簡單生物實驗設計方案

1、簡單生物實驗設計方案簡單生物實驗設計方案范文 1 土壤中別離產(chǎn)生 - 淀粉酶 的菌種一 . 實驗目的1、學習從土壤中別離、純化微生物的原理與方法。2、學習、掌握微生物的鑒定方法。3、對提取的土樣進行微生物的別離、純化培養(yǎng)，并進 行簡單的形態(tài)鑒定二 . 實驗原理- 淀粉酶是一種液化型淀粉酶，它的產(chǎn)生菌芽孢桿菌， 廣泛分布于自然界，尤其是在含有淀粉類物質(zhì)的土壤等樣品 中。從自然界篩選菌種的具體做法，大致可以分成以下四個 步驟：采樣、增殖培養(yǎng)、純種別離和性能測定。1、采樣：即采集含菌的樣品 采集含菌樣品前應調(diào)查研究一下自己打算篩選的微生 物在哪些地方分布最多，然后才可著手做各項具體工作。在 土壤中幾

2、乎各種微生物都可以找到，因而土壤可說是微生物 的大本營。 在土壤中， 數(shù)量最多的當推細菌， 其次是放線菌， 第三霉菌，酵母菌最少。除土壤以外，其他各類物體上都有 相應的占優(yōu)勢生長的微生物。例如枯枝、爛葉、腐土和朽木 中纖維素分解菌較多，廚房土壤、面粉加工廠和菜園土壤中 淀粉的分解菌較多，果實、蜜餞外表酵母菌較多 ; 蔬菜牛奶 中乳酸菌較多，油田、煉油廠附近的土壤中石油分解菌較多 等。2、增殖培養(yǎng) 又稱豐富培養(yǎng) 增殖培養(yǎng)就是在所采集的土壤等含菌樣品中參加某些 物質(zhì)，并創(chuàng)造一些有利于待別離微生物生長的其他條件，使 能分解利用這類物質(zhì)的微生物大量繁殖，從而便于我們從其 中別離到這類微生物。因此，增殖

3、培養(yǎng)事實上是選擇性培養(yǎng) 基的一種實際應用。3、純種別離 在生產(chǎn)實踐中，一般都應用純種微生物進行生產(chǎn)。通過 上述的增殖培養(yǎng)只能說我們要別離的微生物從數(shù)量上的劣 勢轉(zhuǎn)變?yōu)閮?yōu)勢，從而提高了篩選的效率，但是要得到純種微 生物就必須進行純種別離。純種別離的方法很多，主要有： 平板劃線別離法、稀釋別離法、單孢子或單細胞別離法、菌 絲尖端切割法等。三 . 實驗材料1、器材：小鐵鏟和無菌紙或袋 可省、培養(yǎng)皿 8 個、載玻片、蓋 玻片、普通光學顯微鏡、量筒、滴管、吸水紙、無菌水試管 5支每支 4.5mL 水、燒杯 3 個、三角瓶 5個、電爐、玻璃 棒、接種環(huán)、鑷子、恒溫培養(yǎng)箱、高溫滅菌鍋、移液槍 槍 頭 10

4、個 、天平、濾紙、 pH 試紙等。2、試劑：配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的原料 牛肉膏 0.9g 、 NaCl1.5g 、瓊脂 4.5g 、蛋白胨 3.0g) 、 Lugol 氏碘液、可溶 性淀粉 0.6g 、結(jié)晶紫染液、番紅染液、 95%乙醇、無菌水等。3、土樣：取自桂林師專甲山校區(qū)藥用植物園面的土壤， 地下 10cm 左右。四 . 實驗方法步驟1、采集土樣帶上小鐵鏟和無菌袋到土豆地采集較細碎 土壤2、 樣品稀釋在無菌紙上稱取樣品1g,放入100mL無菌水的三角瓶中，手搖10分鐘使土和水充分混合。用1mL無菌吸管吸取 0.5mL 注入 4.5mL 無菌水試管中，梯度稀釋至 10-6 。3、 別離用

5、稀釋樣品的同支吸管分別依次從10-6、 10-5、10-4樣品稀釋液中，吸取lmL，注入無菌培養(yǎng)皿中，然后倒 入滅菌并融化冷至50 C左右的固體培養(yǎng)基，小心搖動冷凝后，倒置于37C溫箱中培養(yǎng)48小時。培養(yǎng)基的配制稱取蛋 白胨 1.0g;NaCl0.5g; 牛 肉膏 0.3g; 瓊 脂 1.5g;pH6.4 左 右 ;100ml 水定容。4、初步鑒定對多種菌進行形態(tài)特征的觀察，簡單染色、 革蘭氏染色以及芽孢染色觀察，記錄結(jié)果。5、- 淀粉酶鑒定1) 實驗原理：細菌能否產(chǎn)生 - 淀粉酶主要依據(jù)是鑒定有能否分解淀 粉。 - 淀粉酶該酶可以把淀粉分解，因淀粉遇碘變藍色，如 菌落周圍有無色圈，說明該菌能

6、分解淀粉2 步驟：將培養(yǎng)的的各種待測菌種接種在含有2%淀粉液的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基的配制稱取蛋白胨 1.0g;NaCl0.5g; 牛 肉 膏 0.3g; 可 溶 性 淀 粉 0.2g; 瓊 脂 1.5g;pH6.4 左右;100ml水定容注：先將可溶性淀粉加少量 蒸餾水調(diào)成糊狀，再加到溶化好的培養(yǎng)基中，調(diào)勻 ，倒置 于37C溫箱中培養(yǎng)18-24小時后，取出平板，向皿中注入I滴 Lugol 氏碘液， 因淀粉遇碘變藍色， 如菌落周圍有無色圈， 說明該菌能分解淀粉。6、純化從平板上選取淀粉水解圈直徑與菌落直徑之比 較大的菌落， 用接種環(huán)沾取少量培養(yǎng)物至斜面上， 并進行 2-3 次劃線別離，挑

7、取單菌落至斜面上，培養(yǎng)后觀察菌苔生長情 況并鏡檢驗證為純培養(yǎng)。簡單生物實驗設計方案范文 2 實驗名稱：土壤中別離產(chǎn) 生 - 淀粉酶的菌種一 . 實驗目的1 、學習從土壤中別離、純化微生物的原理與方法。2、學習、掌握微生物的鑒定方法。3、對提取的土樣進行微生物的別離、純化培養(yǎng)，并進 行簡單的形態(tài)鑒定4、對簡單鑒定后的微生物進行生理生化鑒定并由鑒定 結(jié)果查伯杰氏手冊以確定別離出微生物的品種。二 . 實驗原理- 淀粉酶是一種液化型淀粉酶，它的產(chǎn)生菌芽孢桿菌， 廣泛分布于自然界，尤其是在含有淀粉類物質(zhì)的土壤等樣品 中。從自然界篩選菌種的具體做法，大致可以分成以下四個 步驟：采樣、增殖培養(yǎng)、純種別離和性

8、能測定。1、采樣：即采集含菌的樣品 采集含菌樣品前應調(diào)查研究一下自己打算篩選的微生 物在哪些地方分布最多，然后才可著手做各項具體工作。在 土壤中幾乎各種微生物都可以找到，因而土壤可說是微生物 的大本營。 在土壤中， 數(shù)量最多的當推細菌， 其次是放線菌， 第三霉菌，酵母菌最少。除土壤以外，其他各類物體上都有 相應的占優(yōu)勢生長的微生物。例如枯枝、爛葉、腐土和朽木 中纖維素分解菌較多，廚房土壤、面粉加工廠和菜園土壤中 淀粉的分解菌較多，果實、蜜餞外表酵母菌較多 ; 蔬菜牛奶 中乳酸菌較多，油田、煉油廠附近的土壤中石油分解菌較多 等。2、增殖培養(yǎng) 又稱豐富培養(yǎng) 增殖培養(yǎng)就是在所采集的土壤等含菌樣品中參

9、加某些 物質(zhì)，并創(chuàng)造一些有利于待別離微生物生長的其他條件，使 能分解利用這類物質(zhì)的微生物大量繁殖，從而便于我們從其 中別離到這類微生物。因此，增殖培養(yǎng)事實上是選擇性培養(yǎng) 基的一種實際應用。3、純種別離 在生產(chǎn)實踐中，一般都應用純種微生物進行生產(chǎn)。通過 上述的增殖培養(yǎng)只能說我們要別離的微生物從數(shù)量上的劣 勢轉(zhuǎn)變?yōu)閮?yōu)勢，從而提高了篩選的效率，但是要得到純種微 生物就必須進行純種別離。純種別離的方法很多，主要有：平板劃線別離法、稀釋 別離法、單孢子或單細胞別離法、菌絲尖端切割法等。三 . 實驗材料1、器材： 小鐵鏟和無菌紙或袋、培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、普通 光學顯微鏡、量筒、滴管、吸水紙、無菌水試管

10、 每支 4.5mL 水 、燒杯、三角瓶、電爐、玻璃棒、接種環(huán)、鑷子、搪瓷 杯、恒溫培養(yǎng)箱、高溫滅菌鍋、移液槍 槍頭 、天平、濾紙、 pH 試紙等。 2、試劑：配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的原料牛肉膏、NaCI、瓊脂、蛋白胨 、 Lugol 氏碘液、 0.2%可溶性淀粉液、結(jié)晶紫染液、 番紅染液、碘液、 95%乙醇、 0.5%番紅水染液、無菌水等。 3、 土樣：取自桂林師專 1 棟宿舍樓后面土壤，地下 10cm 左右。四 . 實驗方法步驟1、采集土樣帶上小鐵鏟和無菌袋到土豆地采集較細碎 土壤2、 樣品稀釋在無菌紙上稱取樣品 1g,放入100mL無菌 水的三角瓶中，手搖 10分鐘使土和水充分混合。用 1

11、mL無 菌吸管吸取 0.5mL 注入 4.5mL 無菌水試管中， 梯度稀釋至 10。3、 別離用稀釋樣品的同支吸管分別依次從10、 10、 10樣品稀釋液中，吸取ImL，注入無菌培養(yǎng)皿中，然后倒入滅菌并融化冷至50 C左右的固體培養(yǎng)基， 小心搖動冷凝后，倒 置于37C溫箱中培養(yǎng) 48小時。培養(yǎng)基的配制稱取蛋白胨 1.0g;NaCl0.5g; 牛肉膏 0.3g; 瓊脂 1.5g;pH6.4 左右 ;100ml 水定容。4、初步鑒定對多種菌進行形態(tài)特征的觀察、簡單染色、 革蘭氏染色以及芽孢染色觀察，記錄結(jié)果。5、- 淀粉酶鑒定6、1) 實驗原理：細菌能否產(chǎn)生 - 淀粉酶主要依據(jù)是鑒定有能否分解淀

12、粉。 - 淀粉酶該酶可以把淀粉分解，因淀粉遇碘變藍色，如 菌落周圍有無色圈，說明該菌能分解淀粉2) 步驟：將培養(yǎng)的的各種待測菌種接種在含有0.2%淀粉液的牛肉 膏 蛋 白 胨 培 養(yǎng) 基 中 ， 培 養(yǎng) 基 的 配 制 稱 取 蛋 白 胨 1.0g;NaCl0.5g; 牛 肉 膏 0.3g; 可 溶 性 淀 粉 0.2g; 瓊 脂 1.5g;pH6.4 左右 ;100ml 水定容 ( 注：先將可溶性淀粉加少量 蒸餾水調(diào)成糊狀，再加到溶化好的培養(yǎng)基中，調(diào)勻) ，倒置于37C溫箱中培養(yǎng)18-24小時后，取出平板，向皿中注入 I 滴 Lugol 氏碘液， 因淀粉遇碘變藍色， 如菌落周圍有無色圈， 說

13、明該菌能分解淀粉。8、純化從平板上選取淀粉水解圈直徑與菌落直徑之比 較大的菌落，用接種環(huán)沾取少量培養(yǎng)物至斜面上，并進行 2-3 次劃線別離，挑取單菌落至斜面上， 培養(yǎng)后觀察菌苔生長情況并鏡檢驗證為純培養(yǎng)。四 . 實驗結(jié)果五 . 個人總結(jié)1、在別離實驗中，原土樣的 10-3g/mL 濃度中得到 5 種 不同的能夠分解淀粉的菌落，經(jīng)初步淀粉酶實驗， 1 號菌的 淀粉分解圈大， 2號、 3號、 4號次之， 5號最小。2、在淀粉酶試驗中， 3 號培養(yǎng)基感染雜菌，出現(xiàn)不同菌 落，故后面不再對其處理 ; 其它菌種均得到較純的單菌落， 淀粉酶實驗結(jié)果不變，與上面相同。3、各種菌落的革蘭氏染色中大局部為陽性，

14、菌體形態(tài) 多為橢圓形趨于桿狀， 只有 4 號菌為陰性 ;5 號菌菌落難以挑 故過沒能進行染色。4、1 號、 2 號、 4 號經(jīng)劃線純化均得到單菌落， 5 號菌 沒能劃出單菌落 ; 綜合分析可以判定， 1 號菌即為優(yōu)良的淀粉 酶產(chǎn)生菌，即為枯草芽孢桿菌。5、本次實驗遇到一件讓人頗為為難的事情，那就是實 驗所用酒精燈的酒精被煤油替換，連消毒棉也是煤油的，因 為使用煤油產(chǎn)生大量的黑煙，導致大量顆粒吸附在實驗器具 上，其氣味也難以忍受，故在實際操作中減少了使用，引起 帶來的影響尚不明確。簡單生物實驗設計方案范文 3 一、實驗名稱： 臨時裝片、 切片、涂片的制作、觀察和指導二、實驗目標：讓學生通過獨立自

15、主的制作臨時裝片、 切片、涂片的方法來感知細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，從而使學生對 細胞到達一定的認識，為以后的教學作下鋪墊。制作臨時裝 片的成功，對提高學生的生物學興趣和生物科學素養(yǎng)都起著重要的作用。同時，這樣鍛煉了學生的動手能力，也培養(yǎng)了 學生的自己動腦思考的能力。三、實驗方法及步驟： 一 實驗材料：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、刀片、 吸水紙、解剖針、毛筆、滴管、擦鏡紙 ; 清水、碘酒溶液 ; 西 紅柿、空心蓮子草、洋蔥 ;創(chuàng)可貼 切片時可能會有人受傷 二 實驗步驟：1、臨時裝片的制作準備擦用擦鏡紙把載玻片和蓋玻片擦拭干凈 改良：將潔凈的紗布改為擦鏡紙，擦拭玻片時要注意用 左手的拇指和食指夾住玻片

16、的兩端，右手的拇指和食指襯墊 上潔凈的紗布后，夾在玻片兩面，同時擦拭，以防將玻片損 壞，滴用滴管在載玻片中央滴 1-2 滴清水改良：在制片時至少滴 2 滴清水，這樣加蓋玻片時，蓋 玻片下的空間中水較充盈，氣泡就少，細胞的活性也較好取 用刀片在洋蔥外表上劃井字 大約 0.5cm2 ，用鑷子撕取外表 皮問題：由于葉表皮皺縮、學生不熟練等，導致撕下的表 皮薄膜過厚，在顯微鏡視野中難以找到理想的觀察對象 , 致 使實驗效果較差。改良：首先將洋蔥鱗片葉切成寬 1.0-1.5cm 的縱向窄條 , 再用刀片將洋蔥鱗片葉內(nèi)側(cè)表皮劃成小塊 切忌劃透 , 然后 用鑷子夾住所劃表皮的邊緣 , 將其輕輕取下 洋蔥鱗片

17、葉內(nèi) 側(cè)表皮易與葉肉別離 , 操作簡便 即可。這一改良降低了實驗 操作難度 , 提高了制片質(zhì)量。放把撕取的表皮浸入載玻片上 的水滴中，并展平蓋蓋玻片 蓋用鑷子夾起蓋玻片，使它的一邊先接觸載玻片上的水 滴，然后緩緩地放下，蓋在要觀察的材料上染色染：將玻片傾斜 10 度左右，從高的一側(cè)滴入碘液，讓 其自己流入玻片。問題：染色時書中要求是把 1-2 滴碘液滴 在蓋玻片的一側(cè)，然后用吸水紙從蓋玻片的另一側(cè)吸引，使 染液浸潤標本的全部。然而，局部同學可能將蓋玻片下所有 水全部吸干，做出的裝片會有很多的大氣泡，且氣泡將細胞 掩蓋了，或者有人將氣泡誤認為細胞。改良：染色時不用吸水紙吸水，而是將玻片傾斜 10

18、 度 左右，這個角度一定不能太大，太大水就會流出蓋玻片下的 小空間，然后從較高一側(cè)的蓋玻片與載玻片的縫隙往里滴碘 液，讓碘液自己流進蓋玻片下，如果有液體流到蓋玻片外， 用吸水紙擦拭，但一定要強調(diào)不能從蓋玻片邊緣吸水，蓋玻 片周圍一定要有充盈的液體，這樣才不會出現(xiàn)大氣泡。鏡檢用顯微鏡觀察2、臨時切片的制作選材選擇軟硬適度的材料， 先截成適當長度， 一般以 20-30mm 為宜 便于手持即可 ，材料太軟，可用馬鈴薯塊莖、胡蘿卜 根或肥皂將欲切取的材料夾住一起進行切片，本實驗用空心 蓮子草，可直接用于切片。切片用三只手指夾住空心蓮子草， 使其高于手指，右手持刀片 刀片用水潤濕 ，將空心蓮子草削去一層，形成平面， 刀口向內(nèi)，與斷面平行，以均勻的動作，自左前方向右前方 快速拉刀，滑行切片 注意要整個臂部用力，而不要腕部用 力 。鏡檢 如此連續(xù)動作，切下一些薄