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1、DOC格式論文,方便您的復(fù)制修改刪減不同生長季節(jié)玳玳果中總黃酮的定量分析研究(作者:單位:郵編:)作者:劉永靜,陳丹,邱紅鑫,葉夢屏【摘要】目的研究不同生長季節(jié)玳玳果中總黃酮的含量差異,以便更有效地利用玳玳果總黃酮。方法以柚皮苷為對照品,運用紫外可見 分光光度法對不同生長季節(jié)的玳玳果中總黃酮含量進行定量分析,檢測波長為284 nm。結(jié)果建立了玳玳果總黃酮的含量測定方法,結(jié)果 表明不同生長季節(jié)的玳玳果中總黃酮含量存在一定的差異。結(jié)論所建立的含量測定方法精密度、穩(wěn)定性及重復(fù)性良好,準(zhǔn)確度高,可做為 玳玳果總黃酮的定量分析方法,且玳玳青果中總黃酮的含量最高?!娟P(guān)鍵詞】玳玳果;總黃酮;生長季節(jié);定量分
2、析Abstract : ObjectiveTo study the content of total flavonoids from Citrus aura ntium L. var daidai Tan aka fruits gathered in differe nt seas ons for effective utilizatio n. MethodsThe content was total flavonoids analyzed by ultraviolet spectroscopy. The naringin was used as the chemical reference
3、substa nee and the detecti onwavele ngth was set at 284nm .ResultsThe determ in ati on method of total flav ono ids was established. The content of the total flav ono ids gathered indiffere ntgrow ingperiods wasevide ntlydiffere nt.C on clusi on The method is sen sitive, accurate, reproducible and c
4、an be used to control the quality of the total flavonoids from Citrus aura ntium L. var daidai Tan aka fruits, and the quality of gree n fruits is the best .Key words : Citrus aura ntium L. var daidai Tan aka fruits;Total flav on oids;Growi ng seas on s;Qua ntitative an alysis玳玳又稱代代 Citrus aurantium
5、 L. var daidai ,是蕓香科柑桔亞屬植物,為酸橙的變種,在我國福建、四川、浙江等地都有栽培。玳 玳的未成熟果實稱玳玳花枳殼或蘇枳殼,幼果有被當(dāng)作枳實入藥, 具有理氣寬中、行滯消脹的功效,主要用于胸腹?jié)M悶脹痛、食積不化、 痰飲、胃下垂、脫肛、子宮脫垂等病癥1,2。實驗證明,玳玳果中含 黃酮、生物堿、揮發(fā)油等活性成分,其中黃酮類成分以柚皮苷等為主 要成分,具有良好的抗氧化活性35,而不同采收期的玳玳果中總 黃酮含量不同。為了確保玳玳藥材的質(zhì)量穩(wěn)定性和對藥材的合理利 用,本研究以玳玳果總黃酮中代表性成分柚皮苷為指標(biāo)成分6,分析比較了不同生長季節(jié)的玳玳果中總黃酮的含量。1儀器與試藥1.1儀
6、器BP-211D 型電子分析天平(德國Sartorius公 司);FA2004電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司);UV-4802雙光束 紫外可見分光光度計(尤尼柯上海儀器有限公司)。1.2試藥玳玳果(福建恒馨天然香料有限公司提供;福建中醫(yī)學(xué) 院中藥鑒定教研室范世明咼級實驗師鑒定 );柚皮苷對照品(中國藥品 生物制品檢定所,批號:110722-200610);甲醇等試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1對照品溶液的制備精密稱定柚皮苷對照品 5.08 mg,置50 ml量瓶中,加甲醇適量使溶解,并加甲醇稀釋至刻度,搖勻,制成 每毫升含0.101 6 mg的溶液,即得。2.2供試品溶液的制備取新鮮晾干
7、的玳玳幼果果皮、青果果皮、橙果果皮分別低溫烘干,粉碎,過 20目篩,即得玳玳果皮粗粉。精 密稱取玳玳果皮粗粉50 g,置250 ml錐形瓶中,用6倍量的75%的 乙醇回流提取,共回流提取 3次,每次2h,合并提取液,回收乙醇 使成浸膏,減壓干燥呈橙色粉末,即得玳玳幼果、青果、橙果果皮醇 提粉末。分別精密稱取玳玳幼果、青果、橙果醇提粉末各20.0mg,置50 ml量瓶中,加甲醇適量使溶解,再加甲醇稀釋至刻度, 搖勻,即得供試品溶液。2.3測定波長的選擇分別取對照品溶液和供試品溶液,以甲醇 為溶劑空白,在230400 nm波長范圍掃描,結(jié)果顯示,對照品溶 液和供試品溶液的吸收光譜圖基本一致,最大吸
8、收波長均在284 nm, 故測定波長選擇284 nm。結(jié)果見圖1。1.玳玳果醇提液2.柚皮苷對照品圖1吸收光譜圖2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備與線性關(guān)系的考察分別精密吸取柚皮苷對照品溶液 0.4,0.7,1.0,1.3,1.6,1.9,2.1 ml 于 10 ml 量瓶中, 用甲醇稀釋至刻度,以甲醇為空白,在284 nm波長處測定吸光度。以濃度(C ,mg/ml)為橫坐標(biāo),吸光度(A)為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線, 得回歸方程為 A=3.634 X101C-4.609 X10-3,r=0.999 8,柚皮苷在 0.004 0640.021 336 mg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。標(biāo)準(zhǔn)曲線見 表1,圖2。2.
9、5精密度實驗分別精密吸取同一供試品溶液6份,按“樣品含量測定”項下同法操作,計算。結(jié)果見表2。表1線性關(guān)系測定結(jié)果 圖2標(biāo)準(zhǔn)曲線 表2精密度實驗結(jié)果2.6穩(wěn)定性實驗精密吸取同一供試品溶液,放置0,30,60,90,120,150 min后,按“樣品含量測定”項下同法操作,測定,計 算。結(jié)果表明供試品在150 min內(nèi)穩(wěn)定。結(jié)果見表3表3穩(wěn)定性 實驗結(jié)果2.7重復(fù)性實驗分別取同一批玳玳果(青果)醇提粉末6份制備 供試品溶液,按“樣品含量測定”項下同法操作,測定,計算。結(jié)果見 表4。2.8回收率實驗精密稱取玳玳青果醇提粉末10 mg(含量為0.113 mg/ mg),置50 ml量瓶中,按高、中、
10、低3個濃度水平,分 別精密加入柚皮苷對照品溶液(1.03 mg/ml)適量,用甲醇稀釋至刻度, 按“樣品含量測定”項下同法操作,測定,計算。結(jié)果見表5。表4重 復(fù)性實驗結(jié)果表5回收率實驗結(jié)果2.9樣品含量測定精密吸取供試品溶液1.0 ml置10 ml量瓶中, 加甲醇稀釋至刻度,搖勻。以甲醇為空白,在 284 nm波長處分別測 定其吸光度,計算總黃酮含量(以每毫升生藥中所含總黃酮量計)。結(jié) 果見表6。表63批樣品含量測定結(jié)果3討論實驗結(jié)果表明,不同生長季節(jié)的玳玳果中總黃酮的含量存在一 定的差異:玳玳青果中的總黃酮含量玳玳橙果中的總黃酮含量玳玳幼 果中的總黃酮含量。用分光光度法測定玳玳果醇提物中總黃酮的含量 準(zhǔn)確度高,重復(fù)性好,可以作為其中玳玳果總黃酮控制的方法,且為 更有效地在最佳季節(jié)采摘玳玳果提取分離玳玳果總黃酮有效部位提 供了實驗依據(jù)。【參考文獻】1 冉先德沖華藥海M.哈爾濱:哈爾濱出版社,1993 : 964.2 國家中醫(yī)藥管理局中華本草編委會.中華本草(第4卷)M.上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1999 : 884.3 陳丹,劉永靜,黃劍鈞,等.閩產(chǎn)代代果中化學(xué)成分的分離分析J.福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2007,17(1) :
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