集訓(xùn)選修一生物技術(shù)實(shí)踐

1、集訓(xùn)選修一 生物技術(shù)實(shí)踐一、 微生物的培養(yǎng)和利用<一>、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1培養(yǎng)基(1)一般都含有 還要滿足不同微生物生長(zhǎng)對(duì) 、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及 的需求(2)分類 培養(yǎng)基：含凝固劑 培養(yǎng)基：不含凝固劑2無菌技術(shù)(1)關(guān)鍵：防止 的入侵。(2)不同對(duì)象的無菌操作方法連一連3大腸桿菌的純化培養(yǎng)(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 (2)純化大腸桿菌的方法純化培養(yǎng)原理：想方設(shè)法在培養(yǎng)基上得到 的肉眼可見的 ，即可獲得較純的菌種。純化大腸桿菌的關(guān)鍵步驟： 。常用的微生物接種方法有兩種a平板劃線法：是通過 在瓊脂固體培養(yǎng)基表面 的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。b 法：是將菌液進(jìn)行

2、一系列的 ，然后將 的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。(3)菌種的保存方法對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用 的方法。對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用 的方法。深度思考如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請(qǐng)思考(1)獲得圖A效果和B效果的接種方法分別是什么？(2)某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是什么？應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？1 消毒和滅菌的區(qū)別項(xiàng)目概念常用方法應(yīng)用的范圍消毒一般物品一些不耐高溫的液體，如牛奶如用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等接種室滅菌接種工具的滅菌玻璃器皿、金屬工具的滅菌培養(yǎng)基及容器的滅菌2選擇培養(yǎng)基與鑒

3、別培養(yǎng)基的比較種類制備方法原理用途舉例選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某些 依據(jù)某些微生物對(duì)某些物質(zhì)或環(huán)境條件的嗜好、抗性而設(shè)計(jì)從眾多微生物中 所需的微生物加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種 或 依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中的特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì) 不同種類的微生物伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌易錯(cuò)警示！(1)稀釋涂布平板法的缺點(diǎn)：稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中菌落的數(shù)目往往比實(shí)際數(shù)目 。這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是 菌落。(2)平板劃線法純化大腸桿菌時(shí)不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同：第一次操作： 。每次劃線之前： 。劃線結(jié)束后

4、：殺死接種環(huán)上殘存的菌種， 。<二>、微生物的篩選和計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(1)分離原理：土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣?，這種物質(zhì)在把尿素分解成無機(jī)物的過程中起 作用。(2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目：統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用 法。(3)實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣 微生物的培養(yǎng)與觀察細(xì)菌的 。1微生物的分離和計(jì)數(shù)(1)分離原則：人為提供 的條件，同時(shí) 其他微生物的生長(zhǎng)。(2)菌株篩選原理的比較土壤中分解尿素的細(xì)菌分解纖維素的微生物選擇培養(yǎng)基的成分： 作為唯一的氮源鑒定方法：在培養(yǎng)基中加入 指示劑，若指示劑變 ，pH升高，說明細(xì)菌能分解尿素選擇培養(yǎng)基的成分：纖維素作為唯一的碳

5、源鑒定方法：剛果紅染色法，即剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，培養(yǎng)基出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈2.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法(1) 計(jì)數(shù)法原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積樣品中的微生物數(shù)量；方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。(2) 計(jì)數(shù)法( 計(jì)數(shù)法)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來源于 。通過統(tǒng)計(jì)平板上的 ，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。操作a設(shè)置 ，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。b為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)算公式：每毫升樣品中的菌數(shù) ，其中C代表 ，V代表 ，M代表 。名師點(diǎn)睛應(yīng)特別關(guān)注的

6、三種“組”(1)兩種對(duì)照組確認(rèn)培養(yǎng)基是否合格用一 的空白培養(yǎng)基一起培養(yǎng)，若培養(yǎng)基中無菌落生長(zhǎng)，則表明培養(yǎng)基未被污染，制備合格。確認(rèn)培養(yǎng)基是否起到了“篩選”作用可用一 的普通培養(yǎng)基(如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基)一起培養(yǎng)，若選擇培養(yǎng)基中菌落種類數(shù)明顯 普通培養(yǎng)基，則可表明培養(yǎng)基起到了“篩選”作用。(2)設(shè)置重復(fù)組為使結(jié)果接近真實(shí)值，可將同一稀釋度加到 的平板上，經(jīng)涂布、培養(yǎng)，計(jì)算出菌落平均數(shù)?？键c(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)【典例】 (2014·江蘇單科，30)為了獲得­胡蘿卜素產(chǎn)品，某小組開展了產(chǎn)­胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問題。(1)實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅

7、菌方法是_；為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應(yīng)該_。(2)為了篩選出酵母菌，培養(yǎng)基中添加了青霉素，其目的是_。(3)如圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是_。(填序號(hào))安全閥、放氣閥、壓力表放氣閥、安全閥、壓力表安全閥、放氣閥、溫度表放氣閥、安全閥、溫度表(4)為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線，結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見菌生長(zhǎng)，最可能的原因是_。(5)為增加­胡蘿卜素提取量，在研磨酵母細(xì)胞時(shí)，添加石英砂的目的是_；研磨時(shí)_(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3，理由是_。【練習(xí)】下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請(qǐng)回答相關(guān)問題。(

8、1)圖甲是利用_法進(jìn)行微生物接種，圖乙是利用_法進(jìn)行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是_和_；對(duì)這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是_和酒精消毒。(2)接種操作為什么一定要在火焰附近進(jìn)行？_。(3)接種后，在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)？_。(4)如圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，其接種方法是_(填“圖甲”或“圖乙”)?？键c(diǎn)二微生物的分離與計(jì)數(shù)【典例】 (2014·四川卷，10)有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過程如圖甲、乙所示。(1)微生物生長(zhǎng)繁殖所

9、需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、_四類，該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是_。(2)與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和_，這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成_保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是_。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有_。(4)為探究苯磺隆的降解機(jī)制，將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是_，該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？為什么？_。【練習(xí)】(2014·河北邯鄲一模，39)某化工廠的污水池中含

10、有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示。請(qǐng)分析回答下列問題。(1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是_，這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的_。實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)“目的菌”的代謝類型是_。(3)在上述實(shí)驗(yàn)操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是_。(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時(shí)，常采用平板劃線的方法進(jìn)行接種，此過程中所用的接種工具是_，操作時(shí)采用_滅菌的方法。(5)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉，這樣做的目的是_。(6

11、)某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)污水池中“目的菌”的總數(shù)，他選用104、105、106稀釋液進(jìn)行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿。從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對(duì)照實(shí)驗(yàn)是_，此對(duì)照實(shí)驗(yàn)的目的是_。二、 植物的組織培養(yǎng)菊花組織培養(yǎng)1植物組織培養(yǎng)的過程和原理(1)原理： 。(2)高度分化的細(xì)胞全能性表達(dá)的條件 狀態(tài)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：有機(jī)營(yíng)養(yǎng)、無機(jī)營(yíng)養(yǎng)。植物激素： 、 等。無菌、適宜的外界條件。(3)過程2.菊花組織培養(yǎng)過程(1)影響植物組織培養(yǎng)的主要因素選材：一般選擇 植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。營(yíng)養(yǎng)供應(yīng) 培養(yǎng)基：常用 營(yíng)養(yǎng)成分：大量元素、微量元素、有機(jī)物、 (2)實(shí)驗(yàn)操作過程制備MS固體培養(yǎng)基：配制好的培養(yǎng)基

12、進(jìn)行高壓蒸汽滅菌外植體消毒： 接種：始終在 旁進(jìn)行，對(duì)接種工具要用 滅菌。將菊花莖段插入培養(yǎng)基中時(shí)注意不要倒插培養(yǎng)與移栽：在1822 的 中培養(yǎng)，得到試管苗后進(jìn)行移栽3影響植物組織培養(yǎng)的主要因素(1)培養(yǎng)材料不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差別很大，容易進(jìn)行 的植物也容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。同一種植物材料，材料的 對(duì)培養(yǎng)也有影響。幼齡、保存時(shí)間短的植物材料容易培養(yǎng)成功。(2)無菌條件培養(yǎng)基上有細(xì)菌等微生物存在時(shí)，它們比植物細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖得更快，而且它們會(huì)產(chǎn)生 ，使培養(yǎng)的植物細(xì)胞很快中毒死亡，因此在培養(yǎng)過程中要求進(jìn)行一系列的消毒、滅菌，并且要求無菌操作。1、菊花莖組織培養(yǎng)項(xiàng)目菊花莖組織培養(yǎng)理論依據(jù) 材料

13、選取光照狀況每日用日光燈照射 操作流程制備MS培養(yǎng)基 培養(yǎng) 栽培培養(yǎng)結(jié)果正常植株生殖方式及育性無性生殖，可育影響因素選材、營(yíng)養(yǎng)、激素、pH、溫度、光照等2、影響植物組織培養(yǎng)的因素歸納(1)外植體的選擇： 。(2) 無機(jī)營(yíng)養(yǎng) 大量元素： 營(yíng)養(yǎng) 微量元素： 有機(jī)營(yíng)養(yǎng)： (3) 植物激素 (4) 使用激素順序不同對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞 ，但細(xì)胞 先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞 同時(shí)使用用量比例不同，結(jié)果也不同：的比值(4)溫度：一般將溫度控制在 。(5)pH：一般將pH控制在 左右。(6)光照：每日用日光燈照射 。3植物組織培養(yǎng)中的無菌操作(1)

14、培養(yǎng)材料消毒消毒劑：一般可用體積分?jǐn)?shù)為 和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 溶液，所使用的清洗液是無菌水。(2)培養(yǎng)基、所用操作器材均要進(jìn)行 處理。培養(yǎng)基常采用 滅菌，操作器材可采取 滅菌。(3)對(duì)操作室、工作臺(tái)要進(jìn)行消毒，一般使用 或 消毒。(4)所有接種、轉(zhuǎn)瓶操作都應(yīng)在 旁進(jìn)行。考點(diǎn)一植物組織培養(yǎng)【典例】 (2012·山東理綜，34)辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如下圖。(1)圖中和分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細(xì)胞的_和_過程。(2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是_。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量的比值_(填“高”或“低”)時(shí)，有利于芽的分化。對(duì)培養(yǎng)基徹底滅

15、菌時(shí)，應(yīng)采取的滅菌方法是_。(3)圖中外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是_。用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時(shí)，常用的酶是_和纖維素酶。(4)提取辣椒素過程中，萃取加熱時(shí)需安裝冷凝回流裝置，其目的是_?！揪毩?xí)1】下圖為植物組織培養(yǎng)的流程圖。據(jù)圖分析，下列說法正確的是()A將配制好的培養(yǎng)基在滅菌后要及時(shí)分裝避免冷卻凝固B圖中三種培養(yǎng)基的差異主要表現(xiàn)在植物激素含量方面C整個(gè)培養(yǎng)過程中需要適宜的溫度和不間斷的人工光照D長(zhǎng)出叢芽和生根的過程中細(xì)胞的遺傳物質(zhì)會(huì)發(fā)生改變【練習(xí)2】如圖表示利用棉花葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行遺傳改良的過程，據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是()A過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶的混合物處理B過程

16、能定向誘導(dǎo)原生質(zhì)體產(chǎn)生優(yōu)良性狀的突變C過程中葉肉細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能D過程需用適宜配比的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素處理考點(diǎn)二植物組織培養(yǎng)的影響因素分析【典例】 如圖甲是植物組織培養(yǎng)過程示意圖，圖乙是植物激素對(duì)愈傷組織分化影響的示意圖。據(jù)圖回答下列問題。(1)植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有_。(2)在A過程中，為了有利于嫩枝組織細(xì)胞啟動(dòng)細(xì)胞分裂形成愈傷組織，常常需要在配制好的培養(yǎng)基中添加_。嫩枝組織細(xì)胞接種后25 d時(shí)，若發(fā)現(xiàn)其邊緣局部污染，原因可能是_。(3)在過程B中，若愈傷組織沒有形成根，但分化出了芽，其原因可能是_；若要獲得更多的愈傷組織，培養(yǎng)基中兩種激素的含量應(yīng)該是_。(4)切取經(jīng)光

17、照一段時(shí)間后的幼苗芽尖處的組織塊，消毒后，接種到誘導(dǎo)再分化的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，該培養(yǎng)基中兩種植物激素濃度相同。從理論上分析，分化的結(jié)果是_；原因是_。三、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù) 果酒和果醋的制作1果酒、果醋的制作原理及發(fā)酵條件比較項(xiàng)目果酒制作果醋制作制菌種酵母菌醋酸菌作原理反應(yīng)有氧條件下，大量繁殖： 無氧條件下，酒精發(fā)酵： 氧氣、糖源充足時(shí)： 缺少糖源、氧氣充足時(shí)： 發(fā)酵條件溫度一般 ，最適為 左右最適為 空氣 前期： 后期： 時(shí)間1012 d78 d2.完善制作流程挑選葡萄 榨汁酒精發(fā)酵 深度思考如圖所示為制作果酒和果醋的發(fā)酵裝置，請(qǐng)思考。(1)裝置圖中a、b、c分別指什么？其作用是什么？(2)b需長(zhǎng)而彎

18、曲，其目的是什么？(3)進(jìn)行醋酸發(fā)酵和酒精發(fā)酵時(shí)，對(duì)圖中哪一處操作有差異？請(qǐng)具體指明。果酒和果醋的制作成功的關(guān)鍵點(diǎn)項(xiàng)目說明材料的選擇與處理選擇新鮮的葡萄，榨汁前先 ，再 ，以防葡萄汁流失及污染防止發(fā)酵液被污染榨汁機(jī)和發(fā)酵瓶等都需清洗干凈，且發(fā)酵瓶要用 進(jìn)行消毒清洗葡萄時(shí)要先 后 發(fā)酵瓶排氣管用 管不用 發(fā)酵條件的控制葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留約 的空間，目的是先讓酵母菌進(jìn)行 ，耗盡O2后再進(jìn)行 ，防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液的溢出嚴(yán)格控制溫度： 利于酵母菌的繁殖和酒精發(fā)酵； 利于醋酸菌的繁殖和醋的發(fā)酵充氣：酒精發(fā)酵為無氧發(fā)酵，需 充氣口；醋酸發(fā)酵為有氧發(fā)酵，需經(jīng)充氣口 【典例1】 (20

19、14·江蘇，24)某同學(xué)設(shè)計(jì)了如圖所示的發(fā)酵裝置，下列有關(guān)敘述正確的是(多選)()A該裝置可阻止空氣進(jìn)入，用于果酒發(fā)酵B該裝置便于果酒發(fā)酵中產(chǎn)生的氣體排出C去除彎管中的水，該裝置可滿足果醋發(fā)酵時(shí)底層發(fā)酵液中大量醋酸菌的呼吸D去除彎管中的水后，該裝置與巴斯德的鵝頸瓶作用相似【典例2】 (海南高考)葡萄發(fā)酵可產(chǎn)生葡萄酒，請(qǐng)利用相關(guān)的知識(shí)回答問題。(1)利用葡萄制作葡萄酒的過程中，發(fā)揮作用的微生物是_。(2)該微生物通過無氧呼吸可分解_，產(chǎn)生的終產(chǎn)物是_和_。(3)甲、乙、丙三位同學(xué)將葡萄榨成汁后分別裝入相應(yīng)的發(fā)酵瓶中，在溫度等適宜的條件下進(jìn)行發(fā)酵，如圖所示。發(fā)酵過程中，每隔一段時(shí)間均需排

20、氣一次。據(jù)圖分析，甲和丙同學(xué)的操作有誤，其中甲同學(xué)的錯(cuò)誤是_，導(dǎo)致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異?，F(xiàn)象是_。丙同學(xué)的錯(cuò)誤是_，導(dǎo)致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異?，F(xiàn)象是_。上述發(fā)酵過程結(jié)束后，甲、乙、丙同學(xué)實(shí)際得到的發(fā)酵產(chǎn)品依次是_、_、_。(4)在上述制作葡萄酒的過程中，假設(shè)乙同學(xué)的某一步驟操作錯(cuò)誤導(dǎo)致發(fā)酵瓶瓶塞被沖開，該錯(cuò)誤操作是_?！揪毩?xí)】圖1是果酒和果醋制作的實(shí)驗(yàn)流程，圖2是某同學(xué)設(shè)計(jì)的果酒和果醋的發(fā)酵裝置。根據(jù)圖示回答下列問題：挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵 果酒 果醋圖1(1)完成圖1中的實(shí)驗(yàn)流程。(2)沖洗的主要目的是_，沖洗應(yīng)特別注意不能_，以防止菌種的流失。圖2(3)圖2裝置中的充氣口在_時(shí)關(guān)閉，在_時(shí)連

21、接充氣泵，并連續(xù)不斷地向內(nèi)_。(4)排氣口在果酒發(fā)酵時(shí)排出的氣體是由_產(chǎn)生的_，在果醋發(fā)酵時(shí)排出的是_。(5)寫出與(4)題有關(guān)的反應(yīng)方程式：_。(6)若果汁中含有醋酸菌，在果酒發(fā)酵旺盛時(shí)，醋酸菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸？并說明原因。_。(7)在酒精發(fā)酵時(shí)瓶?jī)?nèi)溫度一般應(yīng)控制在_。醋酸發(fā)酵時(shí)溫度一般應(yīng)控制在_。(8)果酒制作完成后，可以用_來檢測(cè)酒精的生成，在酸性條件下，酒精與之反應(yīng)呈現(xiàn)_色。四、 物質(zhì)提取與分離技術(shù)（血紅蛋白的提取和分離、胡蘿卜素的提?。?lt;一>、血紅蛋白的提取和分離1方法及原理方法原理凝膠色譜法根據(jù) 分離蛋白質(zhì)電泳法各種分子 的差異以及分子本身 的不同2.血紅蛋白

22、的提取和分離過程深度思考1相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的行進(jìn)過程可表示為中的哪一種？2如圖所示裝置可用于血紅蛋白提取、分離的哪種過程？其原理是什么？燒杯內(nèi)a溶液是蒸餾水嗎？1、 凝膠色譜法 比較項(xiàng)目 蛋白質(zhì) 相對(duì)分子質(zhì)量大相對(duì)分子質(zhì)量小移動(dòng)位置移動(dòng)路程移動(dòng)速度洗脫次序2.“血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)”成功關(guān)鍵點(diǎn)(1)紅細(xì)胞的洗滌：洗滌次數(shù)不能過少，否則 ；要 離心，否則會(huì) ，達(dá)不到分離的效果。(2)凝膠的預(yù)處理：用 法不但節(jié)約時(shí)間，而且除去凝膠中可能帶有的 ，排除膠粒內(nèi)的 。(3)色譜柱的裝填：裝填時(shí) ；無 ；洗脫液不能 。(4)色譜柱成功的標(biāo)志： 地移動(dòng)。<二>、植物有效成分的

23、提取胡蘿卜素的提1、胡蘿卜素的性質(zhì)：不溶于 ，微溶于乙醇，易溶于 等有機(jī)溶劑。 提取方法： 、 、 2、胡蘿卜素的提取 石油醚最適宜作 3、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法：萃取法， 最適宜作萃取劑。實(shí)驗(yàn)流程胡蘿卜粉碎 萃取 濃縮 胡蘿卜素注意事項(xiàng)：萃取劑的選擇 有機(jī)溶劑 水溶性有機(jī)溶劑： 水不溶性有機(jī)溶劑 ： 選擇：具有 的沸點(diǎn)，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且 。影響萃取的因素主要因素：萃取劑的 次要因素： 等一般來說，原料顆粒 ，萃取溫度 ，時(shí)間 ，需要提取的物質(zhì)就能夠充分溶解，萃取效果就好。本課題所提供的方法只能提取_；若要獲得-胡蘿卜素，還需要進(jìn)一步的_。 4、鑒定方法： 法。操作注意事項(xiàng)1、注意選擇干凈的濾

24、紙，為了防止操作時(shí)對(duì)濾紙的污染2、點(diǎn)樣應(yīng)該快速細(xì)致，點(diǎn)樣后會(huì)在基線上形成細(xì)小的原點(diǎn)，注意保持濾紙干燥3、卷紙時(shí)注意濾紙的兩邊不能相互接觸,以防止層析液沿著縫隙快速擴(kuò)散4、由于石油醚易揮發(fā)，所以層析容器要密封考點(diǎn)一血紅蛋白的提取和分離【典例1】 (2011·廣東卷)以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述，不正確的是()A洗滌紅細(xì)胞時(shí)，使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂B豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少C血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測(cè)D在凝膠色譜法分離過程中，血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白移動(dòng)慢【典例2】下圖是用除去DNA的濾液進(jìn)行血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)的裝置，下列有關(guān)敘

25、述不正確的是()A.用圖甲裝置對(duì)濾液進(jìn)行處理，其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)B圖乙裝置的試管中收集到的液體中最先得到的是相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)C用圖乙裝置分離血紅蛋白時(shí)，待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，用試管收集流出液，每管收集5 mL，連續(xù)收集D圖丙裝置中電泳法分離提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有一定量的電荷，在電場(chǎng)的作用下向一極移動(dòng)【練習(xí)】血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分，負(fù)責(zé)血液中O2和部分CO2的運(yùn)輸。請(qǐng)根據(jù)血紅蛋白的提取和分離回答問題：（1）凝膠色譜法的基本原理是根據(jù) 分離蛋白質(zhì)的有效方法。（2）洗滌紅細(xì)胞的目的是去除 ，洗滌次數(shù)過少，無法除去 ；離心速度過高和時(shí)

26、間過長(zhǎng)會(huì)使 等一同沉淀，達(dá)不到分離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是 。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是 。（3）洗脫的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體 （填“相同”或“不同”），洗脫時(shí)，對(duì)洗脫液的流速要求是 （4）在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液（pH為7.0）的目的是 ，如果紅色區(qū)帶 ，說明色譜柱制作成功?？键c(diǎn)二胡蘿卜素的提取【典例1】(2013·山東理綜，34)胡蘿卜素是一種常用的食用色素，可分別從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得，流程如下：(1)篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌R時(shí)，可選用_或平板劃線法接種。采用平板劃線法接種時(shí)需先灼燒接種環(huán)，其目的是_。(2)培養(yǎng)酵母菌R時(shí)，培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長(zhǎng)提供_和_。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí)，干燥過程應(yīng)控制好溫度和_以防止胡蘿卜素分解；萃取過程中宜采用_方式加熱以防止溫度過高；萃取液濃縮前需進(jìn)行過濾，其目的是_。(4)紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素，鑒定過程中需用胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品作為_