羅氏試劑盒說明書 FT4 11810537001V15

1、11810537001V15游離甲狀腺素（free thyronine，F(xiàn)T4） Elecsys 和 cobas e 分析儀 5/5 2009-05, V 15 03051986 190 200測試本試劑盒適用的分析儀Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途用于體外定量檢測人體血清或血漿中的FT4。Elecsys和cobas e 免疫分析儀的工作原理是電化學(xué)發(fā)光免疫分析“ECLIA”。臨床應(yīng)用甲狀腺素（T4）是甲狀腺生理調(diào)節(jié)系統(tǒng)的重要組成部分，并在機(jī)體的基礎(chǔ)代謝中發(fā)揮作用。絕大部份的T4與轉(zhuǎn)

2、運(yùn)蛋白（TBG、前白蛋白、白蛋白）結(jié)合。游離的T4是具有生物學(xué)活性的部份。FT4的測定是臨床診斷的重要指標(biāo)。當(dāng)懷疑甲狀腺功能紊亂時(shí)，常常聯(lián)合檢測FT4和TSH。FT4也適合于甲狀腺抑制治療的療效監(jiān)測。FT4測定的優(yōu)點(diǎn)是不受結(jié)合蛋白濃度和結(jié)合特性變化的影響,因此理論上不需要額外檢測一些結(jié)合參數(shù)（T-uptake，TBG）。有多種可靠的方法可用于測定FT4水平。平衡透析或超濾法直接測定FT3和FT4作為參考方法用于標(biāo)準(zhǔn)化臨床常規(guī)開展檢測的那些免疫學(xué)方法。Elecsys FT4檢測采用釕標(biāo)記的抗T4特異性抗體，且使用的抗體量較少（約為12正常血清樣本總T4的含量），因此結(jié)合T4與FT4之間的結(jié)合動(dòng)態(tài)

3、平衡性不受影響。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕檢測原理競爭法，總檢測時(shí)間：18分鐘第一次孵育：15l樣本和釕復(fù)合物標(biāo)記的特異性抗T4抗體一起孵育。第二次孵育：添加生物素化的T4和包被鏈霉素的磁珠微粒，前者將與未結(jié)合的標(biāo)記結(jié)合，形成抗體-半抗原復(fù)合物。復(fù)合物通過生物素、鏈霉素之間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。將反應(yīng)液吸入測量池中，通過電磁作用將磁珠吸附在電極表面。未與磁珠結(jié)合的物質(zhì)通過ProCell被去除。給電極加以一定的電壓，使復(fù)合體化學(xué)發(fā)光，并通過光電倍增器測量發(fā)光強(qiáng)度。Elecsys軟件自動(dòng)通過定標(biāo)曲線計(jì)算得到檢測結(jié)果

4、。試劑工作溶液M包被鏈霉素的磁珠微粒（透明瓶蓋），每瓶12ml；包被鏈霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐劑。R1釕復(fù)合物標(biāo)記的Anti-T4抗體（灰色瓶蓋），每瓶18ml：釕復(fù)合物標(biāo)記的單克隆Anti-T4抗體（羊），50ng/mL；磷酸鹽緩沖液100 mmol/L，Ph7.0; 防腐劑。R2 生物素化的T4（黑色瓶蓋），每瓶18ml：生物素化的T4 2.5ng/mL；磷酸鹽緩沖液100 mmol/L，pH7.0; 防腐劑。警告和注意事項(xiàng)僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時(shí)必需遵循所有試驗(yàn)室試劑操作的注意事項(xiàng)。所有廢棄物必需按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進(jìn)行處置。專業(yè)人員可要求獲得安全數(shù)據(jù)報(bào)告。避免試劑和樣本

5、（樣本、定標(biāo)液和質(zhì)控品）產(chǎn)生氣泡。試劑處理試劑盒（M,R1和R2）為即用型，不能分開使用。試劑相關(guān)信息可以通過試劑條形碼閱讀獲取。儲(chǔ)存及穩(wěn)定性存放于28。請垂直擺放Elecsys FT4試劑盒，確保儀器的自動(dòng)攪拌器能夠完全混勻磁珠微粒。穩(wěn)定性：未開封試劑，28有效期內(nèi)均可使用開封試劑，2812周放置分析儀MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上6周放置分析儀Elecsys 2010 和 cobas e 411上6周放置分析儀Elecsys 1010上6周（試劑交替放置于冰箱和20-25的分析儀中，持續(xù)開蓋的情況下至多20小時(shí)）樣本的采集和準(zhǔn)備僅以下羅列的樣本類型

6、通過測試并符合檢測要求。血清樣本須用標(biāo)準(zhǔn)試管或有分離膠的真空管收集。肝素鋰、鈉、銨，K3-EDTA，枸櫞酸鈉，氟化鈉/草酸鉀抗凝的血漿（未稀釋）都適用。標(biāo)準(zhǔn)：回收率90-110%，斜率0.9-1.1，截距0.95。穩(wěn)定性： 2-8可保存7天；-20可保存1個(gè)月，一次凍融。選擇合適的試管進(jìn)行不同類型樣本的采集，不是所有的試管均可用于檢測。不同廠商的樣本采集系統(tǒng)可能含有不同的物質(zhì)，某些情況下會(huì)影響檢測結(jié)果。如果使用原始管進(jìn)行檢測（樣本前處理系統(tǒng)）時(shí)，應(yīng)遵循生產(chǎn)商所提供的指導(dǎo)。有沉淀和冰凍的樣本檢測前必須先作離心處理。避免使用熱滅活的樣本。添加疊氮化合物的樣本和質(zhì)控品均不能使用。檢測前，樣本、定標(biāo)液

7、及質(zhì)控品須室溫平衡(20-25)。由于蒸發(fā)因素的影響，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品在分析儀上的檢測必須2小時(shí)內(nèi)完成。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。需要的物品（未提供）貨號(hào)11731661122, FT4 CalSet, 規(guī)格4 x1 ml貨號(hào)11731416122, PreciControl Universal，規(guī)格2 x3 ml，分別為PreciControl Universal 1和2或貨號(hào)11731416190, PreciControl Universal，規(guī)格2 x3 ml，分別為PreciControl Universal 1和2實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備Elecsys 1010/2010 、M

8、ODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析儀Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析儀所需材料：貨號(hào)11662988122, ProCell, 6 x 380 mL ,系統(tǒng)緩沖液貨號(hào)11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL,測量池洗液 貨號(hào)11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液貨號(hào)11933159001, SysClean 適配器 貨號(hào)11706829001, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反應(yīng)管或者貨號(hào)11706802001, Elecsys 2010

9、分析杯, 60 x 60 反應(yīng)管貨號(hào)11706799001, Elecsys 2010 分析吸頭, 30 x 120 移液管吸頭 MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀所需材料：貨號(hào)04880340190,ProCell M, 2 x 2 L 系統(tǒng)緩沖液貨號(hào)04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L測量池洗液 貨號(hào)03023141001, PC/CC杯, 12個(gè)用于在檢測前預(yù)熱Procell M及Cleancell M。貨號(hào)03005712190,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在檢測完畢后或更換試劑時(shí)清洗

10、試劑針。貨號(hào)12102137001,反應(yīng)杯/吸頭 組合裝,84反應(yīng)杯/吸頭 組合裝48盒,廢物袋 貨號(hào)03023150001, WasteLiner,廢物袋 貨號(hào)03027651001,系統(tǒng)清潔適配器 M所有分析儀需要：貨號(hào)11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系統(tǒng)清洗液 檢測要優(yōu)化檢測性能，請遵照本說明書中有關(guān)分析儀的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀操作手冊。試劑使用前分析儀自動(dòng)攪拌磁珠微粒，使其處于懸浮狀態(tài)。試劑相關(guān)信息可通過條形碼自動(dòng)讀取，在特殊情況下，分析儀無法自動(dòng)讀取條碼信息時(shí)，請輸入條碼標(biāo)簽上的15位數(shù)字序列。MODULAR ANALYTICS

11、E170、Elecsys2010和cobas e分析儀：將冷藏試劑室溫平衡至20C左右，放置分析儀的試劑盤（20C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。分析儀能自動(dòng)調(diào)節(jié)試劑溫度和開、關(guān)各試劑盒瓶蓋。Elecsys 1010 分析儀: 將冷藏試劑室溫平衡至20-25C左右，放置分析儀的試劑盤（20- 25C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。使用前后手動(dòng)開關(guān)試劑盒瓶蓋。使用后保存于2-8C冰箱。定標(biāo)溯源性：Elecsys FT4 檢測可溯源至酶免FT4 檢測。后者可溯源至平衡透析法3，4。每套Elecsys FT4試劑的條碼標(biāo)簽上均含有其批號(hào)特異的定標(biāo)信息。使用Elecsys FT4 定標(biāo)液可調(diào)整定標(biāo)曲線。定校頻率：新批號(hào)試劑必

12、須進(jìn)行定標(biāo)（新試劑盒在分析儀上放置不能超過24小時(shí)）。以下情況建議重新進(jìn)行定標(biāo)：MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析儀:使用同一批號(hào)試劑，1月后（28天）7天后（同一試劑盒在分析儀上使用）Elecsys 1010 分析儀:每盒試劑7天后（室溫 20-25C）3天后（室溫 25-32C）所有儀器根據(jù)需要：如失控。質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控可使用Elecsys PreciControl Universal 1和2。也可以使用其他合適的質(zhì)控品。各濃度質(zhì)控至少每24小時(shí)內(nèi)檢測一次，每次更換試劑盒或定標(biāo)后也須進(jìn)行質(zhì)控。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)各自的情況設(shè)定合適的控制

13、限和質(zhì)控周期。質(zhì)控值必須處于規(guī)定的控制限內(nèi)。若失控每個(gè)試驗(yàn)室必須采取相應(yīng)的糾正措施。請遵循政府或行業(yè)導(dǎo)則關(guān)于質(zhì)控的規(guī)定。計(jì)算儀器會(huì)自動(dòng)計(jì)算每個(gè)樣本中的分析物濃度，單位是pmol/L，ng/dL或ng/L。轉(zhuǎn)換因子:pmol/L0.077688=ng/dLng/dL12.872pmol/L pmol/L0.77688=ng/L 干擾因素檢測結(jié)果不受黃疸（膽紅素701mol/L或41 mg/dL）, 溶血（血紅蛋白1.2 mmol/L或 2 g/dL）, 脂血(脂肪乳劑 2000mg/dL)和生物素 5mg/天），必須在末次生物素治療8小時(shí)后采集樣本。濃度高達(dá)339 IU/ml的類風(fēng)濕因子和血液透

14、析樣本均對檢測無影響。體外對26種常用藥物進(jìn)行試驗(yàn),除治療劑量水平的速尿會(huì)升高FT4結(jié)果外，其他藥物未發(fā)現(xiàn)會(huì)影響檢測結(jié)果。接收含有D-T4成份降脂藥物治療的病人不能檢測FT4。如果需要對這類病人進(jìn)行甲狀腺功能的檢測，必須停藥46周，使生理狀態(tài)回復(fù)正常后方能進(jìn)行。6新生兒的樣本不適宜進(jìn)行FT4的檢測。甲狀腺激素的自身抗體干擾檢測。結(jié)合蛋白異常，如FDH患者 (家族性異常白蛋白高甲狀腺素血癥)在特定條件下可能會(huì)導(dǎo)致檢測值偏離預(yù)期結(jié)果。7少數(shù)病例中極高濃度的鏈霉素抗體和釕會(huì)影響檢測結(jié)果。這類影響可通過適宜的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行消除。作為診斷指標(biāo)，必須結(jié)合患者病史，臨床檢查和其他臨床資料來綜合評估檢測結(jié)果。檢

15、測范圍0.300-100.0 pmol/L或O.023-7.77 ng/dL（通過最低檢出限和廠商定標(biāo)曲線的最高值確定）。低于檢出限的值報(bào)告100.0 pmol/L或7.77 ng/dL。稀釋標(biāo)本不可稀釋。血中的T4是以游離和蛋白結(jié)合狀態(tài),動(dòng)態(tài)平衡存在的，結(jié)合蛋白的濃度變化會(huì)打破這種平衡。期望值正常甲狀腺功能：12-22 pmol/L（0.93-1.7 ng/dL）該期望值通過檢測801份健康個(gè)體的FT4，取2.5th和97.5th的百分位點(diǎn)值獲得。 注：MCE甲狀腺參考范圍，1998第一季度如果需要獲取兒童、青春期和妊娠婦女的參考區(qū)間信息可參見名為兒童和成人參考區(qū)間的小冊子，貨號(hào)：04640

16、292（英語）；04625889（德語）。該手冊還包含了參考人群組的甲狀腺參數(shù)影響因素的研究結(jié)果。參照NACB導(dǎo)則的入選及排除規(guī)則也羅列在內(nèi)（如：甲狀腺超聲檢測的體積和密度）。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)確定參考范圍的適用性，必要時(shí)建立本實(shí)驗(yàn)室的參考范圍。特殊的性能指標(biāo)試劑在分析儀上的性能試驗(yàn)數(shù)據(jù)如下。各實(shí)驗(yàn)室由于具體情況不同，所得出的數(shù)據(jù)可能會(huì)稍有差異。精密度應(yīng)用Elecsys試劑盒、人混合血清/血漿樣本和質(zhì)控品驗(yàn)證重復(fù)性，按照CLSI的EP5-A2執(zhí)行：每天6次，共10天 (n=60)。批內(nèi)精密度由 MODULAR ANALYTICS E170分析儀完成，n=21下面是獲得的結(jié)果。b) HS =人

17、血清c) PC U = PreciControl Universal分析靈敏度（最低檢出限）0.30 pmol/L（0.23 ng/dL）最低檢出限是指區(qū)別于零濃度的最低分析物水平。方法學(xué)比較使用臨床標(biāo)本比較Elecsys FT4檢測和酶免 FT4 檢測，相關(guān)性數(shù)據(jù)如下（pmol/L）：標(biāo)本數(shù)n=314Passing/Bablok23 線性回歸y = 1.03x + 0.39 y = 1.01x + 0.63r = 0.900 r = 0.987比較樣品濃度約為281 pmol/L(0.166.3 ng/dL)。分析特異性抗體交叉反應(yīng)如下：L-T4和D-T4 100%; L-T3 1.53；D

18、-T3 1.38；3-rT3 0.002%;3,5-二碘-L-酪氨酸 0.01%; 3,3,5,5-tetra-iodothyroacetic acid 38.5%.參考文獻(xiàn)1. Wheeler MH, Lazarus JH. Diseases of the Thyroid. London,Glasgow, Weinheim, New York, Tokyo, Melbourne, Madras:2. Pfannenstiel P, Saller B. Schilddrsenkrankheiten Diagnose und Therapie. Berliner Medizinische Ver

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