齊魯醫(yī)學(xué)臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要

臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁(yè)!臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)是采用各種實(shí)驗(yàn)室檢查方法和技術(shù)，對(duì)來(lái)自機(jī)體的血液、尿液、糞便以及分泌物和排泄物等標(biāo)本進(jìn)行一般性狀觀察，理學(xué)、化學(xué)、免疫學(xué)、病原學(xué)和顯微鏡等檢查，為疾病篩查和診斷提供簡(jiǎn)便、快速的檢測(cè)結(jié)果。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁(yè)!節(jié)概述血液生理概要標(biāo)本采集、送檢、保存與處理

標(biāo)本抗凝

血涂片的制備血細(xì)胞染色方法血細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)法臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁(yè)!一血液生理概要1.血液的組成血漿：血液加抗凝劑后分離出來(lái)的液體部分。血清：血液離休后自然凝固分離出來(lái)的液體。45%血塵55%8－9%91－92%臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁(yè)!黏滯性血細(xì)胞比容（紅細(xì)胞數(shù)量）血漿粘度（血漿蛋白濃度）比密血液比密與紅細(xì)胞相關(guān)男1.055~1.063女1.051~1.060血漿比密與血漿蛋白相關(guān)1.025~1.030滲透壓血漿滲透壓290~310mOsm/（kg?H2O）PH7.35~7.45凝固性凝血因子激活

臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁(yè)!二、血標(biāo)本的采集??、送檢、保存與處理（一）血標(biāo)本的采集

采血靜脈采血毛細(xì)血管采血普通采血法真空采血法臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁(yè)!臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁(yè)!靜脈采血法臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁(yè)!真空采血法（40年代，美國(guó)BD公司）

套筒式和頭皮靜脈式兩種優(yōu)點(diǎn)：

血樣無(wú)需容器之間的轉(zhuǎn)移，減少溶血現(xiàn)象，保持

血液標(biāo)本的完整性，使檢驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確，也有利于防止醫(yī)院內(nèi)血源性傳染病的交叉感染和環(huán)境

保護(hù)。缺點(diǎn)：

真空采血管價(jià)格較高注意:采血后,先拔下刺塞針端的采血試管,后拔穿刺針。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁(yè)!II.持針器2008-10-212008-10-21臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁(yè)!臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁(yè)![采血部位]WHO推薦采取毛細(xì)血管血以左手中指或無(wú)名指指尖內(nèi)側(cè)為宜1手指采血：

優(yōu)點(diǎn)：方便→獲較多血量→檢查結(jié)果比較恒定缺點(diǎn)：與靜脈血仍在某些差異。2耳垂采血：

優(yōu)點(diǎn)：痛感輕→方便→適用于反復(fù)采集

缺點(diǎn)：血循環(huán)差→受氣溫影響大檢查結(jié)果不恒定

RBC、WBC、Hb、Hct結(jié)果均比靜脈血高，特別是冬季。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁(yè)!2008-10-21臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁(yè)![注意事項(xiàng)]1、采血部位皮膚完整。2、無(wú)菌技術(shù)操作：防采血部位感染，一人一針?lè)栏窝?、艾滋病?、采血針刺入皮膚應(yīng)深淺適中。4、多項(xiàng)檢查時(shí)，采血次序?yàn)椋築PC計(jì)數(shù)→RBC計(jì)數(shù)、Hb測(cè)定→WBC計(jì)數(shù)與分類。5、取血用于自動(dòng)化血細(xì)胞分析儀，要防止棉球纖維混入堵塞儀器。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁(yè)!

1.血標(biāo)本運(yùn)輸2.血標(biāo)本保存3.檢驗(yàn)后標(biāo)本處理

（二）血液標(biāo)本運(yùn)輸、保存與處理臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁(yè)!2.乙二胺四乙酸（EDTA）鹽a.抗凝原理：螯合鈣離子b.使用方法：15g/L濃度EDTA和血液1：10適用范圍：對(duì)血細(xì)胞形態(tài)影響小,適合血常規(guī)檢查、Hct不適用于：影響血小板聚集和凝血因子功能,不宜凝血因子檢查和血小板功能試驗(yàn)。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁(yè)!優(yōu)點(diǎn)：抗凝能力強(qiáng)、不影響血細(xì)胞體積、不易溶血、能耐高溫。適用范圍：紅細(xì)胞檢驗(yàn)（紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定、紅細(xì)胞比積）和多種生化分析e.不適用于：

WBC和BPC計(jì)數(shù)、血涂片檢查、凝血功能檢驗(yàn)。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁(yè)!5.雙草酸鹽抗凝劑

a.抗凝原理：草酸鈣沉淀使用方法：草酸鉀0.8g,草酸銨1.2g（100ml）與血液1：10（80°C以下烘干）適用范圍：紅細(xì)胞檢驗(yàn)（紅細(xì)胞比積、計(jì)數(shù)）

d.不適于:血小板計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類計(jì)數(shù),電解質(zhì)測(cè)定臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁(yè)!小結(jié)血液是由血細(xì)胞和血漿組成的紅色、粘稠、不透明、帶腥味的混懸液。凡需血液量較少的檢驗(yàn)項(xiàng)目，常用皮膚采血法，通常采手指血。采血時(shí)要注意采血部位要無(wú)病變，要擦去滴血，不能用力擠壓。凡需血液量較多的檢驗(yàn)項(xiàng)目，要用靜脈采血法，其采血部位常用肘前靜脈。如需要抗凝抗凝血標(biāo)本時(shí)，則需要根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目的要求，采用枸櫞酸鈉、乙二胺四乙酸鹽和肝素等抗凝劑來(lái)阻止血液凝固。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁(yè)!請(qǐng)您練習(xí)答案:皮膚采血法用注意什么問(wèn)題?

①所選擇采血部位的皮膚應(yīng)完好。②嚴(yán)格消毒皮膚，防止采血部位感染。③皮膚消毒后，待乙醇揮發(fā)干后再刺針。④如血流不暢，切不可用力擠壓勉強(qiáng)采血，而應(yīng)重新針刺。⑤出血不止時(shí)，可用消毒干棉球壓迫至血不再流出為止，必要時(shí)應(yīng)在報(bào)告單上注明，提醒臨床醫(yī)生注意。⑥進(jìn)行多項(xiàng)細(xì)胞檢查要分項(xiàng)采血時(shí)，采血的次序?yàn)椋貉“逵?jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁(yè)!請(qǐng)您練習(xí)答案:請(qǐng)說(shuō)出枸櫞酸鈉的抗凝原理、用途及其用量？枸櫞酸鈉能與血液中的鈣離子形成可溶性的螯合物，使Ca2+失去凝血作用，從而阻止血液凝固。主要用于血沉、凝血象和血小板功能檢查。凝血象檢查常用0.109mol/L的水溶液，與血液之比通常為1：9。魏氏法血沉測(cè)定用濃度為0.105mol/L，與血液比例為1:4（V：V）。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁(yè)!教學(xué)目標(biāo)1.敘述載玻片的清潔方法、血涂片的制備方法及合格血片的標(biāo)準(zhǔn)。2.闡述瑞氏染色的原理、染液成分、染色方法、注意事項(xiàng)和染色結(jié)果的判斷。3.知道吉姆薩染色法和混合染色法。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁(yè)!四血涂片的制備血涂片染色顯微鏡檢查用途：細(xì)胞形態(tài)檢查，細(xì)胞數(shù)量評(píng)估，網(wǎng)織紅、異常細(xì)胞、寄生蟲(chóng)檢驗(yàn)。血膜過(guò)厚：細(xì)胞重疊縮小血膜過(guò)?。杭?xì)胞分布不勻，白細(xì)胞多集中于邊緣臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁(yè)!操作推片載玻片25°--30°30°--45°血液推玻片載玻片制備過(guò)程：臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁(yè)!造成血膜薄的原因示意圖角度小血滴小血膜薄角度小速度慢血膜薄<25°臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁(yè)!堿性染料：為陽(yáng)離子染料，能接受質(zhì)子，染細(xì)胞核的染料。如亞甲藍(lán)、天青。酸性染料：為陰離子染料，能釋放質(zhì)子。主要有熒烷-氧雜蒽染料和偶氮染料兩類，能結(jié)合細(xì)胞的堿性成分并染色，如血紅蛋白、嗜酸性顆粒成分等。3.復(fù)合染料：同時(shí)具有陰、陽(yáng)離子型的染料如瑞氏染料（一）染料（天然染料和人工染料）

發(fā)色基團(tuán)和助色基團(tuán)使生物學(xué)染色劑產(chǎn)生顏色和被染組織親合。五細(xì)胞常用的染色方法臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁(yè)!

瑞氏染色法（一）染色原理分兩相進(jìn)行，相是酸性伊紅與細(xì)胞中的堿性物質(zhì)如血紅蛋白、嗜酸性顆粒結(jié)合；堿性亞甲藍(lán)與細(xì)胞中的酸性物質(zhì)如核染色質(zhì)、嗜堿性顆粒、血小板結(jié)合。第二相是亞甲藍(lán)和伊紅結(jié)合在適宜條件下形成紫色的亞甲藍(lán)-伊紅復(fù)合物，結(jié)果使白細(xì)胞核染色質(zhì)成紫色（瘧原蟲(chóng)的染色質(zhì)成紅色），中性粒細(xì)胞的顆粒及血小板顆粒區(qū)成紫色。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁(yè)!

（二）試劑

1.Wright染液瑞氏染粉0.1g,甲醇60.0ml

磷酸鹽緩沖液（PBS）：（PH6.4－6.8）磷酸二氫鉀（無(wú)水）0.3g，磷酸氫二鈉（無(wú)水）0.2g,蒸餾水加到1000ml。配好后用磷酸鹽溶液校正pH，塞緊瓶口備用。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁(yè)!注意事項(xiàng)：

a.血膜要干透后才能染色，否則染色時(shí)易脫落b.染色時(shí)間與染液濃度、室溫及細(xì)胞多少有關(guān)，一般染液淡、染色時(shí)間長(zhǎng)些效果好。c.染液不能過(guò)少，以防蒸發(fā)沉淀。d.沖洗時(shí)不能先倒掉染液，應(yīng)以流水沖，防染料沉著。沖洗時(shí)間也不能長(zhǎng)。e.染色過(guò)淡，可復(fù)染。f.染色過(guò)深可用水沖洗或浸泡，還可用甲醇脫色臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁(yè)!

姬姆薩染色法（一）染色原理：基本成分仍然是伊紅和亞甲藍(lán)，改進(jìn)了染料的質(zhì)量，使細(xì)胞核著色好，結(jié)構(gòu)顯示更清晰，而胞漿和中性顆粒染色較差。（二）試劑Giemsa甲醇純甘油（三）染色方法1.甲醇固定干燥血膜3-5min2.將血膜在染液中浸染10-30min3.流水沖洗,待干后鏡檢臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁(yè)!六血細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)法原理：將待測(cè)標(biāo)本經(jīng)過(guò)適當(dāng)稀釋（或濃縮），有時(shí)還需將標(biāo)本進(jìn)行染色后，充入計(jì)數(shù)池，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的細(xì)胞，再換算成每升標(biāo)本內(nèi)的細(xì)胞數(shù)。優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便、設(shè)備簡(jiǎn)單、價(jià)廉缺點(diǎn)：影響因素多、費(fèi)時(shí)、費(fèi)力臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁(yè)!教學(xué)目標(biāo)掌握：

血液標(biāo)本采集的方法及評(píng)價(jià)，抗凝劑的選擇應(yīng)用，血涂片制備方法和染色原理，血細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)方法。熟悉：

血液生理概述和標(biāo)本保存。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第32頁(yè)!2.血液的理化性質(zhì)血量：正常人血液量70±10ml/kg體重，成人4~5L，占體重的6%~8%。顏色：動(dòng)脈血鮮紅色HbO2↑靜脈血暗紅色Hbred↑貧血病人紅色變淺CO、氰化物中毒櫻紅色紅細(xì)胞懸浮穩(wěn)定性唾液酸根形成Zeta電位

臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第33頁(yè)!3.血液的功能運(yùn)輸功能協(xié)調(diào)功能維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定防御功能臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第34頁(yè)!

靜脈采血法(venipunctureforbloodcollection)凡需血量較多的檢查＞0.5ml如：ESR、Hct、凝血因子的測(cè)定等。[部位]淺表靜脈均可,常用肘部靜脈，不明顯時(shí)可用手背、踝部，幼兒可用頸外靜脈。[體位]坐位或臥位[捆扎時(shí)間]＜1min臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第35頁(yè)!二、靜脈采血法【采血方法】準(zhǔn)備→選擇靜脈→消毒→扎壓脈帶→穿刺、松壓脈帶→抽血→拔針止血→注入試管。如以下視頻所示臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第36頁(yè)!普通采血法1.避免溶血,器具干燥,避免氣泡2.先拔針頭,再緩緩注入試管3.與抗凝劑混勻時(shí)輕輕顛倒4.嚴(yán)格消毒5.抽血時(shí)只能外抽不能內(nèi)推臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第37頁(yè)!

I.采血針2008-10-21臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第38頁(yè)!

III.真空采血管2008-10-21臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第39頁(yè)!

血量＜0.1ml的檢驗(yàn)項(xiàng)目：RBC計(jì)數(shù)、WBC計(jì)數(shù)、BPC計(jì)數(shù)、Hb測(cè)定等

毛細(xì)血管采血法Skinpunctureforbloodcollection臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第40頁(yè)!3、其他部位：拇指、拇趾或足底外側(cè)緣采血——半歲以下嬰幼兒皮膚完整處——嚴(yán)重?zé)齻遊采血針]三棱針或?qū)Ｓ玫摹安裳槨睘楹?，使用前者?yīng)高壓滅菌，一人一針。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第41頁(yè)!臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第42頁(yè)!兩種采血方法的優(yōu)缺點(diǎn)比較毛細(xì)血管采血靜脈采血缺點(diǎn)限制了重復(fù)實(shí)驗(yàn)和追加實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本量少，局部炎癥可得假結(jié)果，組織液可混入不同抗凝劑的使用，改變血液性質(zhì)，影響有形成分的形態(tài)優(yōu)點(diǎn)價(jià)廉、快速、操作簡(jiǎn)便，標(biāo)本可直接測(cè)定標(biāo)本代表性大，無(wú)組織液影響，適于臨床研究，可重復(fù)實(shí)驗(yàn)和追加其他實(shí)驗(yàn)臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第43頁(yè)!

三、血標(biāo)本的抗凝1、枸櫞酸鈉（檸檬酸鈉）a.抗凝原理：螯合鈣離子使用方法配成109mmol/L的濃度和血液1：9

配成105mmol/L的濃度和血液1：4

化學(xué)名：3-羥基-3-羧基戊二酸（三鈉鹽）c.適用范圍：止血學(xué)檢驗(yàn)、血沉、輸血保養(yǎng)液（毒性?。ヾ.不適用于：血細(xì)胞計(jì)數(shù)臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第44頁(yè)!3.肝素（含硫酸基團(tuán)的粘多糖）抗凝原理：低濃度時(shí)抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之間的作用，加強(qiáng)抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶，從而阻止凝血酶形成，還能抑制凝血酶的自我催化及抑制因子Ⅹ的作用；高濃度時(shí)阻斷凝血酶和纖維蛋白的反應(yīng)。

b.適用方法：1g/L濃度的肝素鈉與血液1：10臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第45頁(yè)!4.草酸鈉（乙二酸的鈉鹽）a.抗凝原理：草酸鈣沉淀b.使用方法：草酸鈉0.1mol/L和血液1：9c.適用范圍：止血學(xué)檢驗(yàn)。d.不適用于：對(duì)凝血因子V保護(hù)功能差，影響PT測(cè)定；沉淀物影響自動(dòng)凝血儀的使用。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第46頁(yè)!

物理方法抗凝

脫纖維蛋白：

將血液注入有玻璃珠的器皿中，轉(zhuǎn)動(dòng)，纖維蛋白纏繞凝固于玻璃球，使血液不能凝固。適用于免疫學(xué)檢驗(yàn)和紅斑

性狼瘡細(xì)胞檢查。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第47頁(yè)!臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第48頁(yè)!請(qǐng)您練習(xí)請(qǐng)說(shuō)出靜脈采血的步驟？答案:準(zhǔn)備→選擇靜脈→消毒→扎壓脈帶→穿刺、松壓脈帶→抽血→拔針止血→注入試管。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第49頁(yè)!請(qǐng)您練習(xí)請(qǐng)將下列抗凝方法和適宜的項(xiàng)目用線連接起來(lái)。枸櫞酸鈉血細(xì)胞比容測(cè)定乙二胺四乙酸鹽紅斑狼瘡細(xì)胞的檢驗(yàn)

肝素凝血象脫纖維法一般血液學(xué)檢查臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第50頁(yè)!良好血涂片的標(biāo)準(zhǔn)厚薄適宜,頭體尾分明，細(xì)胞分布均勻,血膜邊緣整齊兩側(cè)兩端留有空隙良好血涂片尾體頭臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第51頁(yè)!1.玻片清潔：

a新玻片處理：用鹽酸浸泡24小時(shí)。

b用過(guò)玻片處理：用洗滌劑清洗。

c使用中玻片處理：只能持玻片邊緣，保持清潔、干燥、中性、無(wú)油膩。臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第52頁(yè)!角度大

角度大速度快血膜厚血滴過(guò)大,血膜過(guò)厚造成血膜厚的原因示意圖臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第53頁(yè)!血膜分布不均：主要由于以下原因所致:推片用力不均,血膜成厚薄相間的梯形玻片不清潔有油跡血膜出現(xiàn)空泡區(qū)推片邊緣不齊血膜出現(xiàn)線條樣缺損臨檢血液概述、采血、抗凝劑概要共60頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第54頁(yè)!（二）細(xì)胞染色原理：1.物