分枝桿菌屬形態(tài)和特性

1、分枝桿菌屬形態(tài)和特性教學(xué)要求：1、掌握結(jié)核分枝桿菌的形態(tài)與染色、培養(yǎng)特性、抵抗力，免疫性和結(jié)核菌素試驗(yàn)，特異性預(yù)防，麻風(fēng)桿菌的致病性。2、理解結(jié)核分枝桿菌和麻風(fēng)分枝桿菌的微生物學(xué)檢查法。3、了解其它特性。主要特點(diǎn)： 細(xì)長(zhǎng)彎曲，分枝狀生長(zhǎng)而命名 細(xì)胞壁含有大量脂質(zhì)（主要是分枝菌酸）占細(xì)胞壁干重60% 常用抗酸染色鑒定，抵抗鹽酸酒精的脫色，呈抗酸染色陽(yáng)性又名抗酸桿菌。 引起疾病都呈慢性，并伴肉芽腫分類： 結(jié)核分枝桿菌非結(jié)核分枝桿菌麻風(fēng)分枝桿菌抗酸染色由于細(xì)菌細(xì)胞壁中含大量脂質(zhì)，一般不易著色，若經(jīng)加溫或延長(zhǎng)染色時(shí)間而著色后又能抵抗強(qiáng)脫色劑鹽酸酒精的脫色，故又稱抗酸桿菌抗酸染色法：以5石炭酸復(fù)紅加溫染

2、色，再用3鹽酸酒精脫色，然后用美藍(lán)復(fù)染，則分枝桿菌呈紅色(+)，其他細(xì)菌和背景物質(zhì)為藍(lán)色(-)。第一節(jié) 結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)俗稱結(jié)核桿菌，引起人類結(jié)核病對(duì)人致病的主要:人型、牛型、非洲型結(jié)核病是一種古老的疾病。從新石器時(shí)代人類的遺骨和古代木乃伊的骨關(guān)節(jié)的病理組織中，已發(fā)現(xiàn)人類在史前時(shí)代已患過(guò)結(jié)核病。中國(guó)醫(yī)史中，結(jié)核病最早記載于內(nèi)經(jīng)并形容為“虛癆”之癥。古代文獻(xiàn)有提及肺癆為癆蟲于肺所致，但未能確定致病的成因。 19世紀(jì)，結(jié)核病在歐洲和北美大肆流行，散布到社會(huì)的各個(gè)階層，生活困頓的人群成了結(jié)核病的溫床。而且是當(dāng)時(shí)造成死亡的主要原因，被人們稱為

3、“巨大的白色瘟疫”。許多當(dāng)年杰出的人物罹患結(jié)核病：雪萊、席勒、勃朗寧、梭羅等。結(jié)核病的流行甚至影響了詩(shī)人和藝術(shù)家的思想。 德國(guó)科學(xué)家Robert Koch在1882年發(fā)現(xiàn)了一種特殊的微生物結(jié)核桿菌，結(jié)核病的致病細(xì)菌。他還證明了這種微生物是可以在培養(yǎng)基里培養(yǎng)出來(lái)的。這一發(fā)現(xiàn)使得結(jié)核的實(shí)驗(yàn)研究成為現(xiàn)實(shí)。世界結(jié)核病防治現(xiàn)狀自發(fā)現(xiàn)MTB以來(lái)，全球約有兩億人死于TB，且疫情發(fā)展日趨嚴(yán)重。WHO已將TB作為重點(diǎn)控制的傳染病之一，1995年將3月24日定為“世界防治結(jié)核病日”目前全球20億感染者， 2000萬(wàn)TB病人TB的死亡將達(dá)歷史最高水平全球每天8000人死于TB，每年約300萬(wàn)人死于TB 。全球98的

4、TB死亡和95的新發(fā)TB都是在發(fā)展中國(guó)家。全球22個(gè)TB高負(fù)擔(dān)國(guó)家，我國(guó)TB的患病人數(shù)居世界第2位。僅次于印度。我國(guó)每10分鐘就有1人死于結(jié)核病我國(guó)TB結(jié)核病疫情表現(xiàn)有“六多”：感染人數(shù)多?；疾∪藬?shù)多。死亡人數(shù)多。新發(fā)患者多。耐藥TB人多。農(nóng)村TB人多。肺結(jié)核-干咳超2周，趕快去醫(yī)院檢查腸結(jié)核（腸鏡）腸結(jié)核（標(biāo)本）脊柱結(jié)核會(huì)導(dǎo)致癱瘓骨結(jié)核關(guān)節(jié)結(jié)核流痰膝部和背部（寒性膿腫）皮膚結(jié)核頸部淋巴結(jié)結(jié)核（瘰疬）瘰疬是結(jié)核累累如貫珠之狀的慢性炎癥性疾病。此愈彼潰，經(jīng)久難斂，形成竇道，愈后凹陷性疤痕。一、生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色 細(xì)長(zhǎng)略帶彎曲， 呈單個(gè)或分枝狀排列，有莢膜，抗酸染色陽(yáng)性2.培養(yǎng)特點(diǎn)專性需氧營(yíng)

5、養(yǎng)要求高，常用羅氏培養(yǎng)基生長(zhǎng)緩慢：2-4周可見菌落生長(zhǎng)現(xiàn)象液體：粗糙皺紋狀菌膜固體：顆粒、結(jié)節(jié)、菜花狀菌落，乳白或米黃，不透明3.抵抗力：對(duì)理化因子抵抗力較強(qiáng)四不怕干燥（干痰中活6-8個(gè)月）酸（3% HCl或6% H2SO4) 或堿（4% NaOH) （處理污染標(biāo)本，殺雜菌）堿性染料青霉素等抗生素四怕乙醇濕熱紫外線抗癆藥物（鏈霉素、異煙肼、利福平等）4.變異性形態(tài)結(jié)構(gòu)變異：結(jié)核桿菌的L型：顆粒狀、絲狀、Much顆粒(非抗酸 顆粒)毒力變異：卡介苗BCG：Calmette和Gurin將牛分枝桿菌經(jīng)13年230次傳代而獲得的減毒活疫苗株耐藥性變異：耐藥結(jié)核菌株日益增多二、致病性致病物質(zhì)： 不是內(nèi)外

6、毒素、侵襲性酶類，其致病作用主要靠 菌體成分，特別是胞壁中所含有的大量脂質(zhì)，脂質(zhì)愈多，毒力越強(qiáng)二、致病性-致病物質(zhì)莢膜粘附吞噬細(xì)胞并進(jìn)入抗吞噬：抑制吞噬體與溶酶體融合保護(hù)：阻止有害物質(zhì)進(jìn)入菌體。含酶降 解宿主的營(yíng)養(yǎng)，供自身繁殖脂質(zhì)索狀因子：破壞細(xì)胞，抑制中性粒細(xì)胞游走和 吞噬引起肉芽腫磷脂：刺激單核細(xì)胞增生-結(jié)核結(jié)節(jié)、干酪樣壞死硫酸腦苷脂：抑制吞噬體與溶酶體結(jié)合蠟質(zhì)D：引起遲發(fā)性過(guò)敏反應(yīng)蛋白質(zhì)引起遲發(fā)性過(guò)敏反應(yīng)（重要的是結(jié)核菌素）結(jié)核桿菌在液體培養(yǎng)基中緊密黏成索狀所致疾病多途徑侵入。多器官結(jié)核病，肺結(jié)核常見1、肺部感染原發(fā)感染：外源性感染多發(fā)生于兒童初次感染（無(wú)免疫力）病灶不局限原發(fā)綜合征 (

7、 原發(fā)灶、淋巴管炎、肺門淋巴腫大）轉(zhuǎn)歸：90%纖維化鈣化，但病灶內(nèi)有菌內(nèi)源性感染 ； 5%；血行擴(kuò)散-粟粒性肺結(jié)核繼發(fā)感染：內(nèi)源性或外源感染（原發(fā)后感染）多見成人再次感染病灶局限 轉(zhuǎn)歸：鈣化痊愈 干酪樣壞死液化空洞-開放性TB 入血-肺內(nèi)外播散原發(fā)綜合征結(jié)核結(jié)節(jié)中心干酪樣壞死肺結(jié)核空洞2、肺外感染進(jìn)入血液循環(huán)引起肺內(nèi)、外播散，如腦、腎、腸、腹腔、生殖器官、皮膚、骨骼大多與結(jié)核分枝桿菌L型有關(guān)三、免疫性抗結(jié)核免疫特點(diǎn)：感染、免疫、超敏反應(yīng)共存屬于感染免疫(傳染性免疫，有菌免疫)細(xì)胞免疫為主,遲發(fā)型超敏反應(yīng)同時(shí)存在可用郭霍現(xiàn)象加以說(shuō)明結(jié)核菌素試驗(yàn)【OT（舊結(jié)核菌素）試驗(yàn)】定義：是應(yīng)用結(jié)核菌素來(lái)測(cè)定

8、機(jī)體對(duì)結(jié)核分枝桿菌是否有細(xì)胞免疫及引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)的一種皮膚試驗(yàn)。原理：型變態(tài)反應(yīng)方法：前臂皮內(nèi)注射PPD純蛋白衍生物（ OT的純化物）意義：4872h紅腫硬結(jié) 5mm-陽(yáng)性，感染過(guò)結(jié)核菌或接種過(guò)卡介苗，有特異性免疫力，有型變態(tài)反應(yīng) 15mm-強(qiáng)陽(yáng)性，活動(dòng)性肺結(jié)核 5mm-陰性，未感染過(guò)結(jié)核菌、未接種過(guò)卡介苗（四種情況除外：初、重、老、低）結(jié)核菌素試驗(yàn)應(yīng)用選擇卡介苗接種對(duì)象和測(cè)定卡介苗接種后的免疫效果。結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性者應(yīng)接種或補(bǔ)種卡介苗在未接種卡介苗的人群中作結(jié)核桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查,了解人群自然感染率。作為嬰幼兒(尚未接種過(guò)卡介苗者)結(jié)核病的輔助診斷測(cè)定腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能四、微生物

9、學(xué)檢查法 標(biāo)本濃縮集菌(氫氧化鈉處理） 直接鏡檢：抗酸染色 分離培養(yǎng)：培養(yǎng)時(shí)間（24周） 動(dòng)物試驗(yàn)：豚鼠等 快速診斷：PCR等測(cè)細(xì)菌DNA痰液等四、防治原則預(yù)防1、一般性預(yù)防：衛(wèi)生宣傳吸煙與肺結(jié)核“狼狽為奸” 吸煙破壞肺部的防御能力，肺結(jié)核發(fā)病率隨著吸煙量的增加和吸煙時(shí)間的延長(zhǎng)而升高 得了肺結(jié)核，一定要休學(xué)或者休假在家正規(guī)治療，避免傳染其他同學(xué) 預(yù)防一般性預(yù)防：提高機(jī)體抵抗力四、防治原則預(yù)防2、特異性預(yù)防：發(fā)現(xiàn)和治療痰菌陽(yáng)性者新生兒接種卡介苗(BCG)四、防治原則治療一般治療：合理營(yíng)養(yǎng)，注意休息藥物：異煙肼+利福平+(鏈霉素、乙胺丁醇、吡嗪酰胺) 治療原則：早期、聯(lián)合、適量、規(guī)律和堅(jiān)持全程。W

10、HO”直接督導(dǎo)下的短程化療方案”（DOTS）早期發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核 發(fā)病早期多不典型，輕毫無(wú)癥狀。癥狀表現(xiàn)不同，下列癥狀應(yīng)警惕肺結(jié)核的發(fā)生。無(wú)明顯誘因出現(xiàn)：易倦、乏力、食欲不振和體重減輕等癥狀； 反復(fù)發(fā)作或遷延不愈的“傷風(fēng)”、“感冒”； 咳嗽、咯痰持續(xù)兩周以上，查不出原因； 痰中帶血絲，或咯血；長(zhǎng)期午后低熱。 到當(dāng)?shù)亟Y(jié)核病?？漆t(yī)院或結(jié)防站就診以排除肺結(jié)核。免費(fèi)檢查包括：胸部透視、攝X光胸片和痰涂片檢查。 第二節(jié) 麻風(fēng)分枝桿菌 麻風(fēng)桿菌，引起麻風(fēng)，一種慢性傳染病流行廣泛，主要分布亞、非和拉丁美洲病菌侵犯皮膚、粘膜和外周神經(jīng)組織，晚期侵入深部組織和臟器，形成肉芽腫皮膚結(jié)節(jié)；獅子臉 手?jǐn)嗄_斷腳底穿洞鞍鼻麻風(fēng)

11、病有如下主要癥狀： （1）肌肉潰瘍；（2）腳底穿洞；（3）不能合眼（兔眼）；（4）鷹爪指； （5）鞍鼻；（6）手?jǐn)嗄_斷；（7）眉毛脫失；（8）神經(jīng)粗大；（9）皮膚結(jié)節(jié)；（10）獅子臉。 臺(tái)灣女記者辭去高薪工作投身四川麻風(fēng)村教育生物學(xué)性狀形態(tài)、染色與結(jié)核分枝桿菌相似麻風(fēng)分枝桿菌是一種典型胞內(nèi)菌麻風(fēng)細(xì)胞（泡沫細(xì)胞）體外人工培養(yǎng)至今仍未成功致病性與免疫性途徑：呼吸道；破損的皮膚和粘膜；接觸等疾病類型： 1、結(jié)核樣型（細(xì)胞免疫正常，傳染性小）； 2、瘤型（麻風(fēng)結(jié)節(jié)，細(xì)胞免疫缺損，傳染性強(qiáng)）； 3、界線類和未定類。 發(fā)病慢，病程長(zhǎng)免疫主要是靠細(xì)胞免疫微生物學(xué)檢查法顯微鏡檢查可從患者鼻粘膜或皮損處取材，用

12、抗酸性染色后檢查患者標(biāo)本中可找到細(xì)菌在細(xì)胞內(nèi)存在，有診斷意義防治原則無(wú)特異性預(yù)防方法早發(fā)現(xiàn)，早治療，早隔離目前多采用二三種藥聯(lián)合治療,砜類、利福平等 1.分枝桿菌屬最主要的特點(diǎn)是_.A.胞壁含大量脂質(zhì)B.無(wú)特殊結(jié)構(gòu)C.有分枝生長(zhǎng)趨勢(shì)D.一般不易著色E.抵抗酸性酒精脫色2.結(jié)核分枝桿菌常用的培養(yǎng)基是_.A.沙保培養(yǎng)基B.羅氏培養(yǎng)基C.庖肉培養(yǎng)基D.巧克力色培養(yǎng)基E.亞碲酸鹽培養(yǎng)基3.與結(jié)核分枝桿菌抗酸性有關(guān)的成分是_.A.磷脂B.蠟質(zhì)DC.分枝菌酸D.索狀因子E.硫酸腦苷脂4.在無(wú)芽胞細(xì)菌中，最耐干燥的細(xì)菌是_.A.葡萄球菌B.溶血性鏈球菌C.肺炎球菌D.白喉?xiàng)U菌E.結(jié)核桿菌5.結(jié)核桿菌的哪種變

13、異可用于制備疫苗_.A.形態(tài)B.結(jié)構(gòu)C.毒力D.耐藥性E.菌落6.以下疾病中屬感染免疫的是_.A.風(fēng)濕熱B.急性腎小球腎炎C.白喉D.結(jié)核E.腸熱癥屬于_.A.死菌苗B.減毒活疫苗C.類毒素D.抗毒素E.莢膜多糖疫苗接種的對(duì)象主要是_.A.年老體弱者B.結(jié)核性腦膜炎患者C.結(jié)核菌素試驗(yàn)陽(yáng)性者D.新生兒和結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性的兒童E.嚴(yán)重結(jié)核病人，結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性患者9.麻風(fēng)的傳播方式主要是_.A.同病人的皮膚接觸B.消化道C.呼吸道D.帶菌小鼠E.帶菌豬10.結(jié)核分枝桿菌侵入機(jī)體的途徑，不可能的是_.A.呼吸道B.消化道C.破損皮膚D.泌尿道E.節(jié)肢動(dòng)物叮咬11.人體對(duì)結(jié)核分枝桿菌的免疫特點(diǎn)是_.

14、A.以體液和細(xì)胞免疫并重B.以體液免疫為主C.為有菌免疫D.不能通過(guò)人工主動(dòng)免疫獲得E.可引起I型超敏反應(yīng)12.有關(guān)結(jié)核菌素試驗(yàn)，下述錯(cuò)誤的是_.A.屬于遲發(fā)型超敏反應(yīng)B.可檢測(cè)機(jī)體對(duì)結(jié)核分枝桿菌的免疫狀態(tài)C.試驗(yàn)結(jié)果以局部紅腫、硬結(jié)的直徑為標(biāo)準(zhǔn)D.可檢測(cè)機(jī)體細(xì)胞免疫功能狀況小時(shí)觀察結(jié)果14.麻風(fēng)病的臨床類型不包括 _.A.瘤型B.結(jié)核樣型C.亞臨床感染型D.界限型E.未定型15.結(jié)核菌素試驗(yàn)的應(yīng)用價(jià)值不包括_.A.用于選擇卡介苗的接種對(duì)象B.用于接種卡介苗免疫效果的測(cè)定C.作為結(jié)核病診斷的依據(jù)D.測(cè)定腫瘤病人的非特異性細(xì)胞免疫功能E.在未接種過(guò)卡介苗的人群中調(diào)查結(jié)核病的流行情況18.關(guān)于結(jié)核

15、分枝桿菌抵抗力的敘述，錯(cuò)誤的是_.A.耐干燥，在干燥的痰內(nèi)可存活6-8天B.對(duì)濕熱敏感，用巴氏消毒法可將其殺死C.對(duì)紫外線敏感，直接日光照射數(shù)小時(shí)可被殺滅D.對(duì)酸堿有抵抗力E.對(duì)抗癆藥物易產(chǎn)生抗藥性19.結(jié)核分枝桿菌的變異不包括_.A.形態(tài)B.菌落C.毒力D.對(duì)氧的需要E.耐藥性20.以下細(xì)菌不屬于胞內(nèi)寄生菌的是_.A.結(jié)核分枝桿菌B.麻風(fēng)分枝桿菌C.傷寒沙門菌D.布魯菌E.百日咳桿菌21.從痰中檢出具有臨床診斷意義的細(xì)菌是_.A.傷寒沙門菌B.布魯菌C.肺炎鏈球菌D.霍亂弧菌E.結(jié)核分枝桿菌22.在人工培養(yǎng)基上常形成竹節(jié)狀長(zhǎng)鏈的細(xì)菌是_.A.結(jié)核分枝桿菌B.破傷風(fēng)梭菌C.麻風(fēng)分枝桿菌D.炭疽桿菌E.傷寒沙門菌23.需氧和產(chǎn)生芽胞的細(xì)菌是_.A.結(jié)核分枝桿菌B.破傷風(fēng)梭菌C.炭疽桿菌D.產(chǎn)氣莢膜梭菌E.肉毒梭菌24.引起波浪