機(jī)能實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1、影響尿液生成的因素【目的和原理】尿生成的過程包括腎小球的濾過、腎小管和集合管的重吸收和分泌三個(gè)過程。凡能影響上述過程的任何因素，均可影響尿的生成并可引起尿量及尿的性質(zhì)、成分的改變。本實(shí)驗(yàn)以家兔為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，采用膀胱插管術(shù)收集并記錄尿量，主要觀察不同因素或藥物對(duì)尿量的影響。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? .學(xué)習(xí)膀胱插管術(shù)、尿量記錄及尿糖鑒定等泌尿?qū)嶒?yàn)的方法。2 .進(jìn)一步學(xué)習(xí)并熟悉大動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本方法和技術(shù)。3 .觀察影響尿生成的若干因素，加深理解尿生成的機(jī)理?！緦?shí)驗(yàn)材料】1 .動(dòng)物家兔2 .試劑和藥品生理鹽水、20%氨基甲酸乙酯溶液、20%葡萄糖注射液、100單位/毫升肝素生理鹽水（或6%枸檬酸鈉）、1：10,00

2、0去甲腎上腺素、垂體后葉素、速尿、20%甘露醇、班氏（Benedict）尿糖定性試劑。3 .裝置和器材微型計(jì)算機(jī)及生物信號(hào)采集與處理系統(tǒng)、血壓換能器、保護(hù)電極、兔手術(shù)臺(tái)和手術(shù)器械、動(dòng)脈插管、動(dòng)脈夾、膀胱漏斗、注射器（2ml、5ml、10ml、20ml）及針頭、酒精燈、試管架、試管和試管夾、輸液裝置、手術(shù)燈、紗布、絲線等。【實(shí)驗(yàn)方法】1 .麻醉固定將兔稱重后，自耳緣靜脈緩慢注入20%氨基甲酸乙酯（5ml/kg）,待動(dòng)物麻醉后仰臥固定于兔手術(shù)臺(tái)上，剪去頸部和下腹部手術(shù)野的毛。2 .手術(shù)1）頸總動(dòng)脈插管在頸部正中切開皮膚67厘米，分離皮下組織及肌肉，暴露出氣管。在氣管的兩邊分別分離出左頸總動(dòng)脈和右迷

3、走神經(jīng)，在其下穿線備用。按頸動(dòng)脈插管方法將充滿肝素生理鹽水的動(dòng)脈插管插入左頸總動(dòng)脈，動(dòng)脈插管的另一端經(jīng)血壓換能器連接于生物信號(hào)采集、處理系統(tǒng)的某一通道上，用于觀察動(dòng)脈血壓的變化。手術(shù)完畢后用溫的生理鹽水紗布覆蓋創(chuàng)面。2）膀胱插管在下腹部正中線臍下方作一長(zhǎng)約34厘米的皮膚切口，其下端直達(dá)恥骨聯(lián)合。分離皮下組織并沿腹白線切開腹壁。將膀胱翻出腹外，辨認(rèn)清楚輸尿管，并向腎側(cè)仔細(xì)地分離兩側(cè)輸尿管23厘米，在其下方穿一條線，將膀胱上翻用線結(jié)扎膀胱頸部以阻斷它同尿道的通路；然后在膀胱頂部選血管較少處，做一環(huán)形的荷包縫合，縫合線兩端要足夠長(zhǎng)，暫不結(jié)扎；在荷包縫合的中央剪一縱行小切口，插入膀胱漏斗，然后用荷包縫

4、合線將切口邊緣固定于膀胱漏斗的凹槽上，膀胱漏斗的延伸管與引流導(dǎo)管相連。動(dòng)物所產(chǎn)生的尿液經(jīng)膀胱漏斗、引流導(dǎo)管流出后直接觀察。手術(shù)完畢用溫?zé)岬纳睇}水紗布覆蓋腹部創(chuàng)口。3 .實(shí)驗(yàn)記錄生物信號(hào)采集與處理系統(tǒng)：與上次實(shí)驗(yàn)相同4 .觀察項(xiàng)目待尿量和血壓穩(wěn)定后，即可進(jìn)行下列各項(xiàng)觀察。注意每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)開始前都必須先記錄一段正常尿量和血壓曲線作為對(duì)照，然后進(jìn)行注射或刺激，并連續(xù)觀察和記錄至效應(yīng)明顯后再等待恢復(fù)至原來水平時(shí)，才能開始下一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。1）耳緣靜脈快速注射37OC生理鹽水20ml,觀察血壓和尿量的變化。2）結(jié)扎并剪斷右側(cè)迷走神經(jīng)，用中等強(qiáng)度的電流刺激其外周段2030秒，使血壓維持在4050mmHg,觀察尿量

5、的變化。3）先收集尿液2滴進(jìn)行尿糖定性實(shí)驗(yàn)*作為對(duì)照，然后自耳緣靜脈注射20%葡萄糖溶液10ml,觀察血壓和尿量的變化，在尿量變化最明顯時(shí)，再收集尿液2滴作尿糖定性實(shí)驗(yàn)。4)自耳緣靜脈注射1：10,000去甲腎上素0.5ml,觀察血壓和尿量的變化。5)自耳緣靜脈注射速尿0.5ml/kg,觀察血壓和尿量的變化。6)自耳緣靜脈注射垂體后葉素4單位，觀察血壓和尿量的變化。7)自耳緣靜脈注射20%甘露醇23ml/kg,觀察血壓和尿量的變化。8)在動(dòng)物的一側(cè)大腿的股三角區(qū)，切開皮膚，分離出一側(cè)股動(dòng)脈，并插入硬塑料管進(jìn)行放血，使血壓降至4050mmHg,觀察尿量的變化。然后再迅速補(bǔ)充生理鹽水，觀察血壓和尿

6、量的變化。9)保存實(shí)驗(yàn)結(jié)果，通過反演功能將結(jié)果調(diào)出并進(jìn)行整理、編輯、打印。對(duì)記錄到的動(dòng)脈血壓、尿量及尿糖定性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行分析、討論，得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論。影響尿生成的因素一實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表格如下家兔血壓與尿量血壓(mmHg)尿里(ml)正常-20ml生理鹽水iv刺激迷走神經(jīng)外周端20%葡萄糖5mliv1:10000去甲腎iv速尿5mg/kgiv垂體后葉素2單位iv結(jié)果解釋(1) IV生理鹽水20ml一血量增加一刺激心肺感受器一抑制ADH釋放(2) 電刺激迷走神經(jīng)外周端一BP下降一壓力感受器上傳沖動(dòng)減少一ADH釋放增加(3) IV20%葡萄糖5ml:滲透性利尿(4) NA:-腎血管平滑肌”受體一腎血管收縮一腎

7、血流量/毛細(xì)血管血壓下降一GFR減少近球細(xì)胞3受體一腎素釋放-腎素、血管緊張素、醛固酮系統(tǒng)一腎小管/集合管對(duì)水和鈉重吸收增加(5)速尿：抑制髓神升支粗段Na+-K+-2Cl同向轉(zhuǎn)運(yùn)，降低外髓腎小管內(nèi)外滲透壓梯度，水重吸收減少。(6) ADH:遠(yuǎn)曲小管和集合管上皮的V2型受體結(jié)合，增加管腔膜水通道數(shù)目，水重吸收增加【注意事項(xiàng)】1 .實(shí)驗(yàn)前應(yīng)給兔子多喂青菜，或在麻醉后立即給動(dòng)物進(jìn)行適量的輸液，以增加其基礎(chǔ)尿流量。2 .實(shí)驗(yàn)中需多次靜脈注射，應(yīng)注意保護(hù)兔的耳緣靜脈。注射時(shí)，先從末梢端開始，逐漸向耳根端移近；或選用小兒頭皮針刺入耳緣靜脈，用膠布固定，用生理鹽水維持使形成一靜脈通路以便于多次注射使用。3 .各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)順序的安排是：在尿量增多的基礎(chǔ)上進(jìn)行減少尿生成的實(shí)驗(yàn)