果蠅雜交實(shí)驗(yàn)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)版

1、果蠅雜交實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)人： 李揚(yáng) 、胡津睿 實(shí)驗(yàn)時(shí)間：2014.9.1111.06 實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)：生化樓305遺細(xì)室一、 前言通過(guò)果蠅雜交實(shí)驗(yàn)：學(xué)會(huì)雜交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法。初步理解遺傳的三大定律：分離規(guī)律、自由組合規(guī)律、連鎖與交換定律。學(xué)會(huì)運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)和遺傳學(xué)的理論分析實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。初步學(xué)會(huì)論文的撰寫方法通常用作遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)材料的是黑腹果蠅。用果蠅作為實(shí)驗(yàn)材料有許多優(yōu)點(diǎn)： 飼養(yǎng)容易。在常溫下，以玉米粉等作飼料就可以生長(zhǎng)，繁殖。 生長(zhǎng)迅速。十天左右就可完成一個(gè)世代，每個(gè)受精的雌蠅可產(chǎn)卵400500個(gè)，因此在短時(shí)間內(nèi)就可獲得大量的子代，便于遺傳學(xué)分析。 染色體數(shù)少。只有4對(duì)。 唾腺染色體制作容易。橫紋清晰，是細(xì)胞學(xué)觀察

2、的好材料。 突變性狀多，而且多數(shù)是形態(tài)突變，便于觀察。果蠅的每一體細(xì)胞有8個(gè)染色體（2n=8），可配成4對(duì)，其中3對(duì)在雌雄果蠅中是一樣的，稱常染色體。另外一對(duì)稱性染色體，在雌果蠅中是XX，在雄蠅中是XY。 果蠅的雌雄在幼蟲期較難區(qū)別，但到了成蟲期區(qū)別相當(dāng)容易。雄性個(gè)體一般較雌性個(gè)體小，腹部環(huán)紋5條，腹尖色深，第一對(duì)腳的跗節(jié)前端表面有黑色鬃毛流蘇，稱性梳，雌性環(huán)紋7條，腹尖色淺，無(wú)性梳。1.實(shí)驗(yàn)材料及方法1.1實(shí)驗(yàn)材料：6黑腹果蠅、e#黑腹果蠅1.2實(shí)驗(yàn)用品：顯微鏡、培養(yǎng)瓶、紗布、量筒、麥片、玉米粉、蔗糖、瓊脂粉、丙酸、乙醚等。 1.3培養(yǎng)基的配制：70ml水 + 0.85g瓊脂 +

3、7g蔗糖煮開(kāi)至瓊脂溶化加入麥片玉米糊（30ml冷水與8g麥片玉米混勻）煮開(kāi)約3-5分鐘，成粘稠的糊狀稍涼后加入1g酵母粉，0.4-0.5ml丙酸，混勻分裝，待培養(yǎng)基凝固后包上紗布。1.4實(shí)驗(yàn)流程：取原種：取若干只6黑腹果蠅和e#黑腹果蠅培養(yǎng)。取處女蠅：清除原種瓶中的成蟲，每隔8h收集剛羽化的成蟲，將準(zhǔn)確鑒別性別的雌性和雄性果蠅分別放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。雜交：將6與e#放入一培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)雜交，同樣將6與e#放入一培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)雜交，雜交后的子代為F1。統(tǒng)計(jì)F1的性狀。 2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析原始記錄：6# × e#果蠅雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果：（灰：灰身、長(zhǎng)：長(zhǎng)翅、紅：紅眼）6×e# 6# ×

4、e#性狀 灰長(zhǎng)紅6268043黑長(zhǎng)紅0000灰短紅黑短紅灰長(zhǎng)白黑長(zhǎng)白灰短白黑短白合 計(jì)20 00 0 0 0 82210000089000041041807000582.1體色：圖譜分析 P:               EE（灰體）× ee（黑體）   F1:           

5、60;             Ee(灰體)  理論數(shù)量：F1代全為灰體，無(wú)黑體實(shí)際數(shù)量：F1代全為灰體，無(wú)黑體X2的檢驗(yàn)： 基因 體色基因（E/e）F1表型灰體 黑體 合計(jì)正交實(shí)得數(shù)O171 0171預(yù)期數(shù)E1710 171X2 X2=0.0015P（n=1）X2<3.84（差異不明顯） 基因 體色基因（E/e）F1表型灰體 黑體 合計(jì)反交實(shí)得數(shù)O99 099預(yù)期數(shù)E990 99X2 X2=0.0025P（n=1） X2<3.84（差異不明顯

6、）分析：在我們的分析中，果蠅的體色是一對(duì)獨(dú)立遺傳的常染色體基因，遵守分離定律，且正反交表型比率相同。針對(duì)實(shí)驗(yàn)得到表型比率來(lái)看，相差比較小。進(jìn)行單因子適合度測(cè)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證分離定律。進(jìn)行適合度檢驗(yàn)，正交和反交的結(jié)果均為P<3.84，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)得到的數(shù)據(jù)與理論的數(shù)據(jù)相差不大，支持最初的假設(shè)。2.2眼色：圖譜分析正交                        &

7、#160;      反交 P：     XwXw（雌白眼）× XWY（雄紅眼）     XWXW（雌紅眼）× XwY（雄白眼）   F1:      XWXw（雌紅眼）× XwY（雄白眼）     XWXw（雌紅眼）× XWY（雄紅眼）&

8、#160; 理論比值： 1       ：     1                  1         ：      1 實(shí)際比值：&

9、#160;     51       ：     41                89         ：     82  X

10、2的檢驗(yàn)： 基因 眼色基因（XW/Xw）F1表型雌紅眼 雄白眼 合計(jì)正交實(shí)得數(shù)O51 4192預(yù)期數(shù)E464692X2 X2=0.4402P（n=1）X2<3.84（差異不明顯） 基因 眼色基因（XW/Xw）F1表型雌紅眼 雄紅眼 合計(jì)反交實(shí)得數(shù)O89 82171預(yù)期數(shù)E85.585.5 171X2 X2=0.1052P（n=1） X2<3.84（差異不明顯）分析：在圖譜分析中，正反交的個(gè)體在F1、F2代上的表現(xiàn)型不同，通過(guò)反交個(gè)體在F1代產(chǎn)生的雄性個(gè)體都是白眼的，我們可以斷定控制紅白眼基因位于X染色體上，白眼為隱性。通過(guò)適合度測(cè)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證分離定律。在單因子X(jué)2適合度檢驗(yàn)中，正反交的

11、結(jié)果均為P<3.84，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與理論比率之間差別不明顯，支持開(kāi)始的假設(shè)，所以實(shí)驗(yàn)整體比較成功。2.3翅型：圖譜分析正交                               反交 P：     XmXm（雌短翅）×

12、 XMY（雄長(zhǎng)翅）     XMXM（雌長(zhǎng)翅）× XmY（雄短翅）   F1:      XMXm（雌長(zhǎng)翅）× XmY（雄短翅）     XMXm（雌長(zhǎng)翅）× XMY（雄長(zhǎng)翅）  理論比值： 1       ：     

13、1                  1         ：      1 實(shí)際比值：      50       ：  

14、0;  49                68         ：      62X2的檢驗(yàn)： 基因 翅型基因（XM/Xm）F1表型雌長(zhǎng)翅 雄短翅 合計(jì)正交實(shí)得數(shù)O50 4999預(yù)期數(shù)E49.549.599X2 X2=0P（n=1）X2<3.84（差異不明顯） 基因 翅型

15、基因（XM/Xm）F1表型雌長(zhǎng)翅 雄長(zhǎng)翅 合計(jì)反交實(shí)得數(shù)O68 62130預(yù)期數(shù)E6565 130X2 X2=0.0961P（n=1） X2<3.84（差異不明顯）分析：果蠅的翅型基因位于X染色體上，正交的結(jié)果P值<3.84，雖然反交的結(jié)果P值也是<3.84，但是實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中出現(xiàn)了理論值以外的短翅，說(shuō)明果蠅的翅型基因與眼色的基因存在連鎖。在進(jìn)行減數(shù)分裂時(shí)發(fā)生重組，導(dǎo)致短翅表現(xiàn)型的出現(xiàn)。3.結(jié)論與討論3.1注意事項(xiàng)：1、 準(zhǔn)備記錄本做好每日的工作記錄；2、 果蠅要適度麻醉，挑蠅用毛筆，忌用鑷子和其他工具，以免影響果蠅生長(zhǎng)繁育。3、 檢查實(shí)驗(yàn)流程之后方可開(kāi)始實(shí)驗(yàn)；4、 實(shí)驗(yàn)之前做好

16、所有的準(zhǔn)備工作；5、 培養(yǎng)基按比例用多少配多少，不能浪費(fèi)；6、 取處女蠅時(shí)，出現(xiàn)幼蟲后天天觀察是否有蛹出現(xiàn)；7、 挑處女蠅時(shí)，每次只挑8小時(shí)內(nèi)羽化成蟲，超過(guò)8小時(shí)的成蟲已逐漸有交配能力,必須一只不留地倒出處死,才能進(jìn)行第二次挑選。8、  剛羽化的果蠅色淡白，體軟綿，難辨，務(wù)必小心區(qū)別。   9、 培養(yǎng)箱溫度保持在25。 10、因?yàn)楸敬螌?shí)驗(yàn)每組的數(shù)據(jù)有限，所以誤差較大。我們更傾向于將實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果統(tǒng)計(jì)起來(lái)一起分析，這樣誤差會(huì)減小一點(diǎn)。11、果蠅的某一些性狀本身可能會(huì)受到環(huán)境之類的影響從而出現(xiàn)與理論不相符的結(jié)果。 12、因?yàn)榇舜螌?shí)驗(yàn)的連續(xù)性

17、很強(qiáng)，所以一定要注意每一步的時(shí)間和操作，否則就會(huì)產(chǎn)生不可逆的后果，嚴(yán)重的要進(jìn)行重做。3.2小結(jié)：果蠅具有生活史短、繁殖率高、飼養(yǎng)簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，是研究遺傳學(xué)的好材料，尤其在基因分離、連鎖、交換等方面，對(duì)果蠅的研究更是廣泛而充分。本次通過(guò)實(shí)施已有實(shí)驗(yàn)方案，觀察后代中果蠅的各種性狀，結(jié)合各種統(tǒng)計(jì)處理方法，從而證明這三大定律。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程需要自主參與。持續(xù)的時(shí)間長(zhǎng)，有很強(qiáng)的連續(xù)性。通過(guò)理論與實(shí)驗(yàn)的緊密結(jié)合以及實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象與數(shù)理統(tǒng)計(jì)結(jié)合，我們提高了自身實(shí)驗(yàn)的能力，體會(huì)到了前人的艱辛的研究過(guò)程。4.體會(huì)與建議果蠅雜交實(shí)驗(yàn)是遺傳學(xué)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)， 尤其是伴性遺傳雜交， 具有極為清晰的思路和歷史上 非常重要的結(jié)論。本次親身體驗(yàn)果蠅雜交