生物制品及其應(yīng)用

關(guān)于生物制品及其應(yīng)用第一頁，共五十四頁，2022年，8月28日什么是生物制品

生物制品是根據(jù)免疫學(xué)原理，用微生物（細(xì)菌、病毒、立克次氏體以及微生物的毒素等）、動物的血液、組織制成的，用以預(yù)防、治療以及診斷人或物傳染病的一類藥品。其中包括：供預(yù)防傳染病發(fā)生的菌苗、疫苗、類毒素；供治療或緊急預(yù)防用的抗菌血清、抗病毒血清、抗病毒素、噬菌體、干擾素等；和供診斷傳染病用的各種抗原抗體診斷液等。第二頁，共五十四頁，2022年，8月28日生物制品的分類1.菌苗、疫苗和類毒素2.抗病血清3.診斷液第三頁，共五十四頁，2022年，8月28日抗病血清

1.抗病血清是抗菌，抗病毒、抗毒血清的總稱。

2.凡是用細(xì)菌免疫馬或其他大動物所取得的免疫血清，稱為抗菌血清。

3.凡是用病毒免疫馬或其他大動物，所取得的免疫血清，稱為抗病毒血清。

4.凡是用細(xì)菌類毒素或毒素免疫馬或其他大動物，所取得的免疫血清、稱為抗毒素。（或抗毒血清）第四頁，共五十四頁，2022年，8月28日診斷液常用的診斷液可以區(qū)分為：

1.抗原：用以檢驗(yàn)動物血清中有無特異性抗體存在。

2.診斷血清：診斷血清內(nèi)有經(jīng)標(biāo)定的已知抗體，用以檢查可疑畜禽組織內(nèi)，有無該種疫病特異性抗原（病原微生物或其代謝物）存在。

3.變態(tài)反應(yīng)原：是利用病原微生物或其代謝產(chǎn)物，制成的一種具有特異性的診斷液。第五頁，共五十四頁，2022年，8月28日一、疫苗基礎(chǔ)知識第六頁，共五十四頁，2022年，8月28日（一）免疫的歷史公元1100中國與印度對天花就已有認(rèn)識天花接種由土耳其傳入英國，稱為variolation,死亡率仍高1790Jenner發(fā)現(xiàn)牛痘1880Pasteur發(fā)現(xiàn)死細(xì)菌可以預(yù)防再度感染，這種現(xiàn)象稱為vaccination,疫苗于是產(chǎn)生，接著生產(chǎn)炭疽及狂犬疫苗1886熱處理死毒疫苗出現(xiàn)。第七頁，共五十四頁，2022年，8月28日1923福爾馬林處理白喉及破傷風(fēng)菌素制成死毒疫苗1926發(fā)現(xiàn)佐劑可以增強(qiáng)類毒素的效果1960細(xì)胞培養(yǎng)小兒麻痹病毒疫苗，造成疫苗的大量制造，而造福人群建立穩(wěn)定細(xì)胞株，用于生產(chǎn)疫苗（一）免疫的歷史第八頁，共五十四頁，2022年，8月28日疫苗是用于針對性預(yù)防某些傳染病的生物制品。病原體：致病原性—生產(chǎn)力下降、臨床癥狀、死亡免疫原性—機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，抵抗病原體的危害。將病原體殺死或致弱=>疫苗（二）什么是疫苗第九頁，共五十四頁，2022年，8月28日1.弱毒活疫苗（活苗、凍干苗）2.滅活疫苗（死苗、油苗）自家苗多數(shù)為滅活疫苗的一種3.多價(jià)苗與聯(lián)苗4.基因缺失疫苗5.提純的大分子疫苗6.核酸疫苗7.其它：合成肽疫苗、轉(zhuǎn)基因植物疫苗、抗獨(dú)特型疫苗（三）疫苗有哪些種類第十頁，共五十四頁，2022年，8月28日優(yōu)點(diǎn)：在體內(nèi)繁殖,模仿自然感染,有完整免疫反應(yīng)(體液免疫+細(xì)胞免疫)較少免疫劑量即產(chǎn)生足夠免疫效果免疫反應(yīng)產(chǎn)生快（7天初步免疫反應(yīng)，14天達(dá)高水平）缺點(diǎn):動物體內(nèi)少量自然抗體可中和疫苗(如母源抗體)，降低免疫效果散毒：安全性問題運(yùn)輸保存不便1.弱毒苗第十一頁，共五十四頁，2022年，8月28日豬瘟豬瘟細(xì)胞苗豬瘟組織苗偽狂犬丹毒-肺疫仔豬副傷寒豬乙型腦炎藍(lán)耳病活疫苗豬場常用的弱毒苗第十二頁，共五十四頁，2022年，8月28日進(jìn)口弱毒苗因加耐熱保護(hù)劑，一般在2-8oC保存，有效期為1.5年。國產(chǎn)弱毒苗保藏在-21oC以下，有效期一年，在-21~-8oC，有效期要減半計(jì)算。因豬場一般無低溫冰箱，故采購回的凍干弱毒疫苗均應(yīng)減半計(jì)算有效期。

弱毒苗的保存第十三頁，共五十四頁，2022年，8月28日優(yōu)點(diǎn):

安全，一般不產(chǎn)生毒力,不會傳播至未免疫動物較易生產(chǎn)，穩(wěn)定性好，受抗生素、體內(nèi)抗體影響較小缺點(diǎn):

在體內(nèi)不復(fù)制，接種劑量為刺激免疫反應(yīng)的全部劑量。通常需要2次以上注射7-14天開始產(chǎn)生；21天達(dá)到較高水平。副反應(yīng)：局部和全身（過敏等）2.滅活苗第十四頁，共五十四頁，2022年，8月28日豬場常用的滅活苗口蹄疫喘氣病大腸桿菌萎縮性鼻炎細(xì)小病毒傳染性胃腸炎/流行性腹瀉藍(lán)耳病滅活苗細(xì)菌性疾病滅活苗：鏈球菌、副豬嗜血桿菌、傳胸第十五頁，共五十四頁，2022年，8月28日3.滅活苗的保存一般滅活苗（油乳劑）保藏在2-8oC，有效期1-1.5年。

第十六頁，共五十四頁，2022年，8月28日疫苗在豬場的保存活苗(含凍干保護(hù)劑，可在2-8℃保存)稀釋劑死苗活苗(不含凍干保護(hù)劑，冷凍保存)第十七頁，共五十四頁，2022年，8月28日4.疫苗佐劑佐劑：于疫苗中可增強(qiáng)及加速免疫反應(yīng)的物質(zhì)加速免疫反應(yīng)，增強(qiáng)記憶細(xì)胞的作用，延長免疫效期有時(shí)產(chǎn)生過敏等不良反應(yīng)常用的佐劑有：氫氧化鋁、礦物油、卡介苗第十八頁，共五十四頁，2022年，8月28日5.免疫途徑非注射途徑經(jīng)口投喂；口、鼻腔噴霧；點(diǎn)眼；皮膚注射途徑肌肉皮下皮內(nèi)腹膜內(nèi)卵內(nèi)或胚胎內(nèi)靜脈內(nèi)第十九頁，共五十四頁，2022年，8月28日6.免疫策略通常注射2次，年度追加注射新生幼畜通常由母畜免疫而獲得母源抗體以整群動物的免疫整齊度考察效果?？深A(yù)防大爆發(fā)；全面接種為保護(hù)的必要條件第二十頁，共五十四頁，2022年，8月28日（四）影響免疫效果的因素1.品種和動物類別因素2.年齡:幼畜弱毒疫苗有較強(qiáng)感受性，尤其是胎兒；母源抗體衰退時(shí)的“空窗期”，也是一高危險(xiǎn)期；老化，退行性，及免疫老化動物3.營養(yǎng)：免疫反應(yīng)依賴充足營養(yǎng)以產(chǎn)生抗體4.環(huán)境因素應(yīng)激：高溫、潮濕、寒冷、擁擠、運(yùn)輸、斷奶等均會影響免疫效果5.操作：稀釋方法；注射操作緊急疫苗接種，有時(shí)也可促進(jìn)免疫反應(yīng)第二十一頁，共五十四頁，2022年，8月28日（五）疫苗的不良反應(yīng)立即反應(yīng)(3-5分鐘產(chǎn)生)痛覺:物理刺激、生理刺激(pH,滲透壓變化)、疫苗內(nèi)容物刺激快速過敏反應(yīng)休克延遲反應(yīng)(數(shù)日至數(shù)周或月年內(nèi)發(fā)生)局部腫脹：水腫、膿腫、肉芽腫、肉瘤暫時(shí)性精神不佳及食欲減退(24-72小時(shí))腎小球腎炎：3型變態(tài)反應(yīng)(抗原-抗體復(fù)合物沉積于腎小球)毒力恢復(fù)；基因重組免疫抑制污染疫苗持續(xù)感染；排毒第二十二頁，共五十四頁，2022年，8月28日（六）免疫失敗的原因1.疫苗質(zhì)量問題2.保存問題；溫度對疫苗效價(jià)的影響3.使用操作不當(dāng)；免疫策略不當(dāng)4.人為錯(cuò)誤；器械錯(cuò)誤；抗原或血清型選擇不當(dāng)5.母源抗體干擾或影響免疫反應(yīng)，無法產(chǎn)生保護(hù)6.動物本身的免疫抑制問題（遺傳、藥物、疾病、應(yīng)激）7.胚胎或子宮內(nèi)已經(jīng)感染暴露，造成個(gè)體對抗原的免疫耐受，從而導(dǎo)致免疫無效第二十三頁，共五十四頁，2022年，8月28日

二、常用疫苗菌苗

第二十四頁，共五十四頁，2022年，8月28日1、豬瘟疫苗豬瘟兔化弱毒凍干苗：

采用感染兔化弱毒的乳兔的組織制作而成，則為豬瘟兔化弱毒乳兔組織凍干苗，斷奶后仔豬免疫、免疫期可達(dá)六個(gè)月到一年半。豬瘟脾淋苗：

采用兔的脾臟、淋巴制作而成則為豬瘟脾淋苗豬瘟兔化弱毒牛體反應(yīng)凍干苗：

系采用接種過豬瘟疫苗牛的組織制作而成。豬瘟兔化弱毒細(xì)胞培養(yǎng)凍干苗：

利用接種過豬瘟兔化苗動物的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)研制而成。第二十五頁，共五十四頁，2022年，8月28日2.豬偽狂犬病疫苗（1）豬偽狂犬常規(guī)弱毒苗（2）豬偽狂犬滅活苗（3）豬偽狂犬基因缺失弱毒苗缺TK基因＋1種或幾種糖蛋白（4）豬偽狂犬基因缺失滅活苗只缺糖蛋白。偽狂犬病毒已發(fā)現(xiàn)11種糖蛋白gE、gB、gC等（病毒基因組成相關(guān)），除此之外還有幾種酶也與病毒毒力密切相關(guān)，其中胸苷激酶（TK）是偽狂犬最主要的毒力基因之一。目前缺失的糖蛋白基因主要為gE和gG基因，也有缺失gC和gB基因的。但要注意一個(gè)問題一個(gè)豬場最好只使用一種基因缺失苗，有研究同時(shí)接種兩種不同的基因缺失苗后、病毒會發(fā)生基因重組現(xiàn)象。第二十六頁，共五十四頁，2022年，8月28日

3.豬傳染性胃腸炎

豬傳染性胃腸炎（TGE）豬流行性腹瀉（PED）——TP二聯(lián)疫苗豬傳染性胃腸炎是由TGE病毒引起的豬的一種急性胃腸道傳染病。豬流行性腹瀉是由PED病毒引起的豬的一種高度接觸性腸道傳染病。該病10日令內(nèi)仔豬死亡率100％，成年豬幾乎不死。我國哈獸研成功研制的——TP二聯(lián)滅活苗經(jīng)后海穴接種，滅活苗主動免疫保護(hù)率為96％、被動免疫保護(hù)率為85.1％。

TP二聯(lián)弱毒苗了、主動免疫率保護(hù)率為97.7％、被動免疫保護(hù)率為98％。第二十七頁，共五十四頁，2022年，8月28日4.豬繁殖呼吸綜合癥

豬繁殖呼吸綜合癥（PRRS）——豬蘭耳病疫苗（有減毒苗和滅活苗）

PRRS是一種高度接觸性傳染病，可通過接觸、空氣、精液、胎盤等傳染。病毒為單股正鏈病毒，有嚴(yán)格的宿主專一性。病毒增殖具有抗體依賴性增強(qiáng)的作用。即在亞中和抗體水平存在的情況下、病毒在細(xì)胞上的復(fù)制能力反而增強(qiáng)。所以講疫苗免疫效果不好。國內(nèi)外使用減毒疫苗毒苗而在豬群中引起多起PRRS的爆發(fā)。目前PRRS主要存在的問題：是以持續(xù)感染、亞臨床感染、免疫抑制、易繼發(fā)感染為流行特點(diǎn)。給本病防制帶來一定的困難。第二十八頁，共五十四頁，2022年，8月28日5.豬流行性乙型腦炎

豬流行性乙型腦炎——有弱毒苗和滅活苗。又稱日本乙型腦炎，是由流行性乙腦病毒引起的一種人畜共患的傳染病?？梢鸷髠淠肛i的流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎。本病由蚊蟲傳播感染，有明顯的季節(jié)性。防制：無特殊治療方法。要求每個(gè)豬場每年3—4月初，在蚊蟲未出現(xiàn)之前免疫。免疫對象是后備母豬、1—2胎的青年母豬、所有的公豬。

第二十九頁，共五十四頁，2022年，8月28日6.豬細(xì)小病毒

豬細(xì)小病毒是導(dǎo)致易感母豬發(fā)生繁殖障礙的主要傳染病之一。豬細(xì)小病毒屬于細(xì)小病毒科細(xì)小病毒屬的自主型細(xì)小病毒。主要表現(xiàn)為受感染的母豬，特別是初產(chǎn)母豬以及血清學(xué)陰性的經(jīng)產(chǎn)母豬發(fā)生流產(chǎn)，產(chǎn)死胎畸形胎木乃伊、弱仔及屢配不孕。

疫苗：有滅活苗和弱毒苗：五月齡注射一次，過一個(gè)月再注射一次，（即配種前一個(gè)月注射）。第三十頁，共五十四頁，2022年，8月28日7.豬流行性感冒

該病是由豬流感病毒引起的豬的一種急性，高度接觸性呼吸道傳染病。臨床上以突然發(fā)病、發(fā)熱、咳嗽、呼吸困難、衰竭然后迅速康復(fù)。豬流感無特效藥，只有對癥治療。疫苗：豬流行性感冒滅活苗，國外已經(jīng)研制成功。國內(nèi)已經(jīng)進(jìn)入疫苗審批程序。第三十一頁，共五十四頁，2022年，8月28日8.豬鏈球菌病

該病是由各種致病性鏈球菌感染引起的一種人畜共患的傳染病。敗血癥、化膿性淋巴結(jié)炎、腦膜炎、關(guān)節(jié)炎為主要特征。豬鏈球菌型菌珠可導(dǎo)致人類的腦膜炎、敗血癥、心內(nèi)膜炎、嚴(yán)重可致人死亡。防制：抗生素有一定效果。弱毒苗是由C群鏈球菌制備的。滅活苗是由鏈球菌二型菌株制備的。也可用本場分離的菌株制備的滅活苗效果更好。第三十二頁，共五十四頁，2022年，8月28日9.大腸桿菌病仔豬黃?。海ㄔ绨l(fā)性大腸桿菌?。┪迦正g內(nèi)發(fā)生。有高發(fā)病率和死亡率。仔豬白?。海ㄟt發(fā)性大腸桿菌?。?0-30日齡內(nèi)仔豬發(fā)生。仔豬水腫?。簞倲嗄袒蛏L最快的育肥豬防制：可用抗生素治療?？捎靡呙邕M(jìn)行被動免疫，母豬產(chǎn)前35天和15天，各分別注射疫苗，常用的有：A、仔豬大腸桿菌三價(jià)滅活苗，帶有K88，K99，987P菌毛抗原。（im）B、仔豬大腸桿菌K88，K99雙基因工程滅活苗。（耳根或im）C、仔豬大腸桿菌K88，LTB雙基因工程滅活苗。（im或口服）第三十三頁，共五十四頁，2022年，8月28日10.豬支原體肺炎（豬喘氣?。?/p>

該病又稱地方性流行性肺炎，是由豬肺炎支原體引起的一種慢性接觸性呼吸道傳染病。癥狀：咳嗽，氣喘。防制：抗生素只能對癥治療，不能消除病根。疫苗：A、中監(jiān)所經(jīng)20多年研制成功的豬支原體肺炎乳兔化弱毒凍干苗。該苗接種的豬，2個(gè)月內(nèi)定期X光透視，肺部無反映率83.8％－100％。同居豬不感染，不影響增重，每頭豬5毫升，右胸腔注射；攻毒后保護(hù)率80％。B、江蘇農(nóng)科院研制成：168株無細(xì)胞培養(yǎng)弱毒苗。1毫升肺穴內(nèi)免疫，保護(hù)率80％。程序：成年公母豬一年一次，仔豬7-15日齡一次，后備配種前一次。第三十四頁，共五十四頁，2022年，8月28日11.豬傳染性萎縮性鼻炎（AR）

豬AR是由支氣管敗血波氏桿菌和產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌引起的一種慢性呼吸道傳染病。其特征為：鼻炎、顏面變形，鼻甲骨下卷曲萎縮。打噴嚏，流鼻血。防制：可用抗生素治療。疫苗：A、支氣管敗血波氏桿菌Ⅰ項(xiàng)菌滅活菌苗。

B、支氣管敗血波氏桿菌＋D型產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌滅活二聯(lián)苗。方法：商品豬場用于母豬，小豬被動免疫。（in）種豬場母仔豬同用。（in＋滴鼻）第三十五頁，共五十四頁，2022年，8月28日12.仔豬副傷寒

仔豬副傷寒是由沙門氏菌屬中的細(xì)菌引起仔豬的傳染病。急性病例為敗血癥變化，慢性病例為大腸壞死性炎癥及肺炎。大多數(shù)發(fā)于1-4月齡的豬，屬革蘭氏陰性菌。防制：抗生素有一定效果。疫苗：仔豬副傷寒活疫苗用20％氫氧化鋁稀釋。方法：im有反應(yīng)（大），口服反映輕微。第三十六頁，共五十四頁，2022年，8月28日13.豬傳染性胸膜肺炎

該病是由胸膜肺炎放線桿菌引起豬的一種高度傳染性呼吸疾病。以急性出血性纖維素性胸膜肺炎和慢性纖維素性壞死性胸膜肺炎為特征。急性型呈高死亡率。防治：抗生素有預(yù)防作用，對慢性豬治療效果不佳。疫苗：A、傳染性胸膜肺炎滅活苗。

B、本場自家菌苗效果更好。第三十七頁，共五十四頁，2022年，8月28日14.豬巴氏桿菌?。ㄘi肺疫）

病原體是多殺性巴氏桿菌（革蘭氏陰性菌）經(jīng)呼吸道或消化道途徑進(jìn)入健康豬體引起發(fā)病。急性病例為出血性敗血癥，咽喉炎肺炎癥狀。防制：抗生素有一定效果。疫苗：A、豬肺疫氫氧化鋁苗。

B、豬多殺性巴氏桿菌A型活疫苗。（CA株）

C、豬多殺性巴氏桿菌苗679-230弱毒株或C20弱毒株制成的口服豬肺疫弱毒凍干菌苗。方法：in、im、口服第三十八頁，共五十四頁，2022年，8月28日三、豬場自家組織苗制作與使用方法第三十九頁，共五十四頁，2022年，8月28日自家組織苗的制作動物的選擇：哺乳、保育豬，有明顯臨床癥狀：毛松、消瘦、蒼白、腹式呼吸、眼分泌物多。解剖見肺臟前2/3有實(shí)變?yōu)橐?。病料的采集：肺臟、脾臟及相應(yīng)淋巴結(jié)：肺門淋巴結(jié)、頜下淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)等。第四十頁，共五十四頁，2022年，8月28日病料采集后，應(yīng)將較大的筋脈徹底切離，稱重。將病料放入組織粉碎機(jī)內(nèi)打成漿狀，可加適量生理鹽水。稀釋液的準(zhǔn)備（2000ml可稀釋700-750g組織勻漿），1.20%鋁膠生理鹽水2.分析純福爾馬林5‰（約10ml），3.疊氮鈉0.5‰(約1ml)三種混合搖勻,待用。注：福爾馬林由40%分析純甲醛加60%注射用水配備;疊氮鈉5克加15注射用水配備病料的處理第四十一頁，共五十四頁，2022年，8月28日自家組織苗的制作

1.將加工處理好的組織漿放入稀釋液內(nèi),充分?jǐn)嚢杈鶆?雙或三層紗布過濾,得濾液約2000ml(濾渣約700-750g,無害化處理廢棄)。

2.濾液室溫保存24小時(shí)后，加入與福爾馬林等量10%硫代硫酸鈉終止滅活。

3.將所得濾液分裝,加反口膠塞及鋁蓋封裝,可用100mL/瓶,20ml/瓶等包裝，滅活。將包裝好的疫苗靜置24小時(shí)后方可使用.第四十二頁，共五十四頁，2022年，8月28日自家組織苗使用方法1.全場免疫做基礎(chǔ)免疫；①種公、母豬及后備種豬3ml/頭②哺乳仔豬1-1.5ml/頭,保育豬2ml/頭2.母豬在基礎(chǔ)免疫一個(gè)月后開始作產(chǎn)前4W免疫,3ml/頭；3.仔豬7-9天齡首免1-1.5ml/頭，兩個(gè)星期后二免2ml/頭。第四十三頁，共五十四頁，2022年，8月28日制作組織苗器械及試劑DS-1高速組織搗碎機(jī)：1臺（上海醫(yī)用儀器，10000~12000轉(zhuǎn)/分）試劑：分析純甲醛:1瓶分析純硫代硫酸鈉1瓶疊氮鈉：1瓶其它儀器：砧板及手術(shù)刀柄、剪刀

1~2kg臺稱：1臺

100g天平稱：1臺

2000ml塑料杯：5個(gè)

150ml廣口瓶（棕色）：3個(gè)

200ml玻璃燒杯：2個(gè)

10000ml大白口瓶：2個(gè)玻棒：2支

2ml及5ml玻璃移液管：各2支橡皮吸球：2個(gè)醫(yī)用紗布：3卷第四十四頁，共五十四頁，2022年，8月28日四、自家血清的制作與應(yīng)用第四十五頁