國家科技支撐計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目疫苗關(guān)鍵生產(chǎn)技術(shù)研究開發(fā)課題申報(bào)指引

1、附件2.“十一五”國家科技支撐計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目“疫苗關(guān)鍵生產(chǎn)技術(shù)研究開發(fā)”課題申報(bào)指南一、總體目標(biāo)本項(xiàng)目的總體目標(biāo)是著力解決制約我國疫苗產(chǎn)業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵生產(chǎn)技術(shù)，完善或建立疫苗關(guān)鍵性技術(shù)平臺(tái)，發(fā)揮其示范作用，使我國疫苗大品種生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)水平邁上新臺(tái)階，大幅度縮小與發(fā)達(dá)國家之間的差距。通過項(xiàng)目實(shí)施，提高緊缺疫苗大品種的產(chǎn)量，提高優(yōu)勢(shì)企業(yè)疫苗的質(zhì)量，為疫苗行業(yè)的進(jìn)一步集約化提供科技支撐；大力推動(dòng)國際化進(jìn)程，促進(jìn)我國疫苗產(chǎn)品出口，提高我國疫苗產(chǎn)品在國際市場的占有率。通過項(xiàng)目的實(shí)施，建立3-5個(gè)技術(shù)平臺(tái)，突破5-10項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)，力爭1-2個(gè)品種獲得臨床研究批件、2-3個(gè)品種獲準(zhǔn)換發(fā)生產(chǎn)文號(hào)，大幅度提高8-1

2、0種疫苗產(chǎn)品的產(chǎn)量，實(shí)現(xiàn)我國疫苗產(chǎn)業(yè)年銷售收入新增8-10億元。二、實(shí)施年限項(xiàng)目實(shí)施年限為2008年7月2010年12月。三、主要內(nèi)容課題1、細(xì)菌多糖-蛋白結(jié)合關(guān)鍵技術(shù)及其應(yīng)用研究1、研究內(nèi)容（1）研究多糖蛋白質(zhì)結(jié)合化學(xué)的適宜方法。利用具有代表性的Hib結(jié)合疫苗優(yōu)化制備條件和結(jié)合物大規(guī)模純化技術(shù)條件；優(yōu)化Hib多糖衍生及多糖蛋白結(jié)合技術(shù)；解決Hib多糖活化、衍生，與載體蛋白結(jié)合過程中的條件優(yōu)化，進(jìn)行規(guī)模純化層析條件的優(yōu)化，最終使多糖-蛋白結(jié)合疫苗的產(chǎn)量提高，結(jié)合物原液質(zhì)量指標(biāo)穩(wěn)定；建立Hib結(jié)合物原液、成品中結(jié)合物含量、成品中游離蛋白、游離多糖的快速、穩(wěn)定的測(cè)定方法游離蛋白質(zhì)和游離多糖含量的質(zhì)

3、量控制方法。（2）細(xì)菌多糖蛋白質(zhì)結(jié)合疫苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。主要包括多價(jià)結(jié)合疫苗和多聯(lián)多價(jià)聯(lián)合疫苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)確立（多價(jià)疫苗中各種單價(jià)疫苗抗原含量檢測(cè)，游離蛋白、游離多糖含量檢測(cè)、多種抗原成分劑量、配伍研究，以及最低免疫劑量的確定等）。（3）載體蛋白多樣化研究。開發(fā)TT和DT以外的新載體蛋白質(zhì)；對(duì)現(xiàn)有載體蛋白使用風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)價(jià)，以及對(duì)新的載體進(jìn)行安全性、有效性的全面評(píng)價(jià)研究，完成H21G、64K外膜蛋白、C5a肽酶等新型載體蛋白的特性研究；以及探索這些新型載體蛋白與細(xì)菌多糖結(jié)合的方法或工藝。（4）細(xì)菌多糖蛋白質(zhì)結(jié)合疫苗效果評(píng)價(jià)方法建立。包括：標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的制備；抗體含量檢測(cè)方法建立與標(biāo)準(zhǔn)化；抗體功能活性檢測(cè)

4、方法建立與標(biāo)準(zhǔn)化。2、考核指標(biāo)(1)技術(shù)指標(biāo) 建立6001200升發(fā)酵罐的高密度發(fā)酵技術(shù)，使每批培養(yǎng)物獲得的Hib粗多糖達(dá)到1000克以上，Hib純化多糖達(dá)到60克以上； 提高累計(jì)收率達(dá)到投入Hib多糖的12%以上；結(jié)合物原液及疫苗成品中游離多糖含量穩(wěn)定在不高于10%；優(yōu)化后的衍生、結(jié)合工藝使結(jié)合物中多糖的收率達(dá)到投入多糖的40%；多糖-蛋白結(jié)合疫苗：高分子量結(jié)合物含量75%80%；純化回收率35%50%；結(jié)合物原液中游離蛋白含量低于總蛋白的5%；Hib純化多糖的內(nèi)毒素含量穩(wěn)定在不高于10EU/ug多糖。提高穩(wěn)定性，降低多糖和結(jié)合蛋白的解離和降解，2年有效期內(nèi)疫苗游離多糖含量不高于15%，游離

5、蛋白含量不高于5%；建立穩(wěn)定、敏感、快速的游離多糖和蛋白質(zhì)監(jiān)測(cè)方法。按照國家標(biāo)準(zhǔn)制備出有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)（檢定用標(biāo)準(zhǔn)菌株、細(xì)胞株，多糖、蛋白以及標(biāo)準(zhǔn)參考血清），抗體含量和抗體功能活性檢測(cè)方法建立并能夠標(biāo)準(zhǔn)化；探索基于高效液相色譜的游離蛋白、游離多糖測(cè)定方法，探索基于高效液相色譜的Hib多糖分子大小測(cè)定以及Hib多糖-蛋白結(jié)合物分子大小的檢測(cè)方法，提高結(jié)合疫苗質(zhì)量控制的水平；使我國的Hib結(jié)合疫苗的安全性和免疫原性與國家先進(jìn)水平的同類產(chǎn)品具有可比性，且免疫后抗體GMC水平較高。(2)經(jīng)濟(jì)指標(biāo)Hib疫苗產(chǎn)品的生產(chǎn)能力達(dá)到1000萬劑量；銷售量增加到600萬劑量。(3)加速和推進(jìn)其它細(xì)菌多糖蛋白質(zhì)結(jié)

6、合疫苗研究開發(fā)中起到示范作用，如9價(jià)肺炎結(jié)合疫苗和4價(jià)流腦結(jié)合疫苗、傷寒Vi-rEPA結(jié)合疫苗、甲型副傷寒結(jié)合疫苗、痢疾結(jié)合疫苗，大腸桿菌結(jié)合疫苗等，力爭12種產(chǎn)品獲臨床研究批件、2種產(chǎn)品完成臨床試驗(yàn)或取得新藥證書。3、經(jīng)費(fèi)預(yù)算本課題擬安排國撥經(jīng)費(fèi)1040萬元，要求申報(bào)單位自籌經(jīng)費(fèi)不低于1040萬元。課題2、病毒性疫苗大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)研究1、研究內(nèi)容規(guī)模化病毒與細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究。研究開發(fā)生物反應(yīng)器微載體技術(shù)，進(jìn)行哺乳類細(xì)胞規(guī)?；囵B(yǎng)，大規(guī)模培養(yǎng)疫苗病毒。對(duì)于不適宜微載體培養(yǎng)技術(shù)或懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞，則采用其它規(guī)?；囵B(yǎng)技術(shù)。同時(shí)，兼顧具有我國自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新型細(xì)胞基質(zhì)的開發(fā)和研究。細(xì)胞在生物反應(yīng)器中

7、培養(yǎng)特性的研究；細(xì)胞培養(yǎng)條件的研究，包括對(duì)溶氧、培養(yǎng)基成分、細(xì)胞代謝產(chǎn)物、生物反應(yīng)器中微環(huán)境等對(duì)細(xì)胞生長的影響；不同細(xì)胞微載體的篩選對(duì)比研究。微載體與細(xì)胞相互影響因素的研究；建立生產(chǎn)規(guī)模的逐級(jí)放大方法，以達(dá)到百升以上規(guī)模；生物反應(yīng)器的操控對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響。建立高滴度病毒的增殖培養(yǎng)方法，確定最優(yōu)的細(xì)胞與病毒培養(yǎng)方法及培養(yǎng)條件。研究多種病毒在生物反應(yīng)器中的生長特點(diǎn)。2、考核指標(biāo)（1）研究成果示范于其它大品種疫苗的生產(chǎn)和研究開發(fā)；著重應(yīng)用于脊髓灰質(zhì)炎病毒、乙腦滅活疫苗、狂犬病、風(fēng)疹（2BS等二倍體細(xì)胞）、輪狀病毒（vero）、水痘等多種病毒性疫苗的技術(shù)升級(jí)或產(chǎn)品開發(fā)。（2）細(xì)胞病毒批次培養(yǎng)規(guī)模：生物

8、反應(yīng)器體積30升，力爭使部分疫苗產(chǎn)品生產(chǎn)能力達(dá)到100升的規(guī)模。（3）培養(yǎng)細(xì)胞密度1×107cells/ml；工作體積的微載體20g/l；培養(yǎng)病毒滴度不低于旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)技術(shù)。（4）病毒感染后，細(xì)胞培養(yǎng)維持時(shí)間應(yīng)20天，并能多次收獲病毒；溶細(xì)胞性病毒除外。（5）病毒滴度均高于藥典三部中規(guī)定的各種疫苗原液的標(biāo)準(zhǔn)。3、經(jīng)費(fèi)預(yù)算本課題擬安排國撥經(jīng)費(fèi)520萬元，要求申報(bào)單位自籌經(jīng)費(fèi)不低于520萬元。課題3、疫苗抗原的高效表達(dá)技術(shù)及分離純化技術(shù)應(yīng)用研究1、研究內(nèi)容利用基因工程技術(shù)改造菌毒種，篩選具有我國自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的高表達(dá)工程菌毒種, 建立漢遜酵母表達(dá)質(zhì)粒和酵母工程細(xì)胞，以及酵母漢遜或畢赤酵母表達(dá)系

9、統(tǒng)；提高現(xiàn)有重組疫苗工程菌毒種的表達(dá)量，以及改造抗原表達(dá)產(chǎn)物的形式；應(yīng)用于構(gòu)建高效的工程菌毒種表達(dá)乙型肝炎病毒亞單位疫苗抗原等，提高免疫原性，探索培養(yǎng)液的國產(chǎn)化，實(shí)現(xiàn)高密度發(fā)酵與高表達(dá)技術(shù)。建立高效的疫苗抗原表達(dá)技術(shù)體系，包括普通抗原、結(jié)構(gòu)復(fù)雜疫苗抗原等在內(nèi)的抗原表達(dá)研究開發(fā)。利用基因工程技術(shù)構(gòu)建重組疫苗抗原、新型載體蛋白用于結(jié)合疫苗；以中國綠膿桿菌優(yōu)勢(shì)感染毒株為親本株構(gòu)建系列脫毒的疫苗抗原組分，研制更為安全、有效的外毒素疫苗或有效的抗原載體；通過基因改造，建立漢遜酵母高效表達(dá)技術(shù)平臺(tái)，并構(gòu)建漢遜酵母表達(dá)人乳頭瘤病毒疫苗；解決用一次性反應(yīng)器系統(tǒng)培養(yǎng)昆蟲細(xì)胞高效表達(dá)HPV疫苗的所有關(guān)鍵技術(shù)，建立

10、通用的、實(shí)驗(yàn)條件達(dá)到規(guī)?；降募?xì)胞培養(yǎng)技術(shù)平臺(tái)和疫苗生產(chǎn)工藝平臺(tái)；應(yīng)用基因工程構(gòu)建呼吸道合胞病毒（RSV）G、F亞單位疫苗抗原等。研究疫苗抗原的分離純化技術(shù)，應(yīng)用于基因重組表達(dá)表達(dá)疫苗抗原、其它亞單位抗原成分、載體蛋白等成分等的分離純化，以及應(yīng)用于純化疫苗如Vero細(xì)胞培養(yǎng)滅活乙腦疫苗等產(chǎn)品的大規(guī)模純化技術(shù)研究。 2、考核指標(biāo)（1）規(guī)?；囵B(yǎng)水平細(xì)菌的批次培養(yǎng)體積1000L；酵母的批次培養(yǎng)體積550L；昆蟲細(xì)胞批次培養(yǎng)體積50L；（2）疫苗抗原表達(dá)量以原核表達(dá)體系其表達(dá)量超過35%；以酵母作為表達(dá)體系其疫苗抗原表達(dá)量超過100mg/L；實(shí)現(xiàn)工程菌抗原表達(dá)量顆粒狀HBsAg表達(dá)量達(dá)100g/m

11、l發(fā)酵液，最終可得HBsAg顆粒狀純品30g/ml發(fā)酵液；以昆蟲細(xì)胞作為表達(dá)體系，其抗原表達(dá)量超過10mg/L；（3）建立疫苗抗原的高效表達(dá)技術(shù)及規(guī)模化分離純化技術(shù)，提高疫苗抗原純度及回收率：雜蛋白去除率99%；或抗原純度95%；細(xì)菌表達(dá)產(chǎn)物純化回收率35%；病毒純化后的回收率35%（4）提高疫苗抗原的比活性；（5）部分發(fā)酵原材料實(shí)現(xiàn)國產(chǎn)化；（6）產(chǎn)品指標(biāo)：滅活乙腦病毒純化回收率25%，每劑病毒蛋白含量2g，實(shí)現(xiàn)年產(chǎn)1000萬劑量；狂犬病病毒純化回收率50%，每劑疫苗蛋白質(zhì)含量65g；單一廠家的乙肝疫苗實(shí)現(xiàn)年產(chǎn)不少于4000萬人份。3、經(jīng)費(fèi)預(yù)算本課題擬安排國撥經(jīng)費(fèi)800萬元，要求申報(bào)單位自籌經(jīng)

12、費(fèi)不低于800萬元。課題4、擴(kuò)大免疫規(guī)劃疫苗規(guī)?；a(chǎn)和升級(jí)換代關(guān)鍵技術(shù)研究1. 研究內(nèi)容（1）脊髓灰質(zhì)炎疫苗升級(jí)換代攻關(guān)研究優(yōu)化Sabin株制備脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗（IPV）的生產(chǎn)工藝，通過改進(jìn)培養(yǎng)方法、優(yōu)化培養(yǎng)參數(shù)，提高病毒產(chǎn)量。改進(jìn)純化工藝，提高產(chǎn)品回收率，降低產(chǎn)品的雜質(zhì)含量。由中試規(guī)模放大到生產(chǎn)規(guī)模，進(jìn)行I、II、III期臨床研究。液體疫苗取代糖丸疫苗的研究。提高脊髓灰質(zhì)炎疫苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，達(dá)到WHO標(biāo)準(zhǔn)。疫苗劑型和劑量研究、原輔材料及包裝材料國產(chǎn)化研究。（2）無細(xì)胞百白破疫苗升級(jí)和生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)研究建立大規(guī)模自動(dòng)化細(xì)菌發(fā)酵技術(shù)工藝，優(yōu)化細(xì)菌培養(yǎng)條件，提高PT、FHA產(chǎn)量；優(yōu)化現(xiàn)有離心共純化法

13、生產(chǎn)工藝。同時(shí)，采用超濾和一步柱層析法的純化方法代替離心法用于百日咳菌有效抗原（PT、FHA）的純化工藝，提高保護(hù)性抗原的純度和收獲率；優(yōu)化和穩(wěn)定百日咳抗原解毒條件，避免產(chǎn)生毒性逆轉(zhuǎn)現(xiàn)象；疫苗中增加百日咳有效組份至至少三個(gè)組分（PT、FHA、Prn），以趕上國際同類產(chǎn)品并符合WHO要求；建立標(biāo)準(zhǔn)化的DTaP生產(chǎn)過程及中間產(chǎn)品、終產(chǎn)品的質(zhì)量控制方法和指標(biāo)，特別是有效抗原成分、活性和毒性檢定項(xiàng)目要求；探索利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)構(gòu)建疫苗抗原或抗原表位肽。（3）麻腮風(fēng)三聯(lián)減毒活疫苗生產(chǎn)工藝優(yōu)化和規(guī)模生產(chǎn)技術(shù)制備高滴度的組分疫苗原液；疫苗病毒組分配比及凍干條件的優(yōu)化；風(fēng)疹和腮腺炎病毒毒種的克隆篩選。（4）甲

14、肝疫苗規(guī)?；a(chǎn)技術(shù)研究針對(duì)甲肝滅活疫苗或減毒活疫苗，開展：大規(guī)模病毒培養(yǎng)的研究；集約化生產(chǎn)的建立；疫苗生產(chǎn)質(zhì)控用參比品及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究，通過與WHO合作，向WHO申報(bào)并爭取WHO授權(quán)制備疫苗的國際參比品，同時(shí)將滅活疫苗的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與國外規(guī)程統(tǒng)一；優(yōu)化甲肝滅活疫苗純化工藝條件；優(yōu)化凍干甲肝減毒活疫苗的組分配比及凍干條件，進(jìn)一步縮短凍干周期時(shí)間，優(yōu)化凍干保護(hù)劑的配比，進(jìn)一步提高熱穩(wěn)定性；疫苗上市后的臨床免疫效果評(píng)價(jià)。2. 考核指標(biāo)（1）脊髓灰質(zhì)炎疫苗升級(jí)換代攻關(guān)研究按國家擴(kuò)大免疫規(guī)劃產(chǎn)品現(xiàn)行定價(jià)，較糖丸疫苗增加產(chǎn)值250%；使用國產(chǎn)塑料管包裝的脊髓灰質(zhì)炎液體疫苗符合國家標(biāo)準(zhǔn)；Sabin株IPV由中

15、試規(guī)模放大到生產(chǎn)規(guī)模，使IPV制造技術(shù)達(dá)到國際先進(jìn)水平；Sabin株IPV完成I、II臨床研究，力爭完成III期臨床研究；連續(xù)生產(chǎn)三批合格疫苗，通過國家GMP認(rèn)證，力爭獲得Sabin IPV的新藥證書或生產(chǎn)文號(hào)。（2）無細(xì)胞百白破疫苗升級(jí)和生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)研究產(chǎn)品質(zhì)量達(dá)到國外同類產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)入國際市場；提高百日咳有效組份純度至90%。力爭達(dá)到由目前的百日咳菌二組份轉(zhuǎn)換為多組份疫苗，增加有效組分至3組分（PT、FHA、Prn）。開發(fā)適合我國成人加強(qiáng)免疫用無細(xì)胞百日咳疫苗；細(xì)菌培養(yǎng)有效抗原的產(chǎn)量血凝效價(jià)由目前的1：64提高到1：512以上；建立和實(shí)現(xiàn)30005000升體積的自動(dòng)化細(xì)菌發(fā)酵培養(yǎng)工藝；提

16、高抗原純化回收率，使成品單產(chǎn)量由現(xiàn)在的1人份/10ml提高到1人份/5ml；建立有效成分（PT、FHA、Prn）參考抗原、定量檢測(cè)、分子分布的有效檢測(cè)方法；建立疫苗效力評(píng)價(jià)的抗體滴度檢測(cè)法。建立DTaP的標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)量控制指標(biāo)，特別是提高毒性檢定項(xiàng)目要求，達(dá)到國際領(lǐng)先水平；年產(chǎn)量由目前約500萬人份增加到約4000萬人份，占國內(nèi)需求量6400萬的2/3以上。（3）麻腮風(fēng)三聯(lián)減毒活疫苗生產(chǎn)工藝優(yōu)化和規(guī)模生產(chǎn)技術(shù)麻腮風(fēng)三聯(lián)疫苗原液中麻疹病毒滴度5.0 lgCCID50/ml、腮腺炎病毒6.0 lgTCID50/ml、風(fēng)疹病毒5.0 lgCCID50/ml；確定最佳疫苗配比方案，保證免疫效果；實(shí)現(xiàn)年產(chǎn)3

17、000萬人份。（4）甲肝疫苗規(guī)?；a(chǎn)技術(shù)研究在大規(guī)模、集約化生產(chǎn)基礎(chǔ)上，保證疫苗質(zhì)量達(dá)到國際標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)疫苗出口；達(dá)到年產(chǎn)3000萬支甲肝疫苗。3、經(jīng)費(fèi)預(yù)算本課題擬安排國撥經(jīng)費(fèi)1600萬元，其中：（1）脊髓灰質(zhì)炎疫苗升級(jí)換代攻關(guān)研究部分?jǐn)M安排國撥經(jīng)費(fèi)400萬元，要求申報(bào)單位自籌經(jīng)費(fèi)不低于400萬元；（2）無細(xì)胞百白破疫苗升級(jí)和生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)研究部分?jǐn)M安排國撥經(jīng)費(fèi)400萬元，要求申報(bào)單位自籌經(jīng)費(fèi)不低于400萬元；（3）麻腮風(fēng)三聯(lián)減毒活疫苗生產(chǎn)工藝優(yōu)化和規(guī)模生產(chǎn)技術(shù)擬安排國撥經(jīng)費(fèi)400萬元，要求申報(bào)單位自籌經(jīng)費(fèi)不低于400萬元；（4）甲肝疫苗規(guī)?；a(chǎn)技術(shù)研究部分?jǐn)M安排國撥經(jīng)費(fèi)400萬元，要求申報(bào)單

18、位自籌經(jīng)費(fèi)不低于400萬元。課題5、乙型腦炎減毒活疫苗的國際GMP預(yù)認(rèn)證研究1、研究內(nèi)容（1）生產(chǎn)工藝和質(zhì)量保證體系的進(jìn)一步優(yōu)化。 （2）SPF動(dòng)物種質(zhì)庫保持和基因穩(wěn)定性研究與檢測(cè)方法建立及SPF動(dòng)物大規(guī)模繁殖。（3）加強(qiáng)上市后臨床評(píng)價(jià)，海外市場的臨床評(píng)價(jià)，適應(yīng)國際化需要。2、考核指標(biāo)（1）實(shí)現(xiàn)年產(chǎn)5000萬人份乙腦減毒活疫苗，其中80%出口。（2）2008年完成WHO GMP預(yù)認(rèn)證。同時(shí)逐步實(shí)現(xiàn)全所所有生產(chǎn)、科研、動(dòng)力供應(yīng)、動(dòng)物試驗(yàn)等場所（如其他GMP車間、冷庫、孵室、動(dòng)力檢測(cè)計(jì)量等）的中央控制室集中監(jiān)控。3、經(jīng)費(fèi)預(yù)算本課題擬安排國撥經(jīng)費(fèi)400萬元，要求申報(bào)單位自籌經(jīng)費(fèi)不低于400萬元。課題

19、6、23價(jià)肺炎疫苗規(guī)?；a(chǎn)和質(zhì)控關(guān)鍵技術(shù)研究1、研究內(nèi)容（1）生產(chǎn)規(guī)模的放大和生產(chǎn)工藝的優(yōu)化。提高細(xì)菌多糖產(chǎn)量和收獲率，建立1000升以上發(fā)酵體積的高密度細(xì)菌發(fā)酵技術(shù)；提高純化后獲得的多糖回收率；對(duì)多糖純化工藝進(jìn)行優(yōu)化，建立收率高、內(nèi)毒素含量低的多糖純化工藝。（2）疫苗定性、定量檢測(cè)用血清的國產(chǎn)化。（3）制備與標(biāo)定企業(yè)參考品和擬申報(bào)制備國家參比品。（4）細(xì)菌多糖結(jié)合疫苗研究開發(fā)。2、考核指標(biāo)（1）生產(chǎn)發(fā)酵培養(yǎng)由100升罐體放大到1000升；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)達(dá)到歐洲藥典標(biāo)準(zhǔn)。（2）產(chǎn)規(guī)模擴(kuò)大后，實(shí)現(xiàn)年產(chǎn)500萬人份23價(jià)肺炎多糖疫苗，年銷售收入3.5億元，市場占有率達(dá)到80%。（3）使用國產(chǎn)血清（多抗

20、和單抗）應(yīng)用于產(chǎn)品的質(zhì)量檢測(cè)和控制；向國家有關(guān)部門申報(bào)并且協(xié)助中國藥品生物制品檢定所建立我國質(zhì)量檢定參比品和參考品；產(chǎn)品質(zhì)量檢定和控制使用的抗血清實(shí)現(xiàn)國產(chǎn)化，國產(chǎn)血清的效價(jià)不低于1：64。（4）多價(jià)多糖結(jié)合疫苗完成臨床研究，力爭完成臨床試驗(yàn)或獲得新藥證書。3、經(jīng)費(fèi)預(yù)算本課題擬安排國撥經(jīng)費(fèi)600萬元，要求申報(bào)單位自籌經(jīng)費(fèi)不低于600萬元。課題7、流感裂解疫苗質(zhì)量提高與規(guī)?；a(chǎn)技術(shù)研究1、研究內(nèi)容（1）大規(guī)模病毒培養(yǎng)技術(shù)研究和應(yīng)用，提高單枚雞胚的病毒產(chǎn)出量。 （2）生產(chǎn)工藝技術(shù)優(yōu)化并驗(yàn)證抗原性和免疫原性。（3）提高質(zhì)量的有關(guān)技術(shù)研究，參照WHO和歐盟GMP要求，降低產(chǎn)品中有害成分如硫柳汞、內(nèi)毒素

21、、雜蛋白等的含量。（4）提高疫苗穩(wěn)定性，主要是提高血凝素的穩(wěn)定性；針對(duì)WHO和歐盟標(biāo)準(zhǔn)，增加神經(jīng)氨酸酶的定性測(cè)定等。2、考核指標(biāo)（1）技術(shù)指標(biāo)：在大規(guī)模、集約化生產(chǎn)基礎(chǔ)上，保證疫苗質(zhì)量達(dá)到國際標(biāo)準(zhǔn)，完善出口注冊(cè)資料和數(shù)據(jù)，申報(bào)并通過WHO預(yù)認(rèn)證，實(shí)現(xiàn)疫苗出口；完成不少于5個(gè)國家的注冊(cè)，力爭出口500-1000萬人份。（2）完成對(duì)工藝的改造，提高純化回收率，至少提高收率30%以上；力爭達(dá)到平均每個(gè)雞胚產(chǎn)出1劑量疫苗。（3）年產(chǎn)量達(dá)3000萬支流感裂解疫苗。（4）獲得WHO的GMP預(yù)認(rèn)證。3、經(jīng)費(fèi)預(yù)算本課題擬安排國撥經(jīng)費(fèi)320萬元，要求申報(bào)單位自籌經(jīng)費(fèi)不低于320萬元。課題8、輪狀病毒疫苗生產(chǎn)新工藝研究1、研究內(nèi)容（1）解決輪狀病毒口服活疫苗現(xiàn)有工藝中影響產(chǎn)品規(guī)模化生產(chǎn)的技術(shù)瓶頸，原代牛腎細(xì)胞有限傳代培養(yǎng)技術(shù)。（2）建立利用生物反應(yīng)器進(jìn)行輪狀病毒疫苗生產(chǎn)的新工藝，采用生物反應(yīng)器進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模、高密度培養(yǎng)傳代細(xì)胞，如Vero細(xì)胞等。（3）多價(jià)輪狀病毒純化疫苗工藝技術(shù)。（4）輪狀病毒疫苗臨床研究方法和判定標(biāo)準(zhǔn)的建立。（5）研制新型輪狀病毒疫苗,解決研制中三價(jià)輪狀病毒基因重配株疫苗的問題、質(zhì)量控制方法及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立、臨床研究評(píng)價(jià)體系的建立等一系列關(guān)鍵技術(shù)；建立各型輪狀病毒基因檢定方法，并進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化研究；建立檢測(cè)混合成分中各型輪狀病毒的方