急性有機氟殺鼠劑中毒0305

1、急性有機氟殺鼠劑中毒事件衛(wèi)生應急處置技術(shù)方案有機氟殺鼠劑以氟乙酰胺、氟乙酸鈉等最為常見。急性有機氟殺鼠劑中毒是短期內(nèi)接觸有機氟殺鼠劑后引起的以中樞神經(jīng)系統(tǒng)和心臟損害為主的全身性疾病。1概述氟乙酰胺和氟乙酸鈉為白色晶體,易溶于水,常溫下化學性質(zhì)穩(wěn)定。有機氟殺鼠劑均為高毒或劇毒化學物,其中毒途徑主要為經(jīng)口攝入，絕大多數(shù)為污染、誤用、投毒引起中毒，如食用有機氟殺鼠劑污染的食品和飲用水，也可經(jīng)皮膚黏膜吸收。2中毒事件的調(diào)查和處理2.1現(xiàn)場處置人員的個體防護現(xiàn)場調(diào)查人員的個體防護無特殊要求?，F(xiàn)場采樣人員采集樣品時，應當佩戴醫(yī)用防護口罩，乳膠手套和防護眼罩，防護服無特殊要求。醫(yī)療救護人員在救護中毒病人時，

2、一般不必穿戴特殊防護裝備。2.2中毒事件的調(diào)查調(diào)查人員到達中毒現(xiàn)場后，應當先了解中毒事件的概況，懷疑由餐飲食品引起的有機氟中毒時，應當及時向有關(guān)部門提出收集并封存所有可疑中毒食品和其他可能導致本次中毒事件物品的建議，然后進行中毒事件相關(guān)場所、人員等調(diào)查工作，主要包括人群流行病學調(diào)查和危害因素調(diào)查。中毒事件危害因素調(diào)查包括中毒事件涉及可疑食品的原料、生產(chǎn)加工、儲存、運輸、銷售、食用等過程中的相關(guān)危害因素以及使用的原料和配料、調(diào)料、食品容器、使用的工具，食品的分裝、儲存條件以及食用方法等。人群流行病學調(diào)查對象應當包括中毒病人、目擊證人以及其他相關(guān)人員（如生產(chǎn)加工人員、商店銷售服務人員等）。調(diào)查內(nèi)容

3、包括接觸時間、接觸物質(zhì)、接觸人數(shù)、中毒人數(shù)、中毒的主要癥狀、中毒事件的進展情況、已經(jīng)采取的緊急措施以及可疑食品來源、生產(chǎn)單位、日期、批號，配方、加工工藝流程、生產(chǎn)經(jīng)營過程危害因素控制、生產(chǎn)經(jīng)營記錄等信息。同時，還應當向臨床救治單位進一步了解相關(guān)資料（如搶救過程、臨床治療資料、實驗室檢查結(jié)果等）。對現(xiàn)場調(diào)查的資料作好記錄，進行現(xiàn)場拍照、錄音等。取證材料要有被調(diào)查人的簽字。在調(diào)查工作中要作好相關(guān)的記錄，被調(diào)查者應當在記錄上和其提供的材料上簽字確認，拒絕簽字的，由調(diào)查人員會同1名以上現(xiàn)場見證人員在相應材料上注明原因并簽字。2.3現(xiàn)場中毒樣品的快速檢測懷疑氟乙酰胺中毒時，可以使用改良奈氏試劑法（附件2

4、）或異羥肟酸鐵反應法（附件3）對中毒事件現(xiàn)場采集的可疑中毒食品、水以及中毒病人的嘔吐物等樣品進行快速定性檢測。2.4 中毒事件的確認和鑒別2.4.1 中毒事件的確認標準同時具有以下三點，可以確認為急性有機氟殺鼠劑中毒事件：a) 中毒病人存在有機氟殺鼠劑接觸機會；b) 中毒病人短時間內(nèi)出現(xiàn)以癲癇樣大發(fā)作、頭痛、頭暈等中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害和/或心律失常、心肌損傷等心臟損害為主的臨床表現(xiàn)；c) 血、嘔吐物和/或食物等樣品中檢出有機氟殺鼠劑。2.4.2 中毒事件的鑒別應當注意其它毒物中毒（如毒鼠強中毒、霉變甘蔗中毒、有機氯殺蟲劑中毒等），以及乙型腦炎、流行性腦脊髓膜炎等傳染病疫情、群體性癔病、急性心肌炎、

5、特發(fā)性癲癇等鑒別。2.5 現(xiàn)場醫(yī)療救援現(xiàn)場醫(yī)療救援首要措施是迅速控制中毒病人的抽搐發(fā)作，并保持呼吸道通暢。意識清晰的中毒病人應當立即進行催吐，有條件可給予活性炭（成人用量為50g，兒童用量為1g/kg）口服。當出現(xiàn)大批中毒病人，應當首先進行現(xiàn)場檢傷分類，優(yōu)先處理紅標病人。2.5.1 現(xiàn)場檢傷分類a) 紅標，具有下列指標之一者：昏迷；癲癇樣發(fā)作呈持續(xù)狀態(tài)；窒息。b) 黃標，具有下列指標者：癲癇樣大發(fā)作。c) 綠標，具有下列指標者： 出現(xiàn)局灶性癲癇樣發(fā)作，以及頭痛、頭暈、乏力、胸悶、心悸、惡心、嘔吐等癥狀。d) 黑標，同時具備下列指標者：意識喪失，瞳孔散大，無自主呼吸，大動脈搏動消失。2.5.2

6、現(xiàn)場醫(yī)療救援對于紅標病人要保持復蘇體位，立即建立靜脈通道。抽搐發(fā)作者，立即緩慢靜脈注射地西泮，必要時可聯(lián)合應用苯巴比妥鈉。黃標病人和紅標病人出現(xiàn)呼吸節(jié)律明顯不規(guī)律、窒息或嚴重缺氧等情況時，及時給予氣道開放、呼吸支持。綠標病人脫離環(huán)境后，暫不予特殊處理，觀察病情變化。2.5.3 病人轉(zhuǎn)送中毒病人經(jīng)現(xiàn)場急救處理后，應當立即就近轉(zhuǎn)送至有血液凈化條件的醫(yī)院繼續(xù)觀察和治療。3中毒樣品的采集與檢測3.1 采集樣品的選擇選擇全血作為采集樣品。3.2 樣品的采集方法采血人員應當戴無粉乳膠或聚乙烯手套，在潔凈的環(huán)境中，采用肝素鋰(鈉)抗凝采血管，同時采集2份全血樣品，每份采集量不少于5ml。隨機抽取與樣品采集同

7、批號的采血管2份，作為樣品空白。3.3 樣品采集時機樣品應當在接觸毒物后盡快采集，6小時以內(nèi)采集的樣品可以進行氟乙酰胺、氟乙酸根離子定性定量檢測，6小時到24小時之間采集的樣品可以進行氟乙酸根離子定性定量檢測。3.4 樣品的保存和運輸將采集后的樣品和樣品空白置于清潔容器中冷凍運輸。樣品采集后應當盡快送實驗室進行分析測定。所有實驗室檢測完畢后的樣品和未檢樣品，應當在冷凍（-80）條件下至少保存1周以上，以備樣品復測。3.5 推薦的實驗室檢測方法3.5.1全血中氟乙酸根離子液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測方法（附件4）。3.5.2全血中氟乙酰胺的氣相色譜質(zhì)譜檢測方法（附件5）。3.5.3全血中氟乙酸根離子的離

8、子色譜檢測方法（附件6）。3.5.4生物樣品中氟乙酸根離子的氣相色譜和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢驗方法。（GA/T933-2011）4醫(yī)院內(nèi)救治4.1 病人交接中毒病人送到醫(yī)院后，由接收醫(yī)院的接診醫(yī)護人員與轉(zhuǎn)送人員對中毒病人的相關(guān)信息進行交接，并簽字確認。4.2診斷和診斷分級救治醫(yī)生對中毒病人或陪護人員進行病史詢問，對中毒病人進行體格檢查和實驗室檢查，確認中毒病人的診斷，并進行診斷分級。4.2.1診斷及診斷分級中毒病人有明確的有機氟殺鼠劑接觸證據(jù)（病人本身或共同暴露其他病人的生物材料中檢出有機氟殺鼠劑，或相關(guān)食品、水等接觸樣品中檢出有機氟殺鼠劑等），出現(xiàn)了以頭痛、頭暈、癲癇樣發(fā)作等中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害和

9、/或心律失常、心肌損傷等心臟損害為主的特征性臨床表現(xiàn)，可確認急性有機氟中毒的診斷。對于有有機氟殺鼠劑接觸機會，無特征性臨床癥狀者可作為觀察對象。具體診斷分級如下：a) 輕度中毒：具有下列情況之一者：i出現(xiàn)頭痛、頭暈、惡心、嘔吐、四肢無力等癥狀，可有局灶性癲癇樣發(fā)作；ii心電圖出現(xiàn)輕度缺血性改變，或CK-MB達到或超過正常參考值2倍以上至5倍以下，并伴有AST、LDH等酶相應增高，或肌鈣蛋白檢測陽性； 出現(xiàn)陣發(fā)性室上性心動過速，單源頻發(fā)室性期前收縮，莫氏型房室傳導阻滯等心律失常之一。b) 中度中毒：在輕度中毒基礎(chǔ)上，具有下列之一者：i癲癇樣大發(fā)作；ii精神病樣癥狀，如幻覺、妄想等； 心電圖有明顯

10、缺血性改變，或CK-MB達到或超過正常參考值5倍以上，并伴有AST、LDH等酶相應增高； 出現(xiàn)陣發(fā)性室性心動過速，多源性室性期前收縮，成對或RonT型室性期前收縮，莫氏型房室傳導阻滯等心律失常之一。c) 重度中毒：具有下列之一者：i癲癇樣發(fā)作呈持續(xù)狀態(tài)；ii 出現(xiàn)度房室傳導阻滯、尖端扭轉(zhuǎn)型室性心動過速、心室顫動或心室停搏等心律失常之一； 出現(xiàn)腦、心、肺、腎、肝等臟器功能衰竭。4.3 治療接收醫(yī)院對所接收的中毒病人確認診斷后，根據(jù)病情的嚴重程度將病人送往不同科室進行進一步救治。觀察對象進行至少48h醫(yī)學觀察，輕、中度中毒病人住院治療，重度中毒病人立即進行搶救治療。4.3.1 清除體內(nèi)毒物a) 催

11、吐：對于意識清晰、經(jīng)口中毒早期者，可進行催吐。1歲以下及不能配合的兒童不要進行催吐治療。b) 洗胃：對經(jīng)口中毒不足24h，無洗胃禁忌癥的病人均要進行洗胃。重度中毒的病人洗胃后可保留洗胃管，以備反復灌入活性炭。c) 活性炭：無使用活性炭禁忌癥的中毒病人均可考慮給予活性炭治療。輕度中毒病人洗胃后給予活性炭1次，中、重度中毒病人可反復使用，使用劑量一般為成人每次30g50g，兒童每次1g/kg。d) 血液凈化：首選血液透析治療，中、重度中毒病人在保證生命體征平穩(wěn)的情況下，應當早期進行血液凈化治療，可多次進行。4.3.2 特效解毒藥物乙酰胺為特效解毒劑，需早期、足量應用。輕、中度中毒病人每次2.5g5

12、.0g，肌內(nèi)注射，每日24次，連用57日；重度中毒病人首日每次可給予5.0g10.0g。兒童使用劑量為每次0.1g/kg0.3g/kg。4.3.3鎮(zhèn)靜止驚a) 地西泮：癲癇樣大發(fā)作和癲癇樣發(fā)作持續(xù)狀態(tài)的首選藥物。成人每次10mg20mg，兒童每次0.3mg/kg0.5mg/kg，或按（年齡+1）mg計算，如1歲2mg、2歲3mg等，兒童每次用量不超過10mg，嬰幼兒每次用量不超過2mg，緩慢靜脈注射。注射速度成人不大于5mg/min，兒童不大于2 mg/min，新生兒0.1mg/min0.2mg/min。必要時1520分鐘可重復靜脈注射。使用時應注意氣道保護，防止發(fā)生呼吸抑制。b) 苯巴比妥鈉

13、：為基礎(chǔ)用藥，可與其他鎮(zhèn)靜止驚藥物合用。輕度中毒，每次0.1g，每8小時1次，肌內(nèi)注射；中、重度中毒，每次0.1g0.2g，每6h8h時1次，肌內(nèi)注射。抽搐停止后減量使用37天。兒童每次8mg/kg10mg/kg，每12小時1次，連用2天，每日最大用量不超過20mg/kg，以后再予每天3mg/kg5mg/kg維持。c) 咪達唑侖：控制癲癇樣大發(fā)作和癲癇樣發(fā)作持續(xù)狀態(tài)。成人每次5mg10mg，兒童每次0.15mg/kg0.3mg/kg，緩慢靜脈注射，注射速度成人不大于4mg/min，兒童不大于1.25mg/min。必要時1520分鐘可重復靜脈注射。發(fā)作頻繁者，可以（0.10.4）mg/kg.h或

14、（26）g/kg.min持續(xù)靜脈點滴，發(fā)作控制12小時后減量停用。使用時應注意氣道保護，防止發(fā)生呼吸抑制。d）其他：癲癇持續(xù)狀態(tài)超過30min，連續(xù)兩次使用地西泮或咪達唑侖，抽搐仍不能得到有效控制，應及時使用靜脈麻醉劑。4.3.4 保護心肌、控制心律失常 使用能量合劑、維生素C、輔酶Q10、1-6二磷酸果糖等藥物以保護心肌、改善心肌細胞代謝；及時使用抗心律失常藥物控制心律失常，出現(xiàn)莫氏型或度房室傳導阻滯伴血流動力學不穩(wěn)定者，可考慮安裝臨時起搏器。4.3.5 其他對癥支持治療加強營養(yǎng)、合理膳食，注意水、電解質(zhì)及酸堿平衡，密切監(jiān)護心、腦、肝、腎等重要臟器功能，出現(xiàn)呼吸衰竭、腦水腫、精神障礙以及肝腎

15、功能障礙時，應及時給予氧療、呼吸機支持、脫水降顱壓等相應對癥支持治療措施。5 應急反應的終止中毒食品和其他可疑毒物已經(jīng)完全收繳和銷毀，中毒相關(guān)危險因素已被有效控制，未出現(xiàn)新的中毒病人且原有病人病情穩(wěn)定24h以上。10附件1致痙攣性殺鼠劑的理化性質(zhì)和毒性毒物名稱CAS分子式物理特性化學性質(zhì)毒性人最低致死劑量備注動物途徑LD50（mg/kg）氟乙酰胺640-19-7C2H4OFN白色針狀結(jié)晶，無臭無味，易溶于水、乙醇、丙酮，微溶于氯仿?？諝庵幸壮苯?，熔點107108。常溫下化學性質(zhì)較為穩(wěn)定。大鼠經(jīng)口5.75 mg/kg可造成二次中毒。氟乙酸鈉62-74-8FCH2COONa白色晶體，略帶醋酸氣味，

16、極易溶于水，微溶于丙酮、乙醇。在空氣中易潮解成糖漿狀。常溫下化學性質(zhì)較為穩(wěn)定，但高于200可以分解。大鼠經(jīng)口0.15 mg/kg可引起二次中毒甘氟80650-71-2C3H6OF2占70%80%，C3H6OFCl占20%30%無色或微黃色透明油狀液體，具有揮發(fā)性，略帶酸味，能與水、醇、乙醚混溶。化學性質(zhì)穩(wěn)定大鼠經(jīng)口30可引起二次中毒。經(jīng)皮66附件2改良奈氏試劑法定性測定食品、生物樣品中氟乙酰胺1 適用范圍適用于食品樣品及部分生物樣品(嘔吐物、胃液和胃內(nèi)容物)中氟乙酰胺的定性測定，測定結(jié)果可作為初步判斷事件中毒物的重要參考，不能作為確定事件性質(zhì)的依據(jù)。氟乙酰胺的檢測目前無分析方法國家標準，遇重大

17、突發(fā)事件性質(zhì)的判定，建議采用其他分析方法加以確證。2 原理氟乙酰胺水溶液遇到強堿性的奈氏試劑,逐漸水解出氨,與奈氏試劑作用,產(chǎn)生黃棕色沉淀。3 方法重要參數(shù)3.1 檢出限：0.5g。 3.2 干擾：銨鹽存在假陽性干擾。3.3 全程測定時間：20min。4 器材與試劑4.1 試劑奈氏試劑:11.5g碘化汞和8g碘化鉀溶于少量水中,溶后加水稀釋至50ml,再加入25%氫氧化鈉50ml,靜置過夜。取上清液置于棕色瓶中待用。4.2 陽性對照樣品：5ml胃液中加50g氟乙酰胺。4.3 陰性對照樣品：5ml胃液中加50g溴鼠隆。5 測定5.1 樣品處理固體或半固體(胃內(nèi)容物、嘔吐物)樣品,可采用有機溶劑直

18、接提取法。一般常用甲醇或乙醇浸泡,在50水浴上溫浸1h2h。如用其他有機溶劑(乙酸乙酯、氯仿等)時,可在提取容器中充分振搖,然后過濾,濾液置60水浴上蒸發(fā)至近干,用適量甲醇溶解殘渣(混濁時可過濾),溶液供檢驗用;液體樣品(飲水、菜湯、飲料),可直接用氯仿等有機溶劑提取或用透析法處理,也可采用在水浴上蒸去水分后再用甲醇浸出。5.2 測定取處理后的樣品溶液1ml2ml ,加奈氏試劑1ml2ml ,如有氟乙酰胺,在滴加試劑約0.5min，觀察顏色變化。如測定食品樣品氟乙酰胺，應同時與氟乙酰胺標準和水質(zhì)等作對照。如測定胃液和胃容物中氟乙酰胺時，同時與陽性樣品和陰性樣品對照。6 結(jié)果判定陽性：淡黃色黃色

19、亮黃色深黃色，2min 后逐漸混濁，最后生成桔紅色沉淀。陰性：無顏色反應。7 說明7.1 如有銨鹽存在，滴加試劑后立即生成桔紅色沉淀。7.2 對含量低的或含量高的樣品要用幾種檢驗方法來確證，以避免假陽性和假陰性，同時要以氟乙酰胺標準和水質(zhì)等作對照試驗，以便檢查操作是否準確。7.3 樣品分離提取后，得到的毒物數(shù)量往往很少，而且常常又不能重復采樣，為此，在試驗前以消耗少量的樣品進行預試驗后，再進行確證試驗。附件3異羥肟酸鐵反應法定性測定食品等樣品中氟乙酰胺1 適用范圍 本方法適用于食品、毒餌、水、嘔吐物樣品，可作為初步判斷事件中毒物的重要參考，不能作為確定事件性質(zhì)的依據(jù)。氟乙酰胺的檢測目前無分析方

20、法國家標準，遇重大突發(fā)事件性質(zhì)的判定，建議采用其他分析方法加以確證。2 原理氟乙酰胺與羥胺在堿性條件下，生成異羥肟酸，與三價鐵離子作用發(fā)生變色反應，通過顏色變化，可對氟乙酰胺進行定性。3 方法重要參數(shù)3.1 檢出限：50g/ml。3.2 干擾：堿度過高對其可造成假陽性干擾，酸度過高可造成假陰性干擾。3.3 全程測定時間：15min。4 試劑和儀器4.1 儀器：酒精燈1個（或電熱杯1個）、試管若干、500ml燒杯1個、100ml燒杯2個、漏斗或滴管1個、玻璃棒1個、濾紙若干，PH試紙。4.2 試劑：活性炭或中性氧化鋁、氫氧化鈉溶液，鹽酸羥胺溶液、鹽酸溶液、三氯化鐵。4.3 氟乙酰胺標準品可從公安

21、部門獲得。5 樣品前處理由于現(xiàn)場所采集的樣品成分復雜，除少數(shù)樣品，例如市售鼠藥或工業(yè)原粉，可直接用本方法檢測外，其他樣品均需進行樣品前處理來以去除雜質(zhì)干擾，提高靈敏度和降低假陽性率。5.1 鼠藥和工業(yè)原粉直接取少量0.1g0.5g樣品進行檢測。5.2 固體樣品（毒餌、米、面、茶葉、鹽、嘔吐物等）取固體樣品（顆粒大的固體需先研磨碎）2g5g放入10ml比色管中，加入3倍于樣品重的蒸餾水，振搖后過濾，將上清液用濾紙過濾，重復上述過程一次，合并上清液至一大試管內(nèi)，將比色管置于沸水浴中，使濾液煮沸濃縮至1ml左右。注意：不要將已經(jīng)揮發(fā)干的試管長時間置于沸水浴中，否則會影響回收率，出現(xiàn)假陰性結(jié)果。5.3

22、 液體樣品（水、酒、飲料、醬油、醋等）取液體樣品5ml放入大試管中，加入等量于樣品重的蒸餾水或純凈水，充分振蕩混勻，靜置5min，用分液漏斗或滴管分離上清液，重復過程一次，合并上清液至大試管內(nèi)，將試管置于沸水浴中，使濾液煮沸濃縮至1ml左右。醬油、醋、有顏色的飲料等液體樣品使用少量活性炭或中性氧化鋁進行脫色處理，以防止顏色干擾。6 樣品測定取待檢液1ml左右于試管中，加氫氧化鈉溶液10滴，加鹽酸羥胺溶液5滴，置沸水中水浴5min（使其充分水解成氟乙酸鈉釋放出氨）。取出放冷，加鹽酸溶液910滴（調(diào)pH值至35）后，加三氯化鐵溶液310滴（使其與氟乙酸反應），取出觀察顏色變化。同時取一干凈的空試管

23、進行同樣操作作為對照。7 結(jié)果判定陽性：粉紅或紫紅色，尤其在滴加后的液面上更為明顯。陰性：淺黃或黃色。8 說明8.1 加鹽酸溶液9滴后要用pH試紙測試溶液pH值，若pH值太高(堿度過高)，加入三氯化鐵溶液時可產(chǎn)生紅棕色沉淀，影響結(jié)果判定，造成假陽性結(jié)果；若pH值太低(酸度過高)，加入三氯化鐵溶液后氟乙酰胺顯色不敏銳或不顯色，易造成假陰性結(jié)果。pH值可用氫氧化鈉溶液和鹽酸溶液反向調(diào)整。8.2 空白對照試驗，取與樣品相同（不含氟乙酰胺）的物質(zhì)與樣品同時操作，以便于觀察對比。對于嘔吐物、胃內(nèi)容物等樣品，應加陽性對照試驗。8.3 測定時做空白對照試驗，陰性結(jié)果為淺黃或黃色，有些空白對照為黃棕色絮狀沉淀

24、，靜置后上層液變成無色或僅呈淺黃色。8.4 本方法不適于血液和組織器官樣品的測定。8.5 三氯化鐵溶液放置時間長時會有少量沉淀產(chǎn)生，須搖勻后使用。組合試劑的有效期為1年，陽性對照試驗無反應時不可再用。9 質(zhì)量控制檢測時，應當同時做陰性樣品及氟乙酰胺標準品。附件4 全血中氟乙酸根離子液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測方法1 適用范圍適用于全血中氟乙酸根離子的定性定量分析。2 原理全血樣品經(jīng)乙腈沉淀蛋白后，采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法檢測分析，以保留時間和特征離子定性，以標準曲線法定量。3 方法重要參數(shù)3.1 線性范圍：5g/L500g/L；3.2精密度：批內(nèi)、批間 RSD10%；3.3準確度（回收率）：80%

25、105%；3.4方法檢出限：1g/L。4 器材與試劑液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，振蕩儀，離心機，微量加樣器，氮吹濃縮儀，0.22m微孔濾膜（水系），氟乙酸鈉標準，乙腈（色譜純），甲酸銨（色譜純）。5 操作步驟5.1 色譜參考條件色譜柱：CSH（氟苯基柱）或C18（50 mm2.1 mm, 1.7 m）；流動相：0.4%甲酸銨溶液:乙腈=70:30；流速：0.2mL/min。5.2 質(zhì)譜參考條件離子源：電噴霧離子源（ESI）；檢測模式：負離子檢測模式；掃描模式：MRM模式；監(jiān)測離子：7733.1；離子源電壓：4.6 KV；離子源溫度：550。5.3樣品預處理將全血樣品放至室溫混勻后，取0.50ml于離心

26、管中，加3ml乙腈沉淀蛋白，振搖1min，10000rpm/min離心10min，取上清液，氮吹濃縮至干，加入流動相0.5ml復溶，經(jīng) 0.22m微孔濾膜（極性）過濾后，濾液待測。5.4標準儲備液的配制準確稱取13mg氟乙酸鈉標準品于10ml容量瓶中，用純水定容至刻度，配制成濃度為1300g/ml的氟乙酸鈉標準貯備液，即1000g/ml的氟乙酸根離子標準儲備液。置于冰箱4冷藏保存?zhèn)溆谩?.5樣品檢測5.5.1 樣品定性檢測 5.5.1.1特征離子和質(zhì)譜條件的確定取氟乙酸根離子標準儲備液，采用流動相稀釋成濃度約為100g/L的標準溶液，以蠕動泵直接進樣方式在電噴霧負離子模式下測定：首先在全掃描模

27、式中獲得氟乙酸的準分子離子M-H-（m/z 77），優(yōu)化毛細管電壓及錐孔電壓，使響應值最高。然后切換到子離子掃描模式，調(diào)節(jié)碰撞能量，獲得碎片離子（m/z 33.1、m/z 56.9、m/z 48.8等）及相對離子豐度，確定特征離子和相應的質(zhì)譜條件。 5.5.1.2用流動相稀釋標準儲備液成20g/L標準溶液，按上述儀器參考條件，進樣檢測后確定氟乙酸根離子的保留時間以及特征離子。 5.5.1.3檢測試劑空白、樣品空白、容器空白和空白對照樣品（正常人全血樣品），確認無干擾。 5.5.1.4 檢測陽性對照（以空白對照樣品加標作為陽性對照樣品，加標濃度為2g/L），確認陽性對照樣品能夠檢出。 5.5.1

28、.5 檢測樣品，將樣品譜圖與空白對照樣品、標準譜圖對比分析，以保留時間和特征離子定性。5.5.2樣品定量檢測 5.5.2.1定量離子的選擇在5.5.1.1中選擇相對豐度最強的碎片離子，與準分子離子組成特征離子對（參考：76.833.1）作為定量離子。 5.5.2.2 標準系列溶液的配制用流動相將標準儲備液逐級稀釋配制成5g/L、10g/L、100g/L、500g/L的氟乙酸根離子標準系列溶液。 5.5.2.3樣品檢測取樣品濾液20l進樣檢測，以標準曲線定量。6 質(zhì)量控制6.1 實驗室應當對檢測方法進行確認，各項指標達到方法要求。6.2 檢測過程應采取質(zhì)量控制措施，每個待測樣品檢測前必須進行試劑

29、空白檢測，以確認進樣針和色譜質(zhì)譜儀器系統(tǒng)未受污染。附件5 全血中氟乙酰胺的氣相色譜質(zhì)譜檢測方法1 適用范圍適用于全血中氟乙酰胺的定性定量分析。2 原理全血中的氟乙酰胺用乙酸乙酯提取，氮吹濃縮后，用乙酸乙酯復溶，使用氣相色譜-質(zhì)譜儀進行檢測，標準品對照，特征離子豐度比與保留時間定性，標準曲線法定量。 3 方法重要參數(shù) 3.1 線性范圍：5.0g/ml80g/ml；3.2 精密度：批內(nèi)、批間RSD10%； 3.3 準確度（回收率）：90%105%；3.4 方法檢出限：0.2g/ml。4 器材與試劑 氣相色譜質(zhì)譜儀（四級桿），毛細管色譜柱（DB-1701MS或 DB-1MS，30m0.25mm0.2

30、5m），渦旋振蕩器，高速離心機，氮吹濃縮儀，乙酸乙酯（色譜純），氟乙酰胺標準品。5 操作步驟 5.1 色譜參考條件 進樣口溫度：250；傳輸線溫度：280；柱溫：初始溫度80，保持2min，以20/min的速率升溫至280，保持5min；載氣：高純氦氣，流速 1.0ml/min；進樣模式：不分流進樣；進樣體積：1.0l。5.2 質(zhì)譜參考條件離子源：EI；離子源能量：70eV；離子源溫度：230；四極桿溫度：150；掃描模式：SIM模式；掃描離子：44 m/z、77 m/z（定量離子）。5.3 樣品預處理 將全血樣品放至室溫混勻后，取5ml置于試管中，加入5ml乙酸乙酯，充分振蕩混勻，以2000

31、r/min離心2min，分離上清液。重復提取一次，合并上清液至試管內(nèi)，用氮吹濃縮儀常溫濃縮近干，加入0.5ml乙酸乙酯復溶后進行檢測。 5.4標準儲備液的配制 用乙酸乙酯準確配制濃度為800g/ml氟乙酰胺標準儲備液。置于冰箱4冷藏保存。5.5樣品檢測5.5.1 樣品定性檢測 5.5.1.1用乙酸乙酯稀釋標準儲備液成10g/ml標準溶液，按上述儀器參考條件，進樣檢測后確定氟乙酰胺的保留時間和特征離子豐度比。 5.5.1.2檢測試劑空白、樣品空白、容器空白和空白對照樣品（正常人全血樣品），確認無干擾。 5.5.1.3 檢測陽性對照（以空白對照樣品加標作為陽性對照樣品，加標量為每毫升全血含有1g氟

32、乙酰胺），確認陽性對照樣品能夠檢出。 5.5.1.4 檢測樣品，將樣品譜圖與空白對照樣品、標準譜圖對比分析，以保留時間和特征離子定性。5.5.2樣品定量檢測 5.5.2.1 標準系列溶液的配制用乙酸乙酯將標準儲備液逐級稀釋配制成5.0g/ml、10g/ml、40g/ml、80g/ml氟乙酰胺標準系列溶液。 5.5.2.3樣品檢測取復溶樣品溶液進樣檢測，以標準曲線定量。6 質(zhì)量控制 6.1 實驗室應當對檢測方法進行確認，各項指標達到方法要求。6.2 檢測過程應當采取質(zhì)量控制措施，每個待測樣品檢測前必須進行試劑空白檢測，以確認進樣針和色譜質(zhì)譜儀器系統(tǒng)未受污染。附件6 全血中氟乙酸根離子的離子色譜檢測方法1 適用范圍 適用于全血中氟乙酸根離子的定性定量分析。 2 原理 全血中的氟乙酸根離子用純水提取，用乙腈沉淀蛋白質(zhì)并定容，采用離子色譜法檢測分析，以保留時間定性，以標準曲線法定量。3