通過dna序列分析教學(xué)文稿

1、通過DNA序列分析第一節(jié)第一節(jié) 利用利用DNADNA定性、定量分析可從不同角度定性、定量分析可從不同角度 對(duì)基因和基因組進(jìn)行研究對(duì)基因和基因組進(jìn)行研究一、一、DNADNA序列測定可以揭示基因和基因組一級(jí)結(jié)構(gòu)變化序列測定可以揭示基因和基因組一級(jí)結(jié)構(gòu)變化DNA測序技術(shù)：測序技術(shù)： 1、雙脫氧鏈終止法、雙脫氧鏈終止法(Sanger法法) 2、化學(xué)裂解法、化學(xué)裂解法 3、PCR測序技術(shù)測序技術(shù) 4、全自動(dòng)、全自動(dòng)DNA測序儀測序儀這些技術(shù)的發(fā)明這些技術(shù)的發(fā)明,都依賴于高分辨率的聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)都依賴于高分辨率的聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù) SangerSanger雙脫氧鏈終止法引入了雙脫氧核苷三磷酸雙

2、脫氧鏈終止法引入了雙脫氧核苷三磷酸（2,3-ddNTP2,3-ddNTP）作為鏈終止劑。）作為鏈終止劑。2,3-ddNTP2,3-ddNTP脫氧脫氧核糖的核糖的33位缺少羥基，它可以與多核苷酸鏈的位缺少羥基，它可以與多核苷酸鏈的33羥基羥基形成磷酸二酯鍵，但卻不能與下一個(gè)核苷酸縮合，導(dǎo)致形成磷酸二酯鍵，但卻不能與下一個(gè)核苷酸縮合，導(dǎo)致多核苷酸鏈的延伸終止。多核苷酸鏈的延伸終止。如果在如果在DNADNA的合成反應(yīng)中，加入一種少量的的合成反應(yīng)中，加入一種少量的ddNTPddNTP，則多，則多核苷酸鏈的延伸將在隨機(jī)的位點(diǎn)終止，生成一系列長短核苷酸鏈的延伸將在隨機(jī)的位點(diǎn)終止，生成一系列長短不一的核苷酸

3、鏈。在不一的核苷酸鏈。在4 4組獨(dú)立的組獨(dú)立的DNADNA合成反應(yīng)中，分別加合成反應(yīng)中，分別加入入4 4種不同的種不同的ddNTPddNTP，結(jié)果生成的，結(jié)果生成的4 4組核苷酸鏈將分別終止組核苷酸鏈將分別終止于各個(gè)于各個(gè)A A，G G，C C，T T的位置上。對(duì)這的位置上。對(duì)這4 4組核苷酸鏈進(jìn)行高分組核苷酸鏈進(jìn)行高分辨變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，就可讀出序列。辨變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，就可讀出序列。雙脫氧測序方法雙脫氧測序方法原理原理n基本步驟：基本步驟：1 1、先將、先將DNADNA的末端之一標(biāo)記放射性同位素（的末端之一標(biāo)記放射性同位素（3232P P、3535S S），），2 2、再將、再

4、將DNADNA樣品分別進(jìn)行多組具堿基特異性、隨機(jī)的、樣品分別進(jìn)行多組具堿基特異性、隨機(jī)的、不完全的化學(xué)修飾；不完全的化學(xué)修飾；3 3、采用修飾堿基敏感的特異化學(xué)試劑在修飾堿基位置斷、采用修飾堿基敏感的特異化學(xué)試劑在修飾堿基位置斷開開DNADNA鏈；鏈；4 4、通過具有可分辨鏈長短僅一個(gè)核苷酸之差的聚丙烯胺、通過具有可分辨鏈長短僅一個(gè)核苷酸之差的聚丙烯胺凝膠電泳，將凝膠電泳，將DNADNA斷裂片段按分子大小分離開斷裂片段按分子大小分離開5 5、根據(jù)放射自顯影膠片上顯示的末端標(biāo)記片段分布情況，、根據(jù)放射自顯影膠片上顯示的末端標(biāo)記片段分布情況，直接讀出直接讀出DNADNA序列。序列。化學(xué)裂解法（化學(xué)

5、裂解法（Maxam-Gilbert） 1977反應(yīng)體系 堿基修飾 堿基修飾 主鏈斷裂 斷裂點(diǎn) 試劑 反應(yīng) 試劑 G 硫酸二甲酯 鳥嘌呤甲基化 六氫吡啶 GG+A 甲酸 脫嘌呤作用 六氫吡啶 G/AC+T 肼 嘧啶開環(huán) 六氫吡啶 C/TC 肼（加鹽） 胞嘧啶開環(huán) 六氫吡啶 C在化學(xué)修飾反應(yīng)中，通過控制反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間，只有一小部分堿基被修飾，隨后進(jìn)行斷裂反應(yīng)也是定量。5-GATCACTACTG-35*-GATCACTACTG-35*G5* GATCACTACTG5*G5*GA5*GATCA5*GATCACTA5*GATCACTACTG5*GAT5*GATC5*GATCAC5*GATCACT5*

6、GATCACTAC5*GATCACTACT5*GATC5*GATCAC5*GATCACTACGG+AC+TCG A/G C/T C5*G5*GA5*GAT5*GATC5*GATCAC5*GATCACTAC5*GATCA5*GATCACT5*GATCACTA5*GATCACTAC5*GATCACTACT5* GATCACTACTG硫酸二甲酯甲酸肼肼（加鹽）DNA自動(dòng)測序儀自動(dòng)測序儀上述兩種方法都不適應(yīng)大規(guī)模DNA測定需要。存在操作步驟繁瑣、效率低、速度慢的缺點(diǎn)，特別是讀結(jié)果的讀片過程。1987年發(fā)明了一種準(zhǔn)確快速的DNA測序方法，即激光測序法和配套的自動(dòng)測序儀。（用熒光染料結(jié)合引物）。隨后又發(fā)明

7、了終止標(biāo)記系統(tǒng)法。1 1、揭示基因和基因組一級(jí)結(jié)構(gòu)變化在醫(yī)學(xué)研究中具、揭示基因和基因組一級(jí)結(jié)構(gòu)變化在醫(yī)學(xué)研究中具有重要意義。有重要意義。2、通過、通過DNA序列分析，可以鑒定基因和基因組變異。序列分析，可以鑒定基因和基因組變異。3、通過、通過DNA序列分析，可以鑒定分析人工重組的基序列分析，可以鑒定分析人工重組的基因。因。4、通過、通過DNA序列測定對(duì)定點(diǎn)突變進(jìn)行確認(rèn)。序列測定對(duì)定點(diǎn)突變進(jìn)行確認(rèn)。 DNA序列測定的意義序列測定的意義分析基因拷貝數(shù)變化分析基因拷貝數(shù)變化一、一、Southern blot 檢測基因拷貝數(shù)變化檢測基因拷貝數(shù)變化 Southern blot 印跡雜交是指DNA與DNA

8、的雜交，將電泳分離的待測DNA片段轉(zhuǎn)印并結(jié)合到一定的固定支持物上，然后用標(biāo)記的DNA探針檢測待測DNA的一種方法。 1975年英國愛丁堡大學(xué)的Southern建立了該方法， Southern印跡雜交由此得名。Southern blot步驟步驟（1）待測核酸樣品的制備待測核酸樣品的制備：提取基因組DNA，并用適當(dāng)?shù)南拗菩詢?nèi)切酶消化水解基因組DNA，成大小不一的DNA片段。（2）待測待測DNA樣品的電泳分離。樣品的電泳分離。（3）凝膠中核酸的變性凝膠中核酸的變性：DNA在制備與電泳過程中DNA片段始終保持雙鏈結(jié)構(gòu)。電泳結(jié)束后DNA變性并轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)墓潭ㄖС治锷喜拍苓M(jìn)行Southern blot。變

9、性通常用堿變性法。（4） Southern 轉(zhuǎn)膜轉(zhuǎn)膜：將凝膠中的DNA進(jìn)行堿變性并將PH恢復(fù)中性后，即可將凝膠中DNA轉(zhuǎn)移到固定支持物上。固定支持物固定支持物：硝酸纖維素（NC）膜、尼龍膜、化學(xué)活化膜和濾紙等。轉(zhuǎn)移方法轉(zhuǎn)移方法：毛吸管虹吸印跡法、電轉(zhuǎn)印跡法、真空轉(zhuǎn)移法。（5）已知序列的）已知序列的DNA探針的制備探針的制備（6） Southern雜交雜交：在將固定于膜上的DNA片段與探針進(jìn)行雜交前，必須先進(jìn)行一個(gè)預(yù)雜交預(yù)雜交的過程。因?yàn)槟軌蚪Y(jié)合DNA的膜同樣可以和探針DNA結(jié)合，在進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)前，必須將膜上所有能與DNA結(jié)合的位點(diǎn)全部封閉。（7）雜交結(jié)果的檢測雜交結(jié)果的檢測：采用核素標(biāo)記的探針

10、或發(fā)光劑標(biāo)記的探針進(jìn)行雜交時(shí)，在雜交洗膜后，將濾膜和X線片裝入暗盒，感光后，經(jīng)沖洗，在X線片上可見黑色條帶。1、對(duì)某種生物體基因組拷貝數(shù)研究，需要完整提取出基因組，并需要適當(dāng)?shù)南拗菩詢?nèi)切酶酶切；2、通常要研究的基因序列是已知的。Southern blot 檢測基因拷貝數(shù)注意事項(xiàng)檢測基因拷貝數(shù)注意事項(xiàng)二、采用二、采用PCRPCR技術(shù)也可以分析基因拷貝數(shù)技術(shù)也可以分析基因拷貝數(shù)原理：原理：細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制是一個(gè)復(fù)雜過程。參與復(fù)制的有多種因素。PCR是在試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制反應(yīng)，PCR原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相似，但反應(yīng)體系相對(duì)簡單。PCR反應(yīng)體系：反應(yīng)體系：耐熱的Taq DNA聚合酶、化學(xué)合成的寡

11、聚核苷酸引物、4種dNTP、以及合適的緩沖液體系。PCR反應(yīng)的基本過程：變性、退火、延伸反應(yīng)的基本過程：變性、退火、延伸 PCR技術(shù)對(duì)擴(kuò)增的模板濃度雖然很低，擴(kuò)增產(chǎn)技術(shù)對(duì)擴(kuò)增的模板濃度雖然很低，擴(kuò)增產(chǎn)量以一個(gè)恒定的指數(shù)率上升，但經(jīng)過量以一個(gè)恒定的指數(shù)率上升，但經(jīng)過25至至30個(gè)循環(huán)，個(gè)循環(huán)，產(chǎn)量會(huì)達(dá)到一個(gè)平臺(tái)期，同時(shí)產(chǎn)量會(huì)達(dá)到一個(gè)平臺(tái)期，同時(shí)PCR過程中，還會(huì)出過程中，還會(huì)出現(xiàn)現(xiàn)“試管效應(yīng)試管效應(yīng)”，因些對(duì)不同樣本量的比較無法直，因些對(duì)不同樣本量的比較無法直接用接用PCR技術(shù)來鑒定。技術(shù)來鑒定。 近年來，隨著近年來，隨著PCR技術(shù)的不斷改進(jìn)，如差異顯技術(shù)的不斷改進(jìn)，如差異顯示示PCR和實(shí)時(shí)和實(shí)

12、時(shí)PCR的發(fā)明，可以用于基因拷貝數(shù)的的發(fā)明，可以用于基因拷貝數(shù)的分析。分析。 是根據(jù)絕大多數(shù)真核細(xì)胞是根據(jù)絕大多數(shù)真核細(xì)胞mRNA3端具有的多聚腺苷酸尾（端具有的多聚腺苷酸尾（polyA）結(jié)構(gòu)，因此可用含結(jié)構(gòu)，因此可用含oligo（dT）的寡聚核苷酸為引物將不同的）的寡聚核苷酸為引物將不同的mRNA反轉(zhuǎn)反轉(zhuǎn)錄成錄成cDNA。 根據(jù)根據(jù)Poly A序列起點(diǎn)前序列起點(diǎn)前2個(gè)堿基除個(gè)堿基除AA外只有外只有12種可能性的特征，設(shè)種可能性的特征，設(shè)計(jì)合成了計(jì)合成了12種下游引物，稱種下游引物，稱3-錨定引物錨定引物；同時(shí)為擴(kuò)增出；同時(shí)為擴(kuò)增出polyA上游上游500bp以內(nèi)所有可能性的以內(nèi)所有可能性的m

13、RNA序列，在序列，在5端又設(shè)計(jì)了端又設(shè)計(jì)了20種種10bp長的隨長的隨機(jī)引物。這樣構(gòu)成的引物對(duì)進(jìn)行機(jī)引物。這樣構(gòu)成的引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增能產(chǎn)生出擴(kuò)增能產(chǎn)生出20000條左右的條左右的DNA條帶，其中每一條都代表一種特定條帶，其中每一條都代表一種特定mRNA種，這一數(shù)字大體涵蓋了在一定種，這一數(shù)字大體涵蓋了在一定發(fā)育階段某種細(xì)胞類型中所表達(dá)的全部發(fā)育階段某種細(xì)胞類型中所表達(dá)的全部mRNA。 將差別表達(dá)條帶中的將差別表達(dá)條帶中的DNA回收，擴(kuò)增至所需含量，進(jìn)行回收，擴(kuò)增至所需含量，進(jìn)行Southernblot或或Northernblot或直接測序，從而對(duì)差異條帶鑒定分析，或直接測序，從而對(duì)差異條

14、帶鑒定分析，以便最終獲得差異表達(dá)的目的基因。以便最終獲得差異表達(dá)的目的基因。（1）差異顯示）差異顯示PCR用于基因拷貝數(shù)分析用于基因拷貝數(shù)分析 盡管應(yīng)用差異顯示PCR方法已經(jīng)取得了不少成果，而且該方法還在不斷改進(jìn)之中，但它仍然存在幾個(gè)難以解決的問題：但它仍然存在幾個(gè)難以解決的問題：(1)重復(fù)率低，至少有20%的差異條帶不能被準(zhǔn)確重復(fù)；(2)假陽性率可以高達(dá)90%；(3)獲得的差異表達(dá)序列極少包含編碼信息。（2）、代表性差異分析技術(shù)）、代表性差異分析技術(shù)該技術(shù)是將差減雜交與該技術(shù)是將差減雜交與PCRPCR有機(jī)結(jié)合形成的一種方法有機(jī)結(jié)合形成的一種方法. .主要步主要步驟驟: :1 1、將對(duì)照組、將

15、對(duì)照組(driver)(driver)和待測組和待測組(tester)mRNA(tester)mRNA逆轉(zhuǎn)錄成逆轉(zhuǎn)錄成cDNAcDNA片片段群段群, ,接上接頭進(jìn)行第一次接上接頭進(jìn)行第一次PCRPCR擴(kuò)增擴(kuò)增; ;2 2、將兩組、將兩組PCRPCR產(chǎn)物片段群用限制性內(nèi)切酶酶切產(chǎn)物片段群用限制性內(nèi)切酶酶切, ,形成平均長度形成平均長度256bp256bp的長度的長度. .3 3、將接頭消化、將接頭消化, ,在在testertester組末端接上新的接頭組末端接上新的接頭,tester,tester組和組和driverdriver組按組按1:1001:100比例混合比例混合. .過量的過量的dri

16、verdriver可與可與testertester中互補(bǔ)中互補(bǔ)的部分形成雙鏈的部分形成雙鏈. .44復(fù)性復(fù)性, ,按新接頭序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行第按新接頭序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行第2 2輪輪PCRPCR，只有，只有testertester和和testertester雜合體才能和引物配對(duì)雜合體才能和引物配對(duì), ,大量拉增大量拉增. . 實(shí)時(shí)PCR根據(jù)PCR反應(yīng)動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)設(shè)計(jì)的分析方法。在PCR反應(yīng)的初始階段，反應(yīng)體系中的模板的產(chǎn)物深度較低，而引物是過量的，產(chǎn)物和模板復(fù)性不會(huì)形成與引物競爭，此時(shí)產(chǎn)物含量呈指數(shù)增加。當(dāng)PCR產(chǎn)物積累后，產(chǎn)物的復(fù)性可以競爭引物與模板的結(jié)合，產(chǎn)物增加減慢，最后進(jìn)入平臺(tái)期。所以對(duì)樣品中

17、的cDNA進(jìn)行定量分析的最佳時(shí)期是反應(yīng)早期。有人試圖依靠循環(huán)次數(shù)減少來分析樣品中的cDNA含量，但因樣品的差異使之很不可靠。在一定的循環(huán)中，mRNA豐度低的樣品產(chǎn)量少，可能尚不能檢測，豐度高的樣品可能已進(jìn)入平臺(tái)期，故難以較。（3 3）實(shí)時(shí)）實(shí)時(shí)PCRPCR用于基因拷貝數(shù)分析用于基因拷貝數(shù)分析 實(shí)時(shí)PCR原理是：在PCR反應(yīng)體系中加入一種雙色熒光標(biāo)記的寡核苷酸探針，并根據(jù)探針上熒光信號(hào)的變化計(jì)算模板DNA含量。如：TaqMan系統(tǒng) 在寡核苷酸探針的5端標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光染料，3端標(biāo)記一個(gè)猝滅染料。當(dāng)光源照射到探針時(shí)，被激活的報(bào)告熒光染料將能量轉(zhuǎn)移給附近的猝滅染料而不發(fā)光。當(dāng)PCR產(chǎn)物擴(kuò)增時(shí)，聚合酶

18、遇到結(jié)合在模板上的熒光探針時(shí)，利用聚合酶所具有的5-3外切酶作用，將兩種染料分離，因此根據(jù)報(bào)告熒光所發(fā)射的熒光強(qiáng)度與被切探針成正比，由此可以計(jì)算出PCR產(chǎn)物的含量。n實(shí)時(shí)PCR技術(shù)特別適合于低拷貝基因的定量。n實(shí)時(shí)PCR需要包括熱循環(huán)儀、計(jì)算機(jī)、光學(xué)儀器用于熒光激發(fā)和收集器、數(shù)據(jù)處理和分析軟件。 核酸保持在細(xì)胞或組織切片中，經(jīng)適當(dāng)方法處理細(xì)胞或組織后，將標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織中的核酸進(jìn)行雜交，稱為原位雜交原位雜交。 原位雜交不需要從組織提取核酸，對(duì)組織中含量極低的靶序列有很高的靈敏度，并可完整保持組織與細(xì)胞形態(tài)，更能準(zhǔn)確反映出組織細(xì)胞的相互關(guān)系及功能狀態(tài)。三、原位雜交技術(shù)可以分析基因在染色

19、體上位置三、原位雜交技術(shù)可以分析基因在染色體上位置 根據(jù)檢測對(duì)象不同可將原位雜交分為細(xì)胞內(nèi)原位細(xì)胞內(nèi)原位雜交雜交和組織切片原位雜交組織切片原位雜交。同時(shí)原位雜交既可檢測DNA，也可檢測RNA，所用探針不同而以。 核酸探針根據(jù)標(biāo)記方法的不同可粗略分為放射性探針和非放射性探針兩類。放射性同位素標(biāo)記探針具有放射性既污染環(huán)境，又對(duì)人體有害，且受半衰期限制等缺點(diǎn)，非放射性探針可以用生物素、地高辛 、熒光素標(biāo)記探針。（一）、固定：保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)，最大限度地保持細(xì)胞內(nèi)DNA或RNA的水平；使探針易于進(jìn)入細(xì)胞或組織。最常用的固定劑是多聚甲醛，其它的固定劑（如戊二醛）。（二）、玻片和組織切片的處理：包括玻片處理、

20、細(xì)胞組織切片的處理、降低背景、預(yù)雜交。（三）雜交：調(diào)整探針的濃度（0.55.0ng/l）、探針長度（50100個(gè)堿基）、雜交的溫度和時(shí)間（四）雜交后處理：包括系列不同濃度，不同溫度的鹽溶液的漂洗。（五）顯示：根據(jù)核酸探針標(biāo)記物的種類分別進(jìn)行放射自顯影或利用酶檢測系統(tǒng)進(jìn)行不同顯色處理。（六）結(jié)果分析基本方法基本方法 真核生物的RNA包括mRNA、tRNA、rRNA、snRNA、snoRNA、dsRNA、微小RNA等。目前在上述RNA研究中，以mRNA研究最為熱點(diǎn)。它的研究可以提示基因的結(jié)構(gòu)、基因的活性、或基因的變異等。 mRNA研究常用的方法有Northern blot、原位雜交、實(shí)時(shí)PCR、R

21、NA酶保護(hù)試驗(yàn)、cDNA芯片技術(shù)和RT-PCR。第二節(jié)第二節(jié) 利用利用RNA定性定量分析可從不定性定量分析可從不 同角度揭示基因表達(dá)活性同角度揭示基因表達(dá)活性 Northern blot印跡雜交是指待測RNA樣品經(jīng)電泳分離后轉(zhuǎn)移到固定支持物上，然后與標(biāo)記的核酸探針進(jìn)行固-液相雜交。原理同Southern blot。 但因Northern blot印跡雜交法檢測的是RNA，在外界環(huán)境中極易被環(huán)境中的RNA酶所降解，因此制備RNA樣品時(shí)，所需器皿均需要特殊處理。同時(shí)作為監(jiān)測細(xì)胞內(nèi)RNA含量不夠準(zhǔn)確，只能作為定性分析定性分析RNA方法。方法。（一）（一）Northern blot定性分析定性分析RN

22、A的常用方法的常用方法 RT-PCR是一種以mRNA為模板的體外擴(kuò)增cDNA的技術(shù)。其基本程序是：提取細(xì)胞總RNA，然后將其中的mRNA在體外逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，再以cDNA為模板，進(jìn)行特定基因的PCR擴(kuò)增。因?yàn)镻CR擴(kuò)增產(chǎn)物有平臺(tái)效應(yīng)，故RT-PCR也一般用于也一般用于RNA的定性分析的定性分析。 但如果將陽性參照基因作為內(nèi)參照與待測RNA在一個(gè)反應(yīng)體系中進(jìn)行擴(kuò)增，可以對(duì)RNA進(jìn)行相對(duì)定量分析。參照基因： -肌動(dòng)蛋白（-actin）、3-磷酸甘油醛脫氫酶、rRNA基因等。（二）（二）RT-PCR用于定性、定量分析用于定性、定量分析RNA方法方法三、三、RNA酶保護(hù)試驗(yàn)酶保護(hù)試驗(yàn)了解基因轉(zhuǎn)錄后的

23、選擇性剪接了解基因轉(zhuǎn)錄后的選擇性剪接 RNA酶保護(hù)試驗(yàn)是利用Rnase A和Rnase T1能專一的降解單鏈RNA而雙鏈RNA受到保護(hù)的特性，用體外轉(zhuǎn)錄合成的放射性核素標(biāo)記的RNA探針與待檢測mRNA進(jìn)行液相雜交，使RNA探針和待測RNA間在互補(bǔ)序列處形成雜交體，然后用Rnase A和Rnase T1切割此RNA雜交體，受到保護(hù)的RNA通過聚丙烯酰胺凝膠電泳分析，從而估計(jì)待檢測mRNA情況。RNA酶保護(hù)試驗(yàn)：可用于mRNA定量、 mRNA末端定位、 mRNA剪切部位確定內(nèi)含子在相應(yīng)基因中的位置。RNARNA酶保護(hù)試驗(yàn)：酶保護(hù)試驗(yàn)：全新的全新的mRNA定量分析方法定量分析方法 其基本原理是將標(biāo)記

24、的特異RNA探針（32P或生物素）與待測的RNA樣品液相雜交，標(biāo)記的特異RNA探針按堿基互補(bǔ)的原則與目的基因特異性結(jié)合，形成雙鏈RNA；未結(jié)合的單鏈RNA經(jīng)RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸，而待測目的基因與特異RNA探針結(jié)合后形成雙鏈RNA，免受RNA酶的消化，故該方法命名為RNA酶保護(hù)實(shí)驗(yàn)。 監(jiān)測大量基因表達(dá)的最好方法之一是cDNA微陣列技術(shù)，利用這種技術(shù)可以同時(shí)測定成千上萬個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄活性。 cDNA微陣列技術(shù)的基本原理與核酸分子雜交方法是一樣的。都是應(yīng)用已知核酸序列作為探針與互補(bǔ)的靶核酸序列雜交，通過隨后的信號(hào)檢測進(jìn)行定性或定量分析基因的表達(dá)情況。利用cDNA微陣列能在同一時(shí)間內(nèi)平行分析大量的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，進(jìn)行大量的信息篩選和檢測分析。三、三、 cDNAcDNA微陣列（微陣列（ cDNAcDNA芯片）可同時(shí)分析大量芯片）可同時(shí)分析大量 基因的轉(zhuǎn)錄活性基因的轉(zhuǎn)錄活性 目前