動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體課件

番茄馬鈴薯嫁接番茄馬鈴薯嫁接1植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)2完美寵物完美寵物3動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體動(dòng)物細(xì)胞融合4教學(xué)目標(biāo)概述動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。概述單克隆抗體的制備過(guò)程及單克隆抗體的特點(diǎn)及應(yīng)用。比較動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)。教學(xué)目標(biāo)5一、動(dòng)物細(xì)胞融合1、概念：指

或動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成細(xì)胞的過(guò)程，也稱為細(xì)胞雜交兩個(gè)一個(gè)一個(gè)2、結(jié)果：形成具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞__________的____細(xì)胞，稱為_(kāi)______雜交細(xì)胞單核遺傳信息一、動(dòng)物細(xì)胞融合1、概念：指或64、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性3、誘導(dǎo)融合的方法：化學(xué)方法聚乙二醇（PEG）生物方法物理電激、離心、振動(dòng)滅活的病毒方法4、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性3、誘導(dǎo)融合的方法：化學(xué)方法聚乙二醇7對(duì)細(xì)胞膜融合過(guò)程的理解細(xì)胞核細(xì)胞核病毒顆粒滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面細(xì)胞膜被病毒顆粒穿透細(xì)胞膜連接細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞對(duì)細(xì)胞膜融合過(guò)程的理解細(xì)胞核細(xì)胞核病毒顆粒滅活的病毒顆粒黏附8細(xì)胞融合的過(guò)程包括：細(xì)胞膜的融合細(xì)胞質(zhì)融合細(xì)胞核融合，其中細(xì)胞膜的融合是細(xì)胞融合的先導(dǎo)，在細(xì)胞膜融合中體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有流動(dòng)性。細(xì)胞融合的過(guò)程包括：95.動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程5.106.動(dòng)物細(xì)胞融合的意義突破了

方法的局限，使

成為可能。成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和

等的重要手段。如：利用

，為制造____________開(kāi)辟了新途徑。有性雜交遠(yuǎn)緣雜交生物新品種培育雜交瘤技術(shù)單克隆抗體6.動(dòng)物細(xì)胞融合的意義突破了方法的局限，使11植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞融合方法用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段與植物體細(xì)胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導(dǎo)二、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的對(duì)比細(xì)胞膜的流動(dòng)性離心、電激、振動(dòng)、聚乙二醇等誘導(dǎo)植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)12結(jié)果獲得雜交細(xì)胞，以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品用途克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)展雜交親本范圍，培育新品種制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等意義突破有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能獲取雜種植株結(jié)果獲得雜交細(xì)胞，以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品用途克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的13每一種B細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體每一種B細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體14在體外培養(yǎng)條件下，一個(gè)B淋巴細(xì)胞是不可能無(wú)限增殖的在體外培養(yǎng)條件下，一個(gè)B淋巴細(xì)胞是不可能無(wú)限增殖的15B淋巴細(xì)胞（已免疫）小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞（已免疫）16二、單克隆抗體的制備1975年設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)1984年獲得諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)米爾斯坦科勒二、單克隆抗體的制備1975年設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)米爾斯坦科勒17免疫老鼠注射特定的抗原蛋白培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合免疫老鼠注射特定的抗原蛋白培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞18融合操作后培養(yǎng)基中有哪些細(xì)胞？?jī)蓛扇诤系模築---BB---瘤瘤---瘤第一次篩選（選擇性培養(yǎng)）B---瘤融合——雜交瘤細(xì)胞（多種）

未融合的:B瘤融合操作后培養(yǎng)基中有哪些細(xì)胞？?jī)蓛扇诤系模築---B19第二次篩選既能分泌專一抗體又能在體外無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞多次抗體檢測(cè)克隆化培養(yǎng)特異性強(qiáng)、靈敏度高、大量制備

的單克隆抗體經(jīng)檢測(cè)抗體呈陽(yáng)性第二次篩選既能分泌專一抗體又能在體外無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞多次20體內(nèi)培養(yǎng)從小鼠腹水中體外培養(yǎng)從細(xì)胞培養(yǎng)液體外培養(yǎng)單克隆抗體單克隆抗體注射到小鼠腹腔中雜交瘤細(xì)胞體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)單克隆抗體單克隆抗體注射到小鼠腹腔中211.過(guò)程1.過(guò)程222.單克隆抗體的應(yīng)用1）作為診斷試劑：具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物：?jiǎn)慰寺】贵w主要用于癌癥的治療制成“生物導(dǎo)彈”2.單克隆抗體的應(yīng)用1）作為診斷試劑：2）用于治療疾病和運(yùn)載23總結(jié)：兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體制備三個(gè)新名詞滅活的病毒雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體既能分泌特異性抗體又能無(wú)限增殖特異性強(qiáng)靈敏度高大量制備總結(jié)：兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體制備三個(gè)新名詞滅活的病毒24練一練1.與植物體細(xì)胞雜交相比，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理及其特有的誘導(dǎo)因子分別是()A．細(xì)胞膜的流動(dòng)性、離心B．細(xì)胞膜的流動(dòng)性、滅活的病毒C．細(xì)胞的全能性、電激D．細(xì)胞的全能性、滅活的病毒B練一練1.與植物體細(xì)胞雜交相比，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理及其特有的252.下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是()

A．特異性強(qiáng)、靈敏度高B．與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”C．體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體D．單克隆抗體是由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后培養(yǎng)的細(xì)胞系分泌的練一練C2.下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是()練一練26練一練3.動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是()A．誘導(dǎo)融合的方法完全相同B．所用的技術(shù)手段完全相同C．所采用的原理完全相同D．都能形成雜種細(xì)胞D練一練3.動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正27練一練4.下列各圖表示單克隆抗體制備過(guò)程的各階段圖解，請(qǐng)根據(jù)圖回答下列問(wèn)題。(1)請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過(guò)程的順序連接起來(lái)________________________________________________________________________。(2)在單克隆抗體制備過(guò)程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有________________、________________的特性。練一練4.下列各圖表示單克隆抗體制備過(guò)程的各階段圖解，請(qǐng)根據(jù)28(1)(2)在體外大量繁殖產(chǎn)生特異性抗體(1)(1)(2)在體外大量繁殖產(chǎn)生特異性抗體(1)29謝謝謝謝30番茄馬鈴薯嫁接番茄馬鈴薯嫁接31植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)32完美寵物完美寵物33動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體動(dòng)物細(xì)胞融合34教學(xué)目標(biāo)概述動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。概述單克隆抗體的制備過(guò)程及單克隆抗體的特點(diǎn)及應(yīng)用。比較動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)。教學(xué)目標(biāo)35一、動(dòng)物細(xì)胞融合1、概念：指

或動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成細(xì)胞的過(guò)程，也稱為細(xì)胞雜交兩個(gè)一個(gè)一個(gè)2、結(jié)果：形成具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞__________的____細(xì)胞，稱為_(kāi)______雜交細(xì)胞單核遺傳信息一、動(dòng)物細(xì)胞融合1、概念：指或364、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性3、誘導(dǎo)融合的方法：化學(xué)方法聚乙二醇（PEG）生物方法物理電激、離心、振動(dòng)滅活的病毒方法4、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性3、誘導(dǎo)融合的方法：化學(xué)方法聚乙二醇37對(duì)細(xì)胞膜融合過(guò)程的理解細(xì)胞核細(xì)胞核病毒顆粒滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面細(xì)胞膜被病毒顆粒穿透細(xì)胞膜連接細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞對(duì)細(xì)胞膜融合過(guò)程的理解細(xì)胞核細(xì)胞核病毒顆粒滅活的病毒顆粒黏附38細(xì)胞融合的過(guò)程包括：細(xì)胞膜的融合細(xì)胞質(zhì)融合細(xì)胞核融合，其中細(xì)胞膜的融合是細(xì)胞融合的先導(dǎo)，在細(xì)胞膜融合中體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有流動(dòng)性。細(xì)胞融合的過(guò)程包括：395.動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程5.406.動(dòng)物細(xì)胞融合的意義突破了

方法的局限，使

成為可能。成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和

等的重要手段。如：利用

，為制造____________開(kāi)辟了新途徑。有性雜交遠(yuǎn)緣雜交生物新品種培育雜交瘤技術(shù)單克隆抗體6.動(dòng)物細(xì)胞融合的意義突破了方法的局限，使41植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞融合方法用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段與植物體細(xì)胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導(dǎo)二、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的對(duì)比細(xì)胞膜的流動(dòng)性離心、電激、振動(dòng)、聚乙二醇等誘導(dǎo)植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)42結(jié)果獲得雜交細(xì)胞，以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品用途克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)展雜交親本范圍，培育新品種制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等意義突破有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能獲取雜種植株結(jié)果獲得雜交細(xì)胞，以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品用途克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的43每一種B細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體每一種B細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體44在體外培養(yǎng)條件下，一個(gè)B淋巴細(xì)胞是不可能無(wú)限增殖的在體外培養(yǎng)條件下，一個(gè)B淋巴細(xì)胞是不可能無(wú)限增殖的45B淋巴細(xì)胞（已免疫）小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞（已免疫）46二、單克隆抗體的制備1975年設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)1984年獲得諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)米爾斯坦科勒二、單克隆抗體的制備1975年設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)米爾斯坦科勒47免疫老鼠注射特定的抗原蛋白培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合免疫老鼠注射特定的抗原蛋白培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞48融合操作后培養(yǎng)基中有哪些細(xì)胞？?jī)蓛扇诤系模築---BB---瘤瘤---瘤第一次篩選（選擇性培養(yǎng)）B---瘤融合——雜交瘤細(xì)胞（多種）

未融合的:B瘤融合操作后培養(yǎng)基中有哪些細(xì)胞？?jī)蓛扇诤系模築---B49第二次篩選既能分泌專一抗體又能在體外無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞多次抗體檢測(cè)克隆化培養(yǎng)特異性強(qiáng)、靈敏度高、大量制備

的單克隆抗體經(jīng)檢測(cè)抗體呈陽(yáng)性第二次篩選既能分泌專一抗體又能在體外無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞多次50體內(nèi)培養(yǎng)從小鼠腹水中體外培養(yǎng)從細(xì)胞培養(yǎng)液體外培養(yǎng)單克隆抗體單克隆抗體注射到小鼠腹腔中雜交瘤細(xì)胞體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)單克隆抗體單克隆抗體注射到小鼠腹腔中511.過(guò)程1.過(guò)程522.單克隆抗體的應(yīng)用1）作為診斷試劑：具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物：?jiǎn)慰寺】贵w主要用于癌癥的治療制成“生物導(dǎo)彈”2.單克隆抗體的應(yīng)用1）作為診斷試劑：2）用于治療疾病和運(yùn)載53總結(jié)：兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體制備三個(gè)新名詞滅活的病毒雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體既能分泌特異性抗體又能無(wú)限增殖特異性強(qiáng)靈敏度高大量制備總結(jié)：兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體制備三個(gè)新名詞滅活的病毒54練一練1.與植物體細(xì)胞雜交相比，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理及其特有的誘導(dǎo)因子分別是()A．細(xì)胞膜的流動(dòng)性、離心B．細(xì)胞膜的流動(dòng)性、滅活的病毒C．細(xì)胞的全能性、電激D．細(xì)胞的全能性、滅活的病毒B練一練1.與植物體細(xì)胞雜交相比，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理及其特有的552.下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是()

A．特異性強(qiáng)、靈敏度高B．與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”C．體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體D．單克隆抗體是由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后培養(yǎng)的細(xì)胞系分泌的練一練C2.下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是()練一練56練一練3.動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是()A．誘導(dǎo)融合的方法完全相同B．所用的技術(shù)手段完全相同C．所采用的原理完全相同D．都能形成雜種細(xì)胞D練一練3.動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正57練一練4.下列各圖表示單克隆抗體制備過(guò)程的各階段圖解，請(qǐng)根據(jù)圖回答下列問(wèn)題。(1)請(qǐng)用