第12章-抗生素類藥物ppt課件

1、第十二章抗生素類藥物的分析Antibiotics. 抗生素類藥物的質(zhì)量分析鑒別：真?zhèn)螜z查：含量效價(jià)測(cè)定：質(zhì)量的優(yōu)劣第一節(jié) 概 述. 官能團(tuán)的顯色反響 光譜法：IR, UV 色譜法 生物學(xué)法一鑒別實(shí)驗(yàn).1控制有機(jī)和無機(jī)雜質(zhì)的目的2影響產(chǎn)品穩(wěn)定性的目的3.與臨床平安性親密相關(guān)的目的 異常毒性、熱原、細(xì)菌內(nèi)毒素等4其他：懸浮時(shí)間與抽針實(shí)驗(yàn)等二檢查. 抗生素的活性表示每毫升或每毫克抗生素供試品中含有某種抗生素有效成分的多少。以效價(jià)單位U表示 測(cè)定方法微生物檢定法理化方法三含量或效價(jià)測(cè)定.微生物檢定法以抗生素對(duì)微生物的抑制或殺傷才干來衡量其效價(jià)分子構(gòu)造復(fù)雜、含多個(gè)組分的抗生素： 首選方法.理化方法根據(jù)分

2、子構(gòu)造，利用物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)展 主要采用HPLC適用于： 高純度、化學(xué)構(gòu)造已確定的抗生素缺陷： 不一定代表生物效價(jià)； 易受雜質(zhì)干擾.按化學(xué)構(gòu)造分： 內(nèi)酰胺類氨基糖苷類四環(huán)素類大環(huán)內(nèi)酯類、苯烴胺類多肽類、蒽環(huán)類、多烯大環(huán)類其他 抗生素的分類.一化學(xué)構(gòu)造與性質(zhì)一化學(xué)構(gòu)造 青霉素族： 側(cè)鏈 + 6-氨基青霉烷酸 母核 頭孢菌素族： 側(cè)鏈 + 7-氨基頭孢菌烷酸 母核 第二節(jié) -內(nèi)酰胺類抗生素. 酰胺側(cè)鏈青、頭的共性構(gòu)造 游離羧基 內(nèi)酰胺環(huán) .青霉素族代表藥物：青霉素鉀鈉 benzylpenicillin potassium(sodium) 即芐青霉素鉀鈉 羥氨芐青霉素鈉 即阿莫西林鈉amoxicill

3、in氨芐青霉素鈉 即氨芐西林鈉ampicillin.頭孢菌素族代表藥物：頭孢氨芐：氨芐頭孢菌素 cefalexin頭孢羥氨芐：羥氨芐頭孢菌素 cefadroxil.溶解性旋光性酸性內(nèi)酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性UV 特性二性質(zhì). 酸性羧基 酸性與堿金屬(Na+、K+)成鹽： 易溶于水 與有機(jī)堿(普魯卡因)成鹽： 難溶于水，易溶于甲醇等有機(jī)溶劑.不穩(wěn)定性要素四元環(huán)張力大酰胺鍵易水解穩(wěn)定性與含水量和純度的關(guān)系枯燥、純真 穩(wěn)定 水溶液、不純真 不穩(wěn)定 青霉素水溶液：pH 6-6.8時(shí)較穩(wěn)定內(nèi)酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性.共軛體系 UV 青霉素類： 母核無明顯UV，側(cè)鏈多數(shù)含苯環(huán)取代基 頭孢菌素類： 母核：共軛體系O=CNC

4、=C O=CC=C 側(cè)鏈：多數(shù)含苯環(huán)取代基UV 特性.二鑒別實(shí)驗(yàn)光譜法：IR、UV色譜法呈色反響各種鹽的反響.一呈色反響 羥肟酸鐵反響 . 類似肽鍵的反響 茚三酮反響： 雙縮脲反響： . 重氮化-巧合反響 普魯卡因青霉素水溶液酸化 青霉素 + 普魯卡因 鉀、鈉離子的火焰反響二各種鹽的反響重氮化-巧合反響.一聚合物：凝膠過濾色譜法 二有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體 HPLC： 不加校正因子的主成分本身對(duì)照法 三特殊雜質(zhì)檢查.適用于原料、各種制劑及生物樣品常采用RP-HPLC外標(biāo)一點(diǎn)法定量 p421四含量測(cè)定HPLC.第三節(jié) 氨基糖苷類抗生素Aminoglycosides antibiotics. 構(gòu)造一構(gòu)造與

5、性質(zhì)鏈霉素. 慶大霉素慶大霉素 C 復(fù)合物.1. 溶解性：水溶性2. 旋光性：手性C3. 堿性： 多與硫酸成鹽 堿性中心：鏈霉素3個(gè)，慶大霉素 5個(gè) 4. UV：鏈霉素：230nm處有紫外吸收慶大霉素：無UV吸收 性質(zhì).5穩(wěn)定性 硫酸鏈霉素：水溶液在 pH5-7.5 條件下，穩(wěn)定過酸或過堿易水解失效 硫酸慶大霉素：對(duì)光，熱，空氣均較穩(wěn)定水溶液在 pH2-12 條件下也穩(wěn)定.(一) 麥芽酚(maltol)反響 鏈霉素特征反響二鑒別實(shí)驗(yàn).H2ONaOHH+Fe 3+麥芽酚紫紅色.二坂口Sakaguchi反響 鏈霉素水解產(chǎn)物鏈霉胍的特征反響 .三光譜法 IR UV： 240-330nm 慶大霉素?zé)o紫

6、外吸收峰. 鏈霉素B甘露糖鏈霉素1. 來源 ：反響中間體2. 方法 ： TLC中的雜質(zhì)對(duì)照品法 雜質(zhì)對(duì)照品：甘露糖 三有關(guān)物質(zhì)及組分分析一有關(guān)物質(zhì). 效價(jià)、毒副作用不同 Chp: 規(guī)定控制各組分的相對(duì)百分含量二慶大霉素C組分測(cè)定.1. 測(cè)定方法： HPLC-衍生UV法 ( USP) 衍生電化學(xué)檢測(cè)BP) 蒸發(fā)光散射檢測(cè)Ch.P)2. 衍生法原理：3. 衍生方式：柱前衍生.4. 分別方式：RP-離子對(duì)HPLC SP：ODS MP：水-冰醋酸-甲醇-庚烷磺酸鈉定量方法：峰面積歸一化 Rf: 某組分的峰面積； Rs: 一切組分峰面積之和 .6. 討論：流動(dòng)相： 極性過強(qiáng)，出峰慢 極性過弱，出峰快離子

7、對(duì)試劑： 抑制C 組分的異吲哚衍生物在ODS柱上的吸附，添加保管； 衍生化試劑不構(gòu)成離子對(duì)，保管值變化不大. 微生物檢定法：各國(guó)藥典采用，測(cè)定效價(jià) HPLC： 衍生化UV或電化學(xué)或蒸發(fā)光散射檢測(cè) 離子對(duì)色譜法：烷基磺酸鹽為反離子 離子交換色譜法： 酸性條件下在陽(yáng)離子交換柱上分別 反相色譜法四含量測(cè)定. 例：HPLC-蒸發(fā)光散射法測(cè)定硫酸依替米星含量 SP：ODS MP：三氟醋酸溶液-甲醇 分別方式：RP-離子對(duì)色譜 檢測(cè)器：蒸發(fā)光散射.蒸發(fā)光散射檢測(cè)器任務(wù)原理 檢測(cè)三步曲流動(dòng)相要求： 必需是揮發(fā)性的，不能含有緩沖鹽樣品要求：霧化蒸發(fā)檢測(cè)揮發(fā)性低于流動(dòng)相.檢測(cè)三步曲表示圖色譜流出物與通入的氣體混

8、合霧化蒸發(fā)除去流動(dòng)相樣品組分構(gòu)成氣溶膠強(qiáng)光照射氣溶膠，產(chǎn)生散射光，檢測(cè).一化學(xué)構(gòu)造與性質(zhì)一構(gòu)造 四并苯或萘并萘的衍生物第四節(jié) 四環(huán)素類抗生素.多西環(huán)素：R3-羥基美他環(huán)素：R3-羥基.1兩性與溶解度 弱酸性 弱堿性 與酸、堿均能成鹽：多用鹽酸鹽 其鹽：溶于水、酸或堿性溶液，不溶于有機(jī)溶劑 游離四環(huán)素類：pH4.5-7.2 內(nèi)難溶于水酚羥基、2個(gè)烯醇型羥基二甲胺基二性質(zhì)2紫外和熒光性質(zhì) UV照射下，四環(huán)素類及其降解產(chǎn)物有熒光.3不穩(wěn)定性枯燥避光： 游離方式和鹽類都較穩(wěn)定水溶液： 對(duì)酸、堿、各種氧化劑包括空氣中的氧都不穩(wěn)定 差向異構(gòu)化 降解性質(zhì).1差向異構(gòu)化 PO43-、枸櫞酸根、Ac-等陰離子：

9、 可加速差向異構(gòu)化 土霉素：不易差向異構(gòu)化(氫鍵構(gòu)成較穩(wěn)定)AApH2.06.0.2降解性酸性下降解：6位上-OH與5a位上的H發(fā)生消去反響 DDDCBBCBC脫水四環(huán)素類.堿性降解：OH-四環(huán)素異四環(huán)素.1濃硫酸反響 可區(qū)別各種四環(huán)素類 二鑒別實(shí)驗(yàn).2三氯化鐵反響 酚羥基的反響3TLC EDTA作用： 抑制痕量金屬離子呵斥的拖尾4. HPLC5. UV、IR.有關(guān)物質(zhì)異構(gòu)體，降解物 4-差向四環(huán)素ETC 差向脫水四環(huán)素EATC 脫水四環(huán)素ATC 鹽酸金霉素CTC 鹽酸四環(huán)素中有關(guān)物質(zhì)的檢查：HPLC 加校正因子的主成分本身對(duì)照法 不加校正因子的主成分本身對(duì)照法 p438 三特殊雜質(zhì)檢查.四含量測(cè)定HPLC法例：鹽酸四環(huán)素的含測(cè)RP-HPLC 三乙胺 p440外標(biāo)一點(diǎn)法 .本