核素藥物99Tc

1、核素藥物99Tc 【摘要】 目的 采用核素藥物99Tc-MDP治療骨質(zhì)疏松動物模型，分析對骨轉(zhuǎn)換或促進成骨作用的價值。方法 采用鹽酸地塞米松（DX）2mg/kg劑量對制作骨質(zhì)疏松動物模型的實驗兔進行肌肉注射，2次/周，注射8周時，取正常對照組和骨質(zhì)疏松動物模型組各一組處死，觀察動物模型所達程度。同時對骨質(zhì)疏松動物模型組繼續(xù)維持（DX）肌肉注射，但劑量改為1次/周。99Tc-MDP治療組采用與成人相同治療用量2mg/（5mlkg）在實驗兔骨質(zhì)疏松模型的基礎(chǔ)上治療16周。治療16周后，對正常對照組、骨質(zhì)疏松動物模型組和99Tc-MDP治療組進行腰椎和右側(cè)股骨頭行病理細胞學(xué)、骨形態(tài)計量分析、骨密度、

2、生物力學(xué)、X線攝片、CT攝片、核素骨骼掃描以及治療后血清ALP指標(biāo)實驗室數(shù)據(jù)分析。結(jié)果 8周后正常對照組和骨質(zhì)疏松動物模型組進行比較，骨質(zhì)疏松動物模型組的腰椎和右側(cè)股骨頭行病理細胞學(xué)表現(xiàn)為明顯骨質(zhì)排列疏松，骨形態(tài)計量分析、骨密度、生物力學(xué)均下降，血清ALP指標(biāo)明顯升高，骨質(zhì)疏松動物模型成立。治療16周后實驗室結(jié)果顯示，99Tc-MDP治療組與骨質(zhì)疏松動物模型組比較：股骨頭和腰椎的骨密度提高20.17%和26.18%；骨形態(tài)計量提高108.65%；骨組織ALP降低223.08%；同時實驗兔的骨組織生物力學(xué)提高了44.24%和87.10%；核素骨骼掃描也顯示示蹤劑攝取增加43.65%。病理組織學(xué)也

3、提示經(jīng)治療成骨細胞有所活躍。但X線攝片、CT攝片僅肉眼觀察，骨質(zhì)疏松對照組與99Tc-MDP治療組之間的變化不明顯。結(jié)論 99Tc-MDP治療對成骨功能或成骨細胞的轉(zhuǎn)換有一定的關(guān)系，與加速骨形成或促進成骨功能相符，筆者將進一步進行該方面的探討?！娟P(guān)鍵詞】 99Tc-MDP；骨質(zhì)疏松動物模型；成骨作用；治療Research the value of the 99TcMDP for animal model osteogenesis 【Abstract】 Objective In order to reseach the value about the 99TcMDP treated osteop

4、orosis for animal model.Methods Use the cony to made the animal model，the cony were pided intonormal、osteoporosis and therapy group.The osteoporosis and therapy group with intramuscular injected dexamethasone 2mg/kg twice a week.At the 8thweeks，compare normal group and osteoporosis group with the bo

5、ne density，then osteoporosis group was continue intramuscular injected once a week until the test end.The 99TcMDPtherapy group was used99TcMDP2mg/（5mlkg） 16 weeks as theadult dosage.At the16thweek，compared thethree groups with lumbarvertebraand the right femoral caput in pathocytology、bone density、o

6、steo vitodynamics、bone morphometry、x-ray、CT、nuclear bone scan and ALP.Results Theosteoporosis groups lumbarvertebra and the right femoral caput is obviousbone rarefaction and drawdown in bone morphometry、bone density、vitodynamics，and the ALP is obviously rise.The osteoporosis is established.The ther

7、apy group lumbarvertebra and caput femorals bone density is sublimate 20.71 and 26.18; the bone morphometry is 108.65%，ALP is low 233.08%; the bone tissue vitodynamics is sublimate 44.24% and 87.1%; the nuclear bone scan indicatethat the bones tracer uptake is raise 43.65%，pathologicaltest prompt th

8、at the osteoblast is more active than the osteoporosis group.But x-ray and CT is not manifest different.Conclusion 99TcMDPcan accelerate bone formation or enhancement bone formation.【Key words】99TcMDP;animal model of osteoporosis;osteogenesis;treatment 骨質(zhì)疏松癥在中、老年人群中較為普遍，已經(jīng)在治療方面引起人們的重視。如何更好地治療骨質(zhì)疏松癥是臨

9、床探討的一個方向1，本實驗采用核素藥物锝-99-亞甲基二磷酸鈉（簡稱99Tc-MDP）治療骨質(zhì)疏松動物模型實驗結(jié)果，分析99Tc-MDP對成骨功能的作用。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 實驗動物 新西蘭兔，由上海生旺實驗動物養(yǎng)殖限公司提供；核素藥物99Tc-MDP由成都云克藥業(yè)責(zé)任有限公司提供：其中A瓶為99Tc液5.5g/5ml，B瓶為MDP 5mg；鹽酸地塞米松針劑（簡稱DX）5mg/1ml/支，由上海信誼藥廠購置；動物實驗場所為上海市交通大學(xué)第六人民醫(yī)院動物實驗室進行。1.1.2 分組 購健康新西蘭實驗兔40只，平均體重3.00.16kg。將實驗兔分為5組：A、B組為正常對照組；C

10、、D組為骨質(zhì)疏松對照組；E組為99Tc-MDP治療組。A、C組實驗兔在證實骨質(zhì)疏松模型成立時處死。1.2 方法1.2.1 動物模型制作方法 健康新西蘭實驗兔先適應(yīng)性飼養(yǎng)2周，然后進行制作骨質(zhì)疏松動物模型。除A、B兩組正常對照組不注射DX外，采用生理鹽水2ml肌肉注射，C、D、E組均進行DX 2mg/kg肌肉注射，2次/周2，3。C組DX注射8周時，與A組一起處死，觀察動物模型所達程度。D、E兩組繼續(xù)維持DX肌肉注射，但劑量改為1次/周。1.2.2 99Tc-MDP治療方法 將A瓶中99Tc液5ml注入B瓶內(nèi)，搖勻1min后，對E組進行治療，根據(jù)與成人相同治療用量2mg/（5mlkg）治療量用生

11、理鹽水稀釋后行耳靜脈推注，每周1次。治療組實驗 ( 核素藥物99Tc-MDP對成骨作用的動物模型研究(2) ) 兔治療時間定為16周。1.3 檢測與分析1.3.1 檢測項目 第三腰椎（L3）和右側(cè)股骨頭行病理細胞學(xué)分析以及骨形態(tài)計量分析，第四腰椎（L4）和左側(cè)股骨頭行骨密度和生物力學(xué)試驗和X線、CT攝片、核素骨骼掃描（取感興趣區(qū)ROI膝關(guān)節(jié)與脛骨中段的比較）以及治療后血清ALP指標(biāo)（血清經(jīng)56的水浴中處理20min后進行檢測）分析。1.3.2 檢測步驟 適應(yīng)性飼養(yǎng)2周后進行DX注射8周，對A、C組進行X線、CT攝片和核素骨骼掃描后處死，對腰椎和股骨頭病理切片細胞學(xué)以及骨形態(tài)計量分析、骨密度檢測

12、、生物力學(xué)試驗和血清ALP測定分析。1.3.3 檢測目標(biāo) DX注射8周時分析A、C組實驗兔腰椎和股骨頭病理切片細胞學(xué)以及骨形態(tài)計量、骨密度檢測和生物力學(xué)試驗、X線、CT攝片和核素骨骼掃描、血清ALP測定是否存在現(xiàn)明顯的數(shù)據(jù)差異，以證實骨質(zhì)疏松模型成立。99Tc-MDP治療16周后，除了分析B、D、E組試驗之間的差別外，同時間接提示是否存在成骨趨勢改變。1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用t檢驗方法統(tǒng)計。2 結(jié)果購進的所有實驗兔進行2周的適應(yīng)性飼養(yǎng)后參考有關(guān)制作兔骨質(zhì)疏松動物模型的資料，給予C、D、E組實驗兔進行DX肌肉注射。8周后對A組和C組行X線、CT攝片、核素ECT骨骼顯像和血清檢查ALP，同時取雙側(cè)

13、股骨頭和L3、4進行骨密度檢測和生物力學(xué)試驗和病理切片、骨形態(tài)計量測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)存在一定的差異。見表1，表2。表1 A、C組實驗兔實驗室結(jié)果注：A組與B組比較，P0.01。病理細胞學(xué)顯示A組實驗兔骨小梁排列規(guī)則，呈正常骨組織形態(tài)。C組實驗兔骨小梁排列稀疏，存在較明顯的骨小梁斷裂、破壞現(xiàn)象，骨母細胞不宜在鏡視野中發(fā)現(xiàn)，稀疏和斷裂的骨小梁間存在脂肪組織填充。X線和CT攝片肉眼見C組的骨小梁較A組略有稀疏表現(xiàn)，核素ECT骨骼顯像顯示B組實驗兔的各大關(guān)節(jié)的放射性與A組相比較有所增強，但骨骼顯像較模糊，以椎體顯像更明顯。從以上實驗室檢測結(jié)果顯示：經(jīng)采用激素DX注射實驗兔，兔骨質(zhì)疏松動物模型成立。第9周開

14、始對E組進行99Tc-MDP治療連續(xù)16周。以B組和D組為正常對照組和骨質(zhì)疏松對照組。在飼養(yǎng)過程中，分別在B組有1只實驗兔于13周時死亡；D組2只分別在11、14周死亡。死亡的實驗兔均為在購入時就比較瘦小，因拉稀死亡，雖 然D組實驗兔的活動較B組、E組略遲鈍，但是實驗兔的一般情況尚較正常。治療16周后進行X線攝片、CT攝片、SPECT骨顯像。正常對照組和骨質(zhì)疏松對照組的X線攝片、CT攝片結(jié)果與8周時基本相同。SPECT骨顯像見D組的骨組織放射性分布為減弱現(xiàn)象，以椎體最為明顯，各大關(guān)節(jié)處放射性范圍增大。E組骨骼顯像情況與C組的放射性分布基本相似表2 B、D、E組實驗室檢測結(jié)果細胞學(xué)分析B組與D組

15、存在較明顯的差異，病理切片顯示D組的骨小梁明顯稀疏，有斷裂和缺損區(qū)或凹陷，B組骨小梁排列均勻，骨母細胞排列規(guī)則，E組的結(jié)構(gòu)基本與C組相似。3 討論骨組織損傷在臨床上是一種較常見的病變，涉及的面也非常大，包括：骨質(zhì)疏松癥、骨性關(guān)節(jié)病、骨折后不愈、骨發(fā)育不良、骨壞死、骨腫瘤等。目前常規(guī)的治療即抑制破骨細胞的功能，幫助鈣的吸收以及調(diào)節(jié)骨代謝等，在國外有報道采用氟制劑的藥物或甲狀旁腺素進行治療4、5，可以促進成骨功能，幫助某些疾病達到盡早愈合，國內(nèi)能促進成骨細胞功能的藥物療效報道不多。筆者應(yīng)用99Tc-MDP治療動物骨質(zhì)疏松模型中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)治療的骨質(zhì)疏松動物模型的骨密度和骨細胞學(xué)改善較明顯6，因此，采用

16、相對能證實成骨功能變化的實驗室檢測方法，了解99Tc-MDP對激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松動物模型的成骨作用進行探討。99Tc-MDP是采用經(jīng)過衰變的放射性锝-99（99Tc）標(biāo)記雙磷酸鹽（MDP）結(jié)構(gòu)上的化合物，雙磷酸鹽具有在短期內(nèi)非常強的吸附在骨組織表面7，在骨質(zhì)代謝中能夠明顯抑制破骨細胞的活性8，所以用化學(xué)結(jié)構(gòu)相同而物理性質(zhì)不同的骨骼顯像劑99Tcm-MDP（核素99Tcm具有放射性示蹤作用，而99Tc沒有m，則沒有示蹤作用）在12h內(nèi)約有75%與骨組織的蛋白質(zhì)結(jié)合9，就能非常清晰地顯示動物的骨組織，同樣99Tc-MDP也有很好的親骨性。另外，有學(xué)者報道99Tc在人體內(nèi)具有調(diào)節(jié)機體的免疫功能的作用

17、10，因此也有醫(yī)院采用99Tc-MDP進行治療免疫系統(tǒng)的疾病：甲狀腺機能亢進的凸眼、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強直性脊椎炎以及銀屑病性關(guān)節(jié)病等的治療，取得了較好的療效?？梢?9Tc-MDP將不是單一具有雙磷酸鹽的作用，可能存在尚未知的復(fù)合型功效作用。采用DX肌肉注射實驗兔8周的實驗室檢測，C組與A組比較，C組的骨密度、骨形態(tài)計量、血清ALP和骨生物力學(xué)均明顯發(fā)生改變，尤其是股骨頭和腰椎骨密度降低23.85%和28.39%；骨形態(tài)計量降低80.98%；骨組織ALP升高200.50%；證實實驗兔骨質(zhì)疏松模型成立。通過對99Tc-MDP骨質(zhì)疏松動物模型治療16周試驗顯示：在骨結(jié)構(gòu)形態(tài)上E組和D組比較：股骨頭和

18、腰椎的骨密度提高20.17%和26.18%；骨形態(tài)計量提高108.65%；病理組織學(xué)也提示經(jīng)治療成骨細胞有所活躍。骨ALP降低223.08%；同時實驗兔的骨組織生物力學(xué)提高了44.24%和87.10%；核素骨骼掃描也顯示示蹤劑攝取增加43.65%。但X線攝片、CT攝片僅肉眼觀察，骨質(zhì)疏松對照組與99Tc-MDP治療組之間的變化不明顯。根據(jù)上述現(xiàn)象，99Tc-MDP治療對成骨功能或成骨細胞的轉(zhuǎn)換有一定的關(guān)系，與加速骨形成或促進成骨功能相符，筆者將進一步進行該方面的探討?！緟⒖嘉墨I】1 潘宏良，何德.老年性骨質(zhì)疏松癥患者骨代謝生化指標(biāo)變化對其特征的評估應(yīng)用.中國臨床康復(fù)，2004，8：3596-3597.2 劉萬林.激素性股骨頭缺血壞死發(fā)病機制及其研究進展.中國矯形外科雜志，2000，7：169-172.3 高克加，李明起，毛誠忠，等.99Tc-亞甲基二磷酸鹽治療股骨頭壞死動物研究及初步臨床應(yīng)用.中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2004，2：80-84.4 Marie PJ，DE Vernjoul MC，Lomri A.Stimulation of