil)瘧原蟲(chóng)第十六頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日二．細(xì)菌的外毒素與類(lèi)毒素

外毒素：某些病原菌生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中分泌到菌體外的一種代謝產(chǎn)物，為次級(jí)代謝產(chǎn)物。其主要成分為可溶性蛋白質(zhì)。

類(lèi)毒素：經(jīng)0.3%～0.4%甲醛處理過(guò)的失去毒性保留免疫原性的外毒素。仍然具有刺激人體產(chǎn)生抗毒素，以起到機(jī)體從此對(duì)某疾病具有自動(dòng)免疫的作用。它們廣泛地應(yīng)用于預(yù)防某些傳染病、注射到動(dòng)物體內(nèi)用于制備抗毒素。第十七頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日

三．異種動(dòng)物血清異種動(dòng)物的血清蛋白對(duì)人具有免疫原性。如：馬的血清進(jìn)入人的體內(nèi)，馬血清中的許多蛋白質(zhì)就成為人的抗原物質(zhì)。

第十八頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日四．血型抗原：

——已經(jīng)發(fā)現(xiàn)并為國(guó)際輸血協(xié)會(huì)承認(rèn)的血型系統(tǒng)有30種

1.ABO血型系統(tǒng)：血型抗原（RBC）抗體（血清）

———————————————————A型A抗原抗B抗體

B型B抗原抗A抗體

AB型AB抗原無(wú)抗A、抗B抗體

O型無(wú)A、B抗原抗A、抗B抗體

———————————————————第十九頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日2.Rh血型系統(tǒng)：

Rh是恒河猴（RhesusMacacus）外文名稱(chēng)的頭兩個(gè)字母。蘭德斯坦納等科學(xué)家在1940年做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，發(fā)現(xiàn)恒河猴和多數(shù)人體內(nèi)的紅細(xì)胞上存在Rh血型的抗原物質(zhì)，故而命名的。凡是人體血液紅細(xì)胞上有Rh抗原（又稱(chēng)D抗原）的，稱(chēng)為Rh陽(yáng)性。

第二十頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日

實(shí)際意義新生兒溶血癥孕婦(Rh-)→胎兒(Rh+)

↓↓抗Rh抗體+新生兒RBC(Rh+)↓

溶血反應(yīng)

第二十一頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日

第二節(jié)抗體第二十二頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日抗體（antibody,Ab）:

機(jī)體免疫細(xì)胞被抗原激活后，由分化成熟的B細(xì)胞分泌的一類(lèi)能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）:

具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體分子相似的球蛋白。

所有抗體都是Ig，但并非所有Ig都具抗體活性。第二十三頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日血清療法：一種利用被動(dòng)免疫的療法。將已被免疫的動(dòng)物血清（抗血清）注射到相應(yīng)疾病的患者身上以達(dá)到治療的目的。這種血清稱(chēng)為治療血清?；謴?fù)期病人的血清也可治療其他病人。

第二十四頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日第二十五頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日第一部分免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)

第二十六頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日N端C端可變區(qū)恒定區(qū)VHVLCH1CH2CH3CL鉸鏈區(qū)V區(qū)：和抗原特異性結(jié)合的關(guān)鍵部位C區(qū)：決定抗體分子的異種抗原性第二十七頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日第二部分單克隆抗體和基因工程抗體抗原決定簇：決定抗原性的特殊化學(xué)基團(tuán)。大多存在于抗原物質(zhì)的表面，有些存在于抗原物質(zhì)的內(nèi)部，須經(jīng)酶或其他方式處理后才暴露出來(lái)。一個(gè)天然抗原物質(zhì)可有多種和多個(gè)決定簇。如白喉類(lèi)毒素有8個(gè)抗原決定簇，流感病毒有40多個(gè)抗原決定簇。

第二十八頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日一.多克隆抗體病原微生物含有多種抗原決定簇的抗原物質(zhì)，此這些抗體制劑也是多種抗體的混合物，故稱(chēng)多克隆抗體，即針對(duì)多種抗原決定簇的抗體。易出現(xiàn)非特異性交叉反應(yīng)。第二十九頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日二、單克隆抗體單克隆抗體是針對(duì)一個(gè)抗原決定簇的抗體，又是單一的B淋巴細(xì)胞克隆產(chǎn)生的。所有制備抗體的細(xì)胞都是同一個(gè)細(xì)胞的拷貝，因此其產(chǎn)生的抗體完全相同。第三十頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日雜交細(xì)胞設(shè)計(jì)方案：

一個(gè)B淋巴細(xì)胞---只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞---能無(wú)限增殖第三十一頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日單克隆抗體是大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的產(chǎn)物，而不是直接來(lái)自于動(dòng)物血清。制備單克隆抗體的過(guò)程涉及到細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合等多種步驟。第三十二頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日雜交瘤技術(shù)產(chǎn)生的3個(gè)技術(shù)關(guān)鍵1.B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的特性：

B淋巴細(xì)胞（Blymphocytes）：

接受抗原刺激后，能分泌針對(duì)該抗原的特異性抗體，在體液免疫中具有重要功能。

B淋巴細(xì)胞本身是一種終末分化細(xì)胞，通常不再進(jìn)行細(xì)胞分裂，存活一段時(shí)間后便會(huì)死亡---短命細(xì)胞第三十三頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日骨髓瘤細(xì)胞（myelomacells）：惡性增殖的轉(zhuǎn)化細(xì)胞，只要營(yíng)養(yǎng)條件適合可永遠(yuǎn)分裂和存活---長(zhǎng)命細(xì)胞。

經(jīng)篩選與馴化，現(xiàn)已建立多種骨髓瘤細(xì)胞株---沒(méi)有抗體分泌物。第三十四頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日2.細(xì)胞融合技術(shù)：第三十五頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日3.雜交瘤細(xì)胞的篩選：不能合成

DNA死亡不能合成

DNA死亡第三十六頁(yè)，共三十八頁(yè)，2022年，8月28日單克隆抗體的應(yīng)用1．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑

作為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的診斷試劑，單克隆抗體有著特異性強(qiáng)、純度高、均一性好