藥物含量測(cè)定方法與驗(yàn)證PPT課件

1、藥物的含量測(cè)定方法與驗(yàn)證 藥物的含量 含量測(cè)定 效價(jià)測(cè)定 藥物含量測(cè)定方法 容量分析法 光譜分析法 色譜分析法第1頁(yè)/共37頁(yè)藥物的含量測(cè)定方法與驗(yàn)證 方法選擇中的供試品因素 化學(xué)原料藥的含量測(cè)定首選容量分析法 藥物制劑的含量測(cè)定首選色譜分析法 藥物制劑的定量檢查首選光譜分析法 含量測(cè)定方法須準(zhǔn)確、穩(wěn)定、耐用第2頁(yè)/共37頁(yè)第一節(jié) 定量分析方法的分類(lèi)與特點(diǎn)第3頁(yè)/共37頁(yè)一、容量分析法（滴定法） 基本術(shù)語(yǔ) 滴定：將滴定劑通過(guò)滴管滴入待測(cè)溶液中的過(guò)程 滴定劑：濃度準(zhǔn)確已知的試樣溶液 指示劑：滴定分析中能發(fā)生顏色改變而指示終點(diǎn)的試劑 滴定終點(diǎn)：滴定分析中指示劑發(fā)生顏色改變的那一點(diǎn)（實(shí)際） 化學(xué)計(jì)量

2、點(diǎn)：滴定劑與待測(cè)溶液按化學(xué)計(jì)量關(guān)系反應(yīng)完全的那一點(diǎn)（理論） 滴定誤差：滴定終點(diǎn)與化學(xué)計(jì)量點(diǎn)不一致產(chǎn)生的誤差第4頁(yè)/共37頁(yè)一、容量分析法（滴定法） 特點(diǎn) 方法簡(jiǎn)便易行 方法耐用性高 測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確 方法專(zhuān)屬性差 適用范圍：較多用于化學(xué)原料藥物的含量測(cè)定第5頁(yè)/共37頁(yè)一、容量分析法（滴定法） 有關(guān)計(jì)算 滴定度：每1ml某摩爾濃度的滴定液所相當(dāng)?shù)谋粶y(cè)藥物的重量。中國(guó)藥典用mg表示。 滴定度的計(jì)算MabmmlmgT)/(第6頁(yè)/共37頁(yè)一、容量分析法（滴定法） 有關(guān)計(jì)算 含量的計(jì)算 直接滴定法 所配制滴定液濃度與規(guī)定濃度不一致時(shí)：%100%WTV含量FTT規(guī)定摩爾濃度實(shí)際摩爾濃度F%100%100%

3、WFTVWTV含量第7頁(yè)/共37頁(yè)一、容量分析法（滴定法） 有關(guān)計(jì)算 含量的計(jì)算 間接滴定法：生成物滴定法 簡(jiǎn)接滴定法：剩余量滴定法%100)V%AWTFVFABBA（含量%100)VV%SB0BWTFAB（含量第8頁(yè)/共37頁(yè)二、光譜分析法 紫外-可見(jiàn)分光光度法（200400760nm） 朗伯-比耳定律 A為吸收度，l為液層厚度，c為溶液濃度，E為吸收系數(shù)。 E：?jiǎn)挝灰簩雍穸葧r(shí)的吸收度。有兩種表示法 摩爾吸收系數(shù)：在一定波長(zhǎng)下，溶液濃度為1mol/L，厚度為1cm時(shí)的吸收度。用表示。 百分吸收系數(shù)：在一定波長(zhǎng)下，溶液濃度為1%（W/V），厚度為1cm時(shí)的吸收度。用 表示。EclA%11cmE

4、第9頁(yè)/共37頁(yè)二、光譜分析法 紫外-可見(jiàn)分光光度法 特點(diǎn)與適用范圍 簡(jiǎn)便易行 靈敏度高，可達(dá)10-4g/ml10-7g/ml。 準(zhǔn)確度較高，相對(duì)誤差為2%5%。 專(zhuān)屬性較差 較少應(yīng)用于原料藥含量測(cè)定，多用于制劑的定量檢查。第10頁(yè)/共37頁(yè)二、光譜分析法 紫外-可見(jiàn)分光光度法 儀器校正與檢定 波長(zhǎng)：常用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線校正，或用鈥玻璃的尖銳吸收峰。 吸光度的準(zhǔn)確度：與規(guī)定的吸收系數(shù)比較。 雜散光的檢查 對(duì)溶劑的要求：截止波長(zhǎng) 測(cè)定法：波長(zhǎng)掃描與吸光度讀數(shù)第11頁(yè)/共37頁(yè)二、光譜分析法 紫外-可見(jiàn)分光光度法 含量測(cè)定方法 對(duì)照品比較法 吸收系數(shù)法 計(jì)算分光光

5、度法 比色法rrxxCAAC100%WDCx含量D為稀釋倍數(shù)。為稀釋倍數(shù)。%100)()E%11%11rcmxcmE（含量第12頁(yè)/共37頁(yè)二、光譜分析法 熒光分析法 特點(diǎn)與適用范圍 靈敏度高，可達(dá)10-10g/ml10-12g/ml. 濃度太大會(huì)有“自熄滅”作用，故適用于低濃度的溶液。 干擾因素多，須做空白試驗(yàn)。 取樣少，方法快速。衍生化試劑提高了適用范圍第13頁(yè)/共37頁(yè)二、光譜分析法 熒光分析法 干擾的排除 溶劑：進(jìn)一步純化溶劑，空白試驗(yàn) 溶液：適當(dāng)?shù)臐舛?，減少雜質(zhì)，降低溶氧，調(diào)節(jié)pH 玻璃量器：高潔凈度 溫度：穩(wěn)定的溫度第14頁(yè)/共37頁(yè)二、光譜分析法 熒光分析法 含量測(cè)定 相對(duì)定量方

6、法測(cè)定 線性范圍較窄rrbribiiCRRRRC式中：Ci為供試品溶液的濃度，Cr為對(duì)照品溶液的濃度，Ri為供試品溶液的讀數(shù)，Rib為供試品溶液試劑空白的讀數(shù)，Rr為對(duì)照品溶液的讀數(shù)，Rrb為對(duì)照品溶液試劑空白的讀數(shù)。第15頁(yè)/共37頁(yè)三、色譜分析法 特點(diǎn)與適用范圍 高靈敏度 高專(zhuān)屬性 高效能與高速度 適用于藥物制劑，尤其復(fù)方制劑的含量測(cè)定。 分類(lèi) 依據(jù)分離原理：吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、分子排阻色潽等 依據(jù)分離方式：紙色譜法，薄層色譜法，柱色譜法，氣相色譜法，高效液相色譜法等第16頁(yè)/共37頁(yè)三、色譜分析法 高效液相色譜法 藥品標(biāo)準(zhǔn)對(duì)HPLC方法改變的要求 對(duì)儀器的一般要求 色譜柱：

7、填料，孔徑與粒徑，柱直徑，溫度，pH等 檢測(cè)器：通用型檢測(cè)器與選擇性檢測(cè)器，對(duì)流動(dòng)相的要求 流動(dòng)相：反相系統(tǒng)與正相系統(tǒng)第17頁(yè)/共37頁(yè)三、色譜分析法 高效液相色譜法 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 色譜柱的理論塔板數(shù) 色譜峰的分離度 色譜系統(tǒng)的重復(fù)性：RSD2.0% 色譜峰的拖尾因子22/1)/(54. 5WtnR2121)(2WWttRRR105. 02dWThd1為極大峰至峰前沿之間的距離。T應(yīng)在0.951.05之間。第18頁(yè)/共37頁(yè)三、色譜分析法 高效液相色譜法 測(cè)定法 外標(biāo)法：一點(diǎn)法；兩點(diǎn)法；工作曲線法 內(nèi)標(biāo)法第19頁(yè)/共37頁(yè)三、色譜分析法 氣相色譜法 檢測(cè)器、固定液及特殊指定的色譜柱材料不能更

8、換 對(duì)儀器的一般要求 載氣 色譜柱填料，柱管材質(zhì)，固定液 檢測(cè)器種類(lèi)，使用溫度 進(jìn)樣方式 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 測(cè)定法：多采用內(nèi)標(biāo)法第20頁(yè)/共37頁(yè)第二節(jié) 樣品分析的前處理方法第21頁(yè)/共37頁(yè)樣品分析的前處理方法 在分析含金屬或鹵素、氮、硫、磷等元素的有機(jī)藥物前，需進(jìn)行適當(dāng)?shù)乃幤非疤幚怼?分類(lèi) 不經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法 經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法第22頁(yè)/共37頁(yè)樣品分析的前處理方法 不經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法 直接測(cè)定法含金屬或C-M不牢固的有機(jī)金屬藥物 配位滴定法 氧化還原滴定法 經(jīng)水解后測(cè)定法鹵素聯(lián)脂肪碳鏈（溶于適當(dāng)溶劑再水解） 堿水解后測(cè)定法 酸水解后測(cè)定法 經(jīng)氧化還原后測(cè)定法鹵素聯(lián)芳環(huán)牢固（

9、一般用于測(cè)碘） 第23頁(yè)/共37頁(yè)樣品分析的前處理方法 經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法 濕法破壞 硫酸-硫酸鹽法凱氏定氮法 硝酸-高氯酸法 硝酸-硫酸法 其它濕法 干法破壞 高溫?zé)胱品?氧瓶燃燒分解后測(cè)定法第24頁(yè)/共37頁(yè)經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法 硫酸-硫酸鹽法凱氏定氮法 將含氮藥物與硫酸在凱氏定氮燒瓶中共熱，藥物分子中有機(jī)結(jié)構(gòu)被氧化分解（亦稱(chēng)“消解”或“消化”）成二氧化碳和水，有機(jī)結(jié)合的氮?jiǎng)t轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)機(jī)氮，并與過(guò)量的硫酸結(jié)合為硫酸氫銨及硫酸銨，經(jīng)氫氧化鈉堿化后釋放出氮?dú)?，并隨水蒸氣餾出，用硼酸溶液或定量的酸滴定液吸收后，再用酸或堿滴定液滴定。 高溫?zé)胱品?將含待測(cè)元素的有機(jī)藥物經(jīng)高溫灼燒灰化，使有機(jī)結(jié)

10、構(gòu)分解而待測(cè)元素轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)元素或可溶性無(wú)機(jī)鹽，以供分析。根據(jù)分析對(duì)象與目的不同，常加無(wú)水碳酸鈣、硝酸鎂、氫氧化鈣、氧化鋅等輔助灰化。 氧瓶燃燒法第25頁(yè)/共37頁(yè)第三節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證第26頁(yè)/共37頁(yè)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證 方法驗(yàn)證的目的 需驗(yàn)證的分析項(xiàng)目：鑒別試驗(yàn)；雜質(zhì)定量或限度檢查；含量測(cè)定等 驗(yàn)證內(nèi)容：準(zhǔn)確度；精密度；專(zhuān)屬性；檢測(cè)限/定量限；線性及范圍；耐用性等第27頁(yè)/共37頁(yè)一、準(zhǔn)確度 含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度 原料藥的含量測(cè)定 制劑的含量測(cè)定 雜質(zhì)定量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度 使用雜質(zhì)對(duì)照品 缺少雜質(zhì)對(duì)照品 數(shù)據(jù)要求第28頁(yè)/共37頁(yè)二、精密度 標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（R

11、SD） 驗(yàn)證內(nèi)容 重復(fù)性 中間精密度 重現(xiàn)性 數(shù)據(jù)要求第29頁(yè)/共37頁(yè)三、專(zhuān)屬性 鑒別反應(yīng) 含量測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定 陰性對(duì)照 陽(yáng)性對(duì)照 純度測(cè)試第30頁(yè)/共37頁(yè)四、檢測(cè)限/定量限 檢測(cè)限常用方法 目視法：非儀器法 信噪比法：色譜法 標(biāo)準(zhǔn)偏差法：光譜法 定量限：信噪比要求不同 數(shù)據(jù)要求第31頁(yè)/共37頁(yè)五、線性及范圍 線性 回歸方程 相關(guān)系數(shù) 范圍 原料藥和制劑含量測(cè)定 制劑含量均勻度檢查 溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定 特殊元素含量測(cè)定 雜質(zhì)測(cè)定第32頁(yè)/共37頁(yè)六、耐用性 耐用性 典型的變動(dòng)因素 被測(cè)溶液 環(huán)境因素 液相色譜法中典型因素 氣相色譜法中典型因素第33頁(yè)/共37頁(yè)七、驗(yàn)證內(nèi)容的選擇 非定量分析方法 定量分析方法 微量定量分析方法第34頁(yè)/共37頁(yè)七、驗(yàn)證內(nèi)容的選擇項(xiàng)目?jī)?nèi)容項(xiàng)目?jī)?nèi)容鑒別鑒別元素或雜質(zhì)檢查元素或雜質(zhì)檢查含量測(cè)定及含量測(cè)定及溶出量測(cè)定溶出量測(cè)定定量定量限度限度準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度精密度精密度 重復(fù)性重復(fù)性中間精密度中間精密度 專(zhuān)屬性專(zhuān)屬性檢測(cè)限檢測(cè)限 定量限定量限線性線性范