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收集適量細(xì)胞,加1ml Trizol用移液槍反復(fù)吹吸,直至裂解液中無明顯沉淀向裂解液中加200 l氯仿4, 12000g 離心15min吸取上清液400450 l 至另一新離心管中(切忌吸出白色中間層)向上清中加入等體積等體積異丙醇混勻4, 12000g 離心10min緩慢沿離心管壁加入1ml 75%乙醇4, 12000g 離心5min小心盡量棄去乙醇加入10l DEPC水溶解沉淀, -80保存?zhèn)溆檬覝仂o置3min蓋緊離心管蓋,用手振蕩15s室溫靜置3min上下顛倒離心管充分混勻室溫靜置5min小心棄去上清室溫干燥沉淀室溫干燥沉淀2min(1 1)(2 2)(3 3)(4 4)(5 5)(6 6)(7 7)(8 8)(9 9)洗滌離心管壁輕輕上下顛倒 dsDNA(雙鏈DNA)1OD260 = 50ug/mlssDNA(單鏈DNA)1OD260 = 33ug/mlRNA1OD260 = 40ug/ml 如配好的反應(yīng)液較多沾到管壁上,可將如配好的反應(yīng)液較多沾到管壁上,可將PCRPCR反應(yīng)管置臺(tái)式離心機(jī)中瞬時(shí)離心,使反應(yīng)管置臺(tái)式離心機(jī)中瞬時(shí)離心,使反應(yīng)液集中于管底,反應(yīng)液集中于管底,將反應(yīng)管放到基因擴(kuò)增儀將反
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