臨床細菌學(xué)檢驗的質(zhì)量控制流程

1、臨床細菌學(xué)檢驗的質(zhì)量控制流程1、質(zhì)量的概念和質(zhì)量保證影響檢驗結(jié)果質(zhì)量的因素很多，實驗過程中，儀器、試劑和操作等均會引起試驗結(jié)果的誤差,衡量檢驗結(jié)果的質(zhì)量常用準確度和精確度,或特異性和靈敏度。具體采用哪一種指標應(yīng)根據(jù)實驗的性質(zhì)決定,目前臨床細菌學(xué)檢驗的工作內(nèi)容大致有3類，衡量起質(zhì)量的技術(shù)指標不完全相同。第一類是檢出細菌的實驗，包括標本直接涂片檢查和細菌分離培養(yǎng)?，F(xiàn)代的細菌感染，混合菌較常見，一份標本中，會有2種以上細菌存在。無論標本直接涂片還是分離培養(yǎng)，檢驗結(jié)果必須如實反映感染病灶中細菌的真實情況。這類實驗的質(zhì)量,應(yīng)該用細菌檢出率或細菌分離率來衡量。第二類是鑒定細菌的實驗.通過一系列生理生化及形

2、態(tài)學(xué)、血清學(xué)的手段來鑒定病原菌。對分離到的病原菌都做出準確的鑒定，是反映細菌事工作質(zhì)量的一個重要方面。第三類是藥敏實驗.有稀釋法和紙片法,前者是半定量的實驗，可以用準確度和精密度來衡量，后者以敏感或耐藥的形式報告，屬于定性的實驗，但實驗過程中測量抑菌環(huán)是定量的指標。也應(yīng)以準確度和精確度衡量。所以實驗室人員必須清楚認識到以上這一點，在實驗室的設(shè)計和管理方面就應(yīng)該主動設(shè)置誤差檢測系統(tǒng)，實驗中一旦出現(xiàn)誤差及時發(fā)出警報，查明原因及時糾正。2、室內(nèi)質(zhì)量控制2.1 在職人員2.1。 1須受過細菌學(xué)檢驗的專門基礎(chǔ)教育以及相關(guān)的生物交全防護知識，并以細菌檢驗為專業(yè)，及時終結(jié)并積累工作經(jīng)驗。2.1 o2作人員必

3、須具有嚴謹?shù)墓ぷ鲬B(tài)度，技術(shù)操作須完全遵守操作規(guī)程，并直接參與質(zhì)量控制工作。2。1.3工作人員應(yīng)不斷加強自身的業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)，及時了解本領(lǐng)域的新進展,將所掌握的新知識應(yīng)用到實際工作中。2。1。4實驗室管理人員應(yīng)注意利用一切機會培養(yǎng)技術(shù)人員，積極參加國際、國內(nèi)學(xué)術(shù)會議、專業(yè)培訓(xùn)班，獲取新信息。因為細菌學(xué)檢驗，投資人員培訓(xùn)遠比投資與儀器設(shè)備更重要.2.2 操作手冊及參考書2。2.1細菌室可以根據(jù)自己的實際情況制訂一本指導(dǎo)日常工作、簡明扼要的操作手冊，并在工作中不斷完善和修改.2。2。2細菌室應(yīng)準備一些細菌學(xué)參考書,解決某些少見的菌種的分離鑒定,判斷細菌的致病性及向臨床醫(yī)生解釋結(jié)果時用。3、設(shè)備質(zhì)量控制3。

4、1溫箱、冰箱每日工作開始，在打開溫箱或冰箱等控溫設(shè)備前，以及下午下班前須觀察當時設(shè)備的溫度并記錄.3.2高壓滅菌器須定期檢查滅菌器的滅菌效果，至少每月1次。測試方法可用留點溫度計或嗜熱芬抱菌等，并定期維修。3。3生物安全柜新安裝必須由生產(chǎn)廠家提供安裝檢測報告,以后每年必須檢測一次，若須更換濾網(wǎng)，須由專門技術(shù)人員進行，并提供檢測報告.工作時檢測氣流、紫外燈正常與否，可用營養(yǎng)瓊脂檢測空氣中細菌的沉降數(shù)，紫外線必須有使用記錄，每3個月檢查一次性能3.4接種環(huán)要求長58cm,環(huán)直徑約3mm接種針長5-8cm3。5顯微鏡應(yīng)做好常規(guī)的清潔和保養(yǎng)。所有的技術(shù)人員必須對顯微鏡的對光、應(yīng)用和清潔正確步驟掌握。3

5、。6細菌鑒定儀應(yīng)及時更新系統(tǒng)操作軟件。定期清治儀器的探測部位，弁用標準模板進行校正，必要時按照菌株對每批號的鑒定卡、條、板進行一次測定,弁核對每個反應(yīng)和藥敏試驗的結(jié)果。4。培養(yǎng)基的質(zhì)量控制每批培養(yǎng)基應(yīng)有配制記錄,弁對不同性能的培養(yǎng)基要用以知特性的、穩(wěn)定的標準菌株進行測定弁記錄，符合要求方可應(yīng)用。培養(yǎng)基的一般質(zhì)量控制項目檢測標準檢測頻率(1)外觀液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基含指示劑的培養(yǎng)基各種培養(yǎng)基都應(yīng)啟名稱、標記和制備日期顏色、透明度、失水情況無菌落、不干裂無菌、顏色符合要求每周(2)平板深度，般培養(yǎng)基3mmMhf4-6mm每批(3)雙糖斜面底層與斜面之間至少有1cm的直立段，長度不得過2/3試管，不

6、可干裂每批（4）無菌試驗經(jīng)病壓滅菌后的培養(yǎng)基無菌分裝的試管或平板選擇性培養(yǎng)基隨機取10個，放35度孵箱24h無菌每批（5）硬度試驗固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基劃線接種應(yīng)無碎裂穿刺接種后能區(qū)分有動力或無每批監(jiān)控常規(guī)培養(yǎng)基及試劑的菌種培養(yǎng)基陽性（或生長）陰性（或不生長）監(jiān)測頻率第一套：A（每月一次）賴氨酸脫酶鳥氮酸脫竣酶精氨酸雙水解酶靛基質(zhì)v-p椽酸鹽（西蒙氏）苯丙氨酸脫氨酶遲緩愛德華菌產(chǎn)氣腸桿菌陰溝腸桿菌大腸埃希氏菌陰溝腸桿菌產(chǎn)氣腸桿菌雷氏變形桿菌弗氏構(gòu)椽酸菌弗氏構(gòu)橡酸國普通變形桿菌陰溝腸桿菌大腸埃希氏菌遲緩愛德華菌弗氏枸椽酸菌每批葡萄糖O-F銅綠假單胞菌洛菲氏不動桿菌氧化大腸埃希氏菌大腸埃希氏菌發(fā)酵

7、洛非氏不動桿菌ATCC25922不活動銅綠假單胞菌化膿性鏈球菌硝酸鹽還原銅綠假單胞菌化膿性鏈球菌氧化酶ATCC27853遲緩愛德華菌觸酶金黃色葡萄球菌大腸埃希氏菌膽?一七葉酸糞鏈球菌肺炎克雷伯氏菌丙二酸鹽產(chǎn)氣腸桿菌尿素雷極氏變形桿菌（快）動力肺炎克雷伯氏菌（慢）大腸埃希氏菌第二套：B（每批一次）巧克力球脂（HN流感血桿菌每批羊血瓊脂平板化膿性鏈球菌（小菌麥康凱落）雙糖鐵培養(yǎng)基肺炎鏈球菌（中等菌落）營養(yǎng)瓊脂大腸埃希氏菌（粉紅菌落）奇異變形桿菌（無色菌落）金黃色葡萄球菌5。試劑、染色液的質(zhì)量控制試劑的質(zhì)量控制試齊陽性控制菌種陰性控制菌監(jiān)測頻率氧化酶銅綠假單胞菌ATCC27853金黃葡萄球國大腸埃希

8、氏面ATCC25922每次凝固酶表皮葡萄球菌每次桿菌肽紙片A群鏈球菌B群鏈球菌每次Optochin紙片肺炎鏈球菌草綠色鏈球菌每次染色液的質(zhì)量控制染色液陽性控制菌種陰性控制菌監(jiān)測頻率革蘭氏染色液金黃色葡萄球菌ATCC25923大腸埃希氏菌ATCC25922每天萋納抗酸染液TB陽性的痰液不作每次鞭毛染色液普通變形桿菌福氏志賀氏每次6、藥敏試驗的質(zhì)量控制瓊脂擴散法為藥敏試驗直接測定抑菌環(huán)直徑。參考菌株分別選擇金黃色葡萄球菌ATCC25923大腸埃希氏菌ATCC2592手口銅綠假單胞菌ATCC27853由于有很多因素均能影響藥敏試驗擴散法的結(jié)果，因此對以下每一可變因素均應(yīng)按要求加以控制：6。1培養(yǎng)基的

9、成分、PH及深度：成分為水解烙蛋白瓊脂：PH為7。2+0.1;深度為4mmu只9cm直徑的平板約需25ml培養(yǎng)基。6。2抗生素紙片含量及有效期:庫存的抗生素紙片儲存在20度，小量使用抗生素紙片密封后存放于冰箱的冰格內(nèi)。使用時取出，放置室溫平衡后再開啟。6。3菌落濃度：挑取分純的菌落5-10個移種于合適的液體培養(yǎng)基,35度46h后，校正菌液濃度與標準0。5麥氏比濁管相同為止。6.4 將菌液均勻的涂好，每只9cm平極至多貼7張紙片，測試平板最多兩只疊在一起，不得過多，量取抑菌環(huán)用毫米尺。6.5 參考菌種的抑菌環(huán)質(zhì)量控制標準是：藥物對該菌株的排菌環(huán)直徑平均值+2標準差：簡明的說：將這個指標換算成抑菌

10、環(huán)直徑質(zhì)量控制允許范圍。實驗室連續(xù)30次監(jiān)測的結(jié)果允許最多3次超過質(zhì)量控制范圍，并且這3次失控不應(yīng)該連續(xù)出現(xiàn).如超出圍，成查明誤差原因并予以糾正。6。6質(zhì)控菌株：大腸埃希氏菌ATCC25922大腸埃希氏菌ATCC35218蜴于（3內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑）；金黃色葡萄球菌ATCC25923綠假單胞菌ATCC2785彝.6.7 質(zhì)控測定次數(shù)：每批新的M-H瓊脂和含藥紙片必須用質(zhì)控菌株進行檢測.每大與臨床標本一起測定質(zhì)控菌株以監(jiān)控整個過程，NCCL規(guī)定只有在符合以下條件時才可減少測定次數(shù)：與常規(guī)標本一起連續(xù)測定質(zhì)控菌株30日.每種藥物與相應(yīng)的每種細菌的30個抑菌環(huán)直徑（3個結(jié)果超出規(guī)定范圍）.達到以上要求以后，可執(zhí)行每周一次檢測。如發(fā)現(xiàn)有一個不符合的結(jié)果,應(yīng)立即尋找原因,如果發(fā)現(xiàn)諸如質(zhì)控菌錯誤、含藥紙片種類