[一、保健食品中紅景天苷測(cè)定]

1、一、保健食品中紅景天苷測(cè)定一、保健食品中紅景天苷的測(cè)定 Determination of salidroside in health food1范圍 本方法規(guī)定了以紅景天為主要原料的保健食品中紅景天苷的液相色譜測(cè)定方法。本方法適用于保健品食品中紅景天苷的測(cè)定，也適用于保健食品中酪醇的測(cè)定。2 原理 試樣經(jīng)甲醇超聲提取，以 0.01 mol/L 乙酸銨-甲醇為流動(dòng)相（80+20），采用高效液相色譜法，紫外檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。3試劑和材料 注：除非另有說(shuō)明，本方法所用試劑均為分析純，水為 GB/T6682 規(guī)定的一級(jí)水。3.1試劑 3.1.1 乙酸銨( CH 3 COONH

2、4)。3.1.2 甲醇(CH 3 OH)：色譜純。3.1.3 甲醇(CH 3 OH)。3.2 試劑配制 乙酸銨溶液 (0.01 mol/L)：稱取 0.77 g 乙酸銨，加入適量水溶解，用水定容至 1000 mL，經(jīng) 0.45 μm 水相微孔濾膜過(guò)濾后備用。3.3 標(biāo)準(zhǔn)品 紅景天苷(C 14 H 20 O 7 )：純度≥98%。酪醇（C 8 H 10 O 2 )：純度≥98%。3.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 3.4.1紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(2.0 mg/mL)：準(zhǔn)確稱取紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)品 0.02 g 于 10 mL 容量瓶中，用甲醇（3.1.2）溶解并定容至刻度

3、，搖勻。 3.4.2 紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)工作液：將紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（3.4.1）用甲醇（3.1.2）稀釋制備一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，標(biāo)準(zhǔn)系列濃度為 0mg/mL、0.01 mg/mL、0.02 mg/mL、0.05mg/mL、0.20 mg/mL、0.50 mg/mL，臨用時(shí)配制。3.4.3 酪醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(2.0 mg/mL)：準(zhǔn)確稱取酪醇標(biāo)準(zhǔn)品 0.02 g 于 10 mL 容量瓶中，用甲醇（3.1.2）溶解并定容至刻度 ，搖勻。3.4.4系統(tǒng)適用性溶液：準(zhǔn)確吸取紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（3.4.1）和酪醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（3.4.3）各 0.5mL 于 10 mL 容量瓶中，用甲醇（3.1.2）稀釋至刻度 ，搖

4、勻。4儀器設(shè)備 4.1高效液相色譜儀：配有紫外檢測(cè)器（UV）。4.2超聲波清洗器。4.3分析天平：感量為 0.01 mg，0.1 mg。5分析步驟 5.1試樣制備 5.1.1固體樣品：取 20 粒以上片劑或膠囊試樣進(jìn)行粉碎、混勻，準(zhǔn)確稱取適量試樣（約含紅景天苷 2.5mg）于 25 mL 容量瓶中，加入甲醇（3.1.3）約 20mL，超聲提取 30 min，放冷至室溫，用甲醇（3.1.3）定容至刻度。混勻后經(jīng) 0.45 μm濾膜過(guò)濾，供液相色譜分析用。5.1.2液體樣品：準(zhǔn)確吸取適量搖勻后的試樣（約含紅景天苷 2.5mg）于 25 mL容量瓶中，用甲醇（3.1.3）定容至刻度?；?/p>

5、勻后經(jīng) 0.45 μm 濾膜過(guò)濾，供液相色譜分析用。5.2色譜參考條件 5.2.1色譜柱：C 18 柱，柱長(zhǎng) 250mm，內(nèi)徑 4.6mm，填料粒徑 5 μm，或同等性能色譜柱； 5.2.2流動(dòng)相：乙酸銨溶液（0.01 mol/L）-甲醇（80+20）； 5.2.3流速：1.0 mL/min； 5.2.4柱溫：25 ； 5.2.5檢測(cè)波長(zhǎng)：215 nm； 5.2.6進(jìn)樣量：10 mL。 5.2.7系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：取系統(tǒng)適用性溶液（3.4.4）10 mL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，紅景天苷峰與酪醇峰的分離度應(yīng)大于 1.5。5.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 將標(biāo)準(zhǔn)系列工作液（3

6、.4.2）分別注入高效液相色譜儀中，測(cè)定相應(yīng)的色譜峰高或峰面積，以標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積或峰高為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（標(biāo)準(zhǔn)溶液液相色譜圖見(jiàn)附錄 A 中圖 A.1）。5.4試樣溶液的測(cè)定 將試樣待測(cè)液(5.1.1 或 5.1.2)注入液相色譜儀中，以保留時(shí)間定性，測(cè)得峰面積或峰高，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測(cè)液紅景天苷的濃度(樣品溶液液相色譜圖見(jiàn)附錄 A 中圖 A.2)。6分析結(jié)果的表述 試樣中紅景天苷含量按式(1)計(jì)算: C ×V X=× 100.(1) m式中：X 試樣中紅景天苷的含量，單位為毫克每百克或毫克每百毫升（mg/100g或 mg/100mL）； C;由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得待測(cè)樣液中紅景天苷的濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）； V;樣品的定容體積，單位為毫升（mL）； m;樣品量，單位為克或毫升（g 或 mL）； 100;單位轉(zhuǎn)換。計(jì)算結(jié)果以重復(fù)條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。7精密度 在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過(guò)算術(shù)平均值的 10% 。8其他 當(dāng)稱樣量為 1 g，定容體積為 25 mL 時(shí)，紅景天苷的檢出限為 50m g/g。 附錄A 標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣溶液典型液相色譜圖A.1