第六章 一般毒性2-2

1、毒性評(píng)價(jià)或安全性評(píng)價(jià)的基本目的毒性評(píng)價(jià)或安全性評(píng)價(jià)的基本目的o 受試物毒作用的表現(xiàn)和性質(zhì)受試物毒作用的表現(xiàn)和性質(zhì)o 劑量反應(yīng)（效應(yīng)）研究劑量反應(yīng)（效應(yīng)）研究o 確定毒作用的靶器官確定毒作用的靶器官o 確定損傷的可逆性確定損傷的可逆性o 其它：敏感檢測(cè)指標(biāo)和生物學(xué)標(biāo)志、毒作用機(jī)制、其它：敏感檢測(cè)指標(biāo)和生物學(xué)標(biāo)志、毒作用機(jī)制、毒物動(dòng)力學(xué)、中毒的解救措施毒物動(dòng)力學(xué)、中毒的解救措施第四節(jié)第四節(jié) 短期、亞慢性和慢性短期、亞慢性和慢性毒性作用毒性作用一、蓄積作用一、蓄積作用檢測(cè)方法檢測(cè)方法o 蓄積作用（蓄積作用（accumulationaccumulation）：）： 外來(lái)化合物進(jìn)入機(jī)外來(lái)化合物進(jìn)入機(jī)體之

2、后，經(jīng)代謝或原型排出體外，但當(dāng)其連續(xù)、反體之后，經(jīng)代謝或原型排出體外，但當(dāng)其連續(xù)、反復(fù)進(jìn)入機(jī)體，而且吸收速度或總量超過(guò)代謝轉(zhuǎn)化與復(fù)進(jìn)入機(jī)體，而且吸收速度或總量超過(guò)代謝轉(zhuǎn)化與排出的速度或總量時(shí)，化合物就有可能在機(jī)體內(nèi)逐排出的速度或總量時(shí)，化合物就有可能在機(jī)體內(nèi)逐漸增加并貯留，這種現(xiàn)象稱為化合物的蓄積作用漸增加并貯留，這種現(xiàn)象稱為化合物的蓄積作用 o 蓄積庫(kù)（蓄積庫(kù)（depot）：化學(xué)物蓄積的組織器官部位。常見(jiàn)的蓄）：化學(xué)物蓄積的組織器官部位。常見(jiàn)的蓄積庫(kù)包括：積庫(kù)包括：血漿蛋白、脂肪組織、肝臟、腎臟、骨骼血漿蛋白、脂肪組織、肝臟、腎臟、骨骼o 物質(zhì)蓄積物質(zhì)蓄積（material accumula

3、tionmaterial accumulation） ：用分析方法能測(cè)得：用分析方法能測(cè)得機(jī)體內(nèi)存在該化合物或其代謝產(chǎn)物，且隨接觸時(shí)機(jī)體內(nèi)存在該化合物或其代謝產(chǎn)物，且隨接觸時(shí)間延長(zhǎng)而增加間延長(zhǎng)而增加o 功能功能( (機(jī)能機(jī)能) )蓄積蓄積(functional accumulation)(functional accumulation) ：在機(jī)體內(nèi)：在機(jī)體內(nèi)雖不能被測(cè)出，卻在長(zhǎng)期接觸下出現(xiàn)了慢性中毒雖不能被測(cè)出，卻在長(zhǎng)期接觸下出現(xiàn)了慢性中毒現(xiàn)象現(xiàn)象 o 蓄積作用是發(fā)生慢性中毒的物質(zhì)基礎(chǔ)蓄積作用是發(fā)生慢性中毒的物質(zhì)基礎(chǔ)o 一種外源化學(xué)物有無(wú)蓄積作用是評(píng)定該化學(xué)一種外源化學(xué)物有無(wú)蓄積作用是評(píng)定該化

4、學(xué)物是否可能引起潛在慢性中毒是論據(jù)之一，物是否可能引起潛在慢性中毒是論據(jù)之一，也是制定衛(wèi)生限量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)安全系數(shù)的一種依也是制定衛(wèi)生限量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)安全系數(shù)的一種依據(jù)。據(jù)。 o 求外來(lái)化學(xué)物的蓄積系數(shù)求外來(lái)化學(xué)物的蓄積系數(shù)o 了解蓄積毒性的強(qiáng)度了解蓄積毒性的強(qiáng)度o 為慢性及其它有關(guān)毒性試驗(yàn)提供劑量選擇依據(jù)為慢性及其它有關(guān)毒性試驗(yàn)提供劑量選擇依據(jù)方法方法o 理化方法：應(yīng)用化學(xué)分析或其他技術(shù)測(cè)定化理化方法：應(yīng)用化學(xué)分析或其他技術(shù)測(cè)定化學(xué)物進(jìn)入機(jī)體后在體內(nèi)含量變化的過(guò)程學(xué)物進(jìn)入機(jī)體后在體內(nèi)含量變化的過(guò)程 該方法可測(cè)定化學(xué)物的半衰期，故可作為該方法可測(cè)定化學(xué)物的半衰期，故可作為檢測(cè)物質(zhì)蓄積的方法檢測(cè)物質(zhì)蓄積的方

5、法o 生物學(xué)方法：將多次染毒與一次染毒所產(chǎn)生生物學(xué)方法：將多次染毒與一次染毒所產(chǎn)生的效應(yīng)進(jìn)行比較。所測(cè)蓄積性不能區(qū)分功能的效應(yīng)進(jìn)行比較。所測(cè)蓄積性不能區(qū)分功能蓄積和物質(zhì)蓄積蓄積和物質(zhì)蓄積 o蓄積系數(shù)法蓄積系數(shù)法 ：在一定期限之內(nèi)以低于致死劑量：在一定期限之內(nèi)以低于致死劑量(LD(LD5050) )，每日給予，每日給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，直至出現(xiàn)預(yù)計(jì)的毒性效應(yīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，直至出現(xiàn)預(yù)計(jì)的毒性效應(yīng)( (或死亡或死亡) )為止，計(jì)算達(dá)到預(yù)計(jì)為止，計(jì)算達(dá)到預(yù)計(jì)效應(yīng)的總累積劑量，求出累積劑量與一次接觸該化合物產(chǎn)生相同效效應(yīng)的總累積劑量，求出累積劑量與一次接觸該化合物產(chǎn)生相同效應(yīng)的劑量的比值應(yīng)的劑量的比值 .即為蓄積系

6、數(shù)即為蓄積系數(shù)(K(K值值) ) 多用小鼠或大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，一般以死亡為指標(biāo)多用小鼠或大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，一般以死亡為指標(biāo) K=D50(n)D50()K=LD50(n)LD50()蓄積系數(shù)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)蓄積系數(shù)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)蓄積系數(shù)蓄積系數(shù)(K)蓄積作用分級(jí)蓄積作用分級(jí)5K5），），但小劑量反復(fù)與機(jī)體接觸后，紅細(xì)胞和腦組織但小劑量反復(fù)與機(jī)體接觸后，紅細(xì)胞和腦組織的乙酰膽堿酯酶可以持續(xù)降低，且伴有神經(jīng)系的乙酰膽堿酯酶可以持續(xù)降低，且伴有神經(jīng)系統(tǒng)癥狀統(tǒng)癥狀o 方法：方法： （1）急性毒性實(shí)驗(yàn)）急性毒性實(shí)驗(yàn) LD50(1) （2）1/20-1/5LD50 每日染毒每日染毒 LD50(n) （ 50%動(dòng)物死亡時(shí)累計(jì)染

7、毒的總量）動(dòng)物死亡時(shí)累計(jì)染毒的總量） （3）計(jì)算）計(jì)算K值：值：K=LD50(n)/LD50(1) 若累計(jì)染毒量已達(dá)到若累計(jì)染毒量已達(dá)到5個(gè)個(gè)LD50，動(dòng)物仍未死亡或死亡，動(dòng)物仍未死亡或死亡未達(dá)到半數(shù)，可終止實(shí)驗(yàn)，其值按未達(dá)到半數(shù)，可終止實(shí)驗(yàn)，其值按 作為結(jié)果。作為結(jié)果。1. 固定劑量法固定劑量法o 方法：方法：（1）測(cè)定）測(cè)定LD50(1)（2）第）第1-4天，先給予天，先給予0.1LD50(1)，以后每，以后每4天天 遞增劑量遞增劑量1.5倍倍 LD50(n)（3）計(jì)算值。）計(jì)算值。 28天時(shí)死亡動(dòng)物仍未達(dá)到半數(shù)，可停止實(shí)驗(yàn)，此時(shí)的總天時(shí)死亡動(dòng)物仍未達(dá)到半數(shù)，可停止實(shí)驗(yàn)，此時(shí)的總量達(dá)到量達(dá)

8、到12.8LD50(1)，即，即12.8，可認(rèn)為基本無(wú)蓄積。，可認(rèn)為基本無(wú)蓄積。 . 遞增劑量法遞增劑量法o方法：分為方法：分為1/2、1/5、1/10、1/20 LD50四個(gè)劑量組和對(duì)照四個(gè)劑量組和對(duì)照組，每組組，每組10只動(dòng)物，每天染毒一次，共染毒只動(dòng)物，每天染毒一次，共染毒20天，觀察天，觀察每組動(dòng)物死亡數(shù)量。每組動(dòng)物死亡數(shù)量。o結(jié)果判定：結(jié)果判定：n蓄積不明顯：蓄積不明顯：各劑量組均無(wú)死亡；各劑量組均無(wú)死亡；n弱蓄積性：弱蓄積性：僅僅1/2 LD50組有死亡，其它劑量組無(wú)死亡；組有死亡，其它劑量組無(wú)死亡；n中等蓄積性：中等蓄積性：1/20 LD50組無(wú)死亡，其它各組間死亡數(shù)組無(wú)死亡，其

9、它各組間死亡數(shù)有劑量反應(yīng)關(guān)系；有劑量反應(yīng)關(guān)系； 強(qiáng)蓄積性：強(qiáng)蓄積性：1/20 LD50組有死亡，且有劑量反應(yīng)關(guān)系。組有死亡，且有劑量反應(yīng)關(guān)系。 . 劑量固定的劑量固定的20天蓄積法天蓄積法 o蓄積系數(shù)法蓄積系數(shù)法 ：在一定期限之內(nèi)以低于致死劑量：在一定期限之內(nèi)以低于致死劑量(LD50)，每日給，每日給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，直至出現(xiàn)預(yù)計(jì)的毒性效應(yīng)予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，直至出現(xiàn)預(yù)計(jì)的毒性效應(yīng)(或死亡或死亡)為止，計(jì)算達(dá)到預(yù)為止，計(jì)算達(dá)到預(yù)計(jì)效應(yīng)的總累積劑量，求出累積劑量與一次接觸該化合物產(chǎn)生相同計(jì)效應(yīng)的總累積劑量，求出累積劑量與一次接觸該化合物產(chǎn)生相同效應(yīng)的劑量的比值效應(yīng)的劑量的比值 .即為蓄積系數(shù)即為蓄積系數(shù)(K值

10、值) 多用小鼠或大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，一般以死亡為指標(biāo)多用小鼠或大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，一般以死亡為指標(biāo) K=D50(n)D50()K=LD50(n)LD50()o生物半減期法：生物半減期法：利用動(dòng)力學(xué)原理利用動(dòng)力學(xué)原理 生物半衰期法生物半衰期法從上圖可以看出，一種化學(xué)物質(zhì)若以從上圖可以看出，一種化學(xué)物質(zhì)若以t1/2相等的時(shí)間間距染毒，其在體內(nèi)經(jīng)相等的時(shí)間間距染毒，其在體內(nèi)經(jīng)過(guò)過(guò)6個(gè)個(gè)t1/2的接觸期就可以基本上達(dá)到蓄積的極限，此時(shí)理論蓄積量達(dá)到極的接觸期就可以基本上達(dá)到蓄積的極限，此時(shí)理論蓄積量達(dá)到極限的限的98.4%，此后即使繼續(xù)接觸該物質(zhì)，機(jī)體的蓄積量基本上也不會(huì)增加。，此后即使繼續(xù)接觸該物質(zhì)，機(jī)體的

11、蓄積量基本上也不會(huì)增加。o 重復(fù)劑量毒性作用重復(fù)劑量毒性作用/ /亞急性毒性作用亞急性毒性作用o 指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人連續(xù)接觸外源化學(xué)物指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人連續(xù)接觸外源化學(xué)物4 4周周（2828天）內(nèi)所產(chǎn)生的毒效應(yīng)。天）內(nèi)所產(chǎn)生的毒效應(yīng)。o 能初步確定相應(yīng)的能初步確定相應(yīng)的NOAEL/LOAELNOAEL/LOAELo 我國(guó)毒理學(xué)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)中內(nèi)容我國(guó)毒理學(xué)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)中內(nèi)容-食品、消毒劑、食品、消毒劑、農(nóng)藥和新化學(xué)品農(nóng)藥和新化學(xué)品o 外源化學(xué)物在長(zhǎng)期重復(fù)染毒時(shí)可產(chǎn)生與急性毒外源化學(xué)物在長(zhǎng)期重復(fù)染毒時(shí)可產(chǎn)生與急性毒性試驗(yàn)完全不同的毒作用性試驗(yàn)完全不同的毒作用o 隨著動(dòng)物的衰老，有些因素如組織易感性改變、隨著動(dòng)物的

12、衰老，有些因素如組織易感性改變、代謝和生理功能的改變，以及自發(fā)性疾病等均代謝和生理功能的改變，以及自發(fā)性疾病等均可影響毒作用的性質(zhì)和程度。可影響毒作用的性質(zhì)和程度。o 某些重要的疾病例如心臟病、慢性腎衰、腫瘤某些重要的疾病例如心臟病、慢性腎衰、腫瘤等均與年齡增長(zhǎng)有關(guān)。等均與年齡增長(zhǎng)有關(guān)。o 外源化學(xué)物的蓄積作用是發(fā)生慢性毒性作用的外源化學(xué)物的蓄積作用是發(fā)生慢性毒性作用的基礎(chǔ)基礎(chǔ)概念概念o 指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人連續(xù)較長(zhǎng)時(shí)間接觸外來(lái)化合物所出現(xiàn)的中毒指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人連續(xù)較長(zhǎng)時(shí)間接觸外來(lái)化合物所出現(xiàn)的中毒效應(yīng)。效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人連續(xù)較長(zhǎng)期（約相實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人連續(xù)較長(zhǎng)期（約相當(dāng)于生命周期當(dāng)于生命周期1/101/

13、10）接觸外源化學(xué)物所產(chǎn)生的中毒效應(yīng)。）接觸外源化學(xué)物所產(chǎn)生的中毒效應(yīng)?？煽蒾 Parkinson等等(1995)報(bào)告報(bào)告117種藥品犬亞慢性種藥品犬亞慢性(90天天)和和慢性慢性(24月月)毒性試驗(yàn)結(jié)果與大鼠毒性試驗(yàn)結(jié)果與大鼠(短期或長(zhǎng)期毒性試短期或長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)驗(yàn))的結(jié)果比較，幾乎沒(méi)有發(fā)現(xiàn)新的毒性資料，因的結(jié)果比較，幾乎沒(méi)有發(fā)現(xiàn)新的毒性資料，因此認(rèn)為動(dòng)物毒性試驗(yàn)長(zhǎng)于此認(rèn)為動(dòng)物毒性試驗(yàn)長(zhǎng)于6個(gè)月沒(méi)有必要，除非研個(gè)月沒(méi)有必要，除非研究致癌作用究致癌作用o Weil等（等（1969）報(bào)告，）報(bào)告，112種受試物中，大鼠染毒種受試物中，大鼠染毒90天后才出現(xiàn)毒性效應(yīng)的只有天后才出現(xiàn)毒性效應(yīng)的只有3種

14、，認(rèn)為大鼠種，認(rèn)為大鼠90天天實(shí)驗(yàn)即可確定受試物的實(shí)驗(yàn)即可確定受試物的NOAELo 慢性毒性試驗(yàn)傾向于和致癌試驗(yàn)合并進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)傾向于和致癌試驗(yàn)合并進(jìn)行試驗(yàn)?zāi)康脑囼?yàn)?zāi)康?o 觀察長(zhǎng)期接觸受試物的毒性效應(yīng)譜、毒作用特點(diǎn)、靶器官；觀察長(zhǎng)期接觸受試物的毒性效應(yīng)譜、毒作用特點(diǎn)、靶器官；o 探索受試物作用機(jī)制；探索受試物作用機(jī)制；o 觀察長(zhǎng)期接觸受試物所致毒性作用的可逆性；觀察長(zhǎng)期接觸受試物所致毒性作用的可逆性；o 確定長(zhǎng)期接觸受試物所致毒作用的劑量反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系，確定長(zhǎng)期接觸受試物所致毒作用的劑量反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系，確定其確定其N(xiāo)OAELNOAEL和和/ /或或LOAELLOAEL，為制定人類接觸

15、的安全限量提供依，為制定人類接觸的安全限量提供依據(jù)；據(jù)；o 觀察不同動(dòng)物對(duì)受試物的毒效應(yīng)差異，為確定適當(dāng)?shù)陌踩禂?shù)，觀察不同動(dòng)物對(duì)受試物的毒效應(yīng)差異，為確定適當(dāng)?shù)陌踩禂?shù)，將結(jié)果外推到人提供依據(jù)。將結(jié)果外推到人提供依據(jù)。兩種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：嚙齒類（大鼠），非嚙齒類（犬）兩種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：嚙齒類（大鼠），非嚙齒類（犬） 實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng)：要求為斷乳不久的動(dòng)物，小鼠體重以實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng)：要求為斷乳不久的動(dòng)物，小鼠體重以15g15g、大、大鼠鼠50-150-10g0g（610%10%） 效應(yīng)差異的時(shí)間趨勢(shì)效應(yīng)差異的時(shí)間趨勢(shì) 兩種性別的一致性兩種性別的一致性 歷史對(duì)照歷史對(duì)照復(fù)習(xí)題復(fù)習(xí)題o 毒性評(píng)價(jià)試驗(yàn)的基本目的毒性評(píng)價(jià)試驗(yàn)的基本目的o 什么