扎沖十三味片的質(zhì)量控制研究

1、扎沖十三味片的質(zhì)量控制研究    Hide one's talents in a napkin.     Children and fools cannot lie.             作者：劉衛(wèi)東，王蘭英，吳維智，任建國 Love makes obedience easy.  【摘要】  目的建立扎沖十三味片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法采用TL

2、C法對片劑中訶子肉豆蔻、丁香、麝香進(jìn)行了鑒別;用溶劑萃取酸性染料比色法測定，以烏頭堿為對照品，溴甲酚綠為酸性染料，用氯仿萃取，檢測波長416 nm。結(jié)果烏頭堿在0.7214.02 mg/L范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系，回歸方程為：Y=0.001 8X+0.305 1,r=0.999 5(n=5)，平均回收率為97.64%，RSD為1.75%(n=5)。結(jié)論所建立方法簡便、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)，可用于扎沖十三味片的質(zhì)量控制()。 【關(guān)鍵詞】  扎沖十三味片; 訶子; 肉豆蔻; 丁香; 

3、;麝香; 薄層色譜法; 草烏總生物堿; 酸性染料比色法; 烏頭堿蒙成藥扎沖十三味丸是蒙醫(yī)臨床最常用的傳統(tǒng)方劑之一 ,又名嘎日迪十三 ,出自蒙醫(yī)經(jīng)典1 ,由訶子、制草烏、麝香、珊瑚(制) 、珍珠(制)、沉香、禹糧土、磁石(煅) 等13 味藥組成;主要功能為祛風(fēng)通竅，舒筋活血，鎮(zhèn)靜安神，除“協(xié)日烏素”;主治半身不遂、左癱右瘓、口眼歪斜、四肢麻木、腰腿不利、言語不清、筋骨疼痛、神經(jīng)麻痹、風(fēng)濕、關(guān)節(jié)疼痛等癥2。因此，臨床廣泛用于腦中風(fēng)、腦偏癱、小腦萎縮、肺心病及腦供血不足引起的眩暈、椎基動脈供血不足引起

4、眩暈等多種心腦血管疾病的治療，收到了較好的臨床效果。但由于原生產(chǎn)工藝比較落后、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅有顯微鑒別和理化鑒別，而本藥中組方中既有毒性藥材，又有貴重藥材，還有礦物藥，成分眾多，僅靠上述標(biāo)準(zhǔn)，無法控制藥品質(zhì)量。為此我們對藥品組方深入研究，制定出切實(shí)可行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。  1 儀器與藥品2450紫外分光光度計(jì)(日本島津);PHS-3C酸度計(jì)(上海理達(dá)儀器廠)。烏頭堿對照品(批號110720-200308，中國生物制品檢定所);沒食子酸對照品(批號0832-9501，中國生物制品檢定所);丁香酚對照品(批號0725-200008，中國生物制品檢定所);麝香酮對照品(批號0719-200

5、006，中國生物制品檢定所)所用試劑均為分析純。扎沖十三味片為本公司正在研制的品種(醫(yī)藥學(xué)/藥學(xué)論文 )。If they say you are good, ask yourself if it be ture.  2 方法與結(jié)果The wise hand doth not all that the fool.  2.1 色譜條件吸收光譜的測定及檢驗(yàn)波長的確定分別吸取供試品溶液、對照品溶液、陰性對照品適量，依法顯色后，在200700 nm波長處進(jìn)行掃描，結(jié)果供試品與烏頭堿對照品的吸收光譜完全一致，并在416 nm的波長處有最大吸收，而

6、陰性對照品在此處無干擾，掃描結(jié)果見圖13。故選擇416 nm作為檢測波長。God sends fortune to fools.  2.2 對照品溶液的制備2精密稱取105干燥至恒重的烏頭堿對照品10mg，置100 ml量瓶中，加三氯甲烷溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每毫升中含有烏頭堿0.1mg)。2.3 供試液的制備取本品5片，研其粉末1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加1ml氨水潤濕后，再加三氯甲烷10 ml浸泡過夜。濾過，殘?jiān)萌燃淄?0 ml分次洗滌，10ml/次。合并濾液和洗液，以10%鹽酸溶液10&#

7、160;ml提取1次后，再用1%鹽酸溶液提取4次，10 ml/次。分取鹽酸液，合并，用10 ml三氯甲烷洗滌，棄去三氯甲烷。用濃氨試液將鹽酸提取液調(diào)至pH 910，用50 ml三氯甲烷分5次提取，合并提取液，蒸干，殘?jiān)?05加熱1 h，取出，放冷，加三氯甲烷分次溶解，轉(zhuǎn)移至25 ml量瓶中，加三氯甲烷稀釋至刻度，搖勻。Early mistakes are the seeds of future trouble.  圖1 烏頭堿對照品光譜掃描圖  圖2 陰性樣品光譜掃描圖圖3 扎沖十三

8、樣品光譜掃描圖2.4 陰性對照溶液的制備按照處方組成，取除制草烏以外的其他各藥，按制備工藝要求制成陰性(缺制草烏)對照溶液，再按供試品溶液的制備方法，制成陰性對照品溶液。陰性無干擾。All are not saints that go to church.  2.5 線性關(guān)系精密量取對照品溶液0.3，0.5，1.0，2.0，4.0 ml，分別置分液漏斗中，依次精密加入三氯甲烷至10.0 ml，再精密加入pH 3.0醋酸鹽緩沖液(稱取無水醋酸鈉0.30g，加水使溶解，加冰醋酸11.2 ml，用水稀釋至1 000

9、60;ml，搖勻，并在pH計(jì)上校正)5.0 ml，蒸餾水3.0 ml和溴甲酚綠溶液(取溴甲酚綠0.2 g，加0.05 mol/L氫氧化鈉溶液3.5 ml使溶解，用水稀釋至200ml，搖勻，靜置過夜。濾過，用三氯甲烷洗滌3次，50 ml/次，洗后，即得)2.0 ml，強(qiáng)力振搖3 min，靜置1 h，分取三氯甲烷層，用干燥濾紙濾過，以相應(yīng)試劑為空白，續(xù)濾液照紫外-可見分光光度法(中國藥典附錄 V A)，分別在416 nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo)，烏頭堿量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)

10、準(zhǔn)曲線。得回歸方程為：Y=0.001 8X+0.305 1(r= 0.999 5)。結(jié)果表明，烏頭堿對照品在所試范圍(28.74383.3g)內(nèi)與吸光度值呈良好的線性關(guān)系。The peacock has fair feathers, but foul.  圖4 制草烏藥材光譜掃描圖2.6 精密度實(shí)驗(yàn)精密量取同一供試品溶液6份，按“2.4”項(xiàng)下方法測定含量值。RSD=0.87%，結(jié)果表明：本法精密度較好。2.7 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取顯色后的同一供試品溶液，立即測定和在室溫下放置，每60 min測定1次，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明

11、，顯色后室溫放置6 h后測定，結(jié)果穩(wěn)定。平均吸光度為0.458，RSD=0.52%。2.8 重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)取同一批號的樣品5份，按供試液的制備項(xiàng)下制備供試液，按線性關(guān)系項(xiàng)下測定含量值。結(jié)果表明，本法重復(fù)性較好。平均含量為122.18，RSD=1.95%。2.9 加樣回收實(shí)驗(yàn)取已知含量的樣品5份，分別加入一定量的烏頭堿對照品溶液，按正文含量測定方法進(jìn)行測定，其平均回收率為97.64%，RSD=1.75%。表1 烏頭堿加樣回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果序號樣品量/g供試品含量g對照品加入量/g測得量/g回收率(%)2.10 樣品測定與含量限度的確定正文方法進(jìn)行3批樣品的

12、含量測定，結(jié)果見表。表2 樣品中烏頭類生物堿測定結(jié)果批號樣品量/g測得量/g含量/g·g-1)每片中平均含量/2.11 扎沖十三味片鑒別35取藥品4片，研碎，加甲醇10 ml，超聲處理15 min，濾過，濾液濃縮至1 ml作為供試品溶液。另取沒食子酸對照品，加甲醇制成每1ml含有2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5l,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲酸(661)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜

13、相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。取藥品30片，加水50ml，提取揮發(fā)油4 h，接收油水混合物，用石油醚(3060)10 ml分3次萃取揮發(fā)油，濃縮至1ml作為供試品溶液。另取肉豆蔻對照藥材1 g，同法提取揮發(fā)油，得對照藥材溶液0.5ml。照薄層色譜法(中國藥典2005年一部附錄VI B)試驗(yàn)， 吸取上述兩種溶液各3l,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-苯(72)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茴香醛試液，在105加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。It is right to put everyt

14、hing in its proper use.  取上述供試液作為供試品溶液。另取丁香酚對照品，加乙醚制成每1 ml含16 l的對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年一部附錄VI B)試驗(yàn)， 吸取上述兩種溶液各4 l,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(6090)-醋酸乙酯(91)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。Riches do not always bring happiness.  取藥品12片，加乙醚10&#

15、160;ml，冷浸過夜，濾過，濾液濃縮至1 ml，作為供試品溶液。另取麝香酮對照品，加乙醚制成每毫升含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4 l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(6090)-醋酸乙酯(92)為展開劑，展開，展距大于15 cm，取出，晾干，噴以二硝基苯肼試液，晾干后，再噴1次。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。3 討論考慮到制草烏中生物堿發(fā)揮作用也是以生物總堿其作用，以烏頭堿計(jì)，故酸性染料測生物總堿切實(shí)可行。提取方法的選擇正文采用105加熱1.0 h的方法，以除去方中其他生物堿對烏頭堿試驗(yàn)的干擾。分液漏斗的活塞應(yīng)選用聚四氟乙烯的，玻璃的既使通過蒸餾水試，在加氯仿時(shí)也滲漏，造成結(jié)果不準(zhǔn)確。Children and fools cannot lie.  考慮到方中總揮發(fā)油中，既有比水重的，又有比水輕的，故在揮發(fā)油提取器中預(yù)先加入10 ml石油醚(6090)，經(jīng)鑒別效果非常好。  【參考文獻(xiàn)】  1 中