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1、一、名詞基因工程(遺傳工程)、基因操作、基因分離、DNA重組、Tm值、分子雜交、探針、Southern印跡雜交、Northern印跡雜交、Western印跡雜交、選擇標(biāo)記基因、報(bào)告基因、-互補(bǔ)、轉(zhuǎn)化、受體細(xì)胞、轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)導(dǎo)、復(fù)制子、轉(zhuǎn)基因沉默、啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、終止子、絕緣子、反義子、SD序列、外顯子、內(nèi)含子、融合蛋白、包涵體、同裂酶、同尾酶、基因組文庫(kù)、cDNA文庫(kù)、載體、多克隆位點(diǎn)(MCS)、基因克隆、亞克隆、cosmid、噬菌粒載體、T-DNA、反式作用因子、順式作用元件、定位整合克隆載體、基因打靶、穿梭載體、基因芯片、基因治療、SSH、RDA、DDRT-PCR、ESTs、PCR、RT-PC
2、R、反向PCR、巢式PCR、識(shí)別位點(diǎn)、限制性核酸內(nèi)切酶、限制性(物理)圖譜、嚴(yán)緊性質(zhì)粒、松弛型質(zhì)粒、結(jié)合型質(zhì)粒、非結(jié)合型質(zhì)粒、質(zhì)粒不親和性、遷移作用、顯性質(zhì)粒、隱蔽質(zhì)粒、RNA干擾(RNAi)、MicroRNA、轉(zhuǎn)化子、重組子、目的基因、目標(biāo)生物、人工染色體載體、連接酶、T/A克隆、定向克隆、限制修飾系統(tǒng)、雜交探針、復(fù)制子、感受態(tài)細(xì)胞、酵母附加體質(zhì)粒、酵母復(fù)制質(zhì)粒、酵母整合質(zhì)粒、DNA聚合酶、藍(lán)白斑篩選二、簡(jiǎn)答與問(wèn)答題1 簡(jiǎn)述乳腺生物反應(yīng)器的原理。2 簡(jiǎn)述基因工程研究發(fā)展歷史。3 簡(jiǎn)述基因工程研究的主要內(nèi)容。4 舉例說(shuō)明濃縮DNA或RNA的方法。5 說(shuō)明限制性核酸內(nèi)切酶產(chǎn)生Star活性的原因及
3、其克服措施。6 DNA修飾酶有哪些?各有何功能?7 按介質(zhì)分,DNA片段凝膠電泳可分為哪幾類(lèi)?各自的主要分離范圍是什么?8 按來(lái)源可將基因克隆載體分為哪幾類(lèi)?并說(shuō)明各自的主要特點(diǎn)。9 作為克隆載體必須具備的主要條件是什么?10 作為基因工程宿主必須具備的主要條件是什么?11 列舉外源基因表達(dá)系統(tǒng)中的載體和宿主。12 特殊用途克隆載體有哪些?13 簡(jiǎn)要說(shuō)明目的基因制備的主要方法。14 特殊用途PCR有哪些?15 簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)基因生物的主要鑒定方法的原理和過(guò)程。16 簡(jiǎn)述基因工程的主要應(yīng)用領(lǐng)域。17 簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品尤其是轉(zhuǎn)基因食品潛在危險(xiǎn)的原因及應(yīng)該采處的安全措施。18 簡(jiǎn)述在基因工程主要表達(dá)受體中提高
4、表達(dá)效率的策略。19 簡(jiǎn)述外源基因在受體細(xì)胞中的主要表達(dá)形式及各自的優(yōu)缺點(diǎn)。20 如何實(shí)現(xiàn)定向克???21 簡(jiǎn)述不同生物的轉(zhuǎn)基因方法。22 說(shuō)明原核與真核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)。23 如何區(qū)別轉(zhuǎn)基因生物、轉(zhuǎn)化子、重組子?24 列舉啟動(dòng)子、終止子和相應(yīng)的宿主。25 表達(dá)載體必須具備哪些功能元件?26 簡(jiǎn)述構(gòu)建基因文庫(kù)的基本步驟。27 簡(jiǎn)述在各類(lèi)生物中實(shí)現(xiàn)高效表達(dá)的措施。28 基因工程誕生的理論基礎(chǔ)和技術(shù)基石是什么?29 構(gòu)建cDNA文庫(kù)涉及哪些基本過(guò)程?50 簡(jiǎn)述酵母人工染色體的工作原理。三、論述與綜合應(yīng)用題1 試述PCR的原理和主要過(guò)程。2 試述基因分離的主要方法和原理。3 試設(shè)計(jì)一個(gè)方案,將擬
5、南芥生長(zhǎng)素反應(yīng)因子9轉(zhuǎn)入油菜中進(jìn)行異源表達(dá)(擬南芥基因組測(cè)序已完成)。4 現(xiàn)分離得到一個(gè)青霉菌的單基因的抗高溫突變體,試設(shè)計(jì)一個(gè)方案克隆和分離該基因(青霉菌基因組測(cè)序尚未進(jìn)行)。考試題型說(shuō)明:一、名詞解釋 (每題3分, 共30分)二、觀察載體,在橫線上填出相應(yīng)內(nèi)容。(每空2分,共10分)1_; 2_ _3_; 4_5_; 6 博來(lái)霉素(zeocin)抗性基因 四、匹配題 (有的可以與多個(gè)匹配, 有的可能沒(méi)有匹配,畫(huà)線連接)(10分) 1 啟動(dòng)子 受體細(xì)胞 35S 大腸桿菌T7 猴SV40早期啟動(dòng)子 小麥 AOX1 畢赤酵母2. 載體或載體源 受體細(xì)胞 Ti質(zhì)粒 煙草 pYES2 人類(lèi) 反轉(zhuǎn)錄病毒 大腸桿菌 pUC19 酵母3. 計(jì)劃擴(kuò)增下圖所示的兩段序列之間的DNA,選出合適的PCR引物。5cgggattgatgccatacaagcgctgagacctgtgg3 3gccctaactacggtatg ttcgcgactctggacacc5 Fordward primers Reverse primers 5cgggattgatgccatac3 5ctggacaccttcgtgga3 5tacggtatgccctaac3 5cgaaggtgtccagcaat3 5gccctaactacggtatg3 3aagcgctgagacctgtgg5 5gtatgcccta
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