山東省泰安市肥城市第三中學(xué)高中生物12基因工程的基本操作程序（二）學(xué)案新人教版選修3

1、山東省泰安市肥城市第三中學(xué)高中生物 1.2 基因工程的基本操作程序（二）學(xué)案 新人教版選修3學(xué)習(xí)指導(dǎo)即時感悟一、學(xué)習(xí)目標 1、簡述將目的基因?qū)胧荏w細胞的方法。2、說出對目的基因進行檢測和鑒定的方法二、學(xué)習(xí)重點及難點 1、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的基本過程2、DNA分子雜交的原理【自主預(yù)習(xí)】1、將目的基因?qū)胧荏w細胞轉(zhuǎn)化是指 。將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ莀，除此之外，還有_和_等方法。 _是轉(zhuǎn)基因動物中采用最多，也是最為有效的一種將目的基因?qū)雱游锛毎姆椒ā?大腸桿菌細胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用_處理細胞，使細胞處于一種_的生理狀態(tài)，這種細胞稱為_。2、目的基因的檢測與鑒定要檢測轉(zhuǎn)基因生物

2、染色體的DNA上是否插入了目的基因，非常關(guān)鍵，檢測方法是 。以_作為探針。要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，檢測方法是_。檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是_。除了上述分子檢測外，有的還需要進行_的鑒定。疑惑點疑惑內(nèi)容三、同學(xué)們，通過自主預(yù)習(xí)，還有哪些疑惑呢？【合作探究】探究一：將目的基因?qū)胧荏w細胞 （想一想，為什么要導(dǎo)入受體細胞？在外界能不能維持穩(wěn)定和表達？） 思考并回答： （1）什么是轉(zhuǎn)化？ （2）將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ心男?？最常用的方法是？哪些細胞可以作為受體細胞？（結(jié)合示意圖，了解農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的基本過程） （3）將目的基因?qū)雱游锛毎幕静僮鞒绦蚴?？要用到什么技術(shù)？哪些

3、細胞可以作為受體細胞？ （4）早期的基因工程為什么選擇原核生物作為受體細胞？ （5）大腸桿菌細胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是？探究二：目的基因的檢測與鑒定（為什么要檢測和鑒定？） 思考并回答： （1）目的基因的檢測與鑒定可以從什么水平來做？ （2）核酸雜交技術(shù)基本過程是？ 什么是探針？ （3）如何檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)？ （4）如何從個體生物學(xué)水平鑒定轉(zhuǎn)基因抗蟲棉？反思總結(jié)基因工程的基本操作步驟主要方法、技術(shù)或組成步驟一：步驟二：步驟三：導(dǎo)入植物細胞：導(dǎo)入動物細胞：導(dǎo)入微生物細胞：步驟四：當堂達標1、人的糖蛋白必須經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工合成。通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)，可以使人的糖蛋白基因得以表達的受體細胞是

4、 （ ） A大腸桿菌 B酵母菌 CT4噬菌體 D質(zhì)粒DNA2、下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是： （ ） A基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因為目的基因B細菌質(zhì)粒是基因工程常用的運載體C通常用一種限制性內(nèi)切酶處理含目的基因的DNA，用另一種處理運載體DNAD為育成抗除草劑的作物新品種，導(dǎo)入抗除草劑基因時只能以受精卵為受體（1） 能否利用人的皮膚細胞來完成過程？為什么？ 。（2）過程必需的酶是 酶，過程必需的酶是 酶。（3）與人體細胞中胰島素基因相比，通過過程獲得的目的基因不含有非編碼區(qū)和 。（4）若A中共有a個堿基對，其中鳥嘌呤有b個，則過程連續(xù)進行4次，至少需要提供胸腺嘧啶 個。（5）在利用AB獲

5、得C的過程中，必須用 切割A(yù)和B，使它們產(chǎn)生 ，再加入 ，才可形成C。（6）為使過程更易進行，可用 （藥劑）處理D。(1)不能     皮膚細胞中的胰島素基因未表達(或未轉(zhuǎn)錄)，不能形成胰島素mRNA (2)逆轉(zhuǎn)錄    4種脫氧核苷酸(3)CaCl2(4)同一種限制性內(nèi)切酶     相同的黏性末端     DNA連接酶【拓展延伸】學(xué)案導(dǎo)學(xué)本節(jié)內(nèi)容【課前預(yù)習(xí)參考答案】1、目的基因的獲取 基因表達載體的構(gòu)建 將目的基因?qū)胧荏w細胞 目的基因的檢測與鑒定 2、自然界中已有的物種中分離出來 人工的方法合成 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 具有調(diào)控作用的因子 從基因文庫中獲取目的基因 利用PCR技術(shù)擴增目的基因 通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成 3、基因表達載體的構(gòu)建 目的基因 啟動子 終止子 標記基因 4、目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法 顯微注射技術(shù) Ca2+ 能吸收周圍環(huán)境中DNA分子 感受態(tài)細胞 5、DNA分子雜交 用放射性同位素標記的含有目的基因的DNA片段 分子雜交技術(shù) 抗原-抗體雜交 個體生物學(xué)水平【課內(nèi)探究參考答案】1 C 2 C 3 B 4 B5、（1）不能 皮膚細胞