黃柏中鹽酸小檗堿在不同復(fù)方中提取率的考察

1、黃柏中鹽酸小檗堿在不同復(fù)方中提取率的考察【摘要】目的考察黃柏中的鹽酸小檗堿在不同復(fù)方中的提取率。方法按照部頒標準各品種項下的制備工藝進展提取，高效液相色譜HPL法測定黃柏中鹽酸小檗堿的含量。結(jié)果黃柏中的鹽酸小檗堿在不同復(fù)方中提取率不同，在所考察的6個復(fù)方中提取率分別為：17.13%，12.51%，7.91%，8.56%，12.61%，23.06%。結(jié)論黃柏中鹽酸小檗堿在不同復(fù)方中的提取率均偏低，有必要對其工藝進一步改革，優(yōu)化工藝參數(shù)，進步藥品質(zhì)量?！娟P(guān)鍵詞】黃柏鹽酸小檗堿提取率黃柏為常用中藥之一，具有清熱燥濕、瀉火解毒的成效，在以清熱作用為主的復(fù)方制劑中應(yīng)用較多。黃柏樹皮中含有多種生物堿，主要

2、為小檗堿，其次為巴馬亭、木蘭花堿、黃柏堿、藥根堿、康迪辛堿等。另含苦味質(zhì)黃柏酮、黃柏內(nèi)酯、白蘚內(nèi)酯、及-谷甾醇、7-去氫豆甾醇、脂肪油及黏液質(zhì)等。在以黃柏為主藥的復(fù)方中，目前多以鹽酸小檗堿的含量作為質(zhì)控指標。但筆者在研究過程中發(fā)現(xiàn)，黃柏中的鹽酸小檗堿在不同復(fù)方中的提取率有較大差異，考慮到可能是復(fù)方配伍后對小檗堿溶出率的影響所致。為了驗證這一假設(shè)，選擇?部頒標準?收載品種中以黃柏為主要藥味，且提取工藝均為水提的6個復(fù)方，對其鹽酸小檗堿的提取率進展了考察，為今后?部頒標準?收載品種進展工藝改良、進步藥品質(zhì)量提供參考根據(jù)。1儀器與試劑1.1儀器aters600E高效液相色譜儀，aters600泵，a

3、ters2487紫外檢測器，illenniu32色譜工作站。1.2試劑甲醇、乙腈均為色譜純，其他試劑均為分析純，水為雙蒸水。所用藥材購于陜西省咸陽市藥材公司。2方法2.1黃柏藥材的含量測定取黃柏藥材3份，每份0.1g，精細稱定，置100l量瓶中，分別精細參加乙腈-0.1%磷酸溶液5050每100l參加十二烷基磺酸鈉0.1g80l，超聲提取40in，放冷，用乙腈-0.1%磷酸溶液5050稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。按?中國藥典?2022年版一部黃柏項下的含量測定方法，精細汲取對照品溶液、黃柏藥材溶液10l，注入液相色譜儀中，測定，結(jié)果鹽酸小檗堿含量分別為59.8，61.3，61.9g

4、/g,平均含量為61.0g/g。2.2黃柏藥材水提液中鹽酸小檗堿的含量稱取黃柏藥材30g，粉碎成粗粉，加10倍量水煎煮3次，2h/次，提取液趁熱過濾，濾液濃縮至200l，備用。按文獻方法1，精細汲取對照品溶液5l，供試品溶液1015l，注入液相色譜儀中，測定，計算鹽酸小檗堿的含量及提取率。結(jié)果見表1。結(jié)果說明，黃柏水提工藝中鹽酸小檗堿的提取率為8.29。表1黃柏水提液中鹽酸小檗堿的提取率提取次數(shù)鹽酸小檗堿含量/gl-1提取率略2.3不同復(fù)方中鹽酸小檗堿的提取率2.3.1鹽酸小檗堿含量測定方法的建立色譜條件：色譜柱為十八烷基硅膠鍵合相；檢測波長265n；流動相為乙腈-0.05l/L磷酸二氫鉀緩沖

5、液用磷酸調(diào)pH值至3.03070；柱溫為常溫；流速1l/in。供試品的制備：精細汲取提取液3l，加甲醇定容至50l，濾過，取續(xù)濾液，即得。對照品的制備：精細稱取鹽酸小檗堿2.1g，加甲醇定容至100l，制成0.021g/l的對照品溶液。線性關(guān)系的考察：精細汲取鹽酸小檗堿對照品溶液(0.068gl-1)，分別進樣2.5，5，7.5，10，12.5，15l，以進樣量(g)為橫坐標(X)，峰面積為縱坐標(Y),繪制標準曲線，計算得回歸方程為:Y=4578.22X-28.86，r=0.9999。儀器精細度實驗：精細汲取供試品溶液,重復(fù)進樣5次,10l/次,記錄鹽酸小檗堿的峰面積，平均峰面積為63190

6、3，RSD為1.20，說明本方法精細度良好。穩(wěn)定性實驗：于供試溶液配制后0，1，2，4，8h，分別精細汲取10l注入HPL儀，測定鹽酸小檗堿峰面積，結(jié)果平均峰面積為636069，RSD為0.21，說明樣品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。重復(fù)性實驗：精細稱取黃柏藥材樣品5份，每份約15g,按“2.2項下方法及“2.3項色譜條件進展鹽酸小檗堿的含量測定,結(jié)果平均含量為0.283g/g，RSD為1.85，說明本方法重復(fù)性良好。2.3.26個復(fù)方樣品的制備為了考察黃柏中鹽酸小檗堿在不同復(fù)方中的提取率，選擇部頒標準中收載的以黃柏為主要藥味的6個復(fù)方，按照部頒標準中所載的制備方法進展樣品制備。祛瘀益胃膠囊的提取：組方為

7、黃芪15g，丹參15g，黃柏15g，重樓9g，莪術(shù)9g，甘草9g，虎杖15g，三七10g，白花蛇舌草15g，雞內(nèi)金、白術(shù)各9g，白及10g。取方中黃芪、丹參、黃柏、重樓、甘草、莪術(shù)、虎杖、白花蛇舌草、白術(shù)、白及10味藥材加水浸泡1h后，煎煮3次，第1次加10倍量水煎煮2h，第2次加8倍量水煎煮1.5h，第3次加8倍量水煎煮1h。水煎液趁熱過濾，合并濾液，濾液濃縮至500l。婦寧栓的提?。航M方為苦參25g，黃柏15g，黃芩12.5g，莪術(shù)7.5g，蛤殼粉3.3g，紅丹0.5g，兒茶0.5g，乳香0.25g，沒藥0.25g，豬膽粉0.7g，冰片0.1g。取方中苦參、黃柏、莪術(shù)3味藥材加水浸泡1h后

8、，煎煮2次。第1次加10倍量水煎煮2h，第2次加8倍量水煎煮1.5h，水煎液趁熱過濾，合并濾液，濾液濃縮至500l。婦炎康片的提?。航M方為赤芍15g，土茯苓25g，三棱醋炙15g，川楝子炒15g，莪術(shù)醋炙15g，延胡索醋炙15g，芡實炒25g，當(dāng)歸25g，苦參15g，香附10g，黃柏15g，丹參25g，山藥30g。取方中的赤芍、土茯苓、三棱、川楝子、延胡索、芡實、當(dāng)歸、苦參、香附、黃柏、丹參11味藥材加水浸泡1h后，煎煮3次。第1次加10倍量水煎煮2h，第2次、第3次各加8倍量水，每次煎煮1h。水煎液趁熱過濾，合并濾液，濾液濃縮至500l。前列泰片的提?。航M方為益母草75g，萹蓄50g，紅花2

9、5g，油菜蜂花粉10g，知母鹽炒15g，黃柏鹽炒15g。取方中益母草、萹蓄、紅花、知母、黃柏5味藥材加水浸泡1h后，煎煮2次。第1次加10倍量水，第2次加8倍量水，分別煎煮2h，水煎液趁熱過濾，合并濾液，濾液濃縮至500l?？祴D靈膠囊的提取：組方為杠板歸60g，苦參30g，黃柏15g，雞血藤30g，益母草30g，紅花龍膽20g，土茯苓15g，當(dāng)歸18g。取方中杠板歸、苦參、黃柏、雞血藤、益母草、紅花龍膽、土茯苓等味藥材加水浸泡1h后，煎煮2次。第1次加10倍量水，第2次加8倍量水分別煎煮2h。水煎液趁熱過濾，合并濾液，濾液濃縮至500l。前列通片的提?。航M方為薜荔18g，黃芪21g，車前子12

10、g，黃柏15g，兩頭尖15g，蒲公英15g，澤蘭15g。取方中薜荔、黃芪、車前子、黃柏、蒲公英、澤蘭等6味藥材加水浸泡1h后，煎煮3次。每次均加8倍量水，分別煎煮2h。水煎液趁熱過濾，合并濾液，濾液濃縮至500l。2.3.3不同復(fù)方中鹽酸小檗堿的提取率考察精細汲取對照品溶液5l，供試品溶液1015l，注入液相色譜儀中，測定鹽酸小糪堿的含量，計算提取率。結(jié)果見表2。結(jié)果說明，黃柏在不同復(fù)方中，鹽酸小檗堿的提取率不同，但均較單味藥材的提取率低。表2復(fù)方中鹽酸小檗堿的含量及提取率略3討論從復(fù)方中鹽酸小檗堿的提取率可以看出，復(fù)方中其它藥味對鹽酸小檗堿的提取率有很大的影響。由于有其他藥味與黃柏共提，使得黃柏的提取率大大降低，在不同復(fù)方