淋病的實(shí)驗(yàn)室檢測及質(zhì)控結(jié)果分析.ppt [兼容模式]

1、淋病的實(shí)驗(yàn)室診斷中國CDC 性病控制中心參比實(shí)驗(yàn)室戴秀芹淋病是我國性病的主要病種，被列為法定報告的乙類傳染病之一。n 淋病的主要臨床表現(xiàn)為泌尿生殖道的化膿性感染，如淋菌性尿道炎、淋菌性宮頸炎等。臨床上也有部分病人呈現(xiàn)無癥狀或癥狀輕, 尤其是女性患者，如不及時處理，感染上行將導(dǎo)致嚴(yán)重后果，如終身不孕等。n淋病的病原體是淋病奈瑟菌，簡稱為淋球菌，好侵犯人類泌尿生殖道的柱狀上皮細(xì)胞。n 淋病的實(shí)驗(yàn)室診斷主要是顯微鏡檢查法和培養(yǎng)法。nn 取材方法的正確與否將直接影響其病原學(xué)的檢測。n 男性病人取材分泌物明顯：須擠出新鮮的膿液，用無菌拭子蘸取即可。分泌物不明顯：待病人排尿12小時后，用無菌拭子插入尿道口

2、2cm4cm，轉(zhuǎn)動并停留數(shù)秒。n 女性病人取材分泌物較多：用第1根無菌拭子擦去宮頸口分泌物，第2根無菌拭子插入宮頸口1cm1.5cm轉(zhuǎn)動并停留數(shù)秒。無分泌物：可直接用無菌拭子插入宮頸口1cm1.5cm轉(zhuǎn)動并停留數(shù)秒。注意事項(xiàng)n采樣準(zhǔn)備時：宜用生理鹽水，忌用消毒劑或潤滑劑。n 采樣時：宜用藻蛋白鈣鹽纖維或人造纖維拭子，忌用棉拭子。n 采樣完：宜立即接種并保溫，忌放冰箱。標(biāo)本的運(yùn)送n淋球菌對外界環(huán)境的抵抗力較弱，對熱敏感，不耐干燥。n 為保證培養(yǎng)成功，標(biāo)本采集后，需立即接種淋球菌分離培養(yǎng)基。n 如不能立即接種，需采用非營養(yǎng)運(yùn)送培養(yǎng)基，于12小時內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室接種。nn n n n操作步驟涂片固定染色

3、鏡檢nn n n n注意事項(xiàng)輕輕滾動、厚薄適宜自然干燥、待干固定脫色適宜、避免過度先低倍、再油鏡n n nn右圖為革蘭染色油鏡視野下觀察見到多形核白細(xì) 胞內(nèi)G -雙球菌 主要見于男性急性淋菌性尿道炎患者nn結(jié)果報告陽性：見到細(xì)胞內(nèi)-G 雙球菌可疑：見到細(xì)胞外G -雙球菌-陰性：未見G 雙球菌nn臨床意義用于男性急性淋菌性尿道炎患者的初步診斷。見于病程較長的淋病病人，需做培養(yǎng)并進(jìn)一步鑒定。nnn淋球菌的分離培養(yǎng)nnn 操作步驟接種培養(yǎng)n n 注意事項(xiàng)培養(yǎng)基培養(yǎng)基的選擇、室溫平衡、分區(qū)劃線培養(yǎng)的條件溫度、CO 2及濕度n 淋球菌的分離培養(yǎng)nnnn 淋球菌初步鑒定試驗(yàn)菌落形態(tài)氧化酶試驗(yàn)革蘭染色nnn

4、 淋球菌確證試驗(yàn)糖發(fā)酵熒光抗體-初步鑒定試驗(yàn)nn 結(jié)果觀察菌落形態(tài)：培養(yǎng)2436小時，細(xì)小、光滑、濕潤、凸起、半透明或灰白色、有粘性。氧化酶試劑：鹽酸二甲基對苯二胺，氧化酶陽性菌落變紫紅色；鹽酸四甲基對苯二胺，氧化酶陽性菌落變紫蘭色。-革蘭染色：菌體形態(tài)為G 雙球菌，呈紅色、腎形排列。n n-初步鑒定試驗(yàn)nn 結(jié)果報告陽性：經(jīng)過48小時培養(yǎng)，對疑似的淋球菌菌落作氧化酶試驗(yàn)、革蘭染色可初步報告。陰性：培養(yǎng)48小時后仍無淋球菌特征菌落生長。n n 臨床意義用于女性患者及癥狀輕或無癥狀的男性患者的診斷。用于特殊需要：如淋球菌藥敏試驗(yàn)等。n n-確證試驗(yàn)（糖發(fā)酵）n 操作步驟nnnnnnn n 注意事

5、項(xiàng)n 菌落分純制備菌懸液準(zhǔn)備糖管加入平衡鹽指示液加入菌懸液孵育或水浴觀察結(jié)果n n 挑取單個菌落，轉(zhuǎn)種到增菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)1618小時。菌懸液濃度109cfu/ml糖的純度要高，尤其是麥芽糖-確證試驗(yàn)nn 結(jié)果判讀淋球菌僅發(fā)酵葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不發(fā)酵其他糖類。因此葡萄糖的顏色由紅變黃，其他糖管顏色不變。 淋球菌的分離培養(yǎng)-確證試驗(yàn)nn 結(jié)果報告陽性：出現(xiàn)上述特征性反應(yīng)即為陽性。陰性：未出現(xiàn)上述特征性反應(yīng)即為陰性。n n 臨床意義用于泌尿生殖器以外部位的淋病患者的診斷，例如：咽部和直腸等。n 淋球菌的保存方法n 保存液n n 保存形式nn n nnn 脫脂牛奶或脫脂奶粉甘油腦心浸出液甘油胰酶大豆肉湯甘油小牛血清低溫液氮冷凍干燥 結(jié)果分析nn 回報情況未參評省份參評省份結(jié)果回報率參評合格率n n n n nn 考核樣本的正確率淋球菌淋球菌混合菌非淋球菌非淋球菌存在的問題nnn 工作不夠細(xì)心：例鑒定結(jié)果未填寫或結(jié)果填報錯誤?；貓蟊硖顚懖煌暾喝缱灾圃噭┪刺顚懪?有效期、未選擇使用的鑒定方法、實(shí)驗(yàn)人員及實(shí)驗(yàn)負(fù)責(zé)人未簽字等。未按要求填報結(jié)果：例初步鑒定結(jié)果填報：有-+填疑似淋球菌、奈瑟氏菌屬、G / G雙球菌、中文表示、+/-表示等。存在的問題nnn 概念不清：對淋球菌菌體概念不