1.2基因工程的基本操作程序習習題

1、習題：§基因工程的基本操作程序 備課時間：2月25日 姓名： 班級： 小組： 1下列關(guān)于cDNA文庫和基因組文庫的說法中，不正確的是()AcDNA文庫中只含有某種生物的部分基因，基因組文庫中含有某種生物的全部基因B如果某種生物的cDNA文庫中的某個基因與該生物的基因組文庫中的某個基因控制的性狀相同，則這兩個基因的結(jié)構(gòu)也完全相同CcDNA文庫中的基因都沒有啟動子D一種生物的cDNA文庫可以有許多種，但基因組文庫只有一種2限制酶Mun 和限制酶EcoR 的識別序列及切割位點分別是CAATTG和GAATTC。下圖表示四種質(zhì)粒和目的基因，其中，箭頭所指部位為酶的識別位點，質(zhì)粒的陰影部分表示標

2、記基因。適于作為圖示目的基因運載體的質(zhì)粒是(A)3下圖是將人的生長激素基因?qū)爰毦鶧細胞內(nèi)，產(chǎn)生“工程菌”的示意圖。所用的載體為質(zhì)粒A。若已知細菌D細胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導入細菌后，其上的基因能得到表達。能表明目的基因已與載體結(jié)合，并被導入受體細胞的結(jié)果是()A在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基和含四環(huán)素的培養(yǎng)基上均能生長繁殖的細菌B在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基和含四環(huán)素的培養(yǎng)基上都不能生長繁殖的細菌C在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長繁殖，但在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長繁殖的細菌D在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能生長繁殖，但在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長繁殖的細菌4將一個目的基因放入PCR擴增儀中

3、,其他條件都具備的條件下循環(huán)30次,合成的目的基因個數(shù)為()。 5人們常選用的細菌質(zhì)粒分子往往帶有一個抗生素抗性基因,該抗性基因的主要作用是()。A.提高受體細胞在自然環(huán)境中的耐藥性 B.有利于對目的基因是否成功導入進行檢測C.增加質(zhì)粒分子的相對分子質(zhì)量 D.便于與外源基因連接6甲、乙兩圖表示從細菌細胞中獲取目的基因的兩種方法，以下說法中錯誤的是()A甲方法可建立該細菌的基因組文庫 B乙方法可建立該細菌的cDNA文庫C甲方法要以脫氧核苷酸為原料 D乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與7我國科學工作者培育的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，其抗蟲基因來源于()A蘇云金芽孢桿菌中的抗蟲基因 B棉鈴蟲變異形成的致死基因C寄生在棉鈴蟲

4、體內(nèi)的線蟲基因 D普通棉的突變基因8下圖是獲得抗蟲棉的技術(shù)流程示意圖?？敲顾乜剐曰?kanr)常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下列敘述正確的是()A構(gòu)建重組質(zhì)粒過程中需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B愈傷組織的分化產(chǎn)生了不同基因型的植株C卡那霉素抗性基因(kanr)中有該過程所利用的限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點D抗蟲棉有性生殖后代能保持抗蟲性狀的穩(wěn)定遺傳9以下為形成cDNA過程和PCR擴增過程示意圖。據(jù)圖分析，下列說法正確的是()A催化過程的酶是RNA聚合酶 B過程發(fā)生的變化是引物與單鏈DNA結(jié)合C催化過程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高溫D如果RNA

5、單鏈中A與U之和占該鏈堿基含量的40%，則一個雙鏈DNA中，A與U之和也占該DNA堿基含量的40%10下圖表示細胞膜上乙酰膽堿(一種神經(jīng)遞質(zhì))受體基因的克隆技術(shù)操作過程，下列相關(guān)分析中正確的是 ()A獲得該mRNA的最佳材料是受精卵B構(gòu)建基因表達載體最可能使用的載體是大腸桿菌C完成過程必不可少的酶分別是逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶D探針篩選的目的是淘汰被感染的細菌，獲得未被感染的細菌11基因工程是在DNA分子水平上進行設(shè)計施工的，在基因操作的基本步驟中，不進行堿基互補配對的步驟是( )A人工合成基因 B制備重組DNA分子C把目的基因?qū)胧荏w細胞 D目的基因的檢測和表達12采用基因工程技術(shù)將人凝血因子

6、基因?qū)肷窖蚴芫?，培育出了轉(zhuǎn)基因羊。但是，人凝血因子只存在于該轉(zhuǎn)基因羊的乳汁中。以下有關(guān)敘述，正確的是( )A如果人凝血因子基因的核苷酸序列已知，可用人工合成的方法獲得該目的基因B人體細胞中凝血因子基因進入羊受精卵細胞后，其傳遞和表達不再遵循中心法則C在該轉(zhuǎn)基因羊體內(nèi)，人凝血因子基因存在于乳腺細胞中，而不存在于其他體細胞中D人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA13科學家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募毎酥?，?jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中，在醫(yī)學研究及相關(guān)疾病治療方面都具有重要意義。下列有關(guān)敘

7、述錯誤的是( )A選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞具有全能性B采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細胞內(nèi)是否成功表達C人的生長激素基因能在小鼠細胞內(nèi)表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用D轉(zhuǎn)基因小鼠的肝細胞含有人的生長激素基因14兩個核酸片段在適宜的條件下，經(jīng)X酶的作用，發(fā)生下述變化，則X酶是A. DNA連接酶 BRNA聚合酶 CDNA聚合酶 D限制酶15科學家通過基因工程的方法，使馬鈴薯塊莖含有人奶主要蛋白，此過程不涉及 ADNA按照堿基互補配對原則自我復制 BDNA以其中一條鏈為模板合成RNA CRNA以自身為模板自我復制 D按照RNA密碼子的排列順序合成蛋白質(zhì)16細

8、胞內(nèi)合成DNA連接酶的場所是 （ ）A細胞核 B核區(qū) C核糖體 D內(nèi)質(zhì)網(wǎng)17某科學工作者把兔子的血紅蛋白的信使RNA加入到大腸桿菌的提取液中，在這個細胞的合成系統(tǒng)中能合成兔子的血紅蛋白，這個事實說明（ ）A蛋白質(zhì)合成是在核糖體上進行的 B各種生物共用一套遺傳密碼C兔子和大腸桿菌的基因發(fā)生了重組 D兔子的基因發(fā)生了突變18能夠使植物體表達動物蛋白的育種方法是 （ ）A單倍體育種 B雜交育種 C基因工程育種 D多倍體育種答題卡 姓名： 班級： 12345678910111213141516171819(2012·全國新課標)根據(jù)基因工程的有關(guān)知識，回答下列問題：(1)限制性內(nèi)切酶切割DN

9、A分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有_和_。(2)質(zhì)粒運載體用EcoR切割后產(chǎn)生的片段如下：AATTCGGCTTAA為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoR切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點是_。(3)按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即_DNA連接酶和_DNA連接酶。(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是_，產(chǎn)物是_。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，常采用_技術(shù)。(5)基因工程中除質(zhì)粒外，_和_也可作為運載體。(6)若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是_。答案：(1)平末端和黏性末端(2)切割產(chǎn)生的DNA

10、片段末端與EcoR切割產(chǎn)生的相同(3)T4E·coli(4)mRNA單鏈DNAPCR(聚合酶鏈式反應(yīng))(5)動植物病毒噬菌體的衍生物(6)未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力極弱12. 2013·北京師大附中質(zhì)量檢測(13分)棉鈴蟲是一種危害棉花的害蟲。我國科學工作者發(fā)現(xiàn)一種生活在棉鈴蟲消化道內(nèi)的蘇云金桿菌能分泌一種毒蛋白使棉鈴蟲致死，而這種毒蛋白對人畜無害。通過基因工程方法，科學家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花植株并成功表達，棉鈴蟲吃了這種轉(zhuǎn)基因棉花的植株后就會死亡?；ǚ酃芡ǖ婪ㄊ侵福豪弥参锘ǚ勖劝l(fā)時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進而導入尚不具備細

11、胞壁的合子或早期胚細胞，最終形成含有目的基因的種胚。此種方法的優(yōu)點是操作簡便，省去了組培的復雜過程。(1)利用花粉管通道法將毒蛋白基因?qū)朊藁毎?，此過程是基因操作的基本步驟中的第三步，即_。此前一步要把目的基因整合到Ti質(zhì)粒的TDNA上，目的是為了_。如果我們已知毒蛋白的氨基酸序列，可以采用_的方法獲取毒蛋白基因。(2)基因工程的工具酶可以將目的基因切下并連接到運載體上。限制酶可以識別特定的DNA序列，并切斷_鍵。下列所示的黏性末端是由_種限制酶作用產(chǎn)生的。(3)用標記的特異性抗體可以直接檢測毒蛋白，這種檢測方法稱為_。也可在宏觀性狀水平檢測該目的基因是否表達，方法是_。已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素

12、蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風險相對較小，原因是人類腸上皮細胞_。答案：將重組DNA導入受體細胞Ti質(zhì)粒能將目的基因整合到棉花染色體的DNA上人工法化學合成目的基因(2)磷酸二酯鍵4(3)抗原抗體雜交讓害蟲吃棉花，觀察害蟲的生存狀態(tài)表面無特異性受體7.(預測題)科學家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達。但在進行基因工程的操作過程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶的識別序列和切點是GGATCC，限制酶的識別序列和切點是GATC，據(jù)圖回答：(1)過程

13、表示的是采取_的方法來獲取目的基因。(2)根據(jù)圖示分析，在構(gòu)建基因表達載體過程中，應(yīng)用限制酶_切割質(zhì)粒，用限制酶_切割目的基因。用限制酶切割目的基因和運載體后形成的黏性末端通過_原則進行連接。(3)人體的生長激素基因能在細菌體內(nèi)成功表達是因為_。寫出目的基因?qū)爰毦斜磉_的過程_。(4)將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長，說明大腸桿菌B已導入了_，反之則沒有導入。答案：(1)反轉(zhuǎn)錄(人工合成)(2) 堿基互補配對(3)共用一套密碼子(4)普通質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒10(11分)在某些深海魚中發(fā)現(xiàn)的抗凍蛋白基因afp對提高農(nóng)作物的抗寒能力有較好的應(yīng)用價值。右圖所示是獲得轉(zhuǎn)基因萵苣的技術(shù)流程，請據(jù)圖回答下列問題：(1)獲取目的基因的主要途徑包括從自然界已有的物種中分離和_。(2)過程需要的酶有_、_。(3)重組質(zhì)粒除了帶有抗凍蛋白基因afp以外，還必須含有啟動子、終止子和_，這樣才能構(gòu)成一個完整的基因表達載體。(4)如果受體細胞C1是土壤農(nóng)桿菌，則將目的基因?qū)胨哪康氖抢棉r(nóng)桿菌的_，使目的基因進入受體細胞C2，并將其插入到受體細胞