微生物綜合實驗報告酸奶的制備

1、C屮u膽紅*3瞬微生物綜合實驗報告酸豹的制簷姓名：邢其勸學(xué)號：09030111024班級：生化制藥0931分組：第六組指導(dǎo)教師：謝光杰陳振興康熙實驗時間：2010.12.062010.12.17一、前言概述近年來，我國發(fā)酵工程技術(shù)不斷發(fā)展，在食品工業(yè)上的應(yīng)用：主要有三大類產(chǎn)品，一是生產(chǎn)傳統(tǒng)的發(fā)酵產(chǎn)品，如啤酒、果酒、食醋等；二是生產(chǎn)食品添加劑；三是幫助解決糧食問題。學(xué)校為了讓學(xué)生注重理論與實踐相結(jié)合，增強學(xué)生的動腦、動手能力訓(xùn)練，對發(fā)酵技術(shù)有一定的了解。按我們學(xué)校的教學(xué)計劃安排，本學(xué)期(2010.12.062010.12.17)為我們生化制藥0931班綜合實驗教學(xué)課程，主要的任務(wù)是制備酸奶。在學(xué)

2、校的組織下，由謝光杰、康熙和陳振興三位老師帶領(lǐng)我們班41名學(xué)生在學(xué)校實驗室進行乳酸發(fā)酵測定與乳酸飲料的制作。一方面是為了加深和鞏固所學(xué)的理論知識，提高分析、解決問題能力，另一方面是為了培養(yǎng)我們有良好的職業(yè)道德，嚴格認真、實事求是的嚴謹科學(xué)態(tài)度和工作作風(fēng)，為以后的工作打下良好的基礎(chǔ)。因此，全班同學(xué)對這次綜合實驗熱情都很高，都下決心要好好利用這次機會充實自己！、乳酸的簡介乳酸純品為無色液體，工業(yè)品為無色到淺黃色液體，具有吸濕性。乳酸有很多衍生物，包括其鹽和酯，鹽類溶解度都較高，是很好的礦物元素補充劑，也是很多藥物的成分之一，其酯類由于具有天然降解的優(yōu)勢，廣泛用于各種工業(yè)技術(shù)和日常生活中。乳酸菌指發(fā)

3、酵糖類主要產(chǎn)物為乳酸的一類無芽孢、革蘭氏染色陽性細菌的總稱。凡是能從葡萄糖或乳糖的發(fā)酵過程中產(chǎn)生乳酸的細菌統(tǒng)稱為乳酸菌。乳酸菌可用于制酸奶；酸奶的好處有：一是能將牛奶中的乳糖和蛋白質(zhì)分解，使人體更易消化和吸收；二是酸奶有促進胃液分泌、提高食欲、加強消化的功效；三是乳酸菌能減少某些致癌物質(zhì)的產(chǎn)生，因而有防癌作用；四是能抑制腸道內(nèi)腐敗菌的繁殖，并減弱腐敗菌在腸道內(nèi)產(chǎn)生的毒素；五是有降低膽固醇的作用，特別適宜高血脂的人飲用。酸奶除了營養(yǎng)豐富外，還含有乳酸菌，所以具有保健作用。這些作用是：維護腸道菌群生態(tài)平衡，形成生物屏障，抑制有害菌對腸道的入侵。通過產(chǎn)生大量的短鏈脂肪酸促進腸道蠕動及菌體大量生長改變

4、滲透壓而防止便秘。酸奶含有多種酶，促進消化吸收。通過抑制腐生菌在腸道的生長，抑制了腐敗所產(chǎn)生的毒素，使肝臟和大腦免受這些毒素的危害,防止衰老。通過抑制腐生菌和某些菌在腸道的生長。從而也抑制了這些菌所產(chǎn)生的致癌因子，達到防癌的目的。提高人體免疫功能，乳酸菌可以產(chǎn)生一些增強免疫功能的物質(zhì)，可以提高人體免疫，防止疾病。三、制備目的和意義1）學(xué)會乳酸發(fā)酵測定和制作乳酸菌飲料的方法，了解乳酸菌的生長特性。2）掌握培養(yǎng)基的配制方法和原理以及一些實驗儀器的使用。3）鞏固所學(xué)的專業(yè)知識，提高專業(yè)技能。4）將理論知識與實踐結(jié)合起來，培養(yǎng)實踐能力，為以后工作崗位打基礎(chǔ)。四主要實驗內(nèi)容41實驗材料和用具樣品：含乳酸

5、菌的酸奶；培養(yǎng)基：BCG牛乳培養(yǎng)基、脫脂乳試管；設(shè)備：高壓蒸汽滅菌鍋，恒溫培養(yǎng)箱，冰箱；儀器用品：100ml燒杯一個，100ml量筒一個，每人2個平板,2個試管，250ml容量三角瓶2個，1ml無菌移液管1只，培養(yǎng)基分裝器一個，玻棒2根,酒精燈一盞，石棉網(wǎng)，接種環(huán)一個，天平，pH試紙若干，棉塞，吸管，報紙，線繩、標(biāo)簽等。藥品：酵母膏，脫脂奶粉，蔗糖，1.6%溴甲酚綠乙醇溶液，瓊脂，結(jié)晶紫染液，碘液，95%乙醇，復(fù)紅染液。42實驗步驟1、培養(yǎng)基的制備：（A）液：稱脫脂奶粉20克，水100ml，放入錐形瓶中，加入1.6%溴甲酚綠乙醇溶液后溶液變藍色，攪拌，用紗布包扎好再用牛皮紙包扎，貼上標(biāo)簽（必須

6、用鉛筆寫），注明何種培養(yǎng)基，放進高壓滅菌鍋中80C滅菌20min。（B）液：稱酵母膏2克，水100克，瓊脂4克混合放入錐形瓶中玻棒攪勻，加熱溶解，加熱過程要不斷攪拌，可適當(dāng)補水。瓊脂完全溶解用PH試紙調(diào)pH=6.8,用紗布包扎好再用牛皮紙包扎，貼上標(biāo)簽（必須用鉛筆寫），注明何種培養(yǎng)基，放進高壓滅菌鍋中121C滅菌2.min。將滅好菌的A液和B液趁熱充分混合，點燃酒精燈對周圍的空氣進行滅菌，并在酒精燈的附近用左手握著平板用拇指和小拇指打開一個小縫，趁熱將培養(yǎng)液倒如平板內(nèi)，倒入的量能使培養(yǎng)基剛要覆蓋平板底部，倒好后把平板平放到實驗臺，輕輕晃動是培養(yǎng)基形成一個平面，等培養(yǎng)基冷卻凝固后倒放并貼上標(biāo)簽。

7、（注意：整個實驗要在酒精燈附近做，以保證培養(yǎng)基不染菌）。2、樣品的處理按照無菌操作要求，從市售新鮮酸乳中吸取1ml檢樣，放入裝有試管中，振搖混勻。3、分離方法倒培養(yǎng)基在無菌室，先用紫外線照射半小時把表面菌滅了，在通風(fēng)10min后，每培養(yǎng)皿傾注約15ml左右已溶化的BCG牛乳培養(yǎng)基，立即放在桌上搖勻，冷卻凝固后即成平板。十倍稀釋法將檢樣充分搖勻后，用十倍稀釋法稀釋成10-1、10-2、10-3各種稀釋度的樣品液。分離直接用接種環(huán)蘸取原液、10-2、10-3稀釋度的試管中原液，在3個BCG牛乳培養(yǎng)基瓊脂平板上劃線分離，置40C培養(yǎng)箱中倒平板培養(yǎng)48h。平板出現(xiàn)有毛絨圓形稍扁平的黃色菌落。然后用接種

8、環(huán)蘸取有黃色的菌落，在未用的3個BCG牛乳培養(yǎng)基瓊脂平板上劃線分離，置40C培養(yǎng)箱中倒平板培養(yǎng)48h。平板出現(xiàn)有毛絨圓形稍扁平的黃色菌落。結(jié)果與分析：我們蘸取原液、10-2、10-3稀釋度同時接種到培養(yǎng)基時，發(fā)現(xiàn)傳代后，只有一個培養(yǎng)基上長出少量黃色菌落；說明我們的檢樣濃度太低造成最后菌落太少。4、鑒別配制脫脂乳試管培養(yǎng)基，分裝試管，包扎，滅菌備用。稱5g脫脂奶粉，2.5g蔗糖，50ml滅菌水，攪拌分別倒進3個試管三分之一，分裝試管，包扎，滅菌備用。選取經(jīng)初步鑒定的乳酸菌典型菌落，用接種環(huán)挑取轉(zhuǎn)至脫脂乳試管中，40C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)824h。若牛乳出現(xiàn)凝固，無汽泡，呈酸性，涂片鏡檢細胞為桿狀或鏈球狀

9、(兩種形狀的菌種分別選入)，革蘭氏染色顯陽性，最終選擇出在36h能凝固的牛乳管，作菌種待用。結(jié)果與分析：我們挑取的乳酸菌微傳代的菌落，用了四小時就能凝乳，而且是黃色的菌落?？赡苁悄谭壑星蚓暮勘容^少，所以只分離出來桿菌，最后我們只好從其他組那接種到了乳酸球菌進行傳代。5、乳酸菌飲料的制作乳酸菌培養(yǎng)基的制作將脫脂乳和水以1:7(W/V)的比例，同時加入6%的蔗糖，充分混合，于8085C滅菌1015min,冷卻至3540C，作為制作飲料的培養(yǎng)基質(zhì)。每人稱脫脂乳粉25g,蔗糖11g，無菌水200ml,放進錐形瓶攪拌做為發(fā)酵液。接種將凝固的牛乳管發(fā)酵菌，均以接入培養(yǎng)基質(zhì)中即為飲料發(fā)酵液。接種后搖勻，

10、用紗布包扎好再用牛皮紙包扎，貼上標(biāo)簽(必須用鉛筆寫)，注明何種培養(yǎng)基。發(fā)酵將接種后的酸乳瓶置4042C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)34h時。觀察，出現(xiàn)凝乳后停止培養(yǎng)。然后轉(zhuǎn)入45C冰箱中冷藏24h以上。經(jīng)此后熟階段,達到酸度適中（pH44.5）,凝塊均勻致密,無乳清晰出,無汽泡,獲得較好口感和特有風(fēng)味。結(jié)果與分析：我們凝乳的都跟豆腐腦差不多，做出來的有異味，且酸味不夠，還有少量乳清晰出，實驗不太成功。而直接用新鮮酸奶的乳酸菌做接種的非常成功。實驗結(jié)果不好在于菌種培養(yǎng)不夠好，而且菌種含量非常少。五、實習(xí)收獲和重要心體會復(fù)習(xí)了培養(yǎng)基的制作，接種，以及超凈工作臺的使用和維護，復(fù)習(xí)了高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法。還有實驗

11、時與各位同學(xué)的合作，實驗時間的具體安排，以及流程的時間掌握，這些都是需要一點一點的計劃和變化的。在整個實驗過程中，需要一個主要的掌握者，合理安排工作，讓每個人都有機會對實驗本質(zhì)內(nèi)容加深理解。六、注意事項牛奶加熱的溫度如過高，會殺死酸奶中的乳酸菌造成發(fā)酵失敗，如溫度過低又會造成發(fā)酵緩慢，以摸著不燙手為度。容器消毒最好不用消毒液，因為如果沖洗不干凈，會殺死乳酸菌，使發(fā)酵失敗。加熱消毒是最安全的方法。3制備過程中發(fā)酵時候要嚴格控制溫度，因為溫度決定乳酸菌的生長環(huán)境。七、實驗總結(jié)經(jīng)過這兩周制備乳酸奶的綜合實驗真是讓我受益匪淺！在此，我對這次制備實驗進行總結(jié)，總結(jié)在這個實驗過程中的收獲和不足，取之長，補

12、之短，在今后學(xué)習(xí)和工作中有所受用。實驗的第一天，指導(dǎo)老師并沒有讓我們直接去做實驗，而是給我們實驗制備任務(wù)，讓我們自己先動手查找資料，然后選出一條合理的路線。于是我們第六組3個人先分別去查找資料，然后我們再把資料綜合在一起并進行討論，最終確立了方案。然后，我們?nèi)齻€人就分開去領(lǐng)取儀器和試品，就開始做制備實驗了。以前我們做過的實驗比較多，但在這次制備酸奶的綜合實驗學(xué)習(xí)中，讓我受益頗多，這次實驗讓我養(yǎng)成了初步查找、整理資料，分析問題的能力。以前做過的實驗，我們都是按照實驗書所提供的步驟進行實驗，但經(jīng)過這一次，讓我深深的懂得查找資料再去完成實驗的重要性，查找到的資料是否合理將會直接影響實驗的成功與否。同

13、時也加深了發(fā)酵技術(shù)的理解，并且進一步熟練發(fā)酵實驗的基本操作，掌握了更多的知識。但是給我受益最深的還是做實驗時認真對待的態(tài)度，因為對于操作程序中某些關(guān)鍵步驟而言，哪怕是作微小改變，都可能使實驗前功盡棄，因為只有這樣，才能做好每一個實驗。在這次的制備實驗中，自己的實驗?zāi)芰σ膊粩嗵岣?，還有最重要的一點就是進一步學(xué)會與同學(xué)合作的精神。雖說制備酸奶實驗是對前人實驗的重復(fù)，但對我們來說也并非是一條容易的事，但它讓我們在學(xué)習(xí)實驗中獲得相關(guān)的知識。當(dāng)然，知識是無止境的，但在制備實驗過程中給我?guī)淼牟粌H是純粹的知識，更多的是自己和同學(xué)一起在制備實驗過程中的合作精神。實驗這過程中，我也發(fā)現(xiàn)存在的很多不足：我的動手能力不夠強；操作時沒有注意一些細節(jié)我們制備出來的酸奶，結(jié)果不是很令人滿意，但我還是很喜歡，畢竟是我們親手制取出來的物品?？傊苽渌崮套屛沂斋@頗多，同時我也發(fā)現(xiàn)了自身的不足，在這次實驗中學(xué)得的，我將發(fā)揮到其它中去，也將在今后的學(xué)習(xí)和工作中不斷提高、完善。在此間發(fā)現(xiàn)的不足，我也將努力改善，通過學(xué)習(xí)、實踐等方式不斷提高。同時，我也希望學(xué)校讓我們接觸到可能多的實驗，獲得較多的實驗知