菌落總數(shù)的測定方法驗證報告

1、方 法 驗 證 報 告公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范集中空調(diào)送風(fēng)中細(xì)菌總數(shù)WS 394-2012附錄D1.目的驗證培養(yǎng)法測定集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中的細(xì)菌總數(shù)指標(biāo)，來判斷在本實驗室此方法的適用性。2.方法內(nèi)容2.1 細(xì)菌總數(shù)集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中采集的樣晶，計數(shù)在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)35 37 、48 h培養(yǎng)所生長發(fā)育的嗜中溫性需氧和兼性厭氧菌落的總數(shù)。2.2 設(shè)備和器材2.2.1六級孔撞擊式微生物采樣器。2.2.2高壓蒸汽滅菌器。2.2.3恒溫培養(yǎng)箱。2.2.4平皿：90mm。2.3培養(yǎng)基2.3.1營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基成分：、蛋白胨 10g氯化鈉 5g內(nèi)膏 5g瓊脂 20g蒸餾水 1000Ml2.3.2制法

2、：將蛋白胨、氯化鈉、肉膏溶于蒸餾水中，校正pH為7.27.6，加入瓊脂，121 C，20 min滅菌備用。2.4采樣2.4.1采樣點：每套空調(diào)系統(tǒng)選擇3個5個送風(fēng)口進(jìn)行檢測，每個風(fēng)口設(shè)置1個檢測點，一般設(shè)在送風(fēng)口下方15 cm20 cm、水平方向向外50 cm100 cm處。2.4.2采樣環(huán)境條件：采樣時集中空調(diào)系統(tǒng)必須在正常運轉(zhuǎn)條件下，并關(guān)閉門窗15 min30 min以上，盡量減少人員活動幅度與頻率，記錄室內(nèi)人員數(shù)量、溫濕度與天氣狀況等。2.4.3采樣方法：以無菌操作，使用撞擊式微生物采樣器(D.3.1)以28.3 L/min流量采集5 min 15 min。2.5檢驗步驟將采集細(xì)菌后的營

3、養(yǎng)瓊脂平皿置35 37培養(yǎng)48 h，菌落計敷。2.6結(jié)果報告2.6.1送風(fēng)口細(xì)菌總數(shù)測定結(jié)果：菌落計數(shù)，記錄結(jié)果并按稀釋比與采氣體積換算成CFU/m3 (空氣中菌落形成單位每立方米)。2.6.2集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中細(xì)菌總數(shù)測定結(jié)果：一個系統(tǒng)送風(fēng)中細(xì)菌總數(shù)的測定結(jié)果按該系統(tǒng)全部檢測的送風(fēng)口細(xì)菌總數(shù)測定值中的最大值給出。3.方法驗證結(jié)果3.1空白實驗對滅菌蒸餾水7次做細(xì)菌總數(shù)的測定，所得結(jié)果如下表：表1 空白試驗結(jié)果序號樣品分析編號平皿菌落數(shù)結(jié)果（CFU/m3）1滅菌蒸餾水-10未檢出2滅菌蒸餾水-20未檢出3滅菌蒸餾水-30未檢出4滅菌蒸餾水-40未檢出5滅菌蒸餾水-50未檢出6滅菌蒸餾水-60未

4、檢出7滅菌蒸餾水-70未檢出3.2樣品測試對樣品分別做7次細(xì)菌總數(shù)的測定，所得結(jié)果如下表：表2 樣品測試結(jié)果序號樣品分析編號結(jié)果（CFU/m3平均結(jié)果（CFU/m3）120102803W010101-1010101-62121220102803W010201-1010201-628320102803W010301-1010301-614420102803W010401-1010401-628520102803W010501-1010501-614620102803W010601-1010601-614720102803W010701-1010701-628根據(jù)以上測試結(jié)果得知，蒸餾水滅菌后測得結(jié)果均為陰性，根據(jù)以上測試結(jié)果得知，空白測得結(jié)果均未檢出，樣品測的結(jié)果為21CFU/m3，因此本實驗室的環(huán)境和儀器、試劑均符合標(biāo)準(zhǔn)的要求。4.結(jié)論經(jīng)驗證，本實驗室已具備開展該方法測試所需的儀器設(shè)備并已達(dá)