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1、PAGE5第二節(jié)基因工程的原理和技術(shù)【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1簡述基因工程的原理2描述基因工程基本步驟的幾個步驟3舉例說出篩選含有目的基因的受體細(xì)胞的原理【教學(xué)重點】基因工程的基本操作步驟【教學(xué)難點】從基因文庫中獲取目的基因;篩選含有目的基因的受體細(xì)胞【教學(xué)過程】(一)引入新課復(fù)習(xí):基因工程的操作工具:限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶運載體或載體提出問題:先解決為什么要分五個步驟的問題,然后解決每一步驟的技術(shù)方法問題。1為什么要有“目的基因的獲取”這一步學(xué)生活動)引導(dǎo)學(xué)生看本專題題圖中基因工程的概念:“基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計,通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出
2、更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?!笨梢哉f這既是概念,也是原理。這里所說的“更符合人們需要”,就是目的,那么更符合人們需要的那個基因就是目的基因了。有了目的基因,我們才能賦予一種生物以另一種生物的遺傳特性。2為什么要有“表達(dá)載體的構(gòu)建”這一步學(xué)生活動)思考:單獨的DNA片段目的基因是不能穩(wěn)定遺傳的。課文中談到構(gòu)建表達(dá)載體的目的是為了使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能表達(dá)和發(fā)揮作用。3為什么要有“目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞”這一步學(xué)生活動)思考討論:教材指出含有目的基因的表達(dá)載體只有進(jìn)入受體細(xì)胞,并且維持穩(wěn)定和表達(dá),才能實現(xiàn)一種生物的基因在另一種生物中的轉(zhuǎn)化。
3、4為什么要有“篩選含有目的基因的受體細(xì)胞”的過程學(xué)生活動)思考討論:這是因為目的基因是否真正插入受體細(xì)胞的DNA中,是否能夠在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳只有通過檢測、鑒定才能得知。5為什么要有“目的基因的表達(dá)”這一步學(xué)生活動)思考討論:目的基因在受體細(xì)胞中的表達(dá)與否,決定了基因工程是否最終成功,必須進(jìn)行鑒定,確定其是否表達(dá)。(二)目的基因的獲?。▎栴}引入)“目的基因的獲取”有什么方法呢你能推測出由mRNA反轉(zhuǎn)錄形成cDNA的過程大致分為哪些步驟嗎(學(xué)生活動)學(xué)生思考討論。(總結(jié)歸納)1970年,特明)和巴爾的摩)證實了RNA病毒中含有一種能將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA的酶,這種酶被稱為依賴RNA的DNA聚合酶
4、,由于與中心法則中的從DNA到RNA的轉(zhuǎn)錄是反向的,所以稱為反轉(zhuǎn)錄酶reversetranscriRNA反轉(zhuǎn)錄形成cDNAcDNA合成過程是:第一步,反轉(zhuǎn)錄酶以RNA為模板合成一條與RNA互補的DNA單鏈,形成RNA-DNA雜交分子。第二步,核酸酶H使RNA-DNA雜交分子中的RNA鏈降解,使之變成單鏈的DNA。第三步,以單鏈DNA為模板,在DNA聚合酶的作用下合成另一條互補的DNA鏈,形成雙鏈DNA分子。的擴增過程是怎樣的RNA,利用DNA分子雜交技術(shù),目的基因DNA一條鏈(作探針)與受體細(xì)胞中提取的mRNA雜交,看是否有雜交帶。(六)目的基因的表達(dá)通過鑒定表達(dá)的蛋白產(chǎn)物或性狀來確定目的基因
5、是否表達(dá)。檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)??贵w與蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原抗體雜交,看是否有雜交帶。還可以進(jìn)行個體水平的鑒定,根據(jù)其性狀。提示:DNA分子雜交技術(shù)首先提取受體細(xì)胞中的DNA,然后高溫解成單鏈,再與同位素標(biāo)記的DNA探針雜交;抗原抗體雜交所用到的抗體是用表達(dá)出的蛋白質(zhì)注射動物進(jìn)行免疫,產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,并提取出而來的。3)要有選擇標(biāo)記基因,如抗生素基因,以便選擇出真正的轉(zhuǎn)基因生物。【板書設(shè)計】第二節(jié)基因工程的原理和技術(shù)一、目的基因的獲取二、形成重組DNA分子(基因工程的核心)三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞四、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞五、目的基因的表達(dá)【教學(xué)反思】因為基因工程對學(xué)生來說是比較抽象的,所以首先設(shè)置問題情景,利用生活中的問題激發(fā)學(xué)生的學(xué)
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