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1、第四章電子顯微分析(fnx)共三十二頁(yè)共三十二頁(yè)發(fā)育(fy)中的擬南芥花芽 掃描電子顯微鏡拍攝,人工上色,萼片( pin)為綠色,花瓣為紅色,花藥為橙色,柱頭未上色。 共三十二頁(yè)圖為西番蓮花粉(hufn)的掃描電子顯微鏡照片 共三十二頁(yè)4.1 引言 - 電子光學(xué)基礎(chǔ)4.1.1 分辨本領(lǐng) 1) 人的眼睛僅能分辨0.10.2mm的細(xì)節(jié)2) 光學(xué)顯微鏡,人們可觀察到象細(xì)菌那樣小的物體。3) 用光學(xué)顯微鏡來(lái)揭示更小粒子的顯微組織結(jié)構(gòu)是不可能的,受光學(xué)顯微鏡分辨本領(lǐng)(或分辨率)的限制。分辨本領(lǐng) 指顯微鏡能分辨的樣品上兩點(diǎn)間的最小距離。以物鏡(wjng)的分辨本領(lǐng)來(lái)定義顯微鏡的分辨本領(lǐng)。共三十二頁(yè)1、光的

2、折射(zhsh)現(xiàn)象及成像原理ABBA.FFL1L2一個(gè)物體可看作是由許多物點(diǎn)所組成,每一個(gè)物點(diǎn)散射的光經(jīng)透鏡后都會(huì)聚(huj)在相應(yīng)的像點(diǎn)上,許多的像點(diǎn)就構(gòu)成了物體的像。透鏡成像公式:放大倍數(shù):共三十二頁(yè)2、光的衍射現(xiàn)象(xinxing)和分辨本領(lǐng)的極限由于光的衍射,使得由物平面內(nèi)的點(diǎn)A 、B在象平面形成一A 、 B圓斑,圓斑由具有一定尺寸的中央亮斑及其周圍明暗相間的圓環(huán)組成(z chn),稱為埃利斑(Airy斑)。Rn透鏡物方介質(zhì)的折射率照明光波長(zhǎng)透鏡孔徑半角,即入射光束與透鏡主軸的夾角; nsin 數(shù)值孔徑M放大倍數(shù)共三十二頁(yè)圖(1)兩個(gè)Airy斑明顯可分辨出。圖(2)兩個(gè)Airy斑剛好

3、可分辨出。圖(3)兩個(gè)Airy斑分辨不出。R將剛好(gngho)可分辨出的兩Airy斑中心間距相應(yīng)于兩個(gè)物點(diǎn)間距離r0定義為顯微鏡能分辨出的最小距離,此即透鏡的分辨本領(lǐng)。一般來(lái)說(shuō),孔徑(kngjng)角較大時(shí)為7075,n約為1.5,則nsin約為1.25-1.35,故:共三十二頁(yè)波長(zhǎng)是透鏡分辨率大小的決定因素(yn s)。 透鏡的分辨本領(lǐng)主要取決于照明束波長(zhǎng)。若用波長(zhǎng)最短的可見(jiàn)光(=400nm)作照明源,則 d0=200nm 200nm是光學(xué)顯微鏡分辨本領(lǐng)的極限提高透鏡的分辨本領(lǐng):增大數(shù)值孔徑是困難的和有限的,唯有尋找比可見(jiàn)光波長(zhǎng)更短的光線才能解決這個(gè)(zh ge)問(wèn)題。共三十二頁(yè)知識(shí)(zh

4、 shi)補(bǔ)充2014年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)給了三個(gè)物理學(xué)家:艾力克貝齊格(Eric Betzig)、斯特凡W赫爾(Stefan W. Hell)和WE莫納(W. E. Moerner),以表彰他們對(duì)于(duy)發(fā)展超分辨率熒光顯微鏡做出的卓越貢獻(xiàn)。他們的突破性工作使光學(xué)顯微技術(shù)進(jìn)入了納米尺度,從而使科學(xué)家們能夠觀察到活細(xì)胞中不同分子在納米尺度上的運(yùn)動(dòng)。貝齊格 赫爾 莫納共三十二頁(yè)4.1.2 電子束的波長(zhǎng) 比可見(jiàn)光波長(zhǎng)更短的有: 1)紫外線 會(huì)被物體強(qiáng)烈的吸收; 2)X 射線 無(wú)法使其會(huì)聚 ; 3)電子波 根據(jù)德布羅意物質(zhì)波的假設(shè)(jish),即電子具有微粒性,也具有波動(dòng)性。電子波 h Plank 常

5、數(shù)(chngsh) , m v 電子速度共三十二頁(yè) 初速度為0的自由電子從零電位開(kāi)始運(yùn)動(dòng),因受到加速電壓U的作用(zuyng)獲得速度為v: 1/2mv2 = eU 當(dāng)電子速度v 遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于光速C 時(shí),電子質(zhì)量m 近似等于電子靜止質(zhì)量m0,由上述兩式整理得:電子波長(zhǎng)與加速(ji s)電壓平方根成反比,即加速(ji s)電壓越高,電子波長(zhǎng)越短,但當(dāng)電壓很高時(shí),電子質(zhì)量需引入相對(duì)論進(jìn)行校正。共三十二頁(yè) 將常數(shù)代入上式,并注意到電子電荷 e 的單位為庫(kù)侖, h的單位為Js,我們將得到: nm 表1 不同加速電壓(diny)下的電子波長(zhǎng) 加速電壓/kV2030501002005001000電子波長(zhǎng)/10

6、-3nm8.596.985.363.702.511.420.687一般(ybn)電鏡的加速電壓為50200KV,100KV以上的為超高壓電鏡。共三十二頁(yè) 當(dāng)加速電壓為100kV時(shí),電子束的波長(zhǎng)約為可見(jiàn)光波長(zhǎng)的十萬(wàn)分之一。因此,若用電子束作照明源,顯微鏡的分辨本領(lǐng)要高得多。但是,電磁透鏡的孔徑(kngjng)半角的典型值僅為10-2-10-3rad。如果加速電壓為100kV,孔徑半角為10-2rad,那么分辨本領(lǐng)為: d0 = 0.613.710-3/10-2 = 0.225 nm共三十二頁(yè)4.1.3 電磁透鏡電鏡中用來(lái)對(duì)電子束聚焦的是電磁透鏡,簡(jiǎn)單的電磁透鏡就是(jish)一個(gè)通電的短線圈。通

7、電線圈所產(chǎn)生的磁場(chǎng)對(duì)電子束有聚焦成像的作用。其焦點(diǎn)(jiodin)f為:式中,V0-電壓; R-透鏡半徑;I-電流;N-線圈匝數(shù); A-與透鏡結(jié)構(gòu)有關(guān)的比例常數(shù)改變電流可以方便調(diào)整透鏡的焦距,從而使放大倍數(shù)發(fā)生改變1、電磁透鏡的焦距共三十二頁(yè)電磁透鏡結(jié)構(gòu)(jigu)示意圖共三十二頁(yè) 控制電子束的運(yùn)動(dòng)在電子光學(xué)領(lǐng)域中主要使用電磁透鏡裝置。但電磁透鏡在成像時(shí)會(huì)產(chǎn)生像差由于透鏡物理?xiàng)l件的限制,所成的像會(huì)模糊不清或發(fā)生畸變,形成的所有缺陷和偏差統(tǒng)稱為像差。 像差分為幾何像差和色差兩類。 幾何像差:由于透鏡磁場(chǎng)幾何形狀上的缺陷而造成的像差。主要指球差和像散。 色差:由于電子波的波長(zhǎng)或能量發(fā)生一定幅度(f

8、d)的改變而造成的像差。2、電磁透鏡的像差與分辨本領(lǐng)共三十二頁(yè) 透鏡的實(shí)際分辨本領(lǐng)除了與衍射效應(yīng)有關(guān)以外,還與透鏡的像差有關(guān)。 光學(xué)透鏡,已經(jīng)可以采用凸透鏡和凹透鏡的組合等辦法來(lái)矯正像差,使之對(duì)分辨本領(lǐng)的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于衍射效應(yīng)的影響; 但電子透鏡只有會(huì)聚透鏡,沒(méi)有發(fā)散透鏡,所以(suy)至今還沒(méi)有找到一種能矯正球差的辦法。這樣,像差對(duì)電子透鏡分辨本領(lǐng)的限制就不容忽略了。共三十二頁(yè)(1)球差即球面像差,是由于電磁透鏡的中心區(qū)域(qy)和邊緣區(qū)域(qy)對(duì)電子的折射能力不符合預(yù)定的規(guī)律而造成的。離主軸較遠(yuǎn)的電子比主軸附近的電子被折射程度要大,當(dāng)物點(diǎn)P通過(guò)透鏡成像時(shí),電子就不會(huì)聚到同一焦點(diǎn)上,而形成一

9、個(gè)散焦斑。共三十二頁(yè)共三十二頁(yè)得到的最小散焦斑的半徑用Rs表示。若把Rs除以放大倍數(shù),就可以(ky)把其折算到物平面上去,大小為:也就是說(shuō),當(dāng)物平面(pngmin)上兩點(diǎn)距離小于2rs時(shí),則透鏡不能分辨。rs可通過(guò)下式計(jì)算:Cs為球差系數(shù),為孔徑半角。采用小孔徑成像是減少球差的有效途徑。共三十二頁(yè)(2)色差:是由于入射電子(dinz)波長(zhǎng)(或能量)的非單一性造成。電子束的能量變化率取決于加速電壓的穩(wěn)定性和電子穿過(guò)樣品時(shí)發(fā)生非彈性(tnxng)散射的程度。共三十二頁(yè)(3)電磁透鏡的分辨本領(lǐng)電磁透鏡的分辨本領(lǐng)由衍射效應(yīng)和球面(qimin)像差來(lái)決定。 衍射效應(yīng)對(duì)分辨本領(lǐng)的影響: r0=0.61/N

10、sin球差對(duì)分辨率的影響:必須確定一個(gè)最佳孔徑(kngjng)半角,使得衍射效應(yīng)Airy斑和球差散焦斑尺寸大小相等時(shí),表明兩者對(duì)透鏡分辨本領(lǐng)影響效果一樣。目前電鏡的最佳分辨本領(lǐng)達(dá)到了0.1nm數(shù)量級(jí)。共三十二頁(yè)共三十二頁(yè)3、電磁透鏡的景深(jngshn)和焦長(zhǎng)電磁透鏡的特點(diǎn)(tdin)是景深大(場(chǎng)深),焦長(zhǎng)很長(zhǎng)。共三十二頁(yè)透鏡的景深是指在保持像清晰的前提下,試樣在物平面上下沿鏡軸可移動(dòng)的距離(jl)Dr。換言之,在景深范圍內(nèi),樣品位置的變化并不影響物像的清晰度。 從原理上講,當(dāng)透鏡焦距、像距一定(ydng)時(shí),只有一層樣品平面與透鏡的理想物平面重合,能在透鏡像平面上獲得該層平面的理想圖象,而偏

11、離理想物平面的物點(diǎn)都存在一定程度的失焦,他們?cè)谕哥R像平面上將產(chǎn)生具有一定尺寸的失焦圓斑,如果失焦圓斑尺寸不超過(guò)由衍射效應(yīng)和像差引起的散焦斑,那么對(duì)透鏡像分辨本領(lǐng)并不產(chǎn)生影響。共三十二頁(yè)Dr與電磁透鏡分辨率r0、孔徑(kngjng)半角之間的關(guān)系: 取 r0=1 nm, =10-210-3rad則 Dr = 2002000nm 試樣(薄膜)一般厚200300nm,上述景深范圍可保證樣品整個(gè)厚度(hud)范圍內(nèi)各個(gè)結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)都清晰可見(jiàn)。共三十二頁(yè)藍(lán)寶石襯底表面形貌觀察(gunch) 表面三維島狀結(jié)構(gòu)共三十二頁(yè)焦長(zhǎng):指物點(diǎn)固定(gdng)不變(物距不變),在保持成像清晰的條件下,像平面沿透鏡軸線可移動(dòng)

12、的距離。 當(dāng)透鏡焦距、物距一定時(shí),像平面在一定的軸向距離內(nèi)移動(dòng),也會(huì)引起失焦。如果失焦尺寸不超過(guò)由衍射效應(yīng)和像差引起的散焦斑,那么像平面在一定的軸向距離內(nèi)移動(dòng),對(duì)透鏡像分辨率并不產(chǎn)生影響。因此(ync),當(dāng)用傾斜觀察屏觀察像時(shí),以及當(dāng)照相底片不位于觀察屏同一像平面時(shí),所拍攝的像也是清晰的。投影儀的投影平面之所以對(duì)距離要求不嚴(yán)也是由于焦長(zhǎng)很大的緣故。 共三十二頁(yè)DL與電磁透鏡分辨率r0、像點(diǎn)所張的孔徑(kngjng)半角之間的關(guān)系:其中,M為透鏡的放大(fngd)倍數(shù)共三十二頁(yè)4.1.4 電子束與固體(gt)物質(zhì)間的相互作用電子束與物質(zhì)(wzh)相互作用產(chǎn)生的信號(hào)圖共三十二頁(yè)內(nèi)容摘要第四章。2、光的衍射現(xiàn)象和分辨本領(lǐng)的極限。B圓斑,圓斑由具有一定尺寸的中央亮斑及其周圍明暗相間的。定義為顯微鏡能分辨出的最小距離,此即透鏡的分辨本領(lǐng)。提高透鏡的分辨本領(lǐng):增大數(shù)值孔徑是困難的和有限的,唯有尋找比可見(jiàn)光波長(zhǎng)更短的光線才能解決

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