實驗室的衛(wèi)生與安全

1、實驗室的衛(wèi)生與安全動物檢疫實驗室是從事與動物及其產(chǎn)品有關(guān)的動物傳染病、寄生蟲病的病原 學(xué)、免疫學(xué)、酶學(xué)、血清學(xué)、分子生物學(xué)、生物化學(xué)診斷的專設(shè)場所。在實驗室 需經(jīng)常使用各種各樣的病原微生物，這些病原微生物不僅對畜禽是致病性的，而 且其中一些還可感染人類，如果控制不嚴(yán)引起擴(kuò)散，不僅污染實驗室，導(dǎo)致檢驗 結(jié)果失敗或混淆，還可能污染周圍環(huán)境，對畜禽造成威脅，甚至引起疫病暴發(fā)； 共患疾病還會引起實驗室工作人員感染。引起實驗室感染的病原類型的百分比 是，細(xì)菌49.1%，病毒31.6%，立克次氏體11.3%，真菌5.7%，寄生蟲2.3%。因 此，要做到檢疫檢驗結(jié)果準(zhǔn)確，又不造成自身感染和從實驗室擴(kuò)散病原微

2、生物， 對動物檢疫實驗室必須有具體的要求。（一）在檢疫檢驗過程中不可避免地要接觸各種各樣的病原微生物，含有病 原微生物的樣品，如臟污樣品的處理和檢驗，特別是粉狀樣品或含灰塵較多的樣 品容易形成氣溶膠和空氣傳播性微粒，容易被操作者吸入而感染，因此應(yīng)在“排 氣櫥”內(nèi)操作，以減少操作者感染的危險。保護(hù)櫥的基本結(jié)構(gòu)由Williams和Lidwell設(shè)計，它由以下部分組成：一個 具有適當(dāng)體體積并內(nèi)部明亮的櫥，裝配有可移動的玻璃窗，通過它操作者可以看 見自己的操作；一個工作面操作者可將手臂伸入，櫥上連結(jié)一排氣系統(tǒng)，形成工 作面氣流的流通；此外還裝有濾器，以便過濾排出氣流中的傳染性微粒。保護(hù)櫥 應(yīng)裝配底盤，

3、以防液體漏出和便于清潔工作。保護(hù)櫥有正面開放式或半柵欄式和 封閉式或全柵欄式等，此處介紹的是正面開放式排氣保護(hù)櫥要求。工作面氣流速度通過保護(hù)櫥工作面的氣流是櫥面的面積和排氣系統(tǒng)牽 力互相作用的結(jié)果，一般不應(yīng)少于0.5m/s。風(fēng)速過小，不能完全排隊由強(qiáng)速率 所釋放出的微粒。一般用1.0m/s （最低為0.75m/s）的均一氣流能產(chǎn)生最好的 效果。當(dāng)氣流小于0.5m/s時，由于在保護(hù)櫥內(nèi)操作和來自酒精燈的熱空氣以及其 他因素，可能引起渦流，使傳染性微粒逸回室內(nèi)。氣流超過1m/s時，可產(chǎn)生部 分真空，使酒精燈缺氧熄滅，濾器很快被堵塞，使工作不順利。保護(hù)櫥的安置和室內(nèi)通風(fēng) 保護(hù)櫥應(yīng)安放于遠(yuǎn)離門窗處，安

4、放位置的前后 均不留通道。因為交叉的氣流和擾動可能引起渦流，抑制排氣系統(tǒng)的功能。保護(hù) 櫥離地面的高度，應(yīng)使操作者能通過前面的玻璃觀察其櫥內(nèi)為度。排氣保護(hù)櫥的房間體積不應(yīng)過小，至少大于30m3。通風(fēng)要良好，但要避免與 戶外直接通風(fēng)。排氣系統(tǒng)及安裝 由一根約長6m、直徑10cm、內(nèi)徑光滑的干道管和一個 具有0.1m3/s吹風(fēng)能力、旋轉(zhuǎn)幅度不少于直徑15cm、轉(zhuǎn)速為3 000r/min的風(fēng)扇 組成排氣系統(tǒng)。風(fēng)扇部位必須安裝在干道管的末端，排于大氣中。這樣在干道管中就形成了 負(fù)壓，所漏氣將被吸出而不致于漏入室內(nèi)。理想的排氣系統(tǒng)應(yīng)安裝于屋頂，使用 排氣系統(tǒng)的實驗室應(yīng)設(shè)置于頂樓。如果條件不允許，也可安裝在

5、墻壁或窗戶上。 安裝的方位很重要，假如排出口面向風(fēng)頭，必將減低排氣效能，需要裝置一蘑菇 狀擋板，遮蔽其出口或?qū)⑴艢夤艿拦芨叱鑫蓓敗Ｈ绻隹谠诮ㄖ锏谋筹L(fēng)面，當(dāng) 優(yōu)勢風(fēng)吹向建筑物時，可能形成一個風(fēng)洼，而排出氣若排入這種風(fēng)洼，則不易散 開和稀釋，并可能渦卷入背風(fēng)面的窗內(nèi)，因此道管應(yīng)高于風(fēng)洼之上。排氣系統(tǒng)出口處應(yīng)安裝可開閉的百葉窗，當(dāng)風(fēng)扇運轉(zhuǎn)時開放，停止時關(guān)閉， 以防在逆風(fēng)情況下空氣回流。出口周圍應(yīng)安裝鐵絲網(wǎng)，防止鳥類棲息和營巢。干道管安裝連接排氣櫥和排氣系統(tǒng)的干道管應(yīng)盡可能短，其內(nèi)壁要光 滑，彎曲要少。拐彎部分必須為圓形，不可成直角，彎曲的半徑不應(yīng)少于干道管 直徑的2.5倍。這些因素可減少亂流和拖

6、力。塑料排氣管的直徑以10-15cm為宜。濾器含有微生物的排氣必須經(jīng)過過濾，除去其傳染性微粒。要求有兩 種濾器，直接安裝于排氣櫥的強(qiáng)制通風(fēng)室之上。安裝于低位的稱為初濾濾器，除 去塵埃和小于5p m的微粒。上位的稱高效能顆粒濾器，排除小于0.川m微粒。 這些濾器系統(tǒng)需要經(jīng)常檢查。排氣櫥的檢查及其機(jī)能的檢測排氣櫥和排氣系統(tǒng)運轉(zhuǎn)功能的檢驗，需要 兩種儀器，即風(fēng)力表和氣流煙向測驗器。風(fēng)力表用來測量工作面的氣流，要有6處數(shù)據(jù)；工作面的每一角落和中心的 頂部和底部風(fēng)速不應(yīng)低于1.0m/s，每周測驗一次。氣流煙向測驗器系由一個含有化學(xué)藥品的小玻璃管和一個橡皮球組成?？諝?從橡皮球通過玻璃管噴出白煙，即可測出

7、櫥內(nèi)的渦流、亂流和回流，以及干道管 連結(jié)處的漏氣現(xiàn)象。排氣保護(hù)櫥內(nèi)氣流是否充足，可由裝配于櫥上的壓力表或文德利氏管 (Venturi system)自動的記錄于外部刻度表上。消毒、清潔和維修排氣櫥內(nèi)和濾器的消毒可使用甲醛溶液，裝于細(xì)頸瓶 內(nèi)放入櫥內(nèi)加熱蒸干。消毒工作應(yīng)在濾器更換前進(jìn)行，一般密封過夜；同時應(yīng)開 動風(fēng)扇幾分鐘，以利甲醛蒸氣浸透過濾器。日常的清潔和消毒可用酚類消毒劑擦 拭。當(dāng)排氣保護(hù)櫥的氣流低于要求時，則需在消毒后進(jìn)行拆卸，更換濾器，用噴 燈燒濾板架中存掛的污物，以及其他部件的檢修等。保護(hù)櫥內(nèi)的器械，應(yīng)盡量少放并保持專用。（二）無菌室的消毒在操作前、后各用紫外燈照射0.5-1h，經(jīng)試

8、用一段時 間，或發(fā)生霉菌或頑固性細(xì)菌污染時，用甲醛溶液熏蒸消毒，每立方米容積用甲 醛溶液10-15ml，加高錳酸鉀5-7.5g，密閉門窗，熏蒸4h以上或過夜。啟封后 殘余甲醛溶液氣霧經(jīng)打開窗戶通風(fēng)或用放在淺盤中的氨水中和。病毒室平時用1%新潔爾滅或3.3%漂白粉或2%過氧乙酸等擦拭。（三）傳染性材料的處理 實驗室中所有傳染性材料一概不準(zhǔn)拿出實驗室。 廢棄的材料均應(yīng)經(jīng)過高壓消毒后分別進(jìn)行處理。用作傳染性材料消毒的高壓鍋必 須專用。送檢的病理標(biāo)本通常應(yīng)貯存于實底容器中，放置于專用櫥內(nèi)或指定的冰 箱中，檢驗完成后即可送去高壓消毒。廢棄的容器和可重復(fù)使用的容器應(yīng)經(jīng)高壓 消毒后分開，廢棄的放入袋中送去焚

9、化；可重復(fù)使用的物品消毒后再送去洗滌。 消毒小量的家兔或豚鼠等糞尿時，可用1份糞尿加漂白粉5份，充分?jǐn)嚢?，消?2h以上。有些傳染性材料可用化學(xué)消毒劑進(jìn)行消毒，實驗室常用的為苯氯酸鈉溶液。 放入消毒液內(nèi)的吸管、玻片、毛吸管等均應(yīng)浸泡過夜后方可處理。處理時，吸管 等應(yīng)在熱水（65C）中漂洗或用水煮沸后再按常規(guī)法洗凈。盛消毒液的玻璃器皿 在重新?lián)Q液前，應(yīng)進(jìn)行高壓消毒，以防耐消毒劑的細(xì)菌滋生。因為在消毒劑的廢 棄筒內(nèi)，經(jīng)常有蛋白質(zhì)類加入其中，致使消毒劑的作用迅速喪失，所以實驗室廢 棄筒應(yīng)經(jīng)常更換。含有10-3有效氯的濃次氯酸鹽適用大多數(shù)消毒目的。當(dāng)存在大量血液時，可 用強(qiáng)次氯酸鹽（含10-2有效氯）

10、。當(dāng)存在大量有機(jī)物而無血液時，可選用可溶性 苯酚溶液。（四）為方便選用各種消毒劑，對常用消毒劑作簡單介紹，以供參考。消毒劑的種類按其主要的作用原理，可分為以下幾類：使菌體蛋白質(zhì)變性或沉淀 重金屬鹽類易與帶陰電的細(xì)菌蛋白質(zhì)結(jié)合，使 之變性或發(fā)生沉淀。汞、銀、砷等均能與菌體酶蛋白的一SH基結(jié)合，使一些以 此為必要基的酶喪失活性。重金屬鹽類遇到有機(jī)物特別是蛋白質(zhì)時，則殺菌作用 降低。氧化劑：能使菌體酶蛋白中的一SH基氧化變成為一S S 基而失去酶活性。 氯能與蛋白質(zhì)中的氨基結(jié)合，使菌體蛋白氯化，代謝機(jī)能發(fā)生障礙，細(xì)菌因而死 亡。漂白粉、氯及其衍化物（如氯胺類）分解時生成次亞氯酸，再分解時生成新 生氧

11、O和Cl，呈氧化和氯化作用，使細(xì)菌死亡。過氧乙酸（CHCOOOH）:為無色透明或淡黃色液體，易溶于水，為強(qiáng)氧化劑， 對金屬有腐蝕性。3市售品為20%水溶液，對細(xì)菌及其芽胞、真菌、病毒均具有高 效的殺滅作用。常用0.2-0.5%水溶液消毒，稀釋液只能存放3天。醇類：能使菌體蛋白變性，具有一定的殺菌力。常用的為乙醇。無水乙醇無 殺菌力，稀釋至70%左右時才有效。醛類：殺菌作用比醇類強(qiáng)，以甲醛和戊二醛作用最強(qiáng)。改變細(xì)菌細(xì)胞壁或破壞細(xì)胞膜使通透性發(fā)生改變。酚類：苯酚、來蘇兒等酚類化合物，低濃度能破壞細(xì)胞膜，使胞漿內(nèi)容物如 氨基酸等漏出，高濃度使細(xì)菌蛋白質(zhì)凝固，能抑制細(xì)菌生長并殺滅之。此外，也 有抑制細(xì)

12、菌某些酶系統(tǒng)如脫氫酶和氧化酶等作用。表面活性劑：又稱去垢劑（detergent），為四聯(lián)胺化合物。易溶于水，能 降低液體的表面張力，使物品油脂乳化，易于去除，因而具有清潔作用。并能吸 附于細(xì)菌表面，改變細(xì)胞壁通透性，使菌體內(nèi)的酶、輔酶和代謝中間產(chǎn)物逸出而 殺菌。因細(xì)菌一般帶陰電荷，故陽離子型表面活性劑有較強(qiáng)的殺菌使用。其作用 機(jī)理，一般認(rèn)為是損害細(xì)胞壁，使菌體內(nèi)的氯、磷和其他物質(zhì)逸出。同時由于水 解酶游離，細(xì)菌成分發(fā)生自溶，最后導(dǎo)致死亡。此外，亦引起菌體蛋白質(zhì)變性沉 淀。陰陽離子表面活性劑相遇作用可抵消。常用的有新潔爾滅、杜滅芬等，使用 新潔爾滅時，不能與肥皂、合成洗滌劑及鹽類接觸時，否則失效

13、。影響細(xì)菌的代謝作用染料：堿性染料，如龍膽紫、甲紫與煌綠等，有顯著的抑菌作用，同時也有弱的殺菌作用。 堿性染料對革蘭氏陽性細(xì)菌的作用比對革蘭氏陰性菌強(qiáng)。氨基吖啶的作用不受血清的抑制， 可用于治療創(chuàng)傷。環(huán)氧乙烷（CHO）:又稱氧化乙烯，是一種化學(xué)性質(zhì)活潑的環(huán)氧類烷基化合 物，它對細(xì)菌及芽胞、病毒、真菌等有較強(qiáng)的殺滅力。酸、堿類主要以離子或其分子殺菌（五）工作衣、帽、口罩等消毒處理 進(jìn)行病毒和細(xì)菌的檢疫檢驗，進(jìn)出操 作室必須更衣、換鞋。進(jìn)工作室要穿工作室內(nèi)的工作衣，戴工作帽和口罩，必要 時要戴手術(shù)手套。操作完成后脫手套，應(yīng)先用一手指勾另一手的手套外表面（不 要接觸內(nèi)表面），將手套脫至一半，再用已脫

14、一半手套的手的手指勾向另一手的 手套外表面脫下手套，然后用已脫下手套的手的手指夾住另一手手套內(nèi)表面將手 套脫下。然后脫下帽子、口罩和工作衣，連同手套放入高壓鍋內(nèi)準(zhǔn)備高壓消毒。 工作完畢，一定要洗手。洗手時，不要用指頭開水龍頭開關(guān)，而用肘或腳踏式水 龍頭開關(guān)，水從上向下沖洗手后再用肥皂清洗一次。所以實驗室必須裝肘動或腳 動開關(guān)的水源。龍頭蓮盤最好裝置蓮頭噴嘴。接觸毒物的生化實驗室和同位素實 驗室也要安裝肘動或腳動開關(guān)的水源，以防毒物對工作人員的毒害。（六）避免交叉污染在同一個無菌室或潔凈工作臺上不能同時進(jìn)行兩種或 兩種以上的病原檢驗，以免交叉污染。有條件的一個無菌室或潔凈工作臺僅檢驗 一種病原。

15、若條件受到限制，應(yīng)當(dāng)檢驗完成一種病原后徹底消毒，再進(jìn)行另一項 檢驗，以免交叉污染，影響檢測結(jié)果。在培養(yǎng)傳代細(xì)胞種的無菌室或潔凈工作臺，不要進(jìn)行病毒或細(xì)菌的檢驗，以 免污染種細(xì)胞。（七）實驗室的污水處理 檢疫用過的水應(yīng)先集中到一個污水處理池，池中 加工業(yè)燒堿，使殘留的病毒或烈性細(xì)菌徹底殺滅后在排放到城市下水道，以避免 危害環(huán)境。（八）實驗室安全需用氧氣的設(shè)備如氣相色譜儀和通氣增菌培養(yǎng)設(shè)備等，都應(yīng)在單獨房間安 放，要避免與其他明火接觸，房間注意通風(fēng)，以免發(fā)生意外。使用氮氣或二氧化碳的設(shè)備如二氧化碳培養(yǎng)箱、超濾過濾器等，要防止窒 息發(fā)生意外，房間要注意通風(fēng)。冰箱和溫箱要分別在不同房間安放，不要混放，

16、因為它們都會產(chǎn)生很大的 熱量，因此房間要注意通風(fēng)、降溫、室內(nèi)溫度不可過高。易燃、易爆、有毒的試劑，要根據(jù)它們的特性合理存放，以免發(fā)生意外， 如乙醚極易揮發(fā)、易燃，沸點為34.6C，在空氣作用下易氧化，在光線下促進(jìn) 氧化。氧化物在100C能引起強(qiáng)烈爆炸，在南方的夏天，氣溫常常超過它的沸點， 所以應(yīng)放在陰涼避光處。又如氯仿是有毒易揮發(fā)的藥品，遇光會產(chǎn)生極毒的光氣。 要存放于通風(fēng)陰涼避光處。實驗室必須常備小型滅火器，以備急用。除了上述易燃易爆的試劑外，最 常用的酒精燈，若因操作不當(dāng)打破就會引起火源，若不及時撲救，也會釀成災(zāi)害， 所以，常備小型滅火器應(yīng)急使用可以避免較大的損失。最好屋頂能裝配自動滅火

17、器，防患于未然。表4-2常用消毒劑的性狀與用法類 別名稱主要性狀用法用途重升汞殺菌作用強(qiáng)，腐蝕金0.05%-0.1%非金屬器皿器械金屬屬紅汞抑菌力弱，無刺激性2%水溶液皮膚粘膜，小創(chuàng)傷消鹽毒類硫柳汞殺菌力弱，抑菌力強(qiáng)，0.01%生物制品防腐不沉淀蛋白質(zhì)硝酸銀有腐蝕性0.1%蛋白銀銀有機(jī)化合物弱蛋白 銀銀有機(jī)化合物高錳酸 鉀過氧化氫過氧乙 酸強(qiáng)氧化劑，穩(wěn)定新生氧殺菌穩(wěn)定20%市售品無爆炸危 險，性質(zhì)不穩(wěn)定，原液 對皮膚、金屬有強(qiáng)烈腐 蝕性1%-5%10%-20%0?3%0.2%-0.5%皮膚消毒，手術(shù)部位消毒新生兒滴眼預(yù)防淋球菌感染眼及尿道粘膜消毒皮膚、尿道消毒、蔬 菜、水果消毒口腔粘膜消毒塑料

18、、玻璃、人造纖 維消毒、皮膚消毒（洗 手）鹵素及其化合物粉 胺 氯 酸酒漂 氯 二氤尿碘（0.2-0.5）X 10-6乳狀液10%-20% 配成乳液;澄清液: 乳狀液放24h后取 上清液0.5%-1.5%0.2%-0.5%水溶液4X10-63%2.5%碘酒（酊）氯氣，刺激性強(qiáng)，有 毒白色粉末，有效氯易 揮發(fā)，有氯味，腐蝕金 屬、棉織品、刺激皮膚 易潮解白色結(jié)晶，有氯臭， 含氯較穩(wěn)定白色結(jié)晶，有氯味， 殺菌力弱，可持入，腐 蝕與殺菌作用小白色粉末，有氯味， 殺菌力強(qiáng)，較穩(wěn)定，含 有效氯62%-64%刺激皮膚，不能與紅 汞水通用飲水及游泳池消毒乳狀液：地面、廁所、 排物消毒；澄清液：空 氣、物品、

19、表面（0.5%-1% 噴霧）地面、墻壁、家具消 毒，飲水消毒： 0.3-0.4g/kg室內(nèi)空氣及表面消毒（噴霧）0.1%-0.2% 浸泡衣服消毒水消毒空氣（噴霧）， 排泄物、分泌物等皮膚消毒已醇甲醛戊二醛消毒力不強(qiáng)，對芽胞 無效揮發(fā)慢，刺激性強(qiáng)揮發(fā)慢，刺激性少， 堿性溶液，有強(qiáng)大殺菌70%-75%10%以 0.3%NaHCO 調(diào) pH 至 7.5-8.5,配皮膚、體溫表消毒浸泡，物品表面消 毒，蒸氣消毒：10%溶 液加等量水，蒸發(fā)，密 閉房間6-24h，或加半 量高錳酸鉀，產(chǎn)生黃色 濃煙，消毒房間消毒不能用熱力滅 菌的物品（如精密儀作用成2%水溶液器）酚類苯酚殺菌力強(qiáng)，有特殊氣 味3%-5%3%-5%地面、家具、 器皿來蘇兒殺菌力強(qiáng)，有特殊氣 味3%-5%表面消毒：2%皮膚消 毒季胺鹽類表面活性劑新潔爾杜滅芬（消毒寧滅）易溶于水，刺激性小， 穩(wěn)定，對芽胞無效；遇 肥皂或其他合成洗滌 劑U，作用減弱穩(wěn)定、易溶于水，遇 肥皂或其他合成洗滌劑 效果減弱0.05%-0.1%0.05%-0.01%外科手術(shù)洗手及皮 膚粘膜消毒，浸泡手術(shù) 器械皮膚創(chuàng)傷沖洗；金屬 器械、棉織品、料物品 消毒巳烷洗必泰白色結(jié)晶，穩(wěn)定，略 溶于水，溶于醇，禁忌 其鹽類