醫(yī)院生化室標(biāo)準(zhǔn)操作程序醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件P

1、1寧波市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件分析項目 SOP 文件編號：LJ-FXXMSOP-02版本：2010-A/0生效日期：20101001生化室標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP） 2008 年 12 月2寧波市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件分析項目 SOP 文件編號：LJ-FXXMSOP-02版本：2010-A/0生效日期：20101001文件首頁文件類別：分析項目 SOP 文件文件編號：LJ-XM/YQSOP-02文件版本：2010 年第一版，未修改。啟用日期：2010 年 10 月 01 日有效時間：至 2012 年 09 月 30 日發(fā)出文件數(shù)：2 份。分別由科主任和生化室存放與使用。文件編寫者：王旭曉文件簽發(fā)者

2、：劉 波文件有效期內(nèi)的修改：修改日期修改內(nèi)容修改方式負(fù)責(zé)人簽名科主任簽名本 SOP 變動程序：任何一位使用本 SOP 的工作人員如提出對本 SOP 改動意見，或本測定項目的方法、試劑有變動的情況，可以對本 SOP 作出改動，但必須先報經(jīng)專業(yè)主管和科主任批準(zhǔn)。文件復(fù)審日期： 年 月 日。復(fù)審后自動延長有效期兩年。復(fù)審?fù)ㄟ^審批者： 3寧波市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件生化項目 sop 目錄序號序號文件名稱文件名稱文件編號文件編號備注備注一一 HITACHIHITACHI 76007600 分析項目分析項目1 1血清總蛋白測定SH-XMSOP-012 2血清白蛋白測定SH-XMSOP-023 3血清總膽紅

3、素測定 SH-XMSOP-034 4血清結(jié)合膽紅素測定SH-XMSOP-045 5血清總膽汁酸測定SH-XMSOP-056 6血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定SH-XMSOP-067 7血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定SH-XMSOP-078 8血清堿性磷酸酶測定SH-XMSOP-089 9血清-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測定SH-XMSOP-091010血清膽堿酯酶測定SH-XMSOP-101111乳酸脫氫酶測定SH-XMSOP-111212血清肌酸激酶測定SH-XMSOP-121313血清肌酸激酶同工酶測定SH-XMSOP-131414淀粉酶測定SH-XMSOP-141515葡萄糖測定SH-XMSOP-151616

4、尿素測定SH-XMSOP-161717肌酐測定SH-XMSOP-171818尿酸測定SH-XMSOP-181919血清總膽固醇測定SH-XMSOP-192020血清甘油三酯測定SH-XMSOP-202121血清高密度脂蛋白膽固醇測定SH-XMSOP-212222血清低密度脂蛋白膽固醇測定SH-XMSOP-222323血清載脂蛋白 A1 測定SH-XMSOP-232424血清載脂蛋白 B 測定SH-XMSOP-242525鉀、鈉、氯離子測定SH-XMSOP-252626鈣測定SH-XMSOP-262727血清無機(jī)磷測定SH-XMSOP-272828血清鎂測定SH-XMSOP-282929腺苷脫氨

5、酶測定SH-XMSOP-293030血清 C-反應(yīng)蛋白測定SH-XMSOP-303131血清免疫球蛋白 IgM 定量測定SH-XMSOP-313232血清免疫球蛋白 IgG 定量測定SH-XMSOP-323333血清免疫球蛋白 IgA 定量測定SH-XMSOP-333434血清補(bǔ)體 C3 測定SH-XMSOP-343535血清補(bǔ)體 C4 測定SH-XMSOP-353636血清類風(fēng)濕因子測定SH-XMSOP-363737血清抗鏈球菌溶血素“O”測定SH-XMSOP-374寧波市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件項目 SOP 文件編號：SH-FXXM02-01版本：2010-A/0生效日期：20101001一

6、一 血清總蛋白測定共 4 頁第 1 頁1 檢驗(yàn)申請 單獨(dú)檢驗(yàn)項目申請：血清總蛋白測定(縮寫 TP)；組合項目申請：肝功能測定項目組合。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請。2 標(biāo)本采集與處理2.12.1 標(biāo)本采集2.1.12.1.1 常規(guī)靜脈采血約 2ml，不抗凝，置普通試管中或采用含分離膠的真空采血管。2.1.22.1.2 檢驗(yàn)申請單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識符。2.1.32.1.3 標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請單上填寫標(biāo)本采集時間，如急診標(biāo)本，加上急查標(biāo)識。2.1.42.1.4 標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請單一起及時運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.52.1.

7、5 下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.12.1.5.1 標(biāo)本量不足：少于 0.3ml 的全血標(biāo)本，或少于 0.1ml 的血清或血漿。2.1.5.22.1.5.2 對反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.32.1.5.3 無法確認(rèn)標(biāo)本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.42.1.5.4 其他如標(biāo)識涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.22.2 標(biāo)本保存2.2.12.2.1 接收標(biāo)本后在 30min 內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.22.2.2 標(biāo)本保存時間：室溫（1525）下可穩(wěn)定一周，普通冰箱中（28）穩(wěn)定一個月。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過1d 的標(biāo)本均加塞密閉或

8、覆蓋濕巾。2.2.32.2.3 已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號，置 28冰箱內(nèi)保存 7d。2.32.3 標(biāo)本采集的注意事項2.3.12.3.1 采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.22.3.2 不建議采集抗凝血標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。3 方法原理雙縮脲法。堿性溶液中的銅離子和蛋白質(zhì)或多肽分子中的肽鍵反應(yīng)，生成紫紅色絡(luò)合物，絡(luò)合物在波長540nm處的吸光度和蛋白質(zhì)的濃度成正比。4 試劑及其他用品4.14.1 試劑：雙縮脲法測定總蛋白試劑盒，由寧波美康生物科技有限公司出品。54.24.2 試劑盒保存：保存于 2-8，避光保存可穩(wěn)定 12 個月。開蓋后放于儀器的試劑

9、倉冰箱中至少穩(wěn)定 30 天。4.34.3 試劑盒準(zhǔn)備：液態(tài)試劑型，即開即用，無特殊準(zhǔn)備。4.44.4 試劑盒主要成分4.4.14.4.1 R1：氫氧化鈉 400mmol/L，酒石酸鉀鈉 89 mmol/L4.4.24.4.2 R2：硫酸銅 24.3 mmol/L，碘化鉀 61 mmol/L，氫氧化鈉 400mmol/L，酒石酸鉀鈉 89 mmol/L。5 校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.15.1 校準(zhǔn)品：由羅氏公司提供的多項目校準(zhǔn)液 C.f.a.s.1552115.25.2 校準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：線性模式，2個校準(zhǔn)點(diǎn)。5.35.3 校準(zhǔn)周期：校準(zhǔn)間隔時間 7 天，批內(nèi)校準(zhǔn)時間 90 天。但在：更換試劑批號

10、或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時；儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；儀器的重要零件更換后；均須進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.45.4 校準(zhǔn)液重建方法：用3.00ml蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min后即可使用。6 質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.16.1 質(zhì)控品采用由 BIO-RAD 公司提供的定值質(zhì)控血清，產(chǎn)品號為 616/1UN6.26.2 質(zhì)控液重建方法：用 5.00ml 蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min 后即可使用。6.36.3質(zhì)控品測定：在每一批標(biāo)本中測定兩個水平質(zhì)控血清各一次。6.46.4 質(zhì)控規(guī)則：采用 Westgard 多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。6.56.5 如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的

11、糾正措施及時糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本檢測7 適用儀器適用 Hitachi 7600 型全自動生化分析儀。8 標(biāo)本檢測步驟裝載試劑 進(jìn)行校準(zhǔn) 進(jìn)行質(zhì)控 輸入標(biāo)本檢測項目 加載標(biāo)本 標(biāo)本測定 結(jié)果復(fù)核 報告。 9主要分析參數(shù)化學(xué)原理：雙縮脲法；測定原理:比色法；測定方法：一點(diǎn)終點(diǎn)法；反應(yīng)方向：正反應(yīng)；單位：g/L；校準(zhǔn)模式：線性；校準(zhǔn)周期：14 天；校準(zhǔn)點(diǎn)：2 個；波長: 主波長 540nm，輔助波長 700 nm；樣本量：3.0l；試劑：R1 150l；測定時間：4.0-7.7sec；分析范圍：10-120g/L。10 結(jié)果計算總蛋白濃度（g/L）(A標(biāo)本/A標(biāo)準(zhǔn)) 校準(zhǔn)液蛋白

12、濃度 (g/L) A：AA546nm A660nm； 儀器根據(jù)此公式自動給出每個標(biāo)本測定結(jié)果。11 檢驗(yàn)結(jié)果的報告及范圍11.111.1 結(jié)果的報告11.1.111.1.1 結(jié)果經(jīng)審核確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報告。611.1.211.1.2 報告單上標(biāo)明結(jié)果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.311.1.3 如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報告單上指出。11.211.2 報告范圍：2150g/L，超過此范圍的結(jié)果報告時必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)測定的結(jié)果。12 操作性能12.112.1 精密度

13、：血清/血漿：批內(nèi)CV 0.47%0.70%，批間 CV 0.95%1.22%。12.212.2 線性范圍：2150g/L。12.312.3 方法的有限性及干擾因素：甘油三酯達(dá) 11.3mmol/L 時影響小于 2%，血紅蛋白達(dá) 5g/L 時影響小于 9%，膽紅素達(dá) 547umol/L 時影響小于 10%。13 參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平參考范圍：6080 g/L。14 臨床意義14.114.1 血漿總蛋白包括血漿中所有的蛋白質(zhì)，其中主要有白蛋白和球蛋白兩大類。血漿蛋白主要的生理功能是維持血漿膠體滲透壓和 pH 值、運(yùn)送多種物質(zhì)的載體、參與凝血和抗凝血、免疫作用和營養(yǎng)作用等。14.214.2 TP

14、ALB球蛋白（含量），并可由此得出 A/G 比值。14.3 血清 TP 增高 （1）多數(shù)反映高免疫球蛋白血癥。 1）各種單克隆性免疫球蛋白病，如多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、冷沉淀球蛋白血癥等。 2）自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、風(fēng)濕病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。（2）多種原因引起的明顯脫水使血漿濃縮，致 TP 相對增高。這種情況 A/G 比值變化不大，為假性蛋白增多血癥。14.4 血清 TP 降低：多反映白蛋白合成減少或蛋白質(zhì)丟失。（1）肝臟合成減少：各種慢性肝病，吸收不良綜合癥，蛋白質(zhì)營養(yǎng)缺乏等。（2）蛋白質(zhì)尤其是白蛋白丟失：腎病綜合癥、急性腎炎和慢性腎炎從腎臟丟失；嚴(yán)重?zé)齻麖膭?chuàng)面丟失；潰

15、瘍性結(jié)腸炎等胃腸疾病從胃腸道丟失；大量失血和漿膜腔滲液也可使蛋白丟失。15 結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項目的聯(lián)系15.115.1 由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.215.2 認(rèn)真審核每一個測定結(jié)果，審核者對發(fā)出報告結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性負(fù)責(zé)，并在報告單的審核者處簽名。15.315.3 相關(guān)項目：審核與白蛋白、血清蛋白電泳、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等的關(guān)系，如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。716威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定（此項不作規(guī)定）17 有關(guān)引用程序與文件17.117.1 Hitachi 7600 型自動生化分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。 。17.217.2生化檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作

16、程序。17.317.3檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。17.417.4標(biāo)本送檢和接收程序。18 參考文獻(xiàn)18.118.1 陸永綏，張偉民主編. 臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程. 杭州:浙江大學(xué)出版社， 2004.18.218.2 北京利德曼生化技術(shù)有限公司雙縮脲法測定總蛋白試劑盒說明書。18.318.3 Kaplan，L.A.and Pesce，A.J.(Des)，Clinical Chemistry Theory，Analysis and Correlation，2nd Edition，C.V. Mosby Co.，1989.18.418.4 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編. 全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 (第三版). 東南

17、大學(xué)出版社，2006. 19 本 SOP 變動程序任何一位使用本 SOP 的工作人員如提出對本 SOP 改動意見，或本測定項目的方法、試劑有變動的情況，可以對本 SOP 作出改動，但必須先報經(jīng)專業(yè)主管和科主任批準(zhǔn)。20 本 SOP 涉及的記錄與表單20.120.1 試劑裝載記錄表20.220.2 試劑質(zhì)量記錄表20.320.3 質(zhì)控記錄20.420.4 失控及失控處理記錄20.520.5 檢驗(yàn)結(jié)果審核記8寧波市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件項目 SOP 文件編號：SH-FXXM02-02版本：版本：2010-A/02010-A/0生效日期：20101001二二 血清白蛋白測定第 1 頁共 4 頁1 檢

18、驗(yàn)申請 單獨(dú)檢驗(yàn)項目申請：血清白蛋白測定(縮寫 ALB)；組合項目申請：肝功能測定項目組合。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請。2 標(biāo)本采集與處理2.12.1 標(biāo)本采集2.1.12.1.1 常規(guī)靜脈采血約 2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的黃色蓋子 SST 真空采血管，如為急診標(biāo)本，使用淺綠色蓋子 PST 試管。2.1.22.1.2 檢驗(yàn)申請單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識符。2.1.32.1.3 標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請單上填寫標(biāo)本采集時間，如為急診標(biāo)本，加上急查標(biāo)識。2.1.42.1.4 標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請單一起及時運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對不合格標(biāo)本予以

19、拒收。2.1.52.1.5 下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.12.1.5.1 標(biāo)本量不足：少于 0.3ml 的全血標(biāo)本，或少于 0.1ml 的血清或血漿。2.1.5.22.1.5.2 對反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.32.1.5.3 無法確認(rèn)標(biāo)本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.42.1.5.4 其他如標(biāo)識涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.22.2 標(biāo)本保存2.2.12.2.1 接收標(biāo)本后在 30min 內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.22.2.2 標(biāo)本保存時間：室溫（1525）下可穩(wěn)定一周，普通冰箱中（28）穩(wěn)定一個月。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過

20、 1 天的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.32.2.3 已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號，置 28冰箱內(nèi)保存 7 天。2.32.3 標(biāo)本采集的注意事項2.3.12.3.1 采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.22.3.2 不建議采集抗凝血標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。3 方法原理溴甲酚綠法。在 pH 4.0 的溶液中，溴甲酚綠與白蛋白立即反應(yīng)形成綠色復(fù)合物，此復(fù)合物在波長 600nm 處的吸光度與白蛋白的濃度成正比。4 試劑及其他用品4.14.1 試劑：溴甲酚綠法測定白蛋白試劑盒，由寧波美康生物科技有限公司出品。4.24.2 試劑盒保存：保存于 225，不開蓋情況下

21、至標(biāo)簽的失效期。開蓋后放于儀器的冰箱中至少穩(wěn)定 30 天。開蓋后避免污染。變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時，表明有細(xì)菌污染，不能繼續(xù)使用。4.34.3 試劑盒準(zhǔn)備：液態(tài)單試劑型，即開即用，無特殊準(zhǔn)備。4.44.4 試劑盒主要成分：琥珀酸鹽緩沖液（pH 4.2）100mmol/L，溴甲酚綠0.2mmol/L，含有穩(wěn)定劑與保護(hù)劑。95 校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.15.1 校準(zhǔn)品：由羅氏公司提供的多項目校準(zhǔn)液 C.f.a.s.（Cat.No.155211） ，其白蛋白濃度值可溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)（CRM）470。5.25.2 校準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：線性模式，2個校準(zhǔn)點(diǎn)。5.35.3 校準(zhǔn)周期：校準(zhǔn)間隔時間 1

22、天。但在：更換試劑批號或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時；儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；儀器的重要零件更換后；均須進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.45.4 校準(zhǔn)液重建方法：用3.00ml蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min后即可使用。6 質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.16.1 質(zhì)控品采用由 BIO-RAD 公司提供的定值質(zhì)控血清，產(chǎn)品號為 616/1UN6.26.2 質(zhì)控液重建方法：用 5.00ml 蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min 后即可使用。6.36.3質(zhì)控品測定：在每一批標(biāo)本中測定兩個水平質(zhì)控血清各一次。6.46.4 質(zhì)控規(guī)則：采用 Westgard 多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。7 適用儀器適用 Hitachi 7600

23、型全自動生化分析儀。8 標(biāo)本檢測步驟裝載試劑 進(jìn)行校準(zhǔn) 進(jìn)行質(zhì)控 輸入標(biāo)本檢測項目 加載標(biāo)本 標(biāo)本測定 結(jié)果復(fù)核 報告。 9 主要分析參數(shù)Assay Code：1 Point End；Reaction Time：5；Assay Point：7；Wave Length Sec：700；Wave Length Prim：600；Sample N：2.0，D：254.075，I：4.0；R1：200；Abs. Limit：32000 Increase；Calibration Type：LogitLog 4P；Point：4；Span 3；Time Out：Full 20；SD Limit：0.1；D

24、uplicate Limit：32000；Sensitivity Limit：0；S1 ABS Limit：44300 44400；Unit：g/L；Technical Limit：10 60。10 結(jié)果計算計算公式：白蛋白濃度（g/L）（A標(biāo)本A空白）/（A標(biāo)準(zhǔn)A空白） 校準(zhǔn)液白蛋白濃度（g/L）注：根據(jù)雙波長測定，A A340nmA700nm儀器根據(jù)此公式自動給出每個標(biāo)本測定結(jié)果。11 檢驗(yàn)結(jié)果的報告及范圍11.111.1 結(jié)果的報告11.1.111.1.1 結(jié)果經(jīng)審核確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報告。11.1.211.1.2 報告單上標(biāo)明結(jié)果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名

25、，并有與申請單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.311.1.3 如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報告單上指出。11.211.2 報告范圍：1960g/L，超過此范圍的結(jié)果報告時必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)測定的結(jié)果。12 操作性能12.112.1 精密度：批內(nèi)CV為 0.8%，總CV 1.3%1.8%。12.212.2 線性范圍：1070g/L。12.312.3 方法的有限性及干擾因素：甘油三酯達(dá) 11.3mmol/L 時影響小于 10%，血10紅蛋白達(dá) 4.5g/L 時影響小于 10%，膽紅素達(dá) 684mol/L 時影響小于 2%。13 參考范圍及醫(yī)學(xué)決

26、定水平13.113.1參考范圍：3557g/L。13.213.2醫(yī)學(xué)決定水平13.2.113.2.120 g/L：低于此值，肝病患者提示嚴(yán)重預(yù)后不良。還應(yīng)測定尿蛋白，以查明有無過多的蛋白丟失。13.2.213.2.2 35g/L：此亦為參考范圍下限，凡低于此值時，各種引起白蛋白降低的因素均應(yīng)列入考慮范圍，如腎病、肝功不全、嚴(yán)重的營養(yǎng)不良、急、慢性炎癥、惡性腫瘤等。13.2.313.2.3 57g/L：在此值以上的，應(yīng)考慮脫水的可能性，并進(jìn)行紅細(xì)胞比積測定，以檢查其是否增高。14 臨床意義14.114.1血漿白蛋白的生理功能很多，包括營養(yǎng)、維持滲透壓、是血管內(nèi)多種物質(zhì)的運(yùn)輸載體等。白蛋白在肝臟中

27、合成，是監(jiān)測肝臟疾病的一個重要指標(biāo)。14.214.2肝臟疾病使白蛋白的合成減少表現(xiàn)為血清白蛋白濃度降低，并與肝臟病變的嚴(yán)重程度成比例，白蛋白是對肝功能作分級的評價指標(biāo)之一。14.314.3血清白蛋白降低還見于嚴(yán)重的吸收不良、腸梗阻、風(fēng)濕熱、惡病質(zhì)、以及多種全身性疾病。14.414.4當(dāng)有蛋白質(zhì)丟失過多的情況，如大面積燒傷、腎病綜合征、慢性腎炎、糖尿病、慢性腸炎、腫瘤、充血性心力衰竭等，血清白蛋白也常降低。14.514.5血清白蛋白增高的情況較少見，高白蛋白血癥偶見于脫水所致的血液濃縮。 15 結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項目的聯(lián)系15.115.1 由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.215.2

28、審核者認(rèn)真審核每一個測定結(jié)果，對發(fā)出報告結(jié)果的可靠性負(fù)責(zé)，并在報告單的審核者處簽名。15.315.3 相關(guān)項目：審核與總蛋白、血清蛋白電泳、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等的關(guān)系，如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定（本項不作規(guī)定）17 有關(guān)引用程序與文件17.117.1 Hitachi 7600 型自動生化分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。17.217.2生化檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。17.317.3檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。17.417.4標(biāo)本送檢和接收程序。18 參考文獻(xiàn)18.118.1 陸永綏，張偉民主編. 臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程. 杭州:浙江大學(xué)出版社， 2004.1

29、8.218.2 北京利德曼生化技術(shù)有限公司白蛋白測定試劑盒說明書。18.318.3 Kaplan，L.A.and Pesce，A.J.(Des)，Clinical Chemistry Theory，Analysis and Correlation，2nd Edition，C.V. Mosby Co.，1989. 18.418.4 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編. 全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 (第三版). 東南大學(xué)出版社，2006. 19 本 SOP 變動程序11任何一位使用本 SOP 的工作人員如提出對本 SOP 改動意見，或本測定項目的方法、試劑有變動的情況，可以對本 SOP 作出改動，但必須先報經(jīng)專

30、業(yè)主管和科主任批準(zhǔn)。20 本 SOP 涉及的記錄與表單20.120.1 試劑裝載記錄表20.220.2 試劑質(zhì)量記錄表20.320.3 質(zhì)控記錄20.420.4 失控及失控處理記錄20.520.5 檢驗(yàn)結(jié)果審核記錄12寧波市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件項目 SOP 文件編號：SH-FXXM02-03版本：版本：2010-A/02010-A/0生效日期：20101001三三 血清總膽紅素測定第 1 頁共 4 頁1 檢驗(yàn)申請 單獨(dú)檢驗(yàn)項目申請：血清總膽紅素測定(縮寫 TBIL)；組合項目申請：肝功能測定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請。2 標(biāo)本采集與處理2.12.1 標(biāo)本采集2.1.12.1.1 常規(guī)靜脈

31、采血約 2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的黃色蓋子 SST 真空采血管，如為急診標(biāo)本，使用淺綠色蓋子 PST 試管。2.1.22.1.2 檢驗(yàn)申請單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識符。2.1.32.1.3 標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請單上填寫標(biāo)本采集時間，如為急診標(biāo)本，加上急查標(biāo)識。2.1.42.1.4 標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請單一起及時運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.52.1.5 下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.12.1.5.1 標(biāo)本量不足：少于 0.3ml 的全血標(biāo)本，或少于 0.1ml 的血清或血漿。2.1.5.22.1.5.2 對反應(yīng)吸

32、光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.32.1.5.3 無法確認(rèn)標(biāo)本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.42.1.5.4 其他如標(biāo)識涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.22.2 標(biāo)本保存2.2.12.2.1 接收標(biāo)本后在 30min 內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.22.2.2 標(biāo)本保存時間：血液膽紅素見光易分解，標(biāo)本注意避光保存。室溫（1525）下可穩(wěn)定 2h，普通冰箱中（28）穩(wěn)定 12h。-15-25度可以穩(wěn)定 3 個月4 個月。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過1 天的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.32.2.3 已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號，置 28冰箱內(nèi)保

33、存 7 天。2.32.3 標(biāo)本采集的注意事項2.3.12.3.1 采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.22.3.2 不建議采集抗凝血標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。3 方法原理為礬酸氧化法。在表面活性劑存在下，膽紅素被化學(xué)氧化劑氧化，生成膽綠素，在一定波長處測定吸光度的減少，與膽紅素的濃度成正比。4 試劑及其他用品4.14.1 試劑：礬酸氧化法測定總膽紅素試劑盒，由日本和光公司出品。4.24.2 試劑盒保存：保存于 28，試劑未啟封情況下可穩(wěn)定至標(biāo)簽的失效期。啟封試劑在儀器的試劑倉冰箱中至少穩(wěn)定 30 天。開蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或者未開蓋的液體有沉淀，或空白吸光

34、度0.5 時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。4.34.3 試劑盒準(zhǔn)備：即開即用，無特殊準(zhǔn)備。4.44.4試劑盒主要成分：Tris-HCl 緩沖液（pH 8.2） 50 mmol/L，化學(xué)氧化劑 1380 mmol/L。含有表面活性劑和保護(hù)劑。5 校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.15.1 校準(zhǔn)品：由羅氏公司提供的校準(zhǔn)液（Cat.No. C.f.a.s.） ，其膽紅素濃度值可溯源至美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所（NIST）標(biāo)準(zhǔn)參考材料（SRM）470。5.25.2 校準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：線性模式，3個校準(zhǔn)點(diǎn)。5.35.3 校準(zhǔn)周期：校準(zhǔn)間隔時間:Full，7 天；Blank，1 天。但在：更換試劑批號或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時

35、；儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；儀器的重要零件更換后；均須進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.45.4 校準(zhǔn)液重建方法：用3.00ml蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min后即可使用。6 質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.16.1 質(zhì)控品采用由 BIO-RAD 公司提供的一個定值質(zhì)控血清，產(chǎn)品號為6.26.2 質(zhì)控液重建方法：用 5.00ml 蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min 后即可使用。6.36.3質(zhì)控品測定：在每一批標(biāo)本中測定兩個水平質(zhì)控血清各一次。6.46.4 質(zhì)控規(guī)則：采用 Westgard 多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。6.56.5 如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時糾正，并在確認(rèn)重

36、新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本檢測。7 適用儀器適用 Hitachi 7600 型全自動生化分析儀。8 標(biāo)本檢測步驟裝載試劑 進(jìn)行校準(zhǔn) 進(jìn)行質(zhì)控 輸入標(biāo)本檢測項目 加載標(biāo)本 標(biāo)本測定 結(jié)果復(fù)核 報告。 9主要分析參數(shù)Assay Code：2 Point End；Reaction Time：10；Assay Point：1634；Wave Length Sec：660；Wave Length Prim：405；Sample N：4.6，D：6.04.694，I：9.0；R1：117 ；R3：39；Abs. Limit：32000 ；Increase；Calibration Type：Linear；P

37、oint：6；Span :3；TimeOut：Full 160， Blank 20；SD Limit：0.1；Duplicate Limit：32000；Sensitivity Limit：0；S1ABS Limit：0 100；Unit：mol/L；Technical Limit：1 520。10 結(jié)果計算計算公式：總膽紅素濃度（mol/L）mol/L)Anm660520nm660520校準(zhǔn)液總膽紅素濃度（校準(zhǔn)液標(biāo)本）（）（A儀器根據(jù)此公式自動給出每個標(biāo)本測定結(jié)果11 檢驗(yàn)結(jié)果的報告及范圍11.111.1 結(jié)果的報告11.1.111.1.1 結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報告。11.1.2

38、11.1.2 報告單上標(biāo)明結(jié)果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.311.1.3 如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報告單上指出。11.211.2 報告范圍：1.71026 mol/L。超過此范圍的結(jié)果報告時必須附有證明14該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)測定的結(jié)果。12 操作性能12.112.1 精密度：總CV 0.8%3.6%。12.212.2 準(zhǔn)確度：回收率 98.7101.5。12.312.3 線性范圍：1.71026 mol/L。12.412.4 方法的有限性及干擾因素：甘油三酯達(dá) 10.2mmo

39、l/L 時影響小于 6%，血紅蛋白達(dá) 250mg/L 時影響小于 10%。13 參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平參考范圍：322 mol/L 14 臨床意義14.114.1 血清總膽紅素和結(jié)合膽紅素多用于黃疸的診斷和鑒別診斷。由于膽紅素和肝臟功能密切相關(guān)，總膽紅素是重要的常規(guī)肝功能指標(biāo)。14.214.2 各種原因引起的黃疸都有血清總膽紅素增高，如膽汁性肝硬化、膽道梗阻、阻塞性膽紅素、肝細(xì)胞性膽紅素，如肝炎、肝硬化，溶血性黃疸、新生兒膽紅素或輸血錯誤。14.314.3 血清總膽紅素可作為暴發(fā)型肝衰竭（FHF）和自體免疫性肝炎（AIH）預(yù)后死亡的獨(dú)立危險因子，TBIL255mol/L 預(yù)測 FHF 預(yù)后死亡

40、的敏感性為77.5%，特異性為 46.8%。15 結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項目的聯(lián)系15.115.1 由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.215.2 審核者認(rèn)真審核每一個測定結(jié)果，對發(fā)出報告結(jié)果的可靠性負(fù)責(zé)，并在報告單的審核者處簽名。15.315.3 相關(guān)項目：審核與直接膽紅素（DBil） 、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT） 、堿性磷酸酶（ALP） 、谷胺酰轉(zhuǎn)移酶的關(guān)系，如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16 威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定16.116.1 255mol/L 為應(yīng)引起臨床重視的緊急值，可能有較嚴(yán)重的肝細(xì)胞壞死或暴發(fā)型肝衰竭的情況。16.216.2 處理程序16.2.

41、116.2.1 檢測人員立即報告審核者。16.2.216.2.2 審核者首先根據(jù)審核程序，分析質(zhì)控、定標(biāo)、試劑的情況是否正常，當(dāng)天其他已做標(biāo)本本項目的總體情況有無異常，確認(rèn)實(shí)驗(yàn)有關(guān)的基礎(chǔ)是在正常狀態(tài)中。 16.2.316.2.3 出現(xiàn)緊急值的標(biāo)本有無異常，該標(biāo)本其他相關(guān)項目有無異常，尤其是該患者其他肝功能的情況。16.2.416.2.4 對該標(biāo)本進(jìn)行一次重復(fù)測定，確認(rèn)緊急值是否重現(xiàn)。16.2.516.2.5 報告技術(shù)質(zhì)量主管及科主任，立即與臨床聯(lián)系，了解臨床相關(guān)情況。16.2.616.2.6 確認(rèn)此緊急值是可報告的，由技術(shù)主管或科主任立即電話向主管臨床醫(yī)生報告，并作好電話報告記錄，包括電話報告

42、時間和對方接聽人員的標(biāo)識。16.2.716.2.7 及時簽發(fā)正式檢驗(yàn)結(jié)果報告。17 有關(guān)引用程序與文件17.117.1Hitachi 7600 型自動生化分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。17.217.2生化檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。17.317.3檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。1517.417.4標(biāo)本送檢和接收程序。18、參考文獻(xiàn)18.118.1 Tietz，N.W.(Ed)，F(xiàn)ndamentals of Clinical Chemistry，3rd Edition，W.B.Sanders，1987.18.218.2 陸永綏，張偉民主編. 臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程. 杭州:浙江大學(xué)出版社， 2004. 18.318

43、.3 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編. 全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 (第三版). 東南大學(xué)出版社，2006. 19 本 SOP 變動程序任何一位使用本 SOP 的工作人員如提出對本 SOP 改動意見，或本測定項目的方法、試劑有變動的情況，可以對本 SOP 作出改動，但必須先報經(jīng)專業(yè)主管和科主任批準(zhǔn)。20 本 SOP 涉及的記錄與表單20.120.1 試劑裝載記錄表20.220.2 試劑質(zhì)量記錄表20.320.3 質(zhì)控記錄20.420.4 失控及失控處理記錄20.520.5 檢驗(yàn)結(jié)果審核記錄16寧波市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件項目 SOP 文件編號：SH-FXXM02-04版本：版本：2010-A/02010

44、-A/0生效日期：20101001四四 血清結(jié)合膽紅素測定第 1 頁共 4 頁1 檢驗(yàn)申請 單獨(dú)檢驗(yàn)項目申請：血清結(jié)合膽紅素測定(縮寫 DBIL)；組合項目申請：肝功能測定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請。2 標(biāo)本采集與處理2.12.1 標(biāo)本采集2.1.12.1.1 常規(guī)靜脈采血約 2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的黃色蓋子 SST 真空采血管，如為急診標(biāo)本，使用淺綠色蓋子 PST 試管。2.1.22.1.2 檢驗(yàn)申請單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識符。2.1.32.1.3 標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請單上填寫標(biāo)本采集時間，如為急診標(biāo)本，加上急查標(biāo)識。2.1.42.1.4 標(biāo)本采集后與檢

45、驗(yàn)申請單一起及時運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.52.1.5 下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.12.1.5.1 標(biāo)本量不足：少于 0.3ml 的全血標(biāo)本，或少于 0.1ml 的血清或血漿。2.1.5.22.1.5.2 對反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.32.1.5.3 無法確認(rèn)標(biāo)本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.42.1.5.4 其他如標(biāo)識涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.22.2 標(biāo)本保存2.2.12.2.1 接收標(biāo)本后在 30min 內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.22.2.2 標(biāo)本保存時間：血液膽紅素見光易分解，標(biāo)

46、本注意避光保存。室溫（1525）下可穩(wěn)定 2h，普通冰箱中（28）穩(wěn)定 12h。-15-25度可以穩(wěn)定 3 個月4 個月。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過1 天的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.32.2.3 已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號，置 28冰箱內(nèi)保存 7 天。2.32.3 標(biāo)本采集的注意事項2.3.12.3.1 采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.22.3.2 不建議采集抗凝血標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。3 方法原理礬酸法測定結(jié)合紅素。結(jié)合(直接)膽紅素在間接膽紅素抑制劑和表面活性劑的存在下，被化學(xué)氧化劑氧化，生成膽綠素，在一定波長處測定吸

47、光度的減少與結(jié)合膽紅素的濃度成正比。 。4 試劑及其他用品4.14.1 試劑：礬酸法測定結(jié)合紅素試劑盒，由日本和光公司出品。4.24.2 試劑盒保存：保存于 28，試劑未啟封情況下可以穩(wěn)定至失效期。啟封試劑在儀器的試劑倉冰箱中至少穩(wěn)定 30 天。4.34.3 試劑盒準(zhǔn)備：即開即用，無特殊準(zhǔn)備。4.44.4 試劑盒主要成分：酒石酸緩沖液(pH 3.0) 200 mmol/L，化學(xué)氧化劑 4.0 17mmol/L。含有表面活性劑和保護(hù)劑。5 校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.15.1 校準(zhǔn)品：由羅氏公司提供的校準(zhǔn)液（Cat.No.） ，其結(jié)合膽紅素濃度值可溯源至美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所（NIST）標(biāo)準(zhǔn)參考材料（S

48、RM）4705.25.2 校準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：線性模式，3個校準(zhǔn)點(diǎn)。5.35.3 校準(zhǔn)周期：校準(zhǔn)間隔時間:Full，7 天；Blank，1 天。但在：更換試劑批號或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時；儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；儀器的重要零件更換后；均須進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.45.4 校準(zhǔn)液重建方法：用3.00ml蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min后即可使用。6 質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.16.1 質(zhì)控品采用由 BIO-RAD 公司提供的定值質(zhì)控血清，產(chǎn)品號為 6.26.2 質(zhì)控液重建方法：用 5.00ml 蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min 后即可使用。6.36.3質(zhì)控品測定：在每一批標(biāo)本中測定質(zhì)控血清。6.46.4 質(zhì)控規(guī)則

49、：采用 Westgard 多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。6.56.5 如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本檢測。7 適用儀器適用 Hitachi 7600 型全自動生化分析儀。8 標(biāo)本檢測步驟裝載試劑 進(jìn)行校準(zhǔn) 進(jìn)行質(zhì)控 輸入標(biāo)本檢測項目 加載標(biāo)本 標(biāo)本測定 結(jié)果復(fù)核 報告。 10 主要分析參數(shù) Assay Code：2 Point End；Reaction Time：10；Assay Point：1634；Wave Length Sec：660；Wave Length Prim：570；Sample N：6，

50、D：6.0694，I：9.0；R1：117 ；R3：39；Abs. Limit：32000 Increase；Calibration Type：Linear；Point：6；Span :3；Time Out：Full 160，Blank 20；SD Limit：0.1；Duplicate Limit：32000；Sensitivity Limit：0；S1 ABS Limit：0 100；Unit：mol/L；Technical Limit：1 180。10 結(jié)果計算計算公式：結(jié)合膽紅素濃度（mol/L）校準(zhǔn)液結(jié)合膽紅素濃度nm660570nm660570A）（）（校準(zhǔn)液標(biāo)本A（mol/L）儀

51、器根據(jù)此公式自動給出每個標(biāo)本測定結(jié)果11 檢驗(yàn)結(jié)果的報告及范圍11.111.1 結(jié)果的報告11.1.111.1.1 結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報告。11.1.211.1.2 報告單上標(biāo)明結(jié)果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.311.1.3 如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報告單上指出。1811.211.2 報告范圍：1.7342mol/L。超過此范圍的結(jié)果報告時必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)測定的結(jié)果。12 操作性能12.112.1 精密度：總CV 2.9%4.8% 。12.212.

52、2 準(zhǔn)確度：回收率 99.2%106.7%。12.312.3 線性范圍：1.0180mol/L。12.412.4 方法的有限性及干擾因素：甘油三酯達(dá)到 10.2 mmol/L 時影響小于10%，血紅蛋白達(dá)到 200mg/L 時影響小于 10%。13 參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平參考范圍：05mol/L 14 臨床意義14.114.1 血清結(jié)合膽紅素常和總膽紅素一起用于黃疸的診斷和鑒別診斷。結(jié)合(直接)膽紅素是重要的常用肝功能指標(biāo)。14.214.2 肝炎、肝硬化時肝細(xì)胞受損引起的肝細(xì)胞性膽紅素和膽汁性肝硬化、膽道梗阻等所致的梗阻性膽紅素，均有直接膽紅素增高的情況。15 結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項目的聯(lián)系

53、15.115.1 由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.215.2 審核者認(rèn)真審核每一個測定結(jié)果，對發(fā)出報告結(jié)果的可靠性負(fù)責(zé)，并在報告單的審核者處簽名。15.315.3 相關(guān)項目：審核與總膽紅素（DBil） 、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT） 、堿性磷酸酶（ALP） 、谷胺酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）的關(guān)系，如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16 威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定（此項不作規(guī)定）17 有關(guān)引用程序與文件17.117.1 Hitachi 7600 型自動生化分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。17.217.2生化檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。17.317.3檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。17.417.4標(biāo)本

54、送檢和接收程序。18 參考文獻(xiàn)18.118.1 Tietz， N. W. (Ed)， Fndamentals of Clinical Chemistry，3rd Edition， W.B.Sanders， 1987.18.218.2 陸永綏，張偉民主編. 臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程. 杭州:浙江大學(xué)出版社， 2004. 18.318.3 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編. 全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 (第三版). 東南大學(xué)出版社，2006. 19 本 SOP 變動程序任何一位使用本 SOP 的工作人員如提出對本 SOP 改動意見，或本測定項目的方法、試劑有變動的情況，可以對本 SOP 作出改動，但必須先報經(jīng)專

55、業(yè)主管和科主任批準(zhǔn)。20 本 SOP 涉及的記錄與表單20.120.1 試劑裝載記錄表20.220.2 試劑質(zhì)量記錄表20.320.3 質(zhì)控記錄1920.420.4 失控及失控處理記錄20.520.5 檢驗(yàn)結(jié)果審核記錄20寧波市第九醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件項目 SOP 文件編號：SH-FXXM02-05版本：版本：2010-A/02010-A/0生效日期：20101001五五 血清總膽汁酸測定第 1 頁共 3 頁1 檢驗(yàn)申請 單獨(dú)檢驗(yàn)項目申請：血清總膽汁酸測定(縮寫 TBA)；組合項目申請：肝功能測定加選本項目。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請。2 標(biāo)本采集與處理2.12.1 標(biāo)本采集2.1.12.1.

56、1 常規(guī)靜脈采血約 2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的黃色蓋子 SST 真空采血管，如為急診標(biāo)本，使用淺綠色蓋子 PST 試管。2.1.22.1.2 檢驗(yàn)申請單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識符。2.1.32.1.3 標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請單上填寫標(biāo)本采集時間，如為急診標(biāo)本，加上急查標(biāo)識。2.1.42.1.4 標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請單一起及時運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.52.1.5 下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.12.1.5.1 標(biāo)本量不足：少于 0.3ml 的全血標(biāo)本，或少于 0.1ml 的血清或血漿。2.1.5.22.1.5.

57、2 對反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.32.1.5.3 無法確認(rèn)標(biāo)本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.42.1.5.4 其他如標(biāo)識涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.22.2 標(biāo)本保存2.2.12.2.1 接收標(biāo)本后在 30min 內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.22.2.2 標(biāo)本保存時間：室溫（1525）下可穩(wěn)定一周，在冰箱中（28）穩(wěn)定一個月。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過 1 天的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.32.2.3 已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號，置 28冰箱內(nèi)保存 7 天。2.32.3 標(biāo)本采集的注意事項2.3.12.3.1 采血前使

58、受檢者保持平靜、松弛和空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.22.3.2 不建議采集抗凝血標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。3 方法原理循環(huán)酶法。膽汁酸被 3a羥基類固醇脫氫酶（3aHSDH）及 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（ThioNAD）氧化，生成 3 酮類固醇及 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸還原型（ThioNAD） 。生成的 3 酮類固醇在 3a羥基類固醇脫氫酶及 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸還原型（ThioNAD）存在下，生成膽汁酸及 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（ThioNAD） 。如此進(jìn)行循環(huán)反應(yīng)，最后測定生成的 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸還原型（ThioNAD）的吸光度，求得膽汁酸濃度值。4 試劑及其他

59、用品4.14.1 試劑：酶循環(huán)法測定總膽汁酸試劑盒，由寧波美康生物科技有限公司出品。4.24.2 試劑盒保存：保存 225，試劑未啟封情況下可穩(wěn)定至標(biāo)簽的失效期。21啟封使用后在儀器的試劑倉冰箱中可以穩(wěn)定 30 天。4.34.3 試劑盒準(zhǔn)備：液態(tài)雙試劑型，即開即用，無特殊準(zhǔn)備。4.44.4 試劑盒主要成分：試劑：硫代NAD 2mmol/L，Goods 緩沖液 200 mmol / L，pH 7.0。試劑：3HSD 15 kU/L，NADH 3 mmol/L，Goods 緩沖液 200 mmol/L，pH 8.0。5 校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.15.1 校準(zhǔn)品：由試劑盒配套的校準(zhǔn)液。5.25.2 校準(zhǔn)

60、類型和數(shù)目：線性模式，4 個校準(zhǔn)點(diǎn)。5.35.3 校準(zhǔn)周期：校準(zhǔn)間隔時間 7 天。但在：更換試劑批號或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時；當(dāng)儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；重要零件更換后；均須進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.45.4 校準(zhǔn)液重建方法：即開即用，無需特殊準(zhǔn)備。6 質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.6. 1質(zhì)控品采用由 BIO-RAD 公司提供的定值質(zhì)控血清，產(chǎn)品號為 616/1UN6.26.2 質(zhì)控液重建方法：即開即用，無需特殊準(zhǔn)備。6.36.3 質(zhì)控品測定：在每一批標(biāo)本中測定兩個水平質(zhì)控血清各一次。6.46.4 質(zhì)控規(guī)則：采用 Westgard 多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。6.56.5 如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)