臨床微生物標(biāo)本采集和送檢

1、關(guān)于臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第一張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月主要內(nèi)容1、標(biāo)本采集的意義和原則2、標(biāo)本的運送與拒收原則3、各種標(biāo)本的采集血液、骨髓標(biāo)本尿液糞便痰及上呼吸道標(biāo)本穿刺液標(biāo)本（腦脊液、膽汁、胸腹水等）膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本生殖道標(biāo)本第二張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月 標(biāo)本采集是指采集患者體內(nèi)的一小部分血液、體液、排泄物、分泌物以及組織細(xì)胞等標(biāo)本進行檢驗，以反映機體正常的生理現(xiàn)象和病理改變。 標(biāo) 本 采 集第三張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月 標(biāo) 本 采 集60%以上的實驗誤差發(fā)生在分析前！標(biāo)本采集正確與否與檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性有密切的關(guān)系!因此，我們

2、應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法。第四張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)本采集的意義正確的微生物標(biāo)本采集和運送是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提第五張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月掌握正確的標(biāo)本采集方法 為保證標(biāo)本的質(zhì)量，獲得陽性結(jié)果，應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法、采集量和采集時間并應(yīng)及時送檢，特殊標(biāo)本還需注明采集時間。 第六張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月基本原則1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.采樣后立即送檢5.混有正常菌群標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)6.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑。7.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗?zāi)康牡谄邚垼?/p>

3、PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)本的運送原則1、所有的標(biāo)本都必須立即送往實驗室，最好在2h內(nèi),保存時間不應(yīng)超過24h.2、最佳的臨床標(biāo)本送檢首先取決于所獲取標(biāo)本的量.量少的標(biāo)本應(yīng)在采集后15-30min內(nèi)送檢.3、對環(huán)境敏感的微生物如志賀菌、奈瑟氏菌和流感嗜血桿菌（對低溫敏感）應(yīng)立即處理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、內(nèi)耳道標(biāo)本。第八張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)本的拒收原則無標(biāo)簽、無檢驗單不檢測，并與送檢的醫(yī)生和護士聯(lián)系。送檢延誤不接收，提醒送檢者，要求重新采集。送檢容器不當(dāng)或滲漏不接收，告知送檢者，要求重新采集。標(biāo)本不符合要求不接收，聯(lián)系送檢者，指出不符合要求之處，要

4、求重新采集符合試驗要求的標(biāo)本.第九張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月臨床微生物檢驗常見標(biāo)本血液、骨髓標(biāo)本尿液糞便痰及上呼吸道標(biāo)本穿刺液標(biāo)本（腦脊液、膽汁、胸腹水等）膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本生殖道標(biāo)本第十張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月一、血培養(yǎng)標(biāo)本采集第十一張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)送檢指征病人出現(xiàn)以下臨床表現(xiàn)，或同時具備以下幾種臨床表現(xiàn)時應(yīng)采集血培養(yǎng)。1 、發(fā)熱（38）或低溫（36）2 、寒戰(zhàn)3 、白細(xì)胞增多（10109/L，特別有“核左移”時）4 、粒細(xì)胞減少（成熟的多形核白細(xì)胞1109/L）5 、血小板減少6 、皮膚、粘膜出血7 、昏迷8 、多器官

5、衰竭9 、血壓降低10 、呼吸加快11、特殊情況：可疑新生兒敗血癥時，除發(fā)熱或低溫外，很少培養(yǎng)出細(xì) 菌，應(yīng)增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。第十二張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)采集須知應(yīng)在抗生素應(yīng)用前或停藥一周后采集標(biāo)本，如不能停用抗生素，應(yīng)于下次抗生素應(yīng)用前采集 ！對懷疑菌血癥、真菌血癥的患者，在考慮使用抗菌藥物之前，應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。必須同時或間隔短時間內(nèi)采集套以上血培養(yǎng)標(biāo)本。第十三張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)采集容器法國梅里埃公司血培養(yǎng)儀配套血培養(yǎng)瓶或安圖公司血培養(yǎng)瓶 第十四張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)標(biāo)本采集方法1、皮膚消毒2、培養(yǎng)瓶消

6、毒 ：(1) 用75酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子。(2) 酒精作用60s。(3) 在血液注入血培養(yǎng)瓶之前，用無菌紗布或棉簽清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。3、血液注入血培養(yǎng)瓶中，輕輕顛倒混勻，以防血液凝固 。第十五張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)采集次數(shù)成年患者：推薦同時采集套（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本（即雙瓶雙臂同時采集血培養(yǎng)標(biāo)本）。嬰幼兒患者：推薦同時采集次（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本。原因：血培養(yǎng)做1套的檢出率為65%。做2套和3套檢出率的檢出率分別為80%和90%。單瓶的血培養(yǎng)檢出率不高，而且結(jié)果很難臨床解釋。 在采取血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，無需重復(fù)采取血培養(yǎng)。兩個例外：細(xì)菌

7、性心內(nèi)膜炎和金黃色葡萄球菌菌血癥。第十六張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)采血量成年患者：推薦采血量每瓶不少于5ml。嬰幼兒患者：兒童3-5ml，嬰兒為1-2ml，推薦采血量每瓶不少于2ml。（少于病人總血容量的1%）第十七張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項1、嚴(yán)禁在輸液、輸血的針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗結(jié)果。（最好在對側(cè)采集）2、若同時抽取幾個項目的血標(biāo)本，一般注入容器的順序為：血培養(yǎng)瓶抗凝管干燥試管. 動作要迅速準(zhǔn)確，避免溶血。注入標(biāo)本后的血培養(yǎng)瓶務(wù)必立即送至檢驗科細(xì)菌室3、每次領(lǐng)培養(yǎng)瓶不宜過多，以防過期，未使用的培養(yǎng)瓶亦應(yīng)室溫保存（15-30），切勿放冰箱

8、保存。第十八張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月骨髓標(biāo)本的微生物學(xué)檢查 采集部位：骨髓穿刺法從髂骨采集標(biāo)本。 采集時間：在用藥前、發(fā)熱初期或高熱期 當(dāng)骨髓炎時或長期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽性率遠(yuǎn)高于血液培養(yǎng) 第十九張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月 二、尿液標(biāo)本的采集 第二十張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月尿液標(biāo)本的送檢指征1 有典型的尿路感染癥狀；2 肉眼膿尿或血尿；3 尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細(xì)胞和/或亞硝酸鹽陽性；4 不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀；5 留置導(dǎo)尿管的病人出現(xiàn)發(fā)熱；6 膀胱排空功能受損；7 泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。第二十一張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2

9、022年6月尿液標(biāo)本采集容器 無菌試管或無菌尿液標(biāo)本留取容器 第二十二張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月尿液標(biāo)本采集方法1、 清潔中段尿標(biāo)本，囑咐患者睡前少飲水，清晨起床后用肥皂水清洗會陰部，女性應(yīng)用手分開大陰唇，男性應(yīng)翻上包皮，仔細(xì)清洗，再用清水沖洗尿道口周圍，開始排尿，將前段尿排去，插入性接取中段尿約10ml于無菌容器中，立即送檢，于一小時內(nèi)接種。該方法簡單、易行，是最常用的尿培養(yǎng)標(biāo)本收集方法，但很容易受到會陰部細(xì)菌污染，應(yīng)由醫(yī)護人員采集或在醫(yī)護人員指導(dǎo)下由患者正確留取。第二十三張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月尿液標(biāo)本采集方法2 、恥骨上膀胱穿刺：使用無菌注射器直接從恥骨

10、上經(jīng)皮穿入膀胱吸取尿液，是評估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”方法，但有一定的痛苦，病人難以接受。主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒尿標(biāo)本的采集 第二十四張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月尿液標(biāo)本采集方法3 、直接導(dǎo)尿：按常規(guī)方法對會陰部進行清洗消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液。可減少尿液標(biāo)本的污染，準(zhǔn)確地反映膀胱感染情況。但有可能將下尿道的細(xì)菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。 第二十五張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月尿液標(biāo)本采集方法4 、小兒收集包：對于無控制能力的小兒可應(yīng)用收集包收集尿液，這種裝置由于很難避免會陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗結(jié)

11、果為陰性時才有意義。如果檢驗結(jié)果為陽性，應(yīng)結(jié)合臨床進行分析，必要時可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍羧∧蛞哼M行復(fù)查。 第二十六張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月尿液標(biāo)本采集方法5、 留置導(dǎo)尿管收集尿液：利用留置導(dǎo)尿管采集標(biāo)本時，應(yīng)先消毒導(dǎo)尿管外部，按無菌操作方法用注射器穿刺導(dǎo)尿管吸取尿液，操作時應(yīng)防止混入消毒劑，不能從收集袋中采集尿液。長期留置導(dǎo)尿患者，應(yīng)在更換新尿管時留取尿標(biāo)本。 第二十七張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項 嚴(yán)格進行無菌操作，因為尿液標(biāo)本的采集和培養(yǎng)中最大的問題是污染雜菌 通常應(yīng)取晨起第一次尿液送檢 多數(shù)藥物均通過尿液排泄，因此采集尿液應(yīng)在用藥前進行 第二

12、十八張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月三、糞便標(biāo)本的采集 第二十九張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月糞便標(biāo)本的送檢指征1 急性腹瀉：大便次數(shù)明顯增多，腹痛，里急后重，往往伴有發(fā)熱，大便性狀為粘液便或膿血便。2 慢性腹瀉：大便次數(shù)多，多為稀便，伴有全身乏力等癥狀。3 無痛性大量水樣便或米泔樣稀便。4 先吐后瀉：惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。有集體發(fā)病史，多為細(xì)菌性食物中毒所致。5 抗生素治療后腹瀉：常發(fā)生于長期抗生素治療后，糊狀便，排便次數(shù)增加。6 高熱驚厥：通常為中毒性痢疾，多見于嬰幼兒和小兒。第三十張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月糞便標(biāo)本的采集容器 一次性無菌便盒 第三十

13、一張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月糞便標(biāo)本采集時間1采樣原則 腹瀉病人應(yīng)在急性期采集（3天以內(nèi)），以提高檢出率，亦最好在用藥之前。2沙門菌感染 腸熱癥在2周以后；胃腸炎病人在急性期，早期采集新鮮糞便 第三十二張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月糞便標(biāo)本采集方法 自然排便采集法 自然排便后，挑取其膿血、粘液部分2-3g，液狀糞便取絮狀物2-3ml，盛于滅菌容器內(nèi)或保存液中送檢 直腸拭子方法 如不易獲得糞便時，或排泄困難的患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭子用生理鹽水濕潤后，插入肛門內(nèi)4-5cm（幼兒2-3cm）輕輕轉(zhuǎn)動取出，插入無菌試管內(nèi)送檢。第三十三張，PPT共六十四頁

14、，創(chuàng)作于2022年6月注意事項 雖糞便含有多種雜菌，但應(yīng)盡量采用無菌容器（一次性無菌平皿）。 為提高檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)，且應(yīng)挑取其膿血、粘液部分。 第三十四張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月四、痰及上呼吸道標(biāo)本的采集 第三十五張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月痰標(biāo)本送檢指征1 咳嗽、咳痰：痰液可為膿性、血性、鐵銹色或紅棕色膠胨樣痰。 2 咯血：肺結(jié)核病人常痰中帶血。 3 呼吸困難4 發(fā)熱5 胸痛：當(dāng)炎癥病變累及壁層胸膜時，會發(fā)生胸痛。*肺部感染的患者有2550可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時作血培養(yǎng)。 第三十六張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月上呼吸道標(biāo)本送檢指征1病毒

15、性普通感冒伴有明顯咽痛時，懷疑為咽部鏈球菌感染，應(yīng)做細(xì)菌培養(yǎng)。2細(xì)菌性咽扁桃體炎：明顯咽痛、畏寒、發(fā)熱，體溫可達39以上。3 上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管支氣管炎，需送相應(yīng)部位分泌物或痰液進行細(xì)菌培養(yǎng)。第三十七張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月痰標(biāo)本和上呼吸道標(biāo)本采集容器一次性無菌留痰盒 咽拭子或鼻咽拭子 第三十八張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月痰及上呼吸道標(biāo)本 采集時間痰：一般以晨痰為好；支氣管擴張癥患者，清晨起床后進行體位引流，可采集大量痰標(biāo)本。咽拭標(biāo)本：時間上雖無嚴(yán)格限制，但應(yīng)于抗菌藥物治療前為好。咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集為宜 第三十九張，

16、PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月痰標(biāo)本采集方法： 自然咳痰法：患者清晨起床后，先用漱口水漱口，再以開水或生理鹽水漱口，以減少口腔常居菌群的污染，然后用力自氣管深部咳出第一口痰于無菌痰懷內(nèi)送檢 小兒取痰法：用壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，送檢 第四十張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月上呼吸道標(biāo)本（咽拭子）采集方法： 采集上呼吸道標(biāo)本通常采用無菌棉拭子。采集前患者應(yīng)用開水或生理鹽水反復(fù)漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，將棉拭子通過舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)，涂抹數(shù)次，但拭子要避免接觸口腔和舌粘膜 第四十一張，PP

17、T共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項1 采集標(biāo)本以清晨為佳，以減少口腔正常菌群的污染，采集前先用漱口液充分漱口。2 做結(jié)核分枝桿菌和真菌培養(yǎng)的標(biāo)本若不能及時送檢，應(yīng)放4冰箱保存，以免雜菌生長。3 作結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取24小時痰液，以提高陽性檢出率。第四十二張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月五、穿刺液標(biāo)本第四十三張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月穿刺液標(biāo)本 采集時間：當(dāng)懷疑感染存在，應(yīng)盡早采集標(biāo)本，一般在患者使用抗菌藥物之前或停止用藥后1-2日采集 采集容器：無菌容器 采集方法：采用無菌方法用注射器抽取體內(nèi)可疑感染部位的液體，注入無菌試管立即送檢 第四十四張，

18、PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項： 如果用于檢測細(xì)菌，收集腦脊液后，最好能在常溫下15-30分鐘內(nèi)接種培養(yǎng)皿。腦脊液標(biāo)本不可置冰箱保存，否則會使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟菌（能產(chǎn)生自溶素迅速自溶）、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌 。第四十五張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項：如果只采集了一管腦脊液，應(yīng)先送細(xì)菌室做細(xì)菌培養(yǎng)，再做腦脊液生化、常規(guī)等檢查穿刺時應(yīng)嚴(yán)格無菌操作 作腦脊液培養(yǎng)時，建議同時作血培養(yǎng) 第四十六張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項：為了防止穿刺液的凝固，最好在無菌試管中預(yù)先加入滅菌肝素，再注入穿刺液 盡可能采集更多的液體，至少1ml第四十七張

19、，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月六、膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本 第四十八張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本采集開放性膿腫和膿性分泌物 先以無菌鹽水沖洗潰瘍表面，用2支無菌棉拭子拭取潰瘍深處的分泌物后插入無菌試管送檢。一支為涂片檢查用，另一支作培養(yǎng)用 大面積燒傷的創(chuàng)面分泌物 用無菌棉拭子取多部位創(chuàng)面的膿液或分泌物，置無菌試管內(nèi)送檢 封閉性膿腫 消毒局部皮膚或粘膜表面后，用注射器抽取，將膿液注入無菌試管內(nèi)送檢 第四十九張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項： 不能立即送檢的標(biāo)本，應(yīng)放4保存；培養(yǎng)淋球菌、腦膜炎奈瑟菌的標(biāo)本除外 用藥前采集標(biāo)本，嚴(yán)格無

20、菌采樣 第五十張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月七、生殖道標(biāo)本第五十一張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月生殖道標(biāo)本檢驗生殖道標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、結(jié)核菌培養(yǎng)；解脲支原體、沙眼衣原體、淋菌的培養(yǎng)；淋菌涂片；細(xì)菌性陰道病相關(guān)檢測、真菌涂片 第五十二張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月生殖道標(biāo)本送檢指征1 皮膚黏膜損害：原發(fā)損害可有斑疹、丘疹、結(jié)節(jié)、水皰、囊腫、糜爛、潰瘍等。繼發(fā)損害由原發(fā)損害演變而來，有萎縮或斑痕等，患者可出現(xiàn)疼痛或瘙癢癥狀。2 全身癥狀：多數(shù)無全身癥狀。偶有發(fā)熱、乏力、食欲不振等。3 男性生殖系統(tǒng)表現(xiàn) 4 女性生殖系統(tǒng)表現(xiàn)5 疑為下列疾病時需送檢標(biāo)本：前

21、庭大腺膿腫、外陰陰道念珠菌病、細(xì)菌性陰道病、急性子宮頸炎、急性盆腔炎、急性尿道炎、急性膀胱炎、羊膜腔感染、產(chǎn)褥期感染。第五十三張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月生殖道標(biāo)本采集容器無菌試管、男性拭子、女性拭子 第五十四張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月生殖道標(biāo)本采集方法1 尿道分泌物 男性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，采取從尿道口溢出的膿性分泌物或用無菌男性拭子插入尿道內(nèi)24厘米取出分泌物。如無膿液溢出，可從陰莖的腹面向龜頭方向按摩，促使分泌物溢出。 女性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，然后從陰道內(nèi)診壓迫尿道，或從尿道的后面向前按摩，使分泌物溢出。無肉眼可見的膿液，可用滅菌拭子輕輕深入前尿道內(nèi)，旋轉(zhuǎn)拭子，采集標(biāo)本。 第五十五張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月生殖道標(biāo)本采集方法2 巴氏腺、尿道旁腺：清洗或局部消毒，然后壓迫腺體，使分泌物溢出。3 陰道分泌物：用窺器擴張陰道，用滅菌女性拭子采取陰道口內(nèi)4厘米內(nèi)側(cè)壁或后穹隆處分泌物培養(yǎng)或涂片鏡檢。4 宮頸分泌物：用窺器擴張陰道，先用無菌棉球擦取宮頸口分泌物；用女性拭子插入宮頸管2厘米采取分泌物，轉(zhuǎn)動并停留1020秒鐘，讓拭子充分吸附分泌物，或用去針頭的注射器吸取分泌物，置入滅菌試管內(nèi)送檢 。第五十六張，PPT共六十四頁，創(chuàng)作于2022年6月生殖道標(biāo)本采集方法5 宮頸內(nèi)容物：羊膜腔感