地貧診斷相關(guān)知識(shí)與產(chǎn)前診斷

1、l地貧的血液學(xué)表型篩查地貧的血液學(xué)表型篩查l地貧的分子診斷地貧的分子診斷l(xiāng)從家系分析進(jìn)行篩查或排除地貧從家系分析進(jìn)行篩查或排除地貧遺傳咨詢遺傳咨詢 雙方的兩項(xiàng)指標(biāo)雙方的兩項(xiàng)指標(biāo)均同時(shí)正常均同時(shí)正常產(chǎn)檢對(duì)象（孕婦及其配偶）產(chǎn)檢對(duì)象（孕婦及其配偶）地貧分子診斷地貧分子診斷 知情同意選擇知情同意選擇 胎兒產(chǎn)前基因診斷胎兒產(chǎn)前基因診斷血液五分類分析（檢測(cè)血液五分類分析（檢測(cè)MCV和和MCH等等RBC指標(biāo)）指標(biāo)）雙方的兩項(xiàng)指標(biāo)雙方的兩項(xiàng)指標(biāo)均同時(shí)降低均同時(shí)降低一方正常，另一方一方正常，另一方的兩項(xiàng)指標(biāo)的兩項(xiàng)指標(biāo)降低降低地貧全套檢查地貧全套檢查異常的一方做地貧全套檢查異常的一方做地貧全套檢查-地貧特征地貧

2、特征-地貧特征地貧特征ID雙方均為雙方均為-地貧特征地貧特征一方為一方為-地貧特征，另一地貧特征，另一方為方為ID或或-地貧特征地貧特征+-單純性單純性ID或單或單純性純性-地貧地貧雙方均為雙方均為-地貧特征地貧特征ID或或-地貧特征的一方地貧特征的一方做做地貧分子診斷地貧分子診斷 夫婦雙方基因診斷夫婦雙方基因診斷血血R正常的正常的一方做一方做地地貧分子診斷貧分子診斷 -單純性單純性ID或單或單純性純性-地貧地貧-+1、地貧高發(fā)區(qū)內(nèi)夫妻雙方盡早作地貧篩查；、地貧高發(fā)區(qū)內(nèi)夫妻雙方盡早作地貧篩查；2、因地制宜選用合適的方法、儀器；、因地制宜選用合適的方法、儀器；3、科學(xué)合理的篩查流程以減少假陰性的

3、發(fā)生；、科學(xué)合理的篩查流程以減少假陰性的發(fā)生；4、血液學(xué)表型結(jié)合分子診斷，必要時(shí)進(jìn)行家系、血液學(xué)表型結(jié)合分子診斷，必要時(shí)進(jìn)行家系 分析，綜合各種檢查結(jié)果才能得出結(jié)論；分析，綜合各種檢查結(jié)果才能得出結(jié)論；5、表型與基因診斷結(jié)果有不符之處時(shí)，要慎之、表型與基因診斷結(jié)果有不符之處時(shí)，要慎之 又慎，需用其它分子診斷方法進(jìn)一步分析。又慎，需用其它分子診斷方法進(jìn)一步分析。 1、育齡夫妻盡可能早篩查，在婚前檢查時(shí)、育齡夫妻盡可能早篩查，在婚前檢查時(shí)最好或孕早期，因孕婦缺鐵的比例較低，有利于最好或孕早期，因孕婦缺鐵的比例較低，有利于紅細(xì)胞指數(shù)的應(yīng)用和排除缺鐵性貧血對(duì)地貧篩查紅細(xì)胞指數(shù)的應(yīng)用和排除缺鐵性貧血對(duì)地

4、貧篩查結(jié)果的判斷。結(jié)果的判斷。 2、有足夠的時(shí)間完成特殊病例或未知突變的、有足夠的時(shí)間完成特殊病例或未知突變的分子診斷。分子診斷。 3、有利于合理安排時(shí)間進(jìn)行產(chǎn)前診斷，如果、有利于合理安排時(shí)間進(jìn)行產(chǎn)前診斷，如果有條件可早期絨毛取樣進(jìn)行產(chǎn)前診斷，在孕中期有條件可早期絨毛取樣進(jìn)行產(chǎn)前診斷，在孕中期可采集羊水標(biāo)本，孕晚期用臍帶血標(biāo)本比較合可采集羊水標(biāo)本，孕晚期用臍帶血標(biāo)本比較合適。適。 1、因地制宜，選用靈敏、準(zhǔn)確的篩、因地制宜，選用靈敏、準(zhǔn)確的篩 查和查和分子診斷的方法；分子診斷的方法； 2、在具有決定意義的項(xiàng)目上要特別重視紅、在具有決定意義的項(xiàng)目上要特別重視紅細(xì)胞指數(shù)測(cè)定、細(xì)胞指數(shù)測(cè)定、HbA2

5、定量定量 和鐵代謝狀態(tài)的分和鐵代謝狀態(tài)的分析）。析）。 1、需要具備相關(guān)資歷及有關(guān)知識(shí)，最好有、需要具備相關(guān)資歷及有關(guān)知識(shí)，最好有高水平的人員把關(guān)，保證篩查結(jié)果的可靠性；高水平的人員把關(guān)，保證篩查結(jié)果的可靠性； 2、PCR上崗證；上崗證； 3、參加省衛(wèi)生廳組織的生化免疫遺傳和分、參加省衛(wèi)生廳組織的生化免疫遺傳和分子遺傳統(tǒng)一考試。子遺傳統(tǒng)一考試。地貧篩查的結(jié)論必須多項(xiàng)目綜合考慮：地貧篩查的結(jié)論必須多項(xiàng)目綜合考慮：1、是否有小細(xì)胞癥？、是否有小細(xì)胞癥？2、是否有鐵代謝異常？、是否有鐵代謝異常？3、Hb電泳是否有異常帶？電泳是否有異常帶？4、抗堿、抗堿Hb是否高？是否高？5、HbA2是否增高？是否增

6、高？6、有無(wú)可能為靜止型地貧？、有無(wú)可能為靜止型地貧？ 1、紅細(xì)胞指數(shù)的降低提示地貧的高風(fēng)險(xiǎn)性，、紅細(xì)胞指數(shù)的降低提示地貧的高風(fēng)險(xiǎn)性，但紅細(xì)胞指數(shù)正常并不能說(shuō)沒(méi)有地貧風(fēng)險(xiǎn)；但紅細(xì)胞指數(shù)正常并不能說(shuō)沒(méi)有地貧風(fēng)險(xiǎn)； 2、對(duì)于處于臨界值（如、對(duì)于處于臨界值（如78flMCV85fl）的）的結(jié)果，必須慎重考慮并做進(jìn)一步的檢查；結(jié)果，必須慎重考慮并做進(jìn)一步的檢查； 3、生理變異與病理性因素應(yīng)考慮在內(nèi)；、生理變異與病理性因素應(yīng)考慮在內(nèi)； 4、MCH比比MCV更為可靠；更為可靠；RDW-CV意義不可意義不可小視；小視； 5、血細(xì)胞分析必須有嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系、血細(xì)胞分析必須有嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系 1、此方法僅

7、適用于無(wú)血細(xì)胞分析儀的基、此方法僅適用于無(wú)血細(xì)胞分析儀的基層單位，當(dāng)然增加項(xiàng)目創(chuàng)收也可以，但不宜層單位，當(dāng)然增加項(xiàng)目創(chuàng)收也可以，但不宜單獨(dú)使用（案例見后）單獨(dú)使用（案例見后） 2、此方法不適用于孕產(chǎn)婦和嬰幼兒的地、此方法不適用于孕產(chǎn)婦和嬰幼兒的地貧篩查；貧篩查； 3、使用該指標(biāo)時(shí)必須排除其它紅細(xì)胞膜、使用該指標(biāo)時(shí)必須排除其它紅細(xì)胞膜的病變。的病變。 1、用于地貧篩查表型陽(yáng)性的明確診斷、用于地貧篩查表型陽(yáng)性的明確診斷; 2、排除地貧表型不明顯者的常見突變、排除地貧表型不明顯者的常見突變; 3、用于靜止型地貧的分子診斷、用于靜止型地貧的分子診斷; 4、排除、排除ID合并合并地貧；地貧； 5、用于胎

8、兒出生前的診斷（產(chǎn)前診斷）、用于胎兒出生前的診斷（產(chǎn)前診斷）; 注意：注意： 1、分子診斷結(jié)果一定要與地貧篩查結(jié)果綜合考慮；、分子診斷結(jié)果一定要與地貧篩查結(jié)果綜合考慮； 2、單獨(dú)使用時(shí)一定要將所有可能的情況均考慮在內(nèi)，、單獨(dú)使用時(shí)一定要將所有可能的情況均考慮在內(nèi)，即使這樣也有可能漏診。即使這樣也有可能漏診。 l情形一：雙方同為情形一：雙方同為或或地貧表型陽(yáng)性地貧表型陽(yáng)性l處理處理：雙方均進(jìn)行：雙方均進(jìn)行或或地貧基因診斷。地貧基因診斷。l結(jié)果結(jié)果：如果分子診斷確定雙方均為同類型的：如果分子診斷確定雙方均為同類型的地貧，建議去產(chǎn)前診斷中心登記，擇機(jī)進(jìn)行地貧，建議去產(chǎn)前診斷中心登記，擇機(jī)進(jìn)行產(chǎn)前診斷

9、；如果一方確定突變，另一方表型產(chǎn)前診斷；如果一方確定突變，另一方表型陽(yáng)性但未檢測(cè)出突變，抓緊時(shí)間鑒定未知突陽(yáng)性但未檢測(cè)出突變，抓緊時(shí)間鑒定未知突變。變。 l情形二情形二 ：一方為：一方為地貧表型陽(yáng)性，另一方為地貧表型陽(yáng)性，另一方為-地貧表型陽(yáng)性時(shí)地貧表型陽(yáng)性時(shí) 。l處理處理：雙方均作：雙方均作地貧基因診斷或者將地貧基因診斷或者將-地地貧表型陽(yáng)性者標(biāo)本送有條件實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。貧表型陽(yáng)性者標(biāo)本送有條件實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。l結(jié)果結(jié)果：確定基因型后，建議去產(chǎn)前診斷中心：確定基因型后，建議去產(chǎn)前診斷中心登記擇機(jī)檢查并提前通知實(shí)驗(yàn)室。登記擇機(jī)檢查并提前通知實(shí)驗(yàn)室。l情形三：情形三：一方為一方為-地貧表型陽(yáng)性，另一方為

10、地貧表型陽(yáng)性，另一方為表型正常。表型正常。 l處理處理：表型正常的一方須做：表型正常的一方須做-地貧基因診斷。地貧基因診斷。l結(jié)果結(jié)果：表型正常者未檢出突變，進(jìn)行產(chǎn)前咨詢：表型正常者未檢出突變，進(jìn)行產(chǎn)前咨詢后轉(zhuǎn)為常規(guī)產(chǎn)檢；表型正常者檢出靜止型突變，后轉(zhuǎn)為常規(guī)產(chǎn)檢；表型正常者檢出靜止型突變，接受接受HbHHbH病的產(chǎn)前咨詢，按知情同意選擇原則病的產(chǎn)前咨詢，按知情同意選擇原則進(jìn)行產(chǎn)前診斷。進(jìn)行產(chǎn)前診斷。l情形四：一方為情形四：一方為-地貧表型陽(yáng)性，另一方為地貧表型陽(yáng)性，另一方為-地貧表型陽(yáng)性時(shí)。地貧表型陽(yáng)性時(shí)。l處理處理：-地貧表型陽(yáng)性的一方須做地貧表型陽(yáng)性的一方須做-地貧基因地貧基因診斷診斷 。

11、l結(jié)果結(jié)果：如果：如果-地貧表型陽(yáng)性合并地貧表型陽(yáng)性合并-地貧，按同地貧，按同為為-地貧處理；如果地貧處理；如果-地貧表型陽(yáng)性未合并地貧表型陽(yáng)性未合并-地貧，產(chǎn)前咨詢后轉(zhuǎn)入常規(guī)產(chǎn)檢。地貧，產(chǎn)前咨詢后轉(zhuǎn)入常規(guī)產(chǎn)檢。l情形五：一方為缺鐵（多為孕婦），另一方情形五：一方為缺鐵（多為孕婦），另一方情況不明。情況不明。 l處理處理：缺鐵的一方必須做：缺鐵的一方必須做-地貧基因診斷。地貧基因診斷。 l結(jié)果結(jié)果：如果：如果ID合并合并-地貧，對(duì)方也必須做地貧，對(duì)方也必須做-地貧基因診斷；如果地貧基因診斷；如果ID未合并未合并-地貧，對(duì)方地貧，對(duì)方可不做可不做-地貧基因診斷，產(chǎn)前咨詢后轉(zhuǎn)入常地貧基因診斷，產(chǎn)前

12、咨詢后轉(zhuǎn)入常規(guī)產(chǎn)檢。規(guī)產(chǎn)檢。l情形六情形六 ：一方為：一方為HbH病，不管另一方病，不管另一方MCV和和MCH正常與否正常與否 。l處理處理：非：非HbH病的一方必須進(jìn)一步做病的一方必須進(jìn)一步做-地貧地貧基因基因 。l結(jié)果結(jié)果：如非：如非HbH病的一方排除病的一方排除-地貧突變，地貧突變，產(chǎn)前咨詢后轉(zhuǎn)入常規(guī)產(chǎn)檢；如非產(chǎn)前咨詢后轉(zhuǎn)入常規(guī)產(chǎn)檢；如非HbH病的一病的一方為方為-地貧，必須進(jìn)行產(chǎn)前診斷。地貧，必須進(jìn)行產(chǎn)前診斷。l情形七情形七 ：一方為：一方為-地貧表型陽(yáng)性合并異常血地貧表型陽(yáng)性合并異常血紅蛋白病，但另一方紅蛋白病，但另一方-地貧表型陽(yáng)性又未檢地貧表型陽(yáng)性又未檢測(cè)出已知突變。測(cè)出已知突變

13、。l處理處理：抓緊時(shí)間檢測(cè)未知突變，建議產(chǎn)前診：抓緊時(shí)間檢測(cè)未知突變，建議產(chǎn)前診斷中心抽臍帶血做產(chǎn)前診斷。斷中心抽臍帶血做產(chǎn)前診斷。l結(jié)果結(jié)果：分子診斷結(jié)合臍帶血電泳的結(jié)果進(jìn)行：分子診斷結(jié)合臍帶血電泳的結(jié)果進(jìn)行產(chǎn)前診斷。產(chǎn)前診斷。地中海貧血的產(chǎn)前診斷l(xiāng)地貧的產(chǎn)前診斷（胎兒出生前的診地貧的產(chǎn)前診斷（胎兒出生前的診斷）是最后一道關(guān)卡，是決定是否斷）是最后一道關(guān)卡，是決定是否淘汰胎兒的決定性依據(jù)，需要特別淘汰胎兒的決定性依據(jù)，需要特別謹(jǐn)慎處理，無(wú)論多么小心都不為過(guò)，謹(jǐn)慎處理，無(wú)論多么小心都不為過(guò)，否則一不小心就會(huì)帶來(lái)滅頂之災(zāi)！否則一不小心就會(huì)帶來(lái)滅頂之災(zāi)！1、實(shí)驗(yàn)室要嚴(yán)格按臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的要求、

14、實(shí)驗(yàn)室要嚴(yán)格按臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的要求從事分子診斷；從事分子診斷；2、必須簽訂知情同意書，需要列明該檢測(cè)涵蓋、必須簽訂知情同意書，需要列明該檢測(cè)涵蓋的突變范圍，未檢測(cè)的突變占地貧中的比例；的突變范圍，未檢測(cè)的突變占地貧中的比例；3、獨(dú)立的兩次平行測(cè)定是保證結(jié)果準(zhǔn)確的必要、獨(dú)立的兩次平行測(cè)定是保證結(jié)果準(zhǔn)確的必要步驟，最好是采用兩種不同的實(shí)驗(yàn)方法相互驗(yàn)步驟，最好是采用兩種不同的實(shí)驗(yàn)方法相互驗(yàn)證。證。4、標(biāo)本的質(zhì)量和適當(dāng)保存也是減少風(fēng)險(xiǎn)的重要、標(biāo)本的質(zhì)量和適當(dāng)保存也是減少風(fēng)險(xiǎn)的重要環(huán)節(jié)。環(huán)節(jié)。l植入前的診斷（植入前的診斷（PGD）：）：68細(xì)胞期。細(xì)胞期。l絨毛取樣：孕絨毛取樣：孕9-12周；周；l

15、羊水取樣：孕羊水取樣：孕16-22周；周；l臍血取樣：孕臍血取樣：孕20周后；周后；l取樣風(fēng)險(xiǎn)：羊水取樣風(fēng)險(xiǎn)最小，臍血次之，絨毛取樣風(fēng)險(xiǎn)：羊水取樣風(fēng)險(xiǎn)最小，臍血次之，絨毛取樣風(fēng)險(xiǎn)最大。取樣風(fēng)險(xiǎn)最大。l臍血標(biāo)本既可獲得較多量的臍血標(biāo)本既可獲得較多量的DNA，而且還可通，而且還可通過(guò)過(guò)Hb電泳對(duì)電泳對(duì)-地貧進(jìn)行快速有效的診斷，從而地貧進(jìn)行快速有效的診斷，從而更有效地保證產(chǎn)前診斷的可靠性。更有效地保證產(chǎn)前診斷的可靠性。1、產(chǎn)前診斷的標(biāo)本標(biāo)識(shí)特別重要，實(shí)行唯一、產(chǎn)前診斷的標(biāo)本標(biāo)識(shí)特別重要，實(shí)行唯一標(biāo)識(shí)制度，這是保證產(chǎn)前診斷準(zhǔn)確的前提。標(biāo)識(shí)制度，這是保證產(chǎn)前診斷準(zhǔn)確的前提。2、產(chǎn)前診斷的標(biāo)本及時(shí)處理，有

16、問(wèn)題及時(shí)與、產(chǎn)前診斷的標(biāo)本及時(shí)處理，有問(wèn)題及時(shí)與實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員進(jìn)行溝通。實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員進(jìn)行溝通。3、羊水標(biāo)本按取樣的先后最好分為三管，標(biāo)、羊水標(biāo)本按取樣的先后最好分為三管，標(biāo)識(shí)清楚，以防母血污染。識(shí)清楚，以防母血污染。4、臍帶血的處理同外周血一樣，可以電泳或、臍帶血的處理同外周血一樣，可以電泳或抗堿抗堿Hb測(cè)定鑒定是否是臍帶血。測(cè)定鑒定是否是臍帶血。l假設(shè)孕產(chǎn)婦為輕型地貧，在臨床上以此類情況假設(shè)孕產(chǎn)婦為輕型地貧，在臨床上以此類情況多見：多見：1、就可將原本重型或中間型地貧誤診為輕型地、就可將原本重型或中間型地貧誤診為輕型地貧，此為滅頂之災(zāi)！貧，此為滅頂之災(zāi)！2、將原本為、將原本為HbH病誤診為

17、輕型病誤診為輕型-地貧，這也是地貧，這也是非常麻煩的官司！非常麻煩的官司！3、將原本正常的胎兒誤診為輕型地貧，這種情、將原本正常的胎兒誤診為輕型地貧，這種情況還算好處理，后果不算嚴(yán)重。況還算好處理，后果不算嚴(yán)重。1、按程序處理羊水，如果污染輕微，對(duì)地貧產(chǎn)前、按程序處理羊水，如果污染輕微，對(duì)地貧產(chǎn)前分子診斷的結(jié)果影響不大（注：分子診斷的結(jié)果影響不大（注：并不是沒(méi)有并不是沒(méi)有）; 中度、重度的母血污染，則誤診的機(jī)會(huì)非常大中度、重度的母血污染，則誤診的機(jī)會(huì)非常大 。2、記錄羊水離心后的詳細(xì)情況，及時(shí)通知臨床醫(yī)、記錄羊水離心后的詳細(xì)情況，及時(shí)通知臨床醫(yī)生并在報(bào)告單上注明生并在報(bào)告單上注明“羊水標(biāo)本嚴(yán)重

18、污染，結(jié)果羊水標(biāo)本嚴(yán)重污染，結(jié)果僅供參考僅供參考”，建議間隔，建議間隔2周以上再次取樣，最好周以上再次取樣，最好采用臍帶血，以引起臨床醫(yī)生注意。采用臍帶血，以引起臨床醫(yī)生注意。 1、如果做、如果做-地貧基因診斷，對(duì)于基因型為地貧基因診斷，對(duì)于基因型為- SEA /的胎兒（實(shí)際基因型可能為的胎兒（實(shí)際基因型可能為- SEA /- SEA ）可在）可在孕孕24周后，定期進(jìn)行周后，定期進(jìn)行B超下監(jiān)測(cè)，觀察心超下監(jiān)測(cè)，觀察心/胸比例、胎盤厚胸比例、胎盤厚度、胎兒有無(wú)水腫等改變。一經(jīng)發(fā)現(xiàn)胎兒有上述變化，建度、胎兒有無(wú)水腫等改變。一經(jīng)發(fā)現(xiàn)胎兒有上述變化，建議盡快終止妊娠。議盡快終止妊娠。 2、對(duì)于基因型為、對(duì)于基因型為-地貧雜合子的胎兒（胎兒的實(shí)際地貧雜合子的胎兒（胎兒的實(shí)際基因型可能為純合子或雙重雜合子）或進(jìn)行基因型可能為純合子或雙重雜合子）或進(jìn)行HbH病的病的產(chǎn)前診斷，那就必須只能擇機(jī)重新抽取羊水或胎兒臍帶血產(chǎn)前診斷，那就必須只能擇機(jī)重新抽取羊水或