實驗操作經(jīng)驗彭駿

1、1、對研發(fā)入門者的忠告在做每一個實驗之前，不要查到一篇文獻，就馬上按照文獻方法去試。反復(fù)調(diào)研文獻，看一看，要得到目標產(chǎn)物，有哪些方法，每種方法的優(yōu)點和缺點是什么，經(jīng)過反復(fù)比較，選擇最方便的開始。這不但是提高工作效率的捷徑，而且是在培養(yǎng)你的判斷能力，也是在積累你的經(jīng)驗和知識。你想，一個實驗?zāi)憔涂梢苑e累一系列資料，一個學(xué)期下來，你將有多大的收獲？這種方法累，但是絕對有效。我相信，只要堅持，畢業(yè)的時候，你會脫胎換骨。 對于你所采用方法的文獻，實驗步驟的每一個細節(jié)，要問為什么這么做？如果不這樣做，后果是什么？能不能用其他方法代替？參考其他合成相同產(chǎn)物的文獻，看看別人的實驗步驟又是如何？他們做了什么改動

2、？為什么要這樣改動？因為實驗是相通的，這些問題你一旦掌握了，堅持一個月的時間，其他問題也就迎刃而解了。 在我的周圍，有很多人一直到要博士畢業(yè)了，這些問題都沒有解決，吾未見其明也。 2、忠告二關(guān)于DMF的無水處理方法引起這么多爭議，實在出乎我的意料。不可否認，不同的實驗對試劑、溶劑的純度等各方面的要求不同。不需要嚴格無水的反應(yīng)，你去進行嚴格的無水處理就是浪費時間；反之亦然。我也承認，有時候試劑中的一些微量雜質(zhì)的存在，往往會使反應(yīng)有出人意料的結(jié)果。在我所知道的范圍（上海有機所）內(nèi)，就有兩個這樣的例子：李安虎博士（戴立信小組）在首例通過葉立德途徑實現(xiàn)的高立體選擇性的氮雜環(huán)丙烷的反應(yīng)中，使用的是未處理

3、的國產(chǎn)分析純CH3CN溶劑。文章在Angew. Chem. Int. Ed上發(fā)表后，引起了一位法國科學(xué)家的注意，但是他在重復(fù)該試驗的過程中，發(fā)現(xiàn)直接使用商業(yè)化的分析純CH3CN溶劑不能重復(fù)反應(yīng)結(jié)果，只有在反應(yīng)體系添加一定量的水后才能重復(fù)試驗結(jié)果，于是專門撰文指正。我們分析原因，認為是國產(chǎn)試劑的含水量比進口試劑的要高；第二個例子是：袁宇博士在雜DA反應(yīng)中，發(fā)現(xiàn)試驗結(jié)果不能重復(fù)，而且所用的苯甲醛越純，反應(yīng)結(jié)果越差。從而想到了最初使用的苯甲醛可能有部分被氧化成苯甲酸，進而發(fā)現(xiàn)使用酸為添加劑可以大大改善反應(yīng)的結(jié)果（文章發(fā)表在Chem. Eur. J）。 但是，這并不意味著我們的試驗不需要嚴格按照標準方

4、法。特別是當(dāng)我們在進行未知領(lǐng)域的探索時，需要對反應(yīng)成功（或者失?。┑脑蜻M行總結(jié)。如果我們反應(yīng)所使用的試劑或溶劑含有少量的雜質(zhì)，那我們?nèi)绾伪ＷC試驗的可重復(fù)性？我們又如何根據(jù)實驗結(jié)果來分析，設(shè)計下一步的實驗方案，改進試驗結(jié)果？ 按照一套標準的實驗方法進行操作，對于新進實驗室的同學(xué)更為重要。因為失敗是新手們的常事，如果我們不能保證我們試驗試劑的純度以及無水要求是否滿足等等，那么一旦實驗失敗了，我們?nèi)绾螌ふ以?？到底是操作失誤還是其他？ 2 / 25 作為一名即將畢業(yè)的同學(xué)，在幾年試驗生涯中，深感按照標準方法試驗的重要性。 可能是因為我從事的不對稱催化對雜質(zhì)的敏感程度較高，所以我在幾年中，曾經(jīng)花了很

5、多時間來重復(fù)，尋找原因。 我很慶幸我剛進實驗室時，接受了一位師姐的忠告，即一切溶劑、試劑嚴格按照標準方法處理，哪怕他再繁瑣。這個方法就是我推薦給大家的書Purification of Laboratory Chemicals，Edited by W. L. F. Armarego and D. D. Perrin, 4th Edition，這也是我們上海有機所每個課題組的導(dǎo)師要求學(xué)生嚴格執(zhí)行的。因為這本書是不斷綜合文獻中的最新處理方法，和對各種方法的不足之處的最新發(fā)現(xiàn)而修訂的。 在我的第一篇文章（J. Am. Chem. Soc）發(fā)表半年后，有位韓國化學(xué)家到我們所交流的時候，專門提到在他們花了

6、半年的時間合成了一個和我合成的一模一樣的配體的時候，卻非常失望發(fā)現(xiàn)我們的文章都已經(jīng)發(fā)表了。我為什么感謝那位師姐？因為我接受她的忠告后，各種溶劑嚴格處理，所以只花了兩個星期就合成了該配體。而事實上，在我文章發(fā)表后，還有國內(nèi)同行不能重復(fù)合成該配體，我們課題組的其他同學(xué)一開始的時候也不能重復(fù)合成，原因無他，他們的溶劑處理都有問題。 有同學(xué)提到，他們的處理方法是參照某某文獻的，事實上，很多文獻的處理方法是不完善的，也在不斷變化的。所以才會有專門的叢書來總結(jié)。我想進入實驗室時間較長的人，都會發(fā)現(xiàn)有些文獻的結(jié)果是很難重復(fù)的，仔細研究他們的實驗方法，你會發(fā)現(xiàn)有些操作是完全沒有必要的，有些是錯誤的，當(dāng)然也有可

7、能作者有所保留。 提高我們的化學(xué)素養(yǎng)，其中之一就在于根據(jù)自己的知識，去判斷文獻的正確與否，而不是盲從。3、減壓蒸餾我在對一個取代的苯乙腈產(chǎn)品進行減壓蒸餾時，由于粗品中有一定的NaBr沒有能夠完全除去，所以在蒸餾的過程中可能是由于NaBr的升華，造成了在進行了一段時間后真空度急劇下降，我當(dāng)時沒有注意到是這個問題。所以，我將近1kg的產(chǎn)品就那樣KO了！悲慘！ 因此，提請大家在進行減壓蒸餾的時候一定要多加小心。最重要的一點是：在減壓蒸餾過程中不要離開！要時刻關(guān)注壓力的變化，以便采取積極措施！ 4、用鋁鎳合金滴加濃堿加氫還原,注意滴加速度一定要慢!因為反應(yīng)強烈放熱,可能會導(dǎo)致暴沸乃至爆炸事故!5、另實

8、驗中反應(yīng)燒瓶里添加物料一定不要超過燒瓶溶劑的2/3.有一次我加多了,結(jié)果反應(yīng)過程中加熱后物料體積增大的有點厲害,全部溢了出來,我的油浴鍋廢了.6、除掉反應(yīng)后剩余的鈉需要將鈉用無水乙醇處理,以免發(fā)生爆炸.7、DMF不要用Na進行除水干燥。有一次我們實驗室有同事將5升的燒瓶進行這個操作，結(jié)果得到一鍋“粥”，估計兩者發(fā)生了反應(yīng)！用硫酸鎂干燥聚乙二醇，結(jié)果會是一鍋粥！乙腈除水時也不要用金屬鈉，也會成為一鍋粥的！ 8、烘滴液漏斗、分液漏斗、恒壓漏斗時，最好取下活塞后再烘，否則，由于膨脹系數(shù)不一樣，活塞會把漏斗脹破，我就烘壞了好幾個恒壓漏斗。9、實驗中如果要用酸度計,務(wù)必遵守酸度計的使用條件，如溫度、濕度

9、等。我記得我就在實驗中吃了虧，分析結(jié)果不對，我從緩沖液試劑一路找來，最后竟發(fā)現(xiàn)只是天氣變冷了而已， 一定要牢記溫度的概念，每一步反應(yīng)的溫度都要準確記錄，不要記錄籠統(tǒng)性的室溫，甚至后處理的溫度都要記錄。許多技術(shù)交到工廠之后，重復(fù)不出來，就有可能是溫度的原因。10、用CaCl2干燥管之前，務(wù)必檢查一下干燥管是否是通的。我就是因為沒有檢查，好幾次回流，溫度上去后，干燥管被上升的熱空氣頂飛，炸裂。11、我一個師弟出力高氯酸銀的時候，瓶口殘留的一點，塞子一磨就爆炸了，還好瓶子里面幾克的東西沒炸，不然他就飛了 大家使用三氯化鋁的時候一定要小心，遇水會強烈反應(yīng)，甚至爆炸！ 做NaH時，攪拌不小心，瓶子破了，

10、臺面上又有水，一下子就爆炸了，真的是很危險。 用雙氧水、間氯過氧苯甲酸等氧化劑的時候，后處理一定要加還原劑處理徹底，否則非常容易爆炸的。 12、做過貯氫試驗的LaNi5粉末，不要直接倒到垃圾桶，因為顆粒極細容易氧化燃燒，我們試驗室我就見過幾回，還好有人在，不然后果不堪設(shè)想，最好用濕紙包住。 13、要控制pH的時候，一定要用酸度計，不要用試紙，我做過一個實驗，兩者差了3-4。 14、格式反應(yīng)需用無水四氫呋喃，用金屬鈉去水。蒸出來后把燒瓶放置了幾天，誤以為已經(jīng)全部反應(yīng)完，就沒加醇直接加水進去，開始也沒什么異常，過一會，開始冒煙，爆了！ 15、反應(yīng)液用酸洗滌后，如果要用NaHCO3中和，應(yīng)先用水洗，

11、不然分液時會產(chǎn)生大量的氣體。16、丙烯酸也挺危險，上次一個師妹用磨口瓶裝了半瓶，放在了陽光比較強的地方，爆了，差點毀容。 17、分液漏斗分離熱液旋塞很容易卡死。18、我也獻丑說上幾句吧，在做有機合成時，有時候最后季銨化階段，總是做不成，因為酸堿中和迅速放熱，產(chǎn)生泡沫，后來中和初期加入消泡劑，效果良好。 19、加壓過柱時，要注意防止因壓力過大淋洗劑沖出來，尤其是添加淋洗劑時。20、加氫還原時，鈀炭或雷尼鎳一定要當(dāng)心，不要放在空氣中，我有一次做辛弗林合成時，鈀碳用乙醇保護時有部分鈀碳露在空氣中造成燃燒，爆炸。多虧當(dāng)時救的及時，否則一噸多的乙醇就在旁邊釜中，后果將不堪設(shè)想。各位一定要小心21、減壓蒸

12、餾結(jié)束后，最好冷卻后去真空。有個廠就是因為沒冷卻發(fā)生暴炸，我也有次著火。 22、使用化學(xué)藥品的安全防護22.1 防毒 22.1.1 實驗前，應(yīng)了解所用藥品的毒性及防護措施。 22.1.2 操作有毒氣體(如H2S、Cl2、Br2、NO2、濃HCl和HF等)應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)進行。 22.2.3 苯、四氯化碳、乙醚、硝基苯等的蒸氣會引起中毒。它們雖有特殊氣味，但久嗅會使人嗅覺減弱，所以應(yīng)在通風(fēng)良好的情況下使用。 22.2.4 有些藥品(如苯、有機溶劑、汞等)能透過皮膚進入人體，應(yīng)避免與皮膚接觸。 22.2.5 氰化物、高汞鹽(HgCl2、Hg(NO3)2等)、可溶性鋇鹽(BaCl2)、重金屬鹽(如鎘、鉛

13、鹽)、三氧化二砷等劇毒藥品，應(yīng)妥善保管，使用時要特別小心。 22.2.6 禁止在實驗室內(nèi)喝水、吃東西。飲食用具不要帶進實驗室，以防毒物污染，離開實驗室及飯前要冼凈雙手23、汞的安全使用和汞的純化 汞中毒分急性和慢性兩種。急性中毒多為高汞鹽(如HgCl2入口所致，0.1g0.3g即可致死。吸入汞蒸氣會引起慢性中毒，癥狀有:食欲不振、惡心、便秘、貧血、骨骼和關(guān)節(jié)疼、精神衰弱等。汞蒸氣的最大安全濃度為0.1mg?m-3，而20度時汞的飽和蒸氣壓為0.0012mmHg，超過安全濃度100倍。所以使用汞必須嚴格遵守安全用汞操作規(guī)定。 23.1安全用汞操作規(guī)定 1)不要讓汞直接暴露于空氣中，盛汞的容器應(yīng)在

14、汞面上加蓋一層水。 2)裝汞的儀器下面一律放置淺瓷盤，防止汞滴散落到桌面上和地面上。 3)一切轉(zhuǎn)移汞的操作，也應(yīng)在淺瓷盤內(nèi)進行(盤內(nèi)裝水)。 4)實驗前要檢查裝汞的儀器是否放置穩(wěn)固。橡皮管或塑料管連接處要縛牢。 5)儲汞的容器要用厚壁玻璃器皿或瓷器。用燒杯暫時盛汞，不可多裝以防破裂。 6)若有汞掉落在桌上或地面上，先用吸汞管盡可能將汞珠收集起來，然后用硫磺蓋在汞濺落的地方，并摩擦使之生成HgS。也可用KMnO4溶液使其氧化。 7)擦過汞或汞齊的濾紙或布必須放在有水的瓷缸內(nèi)。 8)盛汞器皿和有汞的儀器應(yīng)遠離熱源，嚴禁把有汞儀器放進烘箱。 9)使用汞的實驗室應(yīng)有良好的通風(fēng)設(shè)備，純化汞應(yīng)有專用的實驗

15、室。 10)手上若有傷口，切勿接觸汞。 23.2 汞的純化 汞中的兩類雜質(zhì):一類是外部沾污，如鹽類或懸浮臟物?？捎枚啻嗡醇坝脼V紙刺一小孔過濾除去。另一類是汞與其它金屬形成的合金，例如極譜實驗中，金屬離子在汞陰極上還原成金屬并與汞形成合金。這種雜質(zhì)可選用下面幾種方法純化: 23.2.1 易氧化的金屬(如Na，Zn等)可用硝酸溶液氧化除去。酸洗裝置如圖-5所示。把汞倒入裝有毛細管或包有多層綢布的漏斗，汞分散成細小汞滴灑落在10%HNO3中，自上而下與溶液充分接觸，金屬被氧化成離子溶于溶液中，而純化的汞聚集在底部。一次酸洗如不夠純凈，可酸洗數(shù)次。 23.2.2 蒸餾 汞中溶有重金屬(如Cu、Pb等

16、)，可用蒸汞器蒸餾提純。蒸餾應(yīng)在嚴密的通風(fēng)櫥內(nèi)進行23.2.3 電解提純 汞在稀H2SO4溶液中陽極電解可有效地除去輕金屬，裝置如圖I-6所示。電解電壓5V6V，電流0.2A左右，此時輕金屬溶解在溶液中，當(dāng)輕金屬快溶解完時，汞才開始溶解，此時溶液變混濁，汞面有白色HgSO4析出。這時降低電流繼續(xù)電解片刻即可結(jié)束。將電解液分離掉，汞在洗汞器中用蒸餾水多次沖洗。 24、使用烘箱時，烘含大量低沸點溶劑的料，這樣容易使烘箱爆炸，我們合成所曾發(fā)生過兩次。 25、對于易聚合藥品的注意事項：偶師兄經(jīng)常用減壓蒸餾的方法純化丙烯酸（主要目的是除去丙烯酸中的阻聚劑）可由于經(jīng)常做的緣故，就不太注意以為沒有危險。可有

17、一次為了省事就多做了一些（超過了瓶子的三分之二）結(jié)果當(dāng)偶師兄發(fā)現(xiàn)情況有些不對時，就湊到瓶子旁看了看，點子是真背啊，瓶子中的丙烯酸因為聚合并放出大量的熱發(fā)生炸裂，崩到師兄的眼睛里，師兄馬上用大量的水沖洗并被及時送到醫(yī)院，所幸沒造成什么影響?？墒侨越o我們這些后輩們嚇壞了。 26、大孔樹脂在0度以下會因結(jié)冰而漲裂，而且外觀看不出來，只是吸附效果變差，冬天一定不要郵寄。27、有機胺類物質(zhì)不能用塑料瓶裝，否則會“化”掉的。短時間還可以28、做酰氯化反應(yīng)，滴加氯化亞砜時不能太快，否則放出的氣體量太大，把反應(yīng)原料一下全沖出去了，幾個月的心血就全完了。29、用NaH做反應(yīng)時，用過的試劑瓶趕緊蓋好，擰緊。否則夏

18、天空氣潮濕容易著火。30、用活性炭脫色的時候，一定要在低溫下加入。如果溫度升高了，忘加或者想補加，一定要降溫后再補加。否則就會全部沖出來，一切全完了。這和加入沸石是一樣的。31、我正在做一個產(chǎn)品,需用稀鹽酸溶液提取有機溶劑中的產(chǎn)物,產(chǎn)物與HCL成鹽后溶解在水相中，但在此過程中有時會產(chǎn)生嚴重的乳化現(xiàn)象，極難分液，共提取三次，不定在哪次產(chǎn)生乳化，求助：如何避免乳化？乳化后如何處理？常用方法：1 長時間靜置； 2 加入少量電解質(zhì)（如氯化鈉）破乳或增大水相比重使兩相分離；3 若因溶液呈堿性產(chǎn)生乳化，可加入少量酸，反之加堿； 4 過濾；5 加入乙醇或磺化蓖麻油等破乳劑；32、我要用氰化鈉、氰化鉀，有人能

19、給我建議？如何防護？容器如何處理？32.1 硫酸亞鐵可以用，但是生成的鐵離子絡(luò)合物遇見酸還是會有HCN生成，建議用次氯酸鈉溶液浸泡或H2O2氧化！32.2 任何情況下不要在酸性條件下使用，做好勞動防護措施，手有傷口一定小心。2.3 如反應(yīng)對水沒有要求，可以用92的NaCN，含一定的水，呈濕粉狀，不易飄到空氣中。32.4 后處理還是次氯酸鈉好用。32.5 解毒劑：亞硝酸異戊酯，口服或注射。33、5% Pd/C 催化劑的制備：將10%的硝酸和活性碳粉末混合均勻，并在蒸汽浴上煮23 h，過濾，用水洗凈硝酸后，于100-110烘干。稱取11.5 g處理過的活性碳，懸浮在136.0 mL水中，水浴加熱至

20、80，加入溶有0.9g氯化鈀的2.3 ml濃鹽酸與5.7 ml水的混合液，然后再加入37%甲醛溶液0.9ml。攪拌下滴加30%的NaOH水溶液，直至反應(yīng)液呈堿性，繼續(xù)攪拌5min。過濾，濾餅用水洗滌10次，然后將濾餅置于空氣中晾干，即得5%Pd/C催化劑，再移至裝有KOH的干燥器中貯存。 34、關(guān)于柱層析的幾個問題 我做的是Hexane Fraction(正己烷餾分)的分離，用的是HX-EA分離系統(tǒng)，我用濕法裝柱，濕法上樣。第一天晚上，裝好了柱子，上了樣，結(jié)果第二天一看，柱子上半部分花了，很郁悶，只能用甲醇洗下樣品重裝。我的樣品是油狀的，猜測可能是油隔絕了柱子和外界接觸？晚上溶劑揮發(fā)，因為不通

21、氣導(dǎo)致柱子變花？第二次裝柱前，我覺得可能是柱子裝得不緊。所以，這次我用了小的氣泵加壓，裝的感覺挺不錯的。結(jié)果上樣后，油狀的樣品導(dǎo)致洗脫劑與柱子隔絕，打開下邊的閥門后洗脫劑根本不流。只好用小氣泵將樣品推進柱子，樣品進入柱子后，隨著洗脫劑流動，柱子整個變花。34.1 根據(jù)柱層析洗脫的要求，最好是先從低極性溶劑，如石油醚或正己烷開始，逐步加大洗脫劑極性，進行梯度洗脫，這樣的效果比單一洗脫劑要好。 34.2 柱子在裝填和過柱時，加壓很有必要，有利于柱子裝實。 34.3 跑柱時用紫外燈效果一般很差，你需要將洗脫液分別點TLC確定。 34.4 根據(jù)你的柱子變花的情況，我懷疑你的樣品在洗脫劑中的溶解性比較差

22、。 34.5 加壓過柱時，補加洗脫液前應(yīng)該緩慢排除柱內(nèi)氣體，如果排氣過急很可能導(dǎo)致柱子變花；增大極性時如果前后極性相差較大也可能導(dǎo)致柱子變花（柱子溫度升高導(dǎo)致）；建議柱子裝好后先常壓流一段時間，這樣色帶會相對整齊一些；34.6 柱子裝好后洗脫劑難以流下的話，可以用毛細管將吸附了樣品的硅膠層輕輕攪拌，但不要破壞與柱子的層面，然后再加一層石英砂或粗硅膠，洗脫劑難以流下可能是上樣時溶液的濃度太高或者油狀物沒有溶解完全直接吸附在硅膠上導(dǎo)致；建議柱子裝好以后不要放置過夜，夏天溫度高溶劑容易蒸發(fā)使柱子內(nèi)出現(xiàn)大量氣泡，如果要過夜應(yīng)保存在18攝氏度左右的溫室里。 34.7 洗脫劑的選擇，一般是以第一個點在TL

23、C上Rf值0.20.3為基礎(chǔ)，稀釋一倍進行第一個樣品點的洗脫，并在洗脫下第一個點后更換下一個點的洗脫極性（0.2-0.3稀釋一倍）。 34.8 變花是由于柱子中氣泡的存在，放置過夜和過快更換洗脫極性都會產(chǎn)生氣泡。裝柱子時一定要攪拌使得硅膠中的氣體盡量排干凈。二氯甲烷、乙醚等低沸點溶劑很容易“走花”，所以最好用高沸點的同類溶劑代替。更換極性時，我一般從50:1到20:1是逐漸更換的，就是先到40:1，30:1在到20:1。這樣更換，放熱就不明顯。 34.9 柱子在柱頭堵了造成流速極慢，應(yīng)該用洗脫劑溶解樣品后上樣，而不能單獨將油上樣。如果洗脫劑不溶，可以用低極性的二氯甲烷或者甲苯溶解。如果還不行，

24、就得考慮用拌樣方式上樣。34.10 色帶走不齊，很大程度是由于裝柱子不緊造成的，也可能是上樣時破壞了硅膠表層的平面性造成的。 35、產(chǎn)物過濾太難，有何高招 在甲醇鈉溶液中環(huán)合得到的嘧啶產(chǎn)物，蒸掉甲醇后，加水溶解，鹽酸中和后得到的固體產(chǎn)物很難過濾（抽濾和離心都很困難），是不是因為含鹽量太高，有什么辦法能使產(chǎn)物容易過濾？ 35.1 可能是體系中的有機雜質(zhì)太多了，一調(diào)酸有機物全出來了。建議你在調(diào)酸之前，用有機溶劑將堿性體系中的雜質(zhì)提取出來一些，這樣酸化出來的產(chǎn)物純度更高，應(yīng)該會容易抽濾的! 35.2 調(diào)酸后如果析出油狀物，適當(dāng)增加攪拌時間，這樣油狀物可能會變成固體，就很容易抽濾了。 35.3 PH調(diào)

25、完后升溫回流一段時間再冷卻，使結(jié)晶粒變粗，對絕大部分熱穩(wěn)定性較好的物質(zhì)都有良好的效果。 35.4 改變?nèi)軇w系。 35.5 超聲波釋晶，效果顯著但得不到良好的晶型。 35.6 采取慢速自然過濾。 36、降溫方法 我要做的實驗溫度要求在低于52度，我實驗室沒有冷井，請問如何降溫，如何保溫！文獻報道是用干冰乙醇體系降溫，但不知道如何做能保持此溫度！ 37、加壓蒸餾加壓蒸餾是化工中常見的方法之一，如呋喃生產(chǎn)，因沸點太低，主要雜質(zhì)甲基呋喃與之沸點相差很近，就采取了加壓蒸餾，減壓蒸餾降低了物質(zhì)的沸點，往往使不同物質(zhì)的分離難度加大，而加壓蒸餾的最大特點是可以拉開二種沸點很接近的物質(zhì)的沸程差，只是后來塔填料

26、技術(shù)的反展使之被人淡忘了。加壓蒸餾適于低沸點和易揮發(fā)物質(zhì)的蒸餾,多數(shù)情況下,加壓是為了提高沸點,以便更容易冷凝,可以用一般的冷卻水或冰鹽水冷卻,同時提高回收率,減少損失。加壓蒸餾特別要注意防止超壓,設(shè)備需要加安全閥,最好是自動控制壓力,冷凝器冷卻水不能斷流。38、用氯化鈣能把氯仿中的甲醇除去嗎？過完柱后的洗脫劑氯仿中含部分甲醇，現(xiàn)在想把甲醇除去，請問可以用氯化鈣嗎？答：甲醇可與氯化鈣生成絡(luò)合物，但這個絡(luò)合物是絮狀結(jié)構(gòu)，體積很大，只能適合于甲醇含量很少的情況下吸附去除，含量略大，就會生成大量的固體，很難過濾。 39、冰浴的時候你攪拌降溫體系了沒有? 時不時地攪拌降溫體系可以加快降溫效果，接近瓶外

27、側(cè)的降溫液體總會比別的地方的溫度高一些，所以在冰浴降溫的時候，經(jīng)常攪拌冰(水)浴可以提高降溫速度。40、過柱子時,你會趕跑沙芯層底下的液體嗎? 在沙芯層到閥門之間的空隙如果有液體的話,會使經(jīng)過吸附劑的展開劑不能完全分開。本來經(jīng)過吸附劑的展開劑可以把產(chǎn)品中的各種物質(zhì)分開,但因為沒有趕跑空隙(沙芯層到閥門之間的空隙)中的液體,白忙了一會,結(jié)果分離效果還是不好.得不償失!想要趕跑空隙里的液體,先把閥門打開,用一支毛細管順著閥門口伸進去,伸到空隙里的液體，這樣就可以把里面的液體趕跑。 41、結(jié)晶你用過水析嗎? 當(dāng)你試過多種溶劑以后，而結(jié)晶出來的產(chǎn)品，還是不能達到合格的要求的話，不妨試試水析的方法。操作

28、過程：先用易于溶解產(chǎn)品的有機溶劑(這種有機溶劑要能跟水相溶)加熱把產(chǎn)品溶解，然后把水滴加進去(方法同于混合溶劑)。 42、液溴的取用和投料問題 42.1在通風(fēng)櫥里面進行，如果有必要可以帶口罩（面具），操作呢？一定要穩(wěn)，它容易揮發(fā)啊。如果用分液漏斗裝呢？（分液漏斗）就要在下面接一個圓底燒瓶 42.2 加液溴：最好是漫漫的滴吧，注意速度，太快液溴反映很劇烈。在實驗室用溴：1 通風(fēng)要好2.工業(yè)溴一般上層有水，要準備一分液漏斗。3.將稱重的錐形瓶置天平上，將分液漏斗中下層的溴放入錐形瓶之需要量。4.然后將錐形瓶中的溴倒入恒壓滴液漏斗中（要快），馬上進行滴加操作。注意事項：要帶手套，戴口罩，但通風(fēng)要好。

29、用過的玻璃設(shè)備要馬上放入水中最好淹沒出口，使溴蒸氣不冒出而被水吸收43、產(chǎn)物重結(jié)晶我在做一個膽酸（含羧基）和胺的反應(yīng)，在縮合劑DCC(二環(huán)己基碳二亞胺)的作用下用N-羥基丁二酰亞胺（NHS）把膽酸先轉(zhuǎn)化為活化酯，反應(yīng)后按照文獻用1：1的正己烷和乙酸乙酯可以把膽酸的活化酯重結(jié)晶出來，可是我結(jié)晶出來的不是晶體，而是臘狀物，不知道為什么做不出晶體來。有哪位做過產(chǎn)物的重結(jié)晶的給點建議，謝謝了。蠟狀物并不一定就不純，出現(xiàn)蠟狀物可能跟結(jié)晶的物質(zhì)也有關(guān)系，如果說能出現(xiàn)蠟狀物，那能初略分離，盡量抽濾干。重復(fù)幾次，應(yīng)該能夠達到提純要求。 乙酸乙酯正己烷結(jié)晶出現(xiàn)油狀物很有可能是析晶太快，產(chǎn)品同油狀雜質(zhì)一起析出。可

30、以考慮正己烷的量減少，剛有產(chǎn)品析出時停止滴加正己烷，繼續(xù)不停的攪拌至產(chǎn)品析出或放入冰柜冷凍。如果冰凍條件下仍有油狀物析出，考慮將滴加正己烷后的混合液放置過夜，使之緩慢析出。不行的話，試一試二氯甲烷+正己烷結(jié)晶，該方法對有些油狀物很靈光。我一位同事試過，二氯甲烷+正己烷多次結(jié)晶出99以上純品。 44、如何將反應(yīng)產(chǎn)生的無機鹽除干凈 我的反應(yīng)溶劑是甲醇和水，先是無機酸和堿的反應(yīng)，下面是加過量的亞安鹽反應(yīng)，反應(yīng)完后，我怎么樣都除不干凈鹽。而我的產(chǎn)物極性很強，只溶與水,在甲醇中溶解很少，結(jié)晶可行嗎? 看產(chǎn)物的性質(zhì),如沒有酸堿性,可用717與732離子樹脂處理除去陰陽離子，有酸堿性的,可選擇合適的樹脂對產(chǎn)

31、品進行吸附。分子量很大的選擇納濾過濾除去鹽份，如果鹽是完全的強酸強堿,用電滲析除去。 45、請問一下萘氏試劑怎么檢驗銨離子 萘氏試劑檢測銨，是用兩片蒸發(fā)皿相蓋，下片加需要測的溶液與飽和氫氧化鈉反應(yīng)，上片滴幾滴萘氏試劑，準備好后，可略加熱，如果萘氏試劑變黃，說明有銨根離子，無變化就沒有了。 46、LDA（二異丙基胺基鋰）制備 制備LDA要注意什么啊? THF要無水，體系無水無氧，二異丙胺要重蒸，取丁基鋰要用針筒或雙針頭導(dǎo)管-78度滴加。我一般還要把瓶子放煤氣燈上烤一會兒，然后連真空油泵上抽起碼5分鐘。徹底杜絕濕氣。 我做過的,先把反應(yīng)瓶加熱到150度左右,抽氣,補充N2,反復(fù)幾次,然后冷卻下加丁

32、基鋰，-10就可以了，沒必要深冷,保證加料時候無水無氧(氮氣流保護),所有溶劑預(yù)先處理,買來的二異丙胺蒸餾得正沸后,用片狀氫氧化鉀干燥,二異丙胺從滴液漏斗里加,只要別加得太快就ok,這個是比較好做的,我第一次做的時候就做成了. 制法：在干燥的250ml圓底燒瓶或干燥的250ml Schlenk管上配一個橡膠隔膜，在橡膠隔膜上安裝一個減壓閥和插入一個注射用針頭。將容器置冰浴中冷卻，通過針頭用無氧N2吹掃，在反應(yīng)過程中使容器稍稍保持正壓，先從注射器把2.53g（3.60ml,25.0mmol)純二異丙胺溶于25ml無水乙醚的溶液注入瓶中。然后在電磁攪拌下從注射器滴加含2.53mmol甲基鋰的乙醚溶

33、液，在此加料過程中有甲烷劇烈放出，當(dāng)二異丙胺基鋰在0度攪拌510min后，檢查甲基鋰的Gilman顏色試驗呈負性反應(yīng)。  所用二異丙胺需要純化：二異丙胺與鈉絲或氫化鈉回流30min，然后在干燥容器中N2保護下蒸餾。  乙醚也需處理：無水乙醚需用鈉絲回流及在N2保護下蒸餾精制。 47、關(guān)于生物大分子提取問題 47.1 提取蛋白質(zhì)和酶等大分子的時候，最后一步是濃縮和凍干，但這個時候的大分子溶液往往是溶解在緩沖液而不是蒸餾水中的，濃縮的時候緩沖液也會被同時濃縮？那么緩沖液的摩爾濃度會被改變，有影響嗎？還有，凍干后得到的干粉，應(yīng)該也包含了緩沖液中的物質(zhì)（如磷酸鹽等），請問這樣的干粉

34、性質(zhì)會受緩沖液殘留物的影響嗎？ 47.2 如果實驗室沒有凍干設(shè)備，提取的蛋白質(zhì)只能以液體形態(tài)在零下10度密封保存，該蛋白質(zhì)分子量50000左右，性質(zhì)穩(wěn)定，請問該加什么防腐劑？理論上可以保存多長時間？ 47.3 哪位哥哥知道生理鹽水的摩爾濃度??？ 因為我不是生物專業(yè)的，所以只能給你一個可能的解釋。 47.1 蛋白質(zhì)等生物大分子在濃縮之前應(yīng)該會經(jīng)過除鹽這一步，而不會將緩沖液與蛋白質(zhì)一起濃縮?？梢允褂冒胪改せ蛴媚z色譜進行分離。 47.2 常用防腐劑有甲苯、苯甲酸、氯仿、百里酚等。蛋白質(zhì)和酶常用的穩(wěn)定劑有硫酸銨糊、蔗糖、甘油等，酶也可加入底物和輔酶以提高其穩(wěn)定性。此外鈣、鋅、硼酸等鹽溶液對某些酶也有

35、一定保護作用。保存時間不詳。 47.3 生理鹽水的濃度是0.9%NaCl溶液。摩爾濃度換算后為0.1538mol/l. 48、丁基鋰的使用問題 我現(xiàn)在在做的實驗，先用丁基鋰拔掉吡啶衍生物吡啶環(huán)上的溴然后通二氧化碳，把溴變成羧基。我做的100mg的量，反應(yīng)在100ml反應(yīng)瓶中進行，用橡皮塞塞住瓶口，一針擦至瓶底，一針擦至瓶口處，保持N2的流通，沒有抽真空而長時間的通氮。加入的有機鋰按3當(dāng)量一次性針孔加入。反應(yīng)開始時，反應(yīng)液呈微黃色澄清THF溶液，加入丁基鋰后，反應(yīng)液變?yōu)榻燮ど?。并有固休生成，反?yīng)混合物成為乳液。此狀態(tài)保持在-782分鐘左右。然后通入二氧化碳氣體（干冰揮發(fā)生成的），反應(yīng)液很快變?yōu)槟?/p>

36、草青色（透明），繼續(xù)攪拌，發(fā)現(xiàn)有白色固體生成。繼續(xù)通二氧化碳，反應(yīng)溫度漸漸的升至室溫，再攪30分鐘，結(jié)果發(fā)現(xiàn)容液揮發(fā)了很多，加入乙醇溶解，做LCMS，結(jié)果顯示還有很多原料沒反應(yīng)，且無產(chǎn)物生成，但有雜質(zhì)生成，TLC板上能明顯看到3個點。請問各位這是什么原因造成的，我該如何改進。這個反應(yīng)應(yīng)該怎么做，有無成功的案例供參考？ 48.1 二氧化碳干燥很容易解決, 用硫酸洗瓶或氯化鈣干燥塔都行。對溴吡啶類的丁基鋰溴交換反應(yīng), 除了無水無氧和低溫基本操作外, 把溴吡啶往裝有丁基鋰-THF反應(yīng)瓶中滴加反應(yīng)效果更好. 49、如何除去原料藥中的重金屬元素 最近忙于做一種原料藥,合成時用到了Fecl3還有AgBF4

37、，盡管后來過硅藻土,硅膠,氧化鋁,但重金屬還是超標（>0.1%）,試劑中的重金屬可以控制,但合成及過柱時的重金屬如何避免或除掉？ 答：生物堿應(yīng)該不影響，將粗品溶于有機溶劑，多數(shù)是乙酸乙酯；用EDTA水溶液與之強烈攪拌，靜置分層。兩次后對有機相常法處理，測定重金屬殘留量。也可試驗其鹽的水溶液與EDTA水溶液混合，攪拌一定時間后加堿使其沉淀。EDTA在生產(chǎn)操作中用量很小，一噸溶液用量約20克左右，基本不用考慮殘留。50、制備板后如何徹底除去硅膠？我的粗產(chǎn)物爬完制備板后，用乙酸乙酯將產(chǎn)物洗出來，可是發(fā)現(xiàn)同時含有一些硅膠跟著產(chǎn)物出來。請問如何將這些硅膠徹底除去？即使很少的硅膠也會對生物測試產(chǎn)生影

38、響。另外，硅膠上似乎總是殘留一些產(chǎn)物未被洗脫（通過觀察產(chǎn)物熒光得知），請問如何選擇溶劑？答：乙酸乙酯不大可能把硅膠洗下來，從沒有遇到過，甲醇有可能。最大的可能是甲醇洗下來了粘合劑羧甲基纖維素鈉?？赡苁沁^濾濾芯太粗了。用微孔濾膜試試。 51、硝基還原 我用氯化亞錫還原硝基,還原產(chǎn)物粘乎乎的,什么溶劑都不溶解,更本無法進一步提純，請指點。51.1 沒關(guān)系的,許多絮狀的東西,多加些水慢慢在分液漏斗里慢慢放掉就可,如果堵了,用鐵絲疏通一下也行.不過你也可以加些硅藻土過濾,多用些溶劑洗滌濾碴。 51.2 可以用加氫還原的方法還原！用雷尼鎳、鈀碳都行，我也用過氯化亞錫還原硝基，后處理很難提純，就放棄了。加

39、氫的辦法很好！ 51.3 你可以試一下，水合肼還原，用氯化鐵作催化劑，不知道你的硝基是什么情況的硝基物，另外你可以試一下硫化鈉，多硫化鈉的還原，這是比較簡單的，鐵粉一般較粘，離心的時候較難，所以最好還是采用油水分層的。 51.4 還原硝基我常用Fe-HCL，一直覺得挺不錯的方法。 51.5 用10%Pd/C，H2，HCl in ether（1-2eq)，常溫常壓,一般都能搞定。 51.6 還原硝基我常用Fe-NH4Cl,Fe-HAc，覺得不錯 51.7 我勸你還是用鈀碳，我開始做硝基還原時就用氯化亞錫，現(xiàn)象和你說的差不多，后改為鈀碳問題就解決了。 52、水溶性太好的東西，怎樣拿出?最近一直在做

40、分離,混合物里面成分很多,有一種大環(huán)是我們老板很想要的但水溶性太好,用丙酮沉淀后，一會兒就又在水里溶解,那位高手指教下 有沒有什么好的但又比較容易辦到的方法？ 52.1 要看被提純體系的雜質(zhì)情況，如鹽含量高，我們往往采取冷凍干燥，再用有機溶劑溶解過濾，除去鹽份，再選擇合適的有機溶劑進行重結(jié)晶。鹽含量低則采用水與其它的混合溶劑結(jié)晶，過濾后立即用低沸點的有機溶劑漂洗烘干。 53、白油的處理方法我以前用中南化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)的液體石蠟（白油)做反相乳液的油相時還可以，但05和06年產(chǎn)的就做不出來了，感覺粘度明顯變大了，不知道有什么方法可以處理一下？粘度大是不是有可能是里面有什么雜質(zhì)？答：白油是一種聚

41、合度不同的混和物,粘度估計主要是生產(chǎn)廠家生產(chǎn)出的產(chǎn)品聚合度不同于你原來所用的,是無法通過后處理達到要求的,只能與廠家聯(lián)系,要求低粘度的白油. 54、加氫還原如何加氫還原硝基苯，苯環(huán)上有氯，加什么保護劑 54.1 我好像記得用甲酸胺（HCOONH4）作氫源Pd/C催化效果很好，有氯也沒有多大的影響。54.2 亞磷酸鈉可以作為脫氯抑制劑，效果好。54.3 RanyNi低溫氫化含鹵硝基苯，不會脫鹵的。55、wittig反應(yīng)（葉立德反應(yīng)、維蒂希反應(yīng))。需要很嚴格的無水無氧操作嗎？偶即將著手做wittig反應(yīng)，在偶查到的關(guān)于此反應(yīng)的文獻中并無提到要無水無氧條件，可聽實驗室?guī)熜謧冋f此反應(yīng)必須在嚴格無水無氧下做，不知做此反應(yīng)是否真的如此麻煩呢？ 答：金屬有機物一般都要嚴格無水無氧的條件,我用過正丁基鋰,在空氣中幾秒就燃燒。 56、DCC問題 羧酸和醇的酯化反應(yīng)，我用DCC(二環(huán)己基碳二亞胺，是一個常用的失水劑，化學(xué)式為C13H22N2)做脫水劑，請問生成的DCU(二環(huán)己基脲)和未反應(yīng)的DCC是否溶于丙酮？DCC的量是怎么確定的？它呈液體狀還能達到分析純的級別嗎？我還有