最全糖化血紅蛋白測(cè)定的原理與儀器解析

1、糖化血紅蛋白（HbA1c）測(cè)定的原理方法與儀器解析及臨床意義糖尿病目前在世界上發(fā)病率很高，占免疫病的比率，在發(fā)達(dá)國(guó)家高達(dá)2-5%，而我國(guó)糖尿病的發(fā)病率亦達(dá)2-3%,并且每年還以1%o的速度增長(zhǎng)。糖尿病是一種終生性疾病，其并發(fā)癥是至殘至死的主要原因，所以人們希望能盡早發(fā)現(xiàn)和治療糖尿病。臨床上廣泛采用血糖參數(shù)來(lái)判定糖尿病，而血糖參數(shù)只代表抽血時(shí)的血糖水平，對(duì)確診有局限性。近年來(lái)的醫(yī)學(xué)研究證明：血液中的糖化血紅蛋白（HbAlc）濃度相對(duì)穩(wěn)定，其濃度值能準(zhǔn)確反映最近1-3個(gè)月期間的血糖水平，便于醫(yī)生對(duì)糖尿病進(jìn)行早期診斷；也可用于糖尿病人的血糖監(jiān)控及慢性并發(fā)癥的判斷等，受到臨床的廣泛重視，目前我國(guó)各大、

2、中型醫(yī)院正逐漸開展糖化血紅蛋白（HbAlc）占總血紅蛋白（Hb）的百分含量的測(cè)定項(xiàng)目。有些發(fā)達(dá)國(guó)家已將HbAlc的測(cè)定列入中老年人的常規(guī)體檢項(xiàng)目。測(cè)定HbA1c比較常用的方法，目前有乳膠凝集反應(yīng)法和離子交換高壓液相色譜法兩種，分別用生化分析儀和糖化血紅蛋白自動(dòng)分析儀進(jìn)行測(cè)定。1HbAlc的臨床意義糖化血紅蛋白是一項(xiàng)說(shuō)服力較強(qiáng)、數(shù)據(jù)較客觀、穩(wěn)定性較好的生化檢查，不受偶爾一次血糖升高或降低的影響。能反應(yīng)糖尿病患者2-3個(gè)月以內(nèi)的糖代謝狀況，同時(shí)與糖尿病并發(fā)癥尤其是微血管病變關(guān)系密切，在糖尿病學(xué)上有重要的臨床參考價(jià)值。1.1增高：測(cè)定HbAlc可以了解糖尿病人在23個(gè)月的血糖控制情況。此外，用含葡萄

3、糖的透析液作血透的慢性腎衰病人，地中海貧血和白血病病人亦增高。1.2降低：溶血性及失血性貧血，慢性腎衰，慢性持續(xù)性低血糖癥等。1.3作為糖尿病的病情監(jiān)測(cè)指標(biāo)1.3.1作為輕癥、II型、“隱性”糖尿病的早期診斷指標(biāo)。1.3.2不是診斷糖尿病的敏感指標(biāo)，不能取代現(xiàn)行的糖耐量試驗(yàn)。1.3.3可以列為糖尿病的普查和健康檢查的項(xiàng)目。1.4當(dāng)HbA1c>9%時(shí)，說(shuō)明患者存在著持續(xù)性高血糖，可以出現(xiàn)糖尿病腎病、動(dòng)脈硬化、白內(nèi)障等并發(fā)癥。臨床經(jīng)常以糖化血紅蛋白作為監(jiān)測(cè)指標(biāo)來(lái)了解患者近階段的血糖情況，以及估價(jià)糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展情況。1.5對(duì)預(yù)防糖尿病孕婦的巨大胎兒、畸形胎、死胎，以及急、慢性并發(fā)

4、癥發(fā)生發(fā)展的監(jiān)督具有重要意義。1.6對(duì)于病因尚未明確的昏迷或正在輸注葡萄糖（測(cè)血糖當(dāng)然增高）搶救者，急查糖化血紅蛋白具有鑒別診斷的價(jià)值。1.7對(duì)于糖化血紅蛋白特別增高的糖尿病患者，應(yīng)警惕如酮癥酸中毒等急性合并癥的發(fā)生。2臨床常用的測(cè)定糖化血紅蛋白HbA1c的方法21乳膠凝集反應(yīng)法乳膠凝集反應(yīng)法是利用抗原抗體直接測(cè)定總血紅蛋白Hb中的糖化血紅蛋白HbAlc的百分含量。目前有國(guó)內(nèi)外幾家廠商可以提供HbA1c測(cè)定的試劑盒。這種免疫反應(yīng)是由被測(cè)血樣品中的總Hb和HbAlc與試劑中的抗體結(jié)合而形成凝集，凝集量隨HbAlc濃度的大小而變化。使用生化分析儀器來(lái)進(jìn)行比濁測(cè)定HbA1c的濃度，采用終點(diǎn)法，生化儀

5、通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液的吸光度值，可直接反映出凝集量的多少；推算出HbA1c占Hb的百分含量，測(cè)定時(shí)，儀器多采用660nm單色光做主波長(zhǎng)，800nm單色光做副波長(zhǎng)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線得出實(shí)測(cè)值。由于這種試驗(yàn)其標(biāo)準(zhǔn)曲線是非線性的，所以在測(cè)定前，首先用隨試劑盒一起帶有的5種不同濃度的定標(biāo)液，做出5點(diǎn)非線性標(biāo)準(zhǔn)曲線。曲線和數(shù)值存在生化儀的貯存器中，測(cè)定樣品時(shí)，實(shí)測(cè)出的吸光度值A(chǔ)與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，由儀器CPU求出實(shí)測(cè)樣品中的HbAlc百分含量。乳膠凝集反應(yīng)法測(cè)定HbA1c簡(jiǎn)便、不用增加儀器，可直接用自動(dòng)生化分析對(duì)樣品進(jìn)行快速測(cè)定。該方法也可以用手工的方法，在酶標(biāo)儀進(jìn)行測(cè)定，是目前使用較多的方法。但是乳膠凝集反應(yīng)法其準(zhǔn)

6、確性和重復(fù)性均有欠缺。22離子交換高壓液相色譜法HPLC使用離子交換高壓液相色譜HPLC(highpressureliquidchromatography)來(lái)測(cè)定HbAlc的百分含量目前被認(rèn)為是分析HbA1c的金標(biāo)準(zhǔn)。采用HPLC方法工作的全自動(dòng)糖化血紅蛋白分析儀器，以其快速、簡(jiǎn)便、精巧、準(zhǔn)確等特點(diǎn)，受到越來(lái)越多用戶的歡迎。色譜分析是一類利用混合物的各組分在不同相上的分配差別，在兩相物質(zhì)相對(duì)運(yùn)動(dòng)過(guò)程中，將混合物中的各種成份分離開的一種分析技術(shù)。液相色譜是以液體或固體為固定相，以液體為液動(dòng)相的色譜法的總稱。色譜法又叫色層或?qū)游觯@一技術(shù)在生命科學(xué)研究中用于生物活性物質(zhì)的分析；生物活性物質(zhì)是以混合

7、物形式存在，人類血液中的蛋白質(zhì)有上千種，只有把混在一起的被測(cè)蛋白分離出來(lái)，才能準(zhǔn)確測(cè)定；在HbA1c的測(cè)定時(shí)，可以通過(guò)高精度HPLC，將HbA1c從Hb中分離出來(lái)，才能得到準(zhǔn)確的數(shù)值。在生命科學(xué)研究中，活性物質(zhì)的分離主要應(yīng)用的是液相柱色譜。這種技術(shù)誕生于20世紀(jì)初葉，俄國(guó)化學(xué)家茨維特把植物色素混合液置于裝有碳酸鈣吸附劑的玻璃管頂端，用石油醚洗脫后，在玻璃柱上出現(xiàn)了幾組顏色不同的色帶，這些色帶隨著不斷的洗脫，越分越開，先后從玻璃柱下端流出，茨維特把這樣一種用流體洗脫色素混合液，使之通過(guò)碳酸鈣做固定相從而實(shí)現(xiàn)分離的技術(shù)，起名叫“色譜法”。這種方法被推廣用于分離許多混合物中的各種物質(zhì)，被分離物質(zhì)已和

8、顏色無(wú)關(guān)了，但“色譜”分析的名稱仍沿用至今。當(dāng)然更貼切的名稱應(yīng)該叫“層析法”。早期的“色譜柱”體積大，做固定相的物質(zhì)顆粒大，分離時(shí)需要大量的洗脫液。并且洗脫液靠重力流動(dòng)，分離時(shí)間長(zhǎng)，效率低。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，20世紀(jì)60年代，人們研制出新型液相柱，同時(shí)采用高壓輸液泵自柱上端為洗脫液加壓，大大加速了洗脫液的流速，開發(fā)出相應(yīng)的高靈敏度的檢測(cè)器，新的分析儀器高壓液相色譜儀在70年代誕生，很快就占領(lǐng)了分析化學(xué)的舞臺(tái)。特別是在生命科學(xué)的研究中，HPLC技術(shù)由于對(duì)被測(cè)物活性影響小，幾乎可以測(cè)定生物醫(yī)學(xué)中所有的非發(fā)揮性物質(zhì)，如近年來(lái)利用離子交換HPLC法測(cè)定血液中的HbAlc的百分含量，被認(rèn)為是糖尿病診斷

9、的金標(biāo)準(zhǔn)。3糖化血紅蛋白自動(dòng)分析儀糖化血紅蛋白自動(dòng)分析儀采用離子交換HPLC法測(cè)定HbAlc。離子交換HPLC法，是利用能交換離子的材料為固定相來(lái)分離離子型化合物的方法。儀器使用陽(yáng)離子交換柱進(jìn)行HbAlc的百分比測(cè)定；當(dāng)一定量的全血樣品被取樣針吸入到進(jìn)樣裝置內(nèi)，在稀釋部分被溶血，釋放出紅細(xì)胞中的血紅蛋白Hb,并由稀釋液稀釋，稀釋好的已經(jīng)溶血的樣品，由高壓泵注入離子交換柱。柱內(nèi)的固定相是最新開發(fā)的非多孔性，不溶和可滲透的交聯(lián)高聚物，上面分布固定的帶電荷基團(tuán)和能游動(dòng)的配衡離子；樣品通過(guò)過(guò)濾器從交換柱頂端加入后，由三種不同濃度的鹽洗脫緩沖液（流動(dòng)相）洗脫，使樣品向下移動(dòng)。此時(shí)溶液中所含血紅蛋白（Hb

10、）的各種組份即與固定相上能移動(dòng)的離子進(jìn)行交換，樣品中的血紅蛋白多種組分在固定相上連續(xù)進(jìn)行可逆的交換吸著和解吸作用，而3種不同離子濃度的鹽液，形成線性梯度洗脫，洗脫液No1叫起始緩沖液，含低離子濃度的鹽，洗脫液No2、No3緩沖液，其離子濃度依次增高很多，這種流動(dòng)相離子濃度的改變對(duì)分離效果的影響非常明顯，前面洗脫出來(lái)的組分分離效果好，色譜峰很窄，后面組分也能在很短時(shí)間內(nèi)洗脫出來(lái)，大大縮短了分離時(shí)間；所以全自動(dòng)血紅蛋白分析儀，在1分多鐘內(nèi)、Hb中的多種成份被分離成6個(gè)部分，其中的HbA1c、HbF、HbA1被有效、精確的分離；由交換柱流出的Hb成分到達(dá)儀器的檢測(cè)器，檢測(cè)器內(nèi)裝有發(fā)射單色光的發(fā)光二極

11、管，通過(guò)雙波長(zhǎng)可見光比色法測(cè)定HbAlc、HbF、HbA1三個(gè)參數(shù)。儀器的檢測(cè)器檢測(cè)出分離后HbAlc、HbF、HbA1組分的吸光度值，與HbAlc標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值比較，分析計(jì)算出結(jié)果，最后以百分率表示的Hb組分結(jié)果與色譜圖一起打印出來(lái)。離子交換柱HPLC法對(duì)全血直接測(cè)定HbAlc，其批內(nèi)和批間變異系數(shù)CV均可以小于1%（CV<1%）,結(jié)果精確，HbAlc檢測(cè)結(jié)果不受存在的變異型血紅蛋白及其衍生物的影響，特別適合于糖尿病人的監(jiān)控。關(guān)于糖化血紅蛋白的不同的測(cè)定方法與正常值之間的關(guān)聯(lián)！由于現(xiàn)在糖化血紅蛋白測(cè)定方法不同，標(biāo)注的正常值也不同，不光患者糊涂，臨床工作中也不方便?，F(xiàn)在糖化血紅蛋白的測(cè)定

12、方法有5種：（1）離子交換高效液相色譜分析法檢測(cè)糖化血紅蛋白HbAlc的金標(biāo)準(zhǔn)；（2）電泳法；（3）微柱法；（4）親和層析法；（5）免疫法。比如我們醫(yī)院以前用的是免疫法，正常值是5%-7%，現(xiàn)在用的是微離子柱層析法（機(jī)器型號(hào)是DREWDS5），正常值是6%-8%，請(qǐng)教大家這些不同的測(cè)定方法得到的測(cè)量值之間是否有一定的比例關(guān)系？國(guó)際上有沒有糖化血紅蛋白測(cè)定的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)（測(cè)量方法及測(cè)量值）。糖化血紅蛋白（Glycatedhemoglobin,GHB）實(shí)驗(yàn)通常是檢測(cè)由血紅蛋白和葡萄糖經(jīng)緩慢過(guò)程且非酶促反應(yīng)所形成的穩(wěn)定部分，其合成速率與紅細(xì)胞所處環(huán)境中糖的濃度成正比,積累并持續(xù)于紅細(xì)胞120天生命期中。

13、由于紅細(xì)胞允許葡萄糖自由滲透，血液樣本中糖化血紅蛋白水平反應(yīng)過(guò)去120天內(nèi)的平均血糖水平。GHB檢測(cè)用于常規(guī)實(shí)驗(yàn)室始于二十世紀(jì)七十年代末期，且穩(wěn)定發(fā)展至今，成為評(píng)價(jià)血糖控制水平的重要指標(biāo)。臨床實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用的GHB檢測(cè)方法主要分為兩大類，一類方法基于GHB與非GHB的電荷不同，如離子交換色譜、電泳和等電聚焦方法；另一類方法基于血紅蛋白上糖化基團(tuán)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，如親和層析和免疫實(shí)驗(yàn)，每種方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，對(duì)臨床實(shí)驗(yàn)室而言，尚無(wú)“最佳”方法可以選擇。雖然方法不同，結(jié)果的表示不同，但在正確操作和解釋的情況下，方法間可以有較好的相關(guān)性，并能為臨床提供有用的信息。目前在美國(guó)進(jìn)行的糖尿病控制和并發(fā)癥臨床研究（di

14、abetescontrolandcomplicationstrial,DCCT）,表明了糖尿病患者病程的發(fā)展和合并癥與血糖控制的密切關(guān)系，及血漿葡萄糖水平與HbA1c水平間的關(guān)系。在此基礎(chǔ)上，美國(guó)糖尿病協(xié)會(huì)（AmericanDiabetesAssociation）提出了糖尿病治療的建議，指明測(cè)定HbA1c重要性，并在世界范圍內(nèi)被廣泛應(yīng)用。為了更好地應(yīng)用DCCT的結(jié)果治療糖尿病人，為臨床醫(yī)生提供準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)，美國(guó)臨床化學(xué)協(xié)會(huì)（AACC）在1993年成立分委會(huì)進(jìn)行GHB測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化工作，使不同實(shí)驗(yàn)室（方法）的結(jié)果可溯源至DCCT的參考結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)化工作由美國(guó)國(guó)家糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃（Natio

15、nalGlycohemoglobinStandardizationProgram,NGSP）指導(dǎo)委員會(huì)于1996年完成。這一工作使得美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室間GHB測(cè)定的結(jié)果有了大的變化：2000年，90%實(shí)驗(yàn)室以HbA1c報(bào)告糖化血紅蛋白的結(jié)果，所有參加NGSP活動(dòng)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的室間C小于5%,HbA1c結(jié)果與靶值的偏差小于0.8%。目前，美國(guó)絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的結(jié)果，均可溯源至DCCT結(jié)果，使對(duì)糖尿病及其并發(fā)癥的治療和預(yù)防工作有了統(tǒng)一的參考標(biāo)準(zhǔn)。美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（NCCLS）采納了NGSP的GHB測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化模式。一、NGSP實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)NGSP由執(zhí)行委員會(huì)和實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)組成（圖1）實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)

16、中包括管理核心（NETCORE）,一級(jí)中心參考實(shí)驗(yàn)室（CPRL）,級(jí)參考實(shí)驗(yàn)室（PRLs）和二級(jí)參考實(shí)驗(yàn)室（SRLs）。管理核心（NETCORE）負(fù)責(zé)直接與執(zhí)行委員會(huì)聯(lián)系，分析全部網(wǎng)絡(luò)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)并轉(zhuǎn)送執(zhí)行委員會(huì)審批，向合格的實(shí)驗(yàn)室或廠家頒發(fā)證書。一級(jí)中心參考實(shí)驗(yàn)室依據(jù)在DCCT項(xiàng)目中使用的方案，使用Bio-Rex70樹脂HPLC方法測(cè)定HbA1c，建立基準(zhǔn)。雖然，采用的方法有一定缺限（如受HbF、變異血紅蛋白的干擾，且測(cè)定速度較慢），但長(zhǎng)期穩(wěn)定性（Cs<3%）是NFSP考慮其作為參考方法的主要依據(jù)。一級(jí)參考實(shí)驗(yàn)室作為中心參考實(shí)驗(yàn)室的后備支持，采用相同的實(shí)驗(yàn)方法，并確保結(jié)果可溯源至CPRL。

17、其他網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室為SRLs，可使用不同的實(shí)驗(yàn)方法，但必須溯源至CPRL方法。每個(gè)SRL都應(yīng)得到NGSP相應(yīng)的證書，并可直接參與生產(chǎn)廠家的校準(zhǔn)工作。NGSP實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)中的各實(shí)驗(yàn)室都必須依據(jù)NCCLSEP5-A文件進(jìn)行方法精密度評(píng)估，并每月參加用新鮮血樣本進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)（n=100）和依據(jù)NCCLSEP9-A文件進(jìn)行的偏差評(píng)估（表1）。NGSP實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)與各臨床實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)廠家協(xié)同工作，完成校準(zhǔn)、頒發(fā)證書和能力驗(yàn)證工作。二、標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃的應(yīng)用GHB測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃的目的是：校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定方法、為檢測(cè)方法和實(shí)驗(yàn)室頒發(fā)證書、及指導(dǎo)常規(guī)實(shí)驗(yàn)室開展室間質(zhì)量評(píng)價(jià)活動(dòng)。在檢測(cè)方法獲得證書前，生產(chǎn)廠家必須確保他們

18、的檢測(cè)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)的結(jié)果具有可比性，廠家可在網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室的幫助下，達(dá)到以上目的。同時(shí)，必須按規(guī)定的程序進(jìn)行方法精密度檢測(cè)和室間比對(duì)。在全部數(shù)據(jù)經(jīng)管理核心評(píng)審合格后，可獲得合格證書。檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室也可按相同程序獲得相應(yīng)證書，參加網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室可獲得“水平1”證書，否則，為“水平2”證書。GHB標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃的效益，臨床實(shí)驗(yàn)室可以通過(guò)參加能力驗(yàn)證活動(dòng)獲得，這種活動(dòng)通常使用由網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室定值的新鮮血樣本，評(píng)估結(jié)果的偏差和實(shí)驗(yàn)室間及方法間的可比性。標(biāo)準(zhǔn)方法的使用，讓實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果與DCCT實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)合起來(lái)，從而更好地服務(wù)于臨床醫(yī)生和糖尿病患者。三、GHB測(cè)定方法的選擇為保證實(shí)驗(yàn)室結(jié)果可以溯源至DC

19、CT的結(jié)果，且在實(shí)驗(yàn)室具有可比性，美國(guó)糖尿病協(xié)會(huì)（ADA）建議只使用NGSP驗(yàn)證的GHB實(shí)驗(yàn)方法6,除具可比較性外，這些方法還具有較好的精密度，通常總不精密度V5%。GHB實(shí)驗(yàn)的方法原理不同，各有優(yōu)缺點(diǎn)，影響因素亦不相同。臨床實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)所用的方法，明確易受的干擾因素：如不同血紅蛋白組分、高HbF;餐后急性產(chǎn)生的可逆性葡萄糖血紅蛋白中間產(chǎn)物（不穩(wěn)定GHB或pre-A1c）,同時(shí)，樣本的保存對(duì)某些實(shí)驗(yàn)方法有較大的影響。四、GHB測(cè)定國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化1995年國(guó)際臨床化學(xué)組織（IFCC）建立了工作組，以研發(fā)HbA1c測(cè)定的原級(jí)參考物和參考方法為目的，在其建立的實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)中，使用純化的HbA1c和HbA0

20、進(jìn)行校準(zhǔn)，并致力于建立與NGSP網(wǎng)絡(luò)結(jié)果間的聯(lián)系。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，IFCC的HbA1c結(jié)果略低于NGSP結(jié)果。在NGSP的中心參考實(shí)驗(yàn)室內(nèi)將建立IFCC參考方法。糖化血紅蛋白測(cè)定方法簡(jiǎn)述糖化血紅蛋白測(cè)定（glycosylatedhemoglobinA,GHb）成人紅細(xì)胞中的血紅蛋白有HbA（占95%97%以上），HbA2（占2.5%）,HbF（占0.2%）。當(dāng)HbA中的部分血紅蛋白被糖基化后，其中由于HbA的B鏈N末端的纈氨酸分子與葡萄糖等己糖分子相結(jié)合而使其在血紅蛋白電泳中成為HbA之前的快泳、HbA1組分，在離子交換柱層析中亦在HbA之前首先被洗脫，糖化Hb可分為HbAla（其中與1,6-二

21、磷酸果糖結(jié)合的為HbAlal；與6-磷酸葡萄糖結(jié)合的為HbA1a2）,HbA1b（尚無(wú)明確定義，包括HbA1b1,HbA1b2,HbA1b3）,HbA1e（與葡萄糖結(jié)合）和HbA1d（a鏈和B鏈內(nèi)氨基以及a鏈的N末端基團(tuán)上的烯化血紅蛋白；包括HbAIdl,HbA1d2,HbA1d3）共九種。最重要的是HbAIc.HbAle的生成量取決于血糖的濃度，正常人約占4%6%。由于紅細(xì)胞的半壽期是60天，所以GHb的測(cè)定可以反映測(cè)定前8周左右病人的平均血糖水平。GHb測(cè)定方法很多，兩種最基本的方法是：測(cè)定HbA1組分和僅測(cè)定HbA1c.高壓液相色譜（HPLC）法可精確分離HbA1各組分；并分別得出HbA

22、la、HbAlb、HbAlc、HbA1d的百分比，CV3%，是參考方法，其次還有低壓液相色譜LPLC）,目前二者均有高精度的自動(dòng)化儀器，作為常規(guī)方法用于臨床；硼酸親和柱層析法CV（1%4.7%）,陽(yáng)離子交換柱層析法CV（2%16%）,測(cè)定的血紅蛋白類型為HbA1.前者在樣本量不大的實(shí)驗(yàn)室仍可使用；后者在分離過(guò)程中對(duì)pH和溫度的要求極高，HbF是其干擾因素。電泳法CV（4%10%）,分離Hb類型和干擾因素與陽(yáng)離子交換柱層析法相同；比色法可用于自動(dòng)生化儀，無(wú)血紅蛋白分離步驟，干擾因素小，具特異性和敏感性，但CV較大（4%18%）,且樣品用量大，用濃度單位報(bào)告的方式還未被廣大臨床醫(yī)師接受。一些醫(yī)院用

23、的糖化設(shè)備1.糖化血紅蛋白分析系統(tǒng)型號(hào):HLC-723G7HLC-723G7是由最新出品的全自動(dòng)糖化血紅蛋白分析儀。離子交換HPLC法是HbA1c檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，得到NGSP認(rèn)證。檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確精密CV<1%。G7的檢測(cè)速度相當(dāng)快，每個(gè)測(cè)試只需1.2分鐘，它的操作也相當(dāng)簡(jiǎn)便，原始試管即可上機(jī)測(cè)試，無(wú)需人員看護(hù)。更有急診插入功能。日常維護(hù)全部自動(dòng)進(jìn)行，所有的設(shè)計(jì)確保最大程度上的解放人力?？焖贆z測(cè)從開機(jī)到報(bào)告第一個(gè)結(jié)果，僅需3.6分鐘。檢測(cè)時(shí)間為1.2分鐘。設(shè)計(jì)精巧該儀器體積，其長(zhǎng)、寬、高均在50cm左右，重量?jī)H為50Kg。操作簡(jiǎn)便標(biāo)本無(wú)需前處理，只需放好樣本架，輕輕一按啟動(dòng)鍵。維護(hù)簡(jiǎn)單機(jī)器自動(dòng)

24、進(jìn)行日常維護(hù)?？蛇x性強(qiáng)不同型號(hào)的原始管均可連續(xù)進(jìn)樣，帶條型碼的原始管與不帶條型碼的二級(jí)管均可置于試管架上應(yīng)用。功能強(qiáng)大具備急診插入優(yōu)先檢測(cè)功能，主機(jī)查詢功能，試劑量監(jiān)測(cè)直觀。準(zhǔn)確精密對(duì)穩(wěn)定的HbAlc進(jìn)行直接測(cè)定，其CV小于1%。2.全自動(dòng)糖化血紅蛋白分析裝置HS-12HS-10性能特點(diǎn)：-采用“金標(biāo)準(zhǔn)”一一離子交換高效液相層析法-最新開發(fā)的非多孔離子交換HPLC常光特有的即插式層析柱，裝卸時(shí)不需要工具，使部件更換簡(jiǎn)單易行"全自動(dòng)高速檢測(cè)90秒/樣本-常光通過(guò)光感原理，開發(fā)出獨(dú)特的可變稀釋倍率功能，可智能地隨樣品濃度改變稀釋倍率，大大提咼了檢測(cè)范圍"采用離子交換高壓液相層析

25、法，對(duì)穩(wěn)定的HbAlc進(jìn)行直接測(cè)定，C.V.<0.5%共存干擾物影響極小-完美的自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)：自動(dòng)添加、自動(dòng)搬送試管、代條形碼的采血管與不帶條形碼的樣本管均可檢測(cè)，100個(gè)樣本自動(dòng)進(jìn)樣器-人性化的急診優(yōu)先裝置"通過(guò)NGSP認(rèn)證、日本糖尿病學(xué)會(huì)Lot2標(biāo)準(zhǔn)做GHb定標(biāo)-彩色觸摸式液晶顯示屏，可視報(bào)警提示，自動(dòng)報(bào)告工作狀況-自動(dòng)化程度高，自動(dòng)感應(yīng)試劑量的狀況、自我診斷、自動(dòng)進(jìn)行日常維護(hù)等3.美國(guó)Bio-RadD-10糖化血紅蛋白儀、美國(guó)Bio-RadDiaSTAT糖化血紅蛋白儀。儀器介紹:糖化血紅蛋白是反映血液中葡萄糖水平的一個(gè)中長(zhǎng)期指標(biāo)，國(guó)際上通常將其作為糖尿病血糖控制的“金標(biāo)準(zhǔn)

26、”對(duì)預(yù)示微小血管病變，評(píng)估糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展有著重要的臨床意義。同時(shí)糖化血紅蛋白可作為輕癥、2型及“穩(wěn)性”糖尿病的早期診斷指標(biāo)，尤其對(duì)于糖尿病的篩選普查具有早期提示價(jià)值。伯樂（Bio-Rad）監(jiān)測(cè)糖化血紅蛋白的產(chǎn)品均已經(jīng)通過(guò)了美國(guó)全國(guó)糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化項(xiàng)目（NGSP）認(rèn)證，并且是NGSP的溯源試驗(yàn)一一美國(guó)糖尿病控制與并發(fā)癥臨床試驗(yàn)（DCCT）的唯一產(chǎn)品供應(yīng)商，適用于不同測(cè)試量的醫(yī)院臨床試驗(yàn)室。檢測(cè)原理：D-10TM糖化血紅蛋白檢測(cè)系統(tǒng)使用高壓液相色譜原理（HPLC）。全血樣本經(jīng)歷一個(gè)自動(dòng)兩步驟稀釋過(guò)程并引導(dǎo)入分析流通道。預(yù)稀釋樣本則省略了自動(dòng)稀釋步驟，預(yù)稀釋樣本被直接吸入并被引導(dǎo)入分析流

27、通道。根據(jù)血紅蛋白與其他物質(zhì)的離子強(qiáng)度的差異，分離出血紅蛋白，然后通過(guò)過(guò)濾器光度計(jì)，在415nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。系統(tǒng)軟件對(duì)數(shù)據(jù)校正后，產(chǎn)生一個(gè)樣本報(bào)告和每個(gè)樣本的色譜圖，從而計(jì)算出HbA1c的濃度比值。江蘇省人民醫(yī)院臨床檢驗(yàn)科也在使用這種設(shè)備。4.拜耳BayerDCA2000+糖化血紅蛋白儀HbA1C檢測(cè)“金標(biāo)準(zhǔn)”-尿微量白蛋白分析檢測(cè)項(xiàng)目：尿微量白蛋白糖化血紅蛋白HbA1C長(zhǎng)期監(jiān)控糖尿病臨床實(shí)驗(yàn)室HbA1C對(duì)過(guò)去三個(gè)月監(jiān)控糖尿病提供十分重要的指標(biāo)HbAIC對(duì)總死亡率的預(yù)測(cè)價(jià)值超過(guò)膽固醇濃度、體重指數(shù)和血壓臨床實(shí)驗(yàn)室HbAIC下降1%導(dǎo)致微血管并發(fā)癥危險(xiǎn)性減少35%臨床實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格控制血糖水平

28、可使眼睛病變、神經(jīng)病變、心血管病變和腎臟病變降低尿微量白蛋白-發(fā)現(xiàn)、檢測(cè)糖尿病腎病約30%的胰島素依賴性的糖尿病患者將發(fā)展為糖尿病腎病Microalbuminuria的早期發(fā)現(xiàn)將指示可能發(fā)展為腎衰的糖尿病腎病的患者的晚期發(fā)展Microalbuminuria也是冠心病和其他脈管疾病的指標(biāo)可靠的HbAIC結(jié)果只需6分鐘最近的研究指出“DCA2000+提供的及時(shí)反饋導(dǎo)致6-12月隨訪HbAIC顯著下降.”尿微量白蛋白結(jié)果只需7分鐘A：C的比值被用來(lái)校正尿濃度造成的差別，提高了結(jié)果的臨床意義允許任何尿樣的測(cè)試無(wú)比的方便診室內(nèi)即得結(jié)果，無(wú)需等待，無(wú)需不必要的再診檢測(cè)HbA1C只需1uL血，節(jié)省時(shí)間，減少

29、患者的不適測(cè)定儀自動(dòng)計(jì)算A：C比值，您可以任何時(shí)間使用任意標(biāo)本小巧、輕便、移動(dòng)方便杰出的準(zhǔn)確性和精確性單克隆抗體方法檢測(cè)HbA1C保證了杰出的準(zhǔn)確度和精密度，避免了血球蛋白因子的干擾相關(guān)性研究顯示和HPLC（高壓液相）檢測(cè)法的一致性達(dá)到99%2.6%*的變異系數(shù)（CV）意味著化驗(yàn)結(jié)果的可靠性國(guó)家糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化項(xiàng)目（NGSP）注冊(cè)方法，美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)（ADA）*推薦方法（*正常范圍內(nèi)的患者的CV值，*最近的文件上的數(shù)據(jù)證明）操作簡(jiǎn)單只需三步：插入試劑盒、拔掉尾部、關(guān)上門全部自帶試劑盒，無(wú)需試管，試劑，混合和手工操作友好的操作界面三步快速檢測(cè)HbA1C長(zhǎng)期、準(zhǔn)確的糖尿病檢測(cè)器發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病的早

30、期指標(biāo)提供立即的治療方案5.產(chǎn)品名稱：韓國(guó)i-CHROMAReader免疫熒光分析儀（糖化血紅蛋白）產(chǎn)品價(jià)格：80000¥規(guī)格：免疫熒光定量法產(chǎn)地：韓國(guó)詳細(xì)說(shuō)明1. 通過(guò)FDA、CE、SFDA、KFDA,SKUP認(rèn)證2. 完善的POCT檢測(cè)系統(tǒng)、多項(xiàng)目的檢測(cè)平臺(tái)設(shè)計(jì)精巧、便于攜帶、界面友好，可快速定量檢測(cè)全程CRP（含超敏CRP、常規(guī)CRP）、HbAlc、MAU、PSA、AFP、CEA、cTnl等7個(gè)項(xiàng)目3. 先進(jìn)的檢測(cè)技術(shù)、第三代POCT產(chǎn)品采用先進(jìn)的免疫熒光定量技術(shù)。方法學(xué)先進(jìn)、檢測(cè)靈敏度可達(dá)到pg/ml、具備內(nèi)置質(zhì)控，整體檢測(cè)系統(tǒng)的CV<5%。4. 超寬線性范圍、項(xiàng)目整合

31、的完美體現(xiàn)全程C-反應(yīng)蛋白檢測(cè)項(xiàng)目，同時(shí)包含hsCRP和常規(guī)CRP檢測(cè)，一卡雙項(xiàng)，一次檢測(cè)同時(shí)出具兩個(gè)檢測(cè)結(jié)果；有效降低檢測(cè)成本。5. 快速、準(zhǔn)確、大批量、低成本的檢測(cè)所有檢測(cè)項(xiàng)目均在315分鐘內(nèi)完成，儀器內(nèi)的檢測(cè)速度13秒/測(cè)試，可以滿足大批量檢測(cè)的要求。無(wú)隱蔽性成本；如定標(biāo)液、沖洗液等，成本核算直接、可靠。6. 內(nèi)置質(zhì)控的模式，強(qiáng)大的項(xiàng)目擴(kuò)展功能7具備儲(chǔ)存、查詢、打印功能；可與LIS系統(tǒng)連接。6.Ultra2全自動(dòng)糖化血紅蛋白分析儀順德第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科最近引進(jìn)一臺(tái)美國(guó)Ultra2全自動(dòng)分析儀。Ultra2全自動(dòng)分析儀是美國(guó)Primus公司生產(chǎn)的一款全自動(dòng)的基于親和層析檢測(cè)技術(shù)的分析儀，該

32、儀器主要用于糖化血紅蛋白的分離和定量分析。它主要由以下四部分組成：1、Ultra2液相系統(tǒng)由兩個(gè)高壓泵系統(tǒng)和可變波長(zhǎng)檢測(cè)系統(tǒng)組成。2、自動(dòng)加樣器可配置多種型號(hào)的采血管，每批最多可放置475個(gè)樣品。3、該系統(tǒng)由電腦控制并自動(dòng)存儲(chǔ)數(shù)據(jù)。4、基于Windows操作系統(tǒng)的軟件提供實(shí)時(shí)的層析圖，并進(jìn)行系統(tǒng)狀態(tài)監(jiān)測(cè)，可通過(guò)鍵盤輸入或掃描條形碼來(lái)實(shí)現(xiàn)樣品的識(shí)別。Ultra2分析儀運(yùn)用硼酸鹽親和高效液相色譜原理(HPLC),采用枸櫞酸納抗凝，糖化血紅蛋白檢驗(yàn)精度高，結(jié)果可靠，變異系數(shù)(CV)小于2%,檢測(cè)快速，每個(gè)測(cè)試僅需2分鐘，抗干擾性強(qiáng)，是全國(guó)臨檢操作規(guī)程推薦的新一代的檢測(cè)儀器。糖化血紅蛋白(GHb)對(duì)糖

33、尿病的控制有重要的臨床意義。GHb值反應(yīng)紅細(xì)胞一半壽命時(shí)(約60天)的血糖水平。如果采取控制飲食、適度鍛煉并注射胰島素等措施會(huì)改善GHb值，接近或在正常范圍內(nèi)。而不加以控制和控制較差的糖尿病患者的GHb值可能是控制良好的病人的GHb值的23倍。良好的血糖控制對(duì)防止糖尿病并發(fā)癥有很大的幫助。Ultra2全自動(dòng)分析儀提供快速、準(zhǔn)確的糖化血紅蛋白檢驗(yàn)，在臨床糖尿病的診斷方面具有較大的意義。7.挪威小旋風(fēng)DedeCnsVSKI殆匕関貉w.w.w.lmabcihpTcnrri一點(diǎn)血樣四分鐘，檢測(cè)糖化快而準(zhǔn)：以檢測(cè)糖化血紅蛋白項(xiàng)目為例：操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，僅需4分鐘；所需標(biāo)本量少（5ul全血）；變異系數(shù)?。恢貜?fù)性好；干擾因素小,特異性強(qiáng)；可用手指末稍血，可單人份操作，極為方便。權(quán)威性：該系統(tǒng)已通過(guò)歐洲糖化血紅蛋白參比實(shí)驗(yàn)室（ERL）的鑒定；通過(guò)美國(guó)FDA的認(rèn)證。標(biāo)準(zhǔn)化：該系統(tǒng)按照歐洲糖化血紅蛋白參考實(shí)驗(yàn)室所推薦的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。準(zhǔn)確性：該系統(tǒng)測(cè)量的線性范圍為3-18%，整個(gè)測(cè)量范圍內(nèi)的變異系數(shù)（CV）值低于5%,般在3%以下。